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流感病毒受体在三种动物气管和肺脏分布的组织化学检测 被引量:5
1
作者 宁章勇 刘雪梅 +3 位作者 罗敏意 亓文宝 焦培荣 廖明 《中国动物检疫》 CAS 2009年第4期44-47,共4页
利用凝集素组织化学染色的方法,对岭南黄鸡、番鸭和BALB/C小鼠的气管和肺脏进行了流感病毒受体分布的检测。结果表明:在岭南黄鸡、番鸭和小鼠的气管粘膜层、粘膜下层、肺脏的细支气管和肺泡上皮细胞均有禽流感病毒受体的分布。番鸭和小... 利用凝集素组织化学染色的方法,对岭南黄鸡、番鸭和BALB/C小鼠的气管和肺脏进行了流感病毒受体分布的检测。结果表明:在岭南黄鸡、番鸭和小鼠的气管粘膜层、粘膜下层、肺脏的细支气管和肺泡上皮细胞均有禽流感病毒受体的分布。番鸭和小鼠气管和肺脏的人流感病毒受体的分布范围和细胞类型与禽流感病毒受体的分布稍有差异,岭南黄鸡气管和肺脏未检测到人流感病毒受体的分布。研究结果为探讨流感病毒的感染机制和宿主特异性的差异提供了基础数据。 展开更多
关键词 气管 肺脏 流感病毒受体 分布
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流感病毒血凝素受体分子的研究进展 被引量:5
2
作者 张太翔 王炳军 +5 位作者 田国华 田国宁 张金玲 侯志高 韩亮 张丽萍 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第2期188-191,共4页
血凝素是流感病毒的重要糖蛋白,它的受体研究是目前国际上的热点。作者针对流感病毒的HA受体分子从分子学基础、种属特异性和致病性方面作一综述。
关键词 流感病毒 HA受体 种属特异性
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流感病毒受体结合与抗原性改变的分子基础 被引量:3
3
作者 冯安林 涂镇波 +1 位作者 张增峰 樊晓晖 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第11期123-126,共4页
流感病毒的血凝素(HA)与宿主细胞表面糖链末端唾液酸(SA)的结合对流感病毒感染宿主起着至关重要的作用。禽流感病毒对SAα2-3Galβ糖链以及人流感病毒对SAα2-6Galβ糖链的结合特异性使跨种属传播受阻,但不同的流感病毒在猪和陆地家禽... 流感病毒的血凝素(HA)与宿主细胞表面糖链末端唾液酸(SA)的结合对流感病毒感染宿主起着至关重要的作用。禽流感病毒对SAα2-3Galβ糖链以及人流感病毒对SAα2-6Galβ糖链的结合特异性使跨种属传播受阻,但不同的流感病毒在猪和陆地家禽等中间宿主体内发生基因重配作用后,可使部分禽流感病毒获得适应性感染人的能力,另一方面,流感病毒自身的基因突变,尤其是受体结合部位周围的特定位点,可导致流感病毒受体结合特异性发生转变,而病毒的变异伴随着自身糖修饰和抗原表位的改变,使机体对其免疫识别结合的能力也随之发生变化。这些分子水平的改变都将对病毒相关的宿主受体结合和免疫应答反应产生影响。 展开更多
关键词 流感病毒 受体结合 抗原性 基因重配 基因突变
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鸡α-2,3-唾液酸转移酶Ⅰ基因的克隆和真核表达载体的构建 被引量:3
4
作者 刘媛媛 王俊亚 +6 位作者 张晓娟 陈礼朋 岳旭龙 高文明 李双亮 崔保安 李新生 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第1期21-24,共4页
试验利用Trizol法从鸡肠道组织提取总RNA,采用特异性引物通过RT-PCR扩增出α-2,3-唾液酸转移酶Ⅰ(α-2,3-sialyltransferaseⅠ,ST3GALⅠ)基因的cDNA片段,并将其克隆至pGEM-T easy载体,获得阳性重组质粒,再以阳性重组质粒为模板亚克隆ST3... 试验利用Trizol法从鸡肠道组织提取总RNA,采用特异性引物通过RT-PCR扩增出α-2,3-唾液酸转移酶Ⅰ(α-2,3-sialyltransferaseⅠ,ST3GALⅠ)基因的cDNA片段,并将其克隆至pGEM-T easy载体,获得阳性重组质粒,再以阳性重组质粒为模板亚克隆ST3GALⅠ基因的完整ORF区,定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)上,进行PCR、限制性酶切和DNA序列分析鉴定。结果表明,ST3GALⅠ基因全长1029bp,测序结果同GenBank数据库收录的序列一致,无任何密码子缺失与突变,插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)上的目的基因大小方向均正确。本研究成功构建了pcDNA3.1(+)-ST3GALⅠ真核表达载体,为下一步的真核表达及对ST3GALⅠ基因的功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 禽流感病毒 受体 α-2 3-唾液酸转移酶Ⅰ 真核表达载体
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三黄鸡ST3Gal6基因的半定量RT-PCR及生物信息学分析 被引量:1
5
作者 周飞 崔连成 +1 位作者 安玉甫 宁章勇 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第3期51-54,共4页
本研究旨在对三黄鸡ST3Gal6基因进行组织表达谱和生物信息学分析。参考三黄鸡ST3Gal6基因序列设计引物,采用PCR技术克隆三黄鸡ST3Gal6基因序列,并利用半定量RT-PCR进行组织表达谱分析;同时对其进行生物信息学分析。结果表明,克隆的三黄... 本研究旨在对三黄鸡ST3Gal6基因进行组织表达谱和生物信息学分析。参考三黄鸡ST3Gal6基因序列设计引物,采用PCR技术克隆三黄鸡ST3Gal6基因序列,并利用半定量RT-PCR进行组织表达谱分析;同时对其进行生物信息学分析。结果表明,克隆的三黄鸡ST3Gal6基因全长1169bp,含有1059bp的完整CDS编码区,编码352个氨基酸。其CDS编码区的核苷酸序列与人、黑猩猩、牛、大鼠、蟾ST3Gal6基因对应序列的同源性分别为62%、62%、61.9%、59%、54.4%。组织表达谱分析表明,ST3Gal6基因在各组织均不同程度地表达,其中在大脑表达量很高,肺脏中最低。生物信息学预测ST3Gal6蛋白结构发现,三黄鸡的ST3Gal6蛋白存在2个跨膜螺旋结构域,同时预测ST3Gal6存在22个磷酸化位点和1个特异性蛋白激酶磷酸化位点。 展开更多
关键词 唾液酸转移酶 流感受体 半定量 生物信息学
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流感病毒与细胞受体相互作用的复杂性 被引量:2
6
作者 丛彦龙 王广美 丁壮 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第5期62-67,共6页
细胞受体是流感病毒感染、复制与传播的生物学基础。病毒血凝素基因的差异和细胞上不同类型的受体是影响病毒受体结合特性的两个重要因素。了解这两个因素有助于人们进一步认识流感的病原学、感染机制、流行病学等内容,对于流感的监测... 细胞受体是流感病毒感染、复制与传播的生物学基础。病毒血凝素基因的差异和细胞上不同类型的受体是影响病毒受体结合特性的两个重要因素。了解这两个因素有助于人们进一步认识流感的病原学、感染机制、流行病学等内容,对于流感的监测、疫苗研制和公共卫生学都将有借鉴意义。论文就流感病毒基因特点、细胞受体类型差异及二者相互作用的复杂性进行综述。 展开更多
关键词 流感病毒 血凝素 受体
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流感病毒HA受体结合位点抑制剂研究进展 被引量:1
7
作者 王文超 王心竹 +5 位作者 尹荣焕 赵玉军 刘娇 王欣 李化生 田菁菁 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第11期88-92,共5页
目前临床所用控制流感病毒的药物和疫苗受到病毒耐药性、疫苗滞后性等诸多因素的限制,使能阻止病毒侵入宿主细胞的抑制剂成为当前研究的热点。唾液酸是流感病毒囊膜表面血凝素(HA)的受体,但研究表明唾液酸并不适合作为研制流感病毒侵入... 目前临床所用控制流感病毒的药物和疫苗受到病毒耐药性、疫苗滞后性等诸多因素的限制,使能阻止病毒侵入宿主细胞的抑制剂成为当前研究的热点。唾液酸是流感病毒囊膜表面血凝素(HA)的受体,但研究表明唾液酸并不适合作为研制流感病毒侵入宿主细胞抑制剂的结构模型。研究发现流感病毒的HA受体结合位点必须外露才能与宿主细胞受体结合,因此HA受体结合位点可以被宿主免疫系统监视,成为抗体潜在的靶向契合位点。随后发现的HA受体结合位点抗体能与HA受体结合位点的保守氨基酸残基结合,能有效阻止流感病毒感染宿主。因此,可用HA受体结合位点抗体作为流感病毒感染抑制剂的模型,研制流感病毒抑制剂。论文就流感病毒HA的分子结构和功能,HA结合受体的机制,HA受体结合位点抗体以及该类抗体对流感病毒的抑制效果进行了阐述,以期对以HA受体结合位点抗体为模型研制流感病毒感染抑制剂提供帮助。 展开更多
关键词 流感病毒 血凝素 受体结合位点 抑制剂
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鸭呼吸道和消化道流感病毒SA受体的分布特征 被引量:2
8
作者 张增峰 樊晓晖 +2 位作者 罗殿中 陈晓燕 冯安林 《内科》 2011年第5期393-396,共4页
目的探讨鸭流感病毒受体分布特点及其作用。方法应用凝集素组织化学染色技术检测鸭呼吸道和消化道流感病毒SA受体的分布,用荧光素Alexa 488标记禽流感病毒H9N1、人流感病毒H1N1,观察这两种病毒与鸭呼吸道、消化道各解剖部位结合特点。结... 目的探讨鸭流感病毒受体分布特点及其作用。方法应用凝集素组织化学染色技术检测鸭呼吸道和消化道流感病毒SA受体的分布,用荧光素Alexa 488标记禽流感病毒H9N1、人流感病毒H1N1,观察这两种病毒与鸭呼吸道、消化道各解剖部位结合特点。结果SAα-2,3Gal受体在鸭呼吸道气管、支气管、次级支气管、副支气管和消化道结肠呈高密度分布,而SAα-2,6Gal受体缺乏或仅极少量表达。禽流感病毒H9N1能与鸭呼吸道和消化道上皮细胞结合,而人流感病毒H1N1与副支气管和结肠未见结合反应,仅极少量与气管、支气管、次级支气管结合。结论水禽类鸭流感病毒SA受体的分布以SAα-2,3Gal受体为主,在呼吸道和消化道均呈高密度分布,有利于各亚型禽流感病毒在其复制、基因重配。 展开更多
关键词 甲型流感病毒 受体 唾液酸
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MDCK单细胞悬浮生长的驯化筛选及其在AIV增殖上的初步应用 被引量:11
9
作者 冯磊 吴培培 +3 位作者 褚轩 王伟峰 陈丽 侯继波 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第6期913-920,共8页
采用逐步降低培养基中血清含量的方法获得可悬浮生长的MDCK-Sus细胞株,对其生长代谢情况、细胞膜表面病毒受体丰度,以及在生物反应器中悬浮培养该细胞对禽流感H9亚型病毒增殖进行了初步应用研究。结果表明,MDCK-Sus细胞株可完全适应无... 采用逐步降低培养基中血清含量的方法获得可悬浮生长的MDCK-Sus细胞株,对其生长代谢情况、细胞膜表面病毒受体丰度,以及在生物反应器中悬浮培养该细胞对禽流感H9亚型病毒增殖进行了初步应用研究。结果表明,MDCK-Sus细胞株可完全适应无血清营养条件并呈单细胞悬浮生长状态,细胞生长旺盛,平均比生长速率达到0.556 d-1,最大活细胞密度达到2.42×106cells·m L-1,并可检测出其细胞膜表面具有正常丰度的唾液酸-α-2,3-半乳糖糖链受体。在MOI为0.05,TPCK处理的胰蛋白酶作用浓度为1μg·m L-1的条件下,AIV-H9亚型病毒JS03株可在MDCK-Sus细胞中获得较好的增殖HA效价,达到8log2·25μL-1。 展开更多
关键词 MDCK细胞 禽流感病毒 单细胞悬浮培养 禽流感病毒受体
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表没食子儿茶素没食子酸酯对H9N2猪流感病毒诱导小鼠肺损伤中Toll样受体-4表达的影响 被引量:2
10
作者 徐彤 王存连 +4 位作者 徐明举 张瑞华 刘宝剑 魏东 王国华 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1438-1446,共9页
旨在探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对猪源H9N2流感病毒感染诱导小鼠肺损伤及氧化应激相关信号通路Toll样受体(TLR)-4表达的影响。将6~8周龄、雌性SPF级BALB/c小鼠随机分为病毒感染致急性肺损伤(H9N2)组、H9N2+EGCG组、模拟感染(Mo... 旨在探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对猪源H9N2流感病毒感染诱导小鼠肺损伤及氧化应激相关信号通路Toll样受体(TLR)-4表达的影响。将6~8周龄、雌性SPF级BALB/c小鼠随机分为病毒感染致急性肺损伤(H9N2)组、H9N2+EGCG组、模拟感染(Mock)组、Mock+EGCG以及TLR-4抑制剂Eritoran5564(H9N2+E5564)对照组,观察各组小鼠肺组织病理学变化,测定肺湿/干重比;测定肺组织内MPO、T-SOD、抗HO·能力、MDA、IL-1β和TNF-α的含量;Western blot和RT-PCR方法检测肺内TLR-4 mRNA及蛋白质的表达。结果表明,H9N2组小鼠精神沉郁、呼吸困难、体重下降明显;肺组织学表现为肺泡壁水肿、炎性细胞浸润、出血为特征的弥漫性肺组织损伤。EGCG干预后,与H9N2组相比,EGCG治疗组小鼠临床症状较轻,一定程度上降低了死亡率,并明显延长小鼠存活时间(P<0.01);其肺组织损伤程度较轻,肺湿/干重比极显著下降(P<0.01);MPO和MDA的含量显著降低,与之相反T-SOD及抗HO·能力升高;同时,EGCG显著降低肺组织内IL-1β和TNF-α的含量。肺组织内TLR-4mRNA以及蛋白表达显著降低;E5564呈现与EGCG相似的干预效果,显著降低TLR-4mRNA以及蛋白表达,降低肺组织MPO、MDA、IL-1β和TNF-α的含量,减少T-SOD的消耗以及提高抗HO·能力。EGCG明显缓解小鼠肺损伤过程,其机制可能与其影响活性氧自由基的产生或清除进而显著降低TLR-4的表达有关,提示其在辅助预防和干预H9N2-SIV诱导的肺损伤方面具有潜在的应用前景。 展开更多
关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯 H9N2猪流感病毒 急性肺损伤 TOLL样受体-4
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TRPM2离子通道在H9N2流感病毒感染小鼠肺微血管内皮细胞线粒体损伤中的作用 被引量:3
11
作者 李军 高晶萍 +7 位作者 张雅琪 罗强 梁亭 李珮瑶 王少华 张瑞华 徐明举 徐彤 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期2053-2060,共8页
旨在探讨瞬时电位受体M2离子通道(TRPM2)在H9N2流感病毒感染小鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)导致线粒体损伤过程中的作用。在已建立TRPM2 shRNA PMVEC的基础上,采用5MOI H9N2猪流感病毒感染细胞,在病毒作用后24和48 h提取各组细胞的线粒体... 旨在探讨瞬时电位受体M2离子通道(TRPM2)在H9N2流感病毒感染小鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)导致线粒体损伤过程中的作用。在已建立TRPM2 shRNA PMVEC的基础上,采用5MOI H9N2猪流感病毒感染细胞,在病毒作用后24和48 h提取各组细胞的线粒体进行蛋白定量,检测各组细胞线粒体超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮合成酶(NOS)、线粒体呼吸链复合物Ⅳ活性和ATP酶水平;利用激光共聚焦显微镜观察线粒体膜电位变化(JC-1染色)及细胞凋亡(Annexin V-FITC/PI双染色法)情况。结果表明:H9N2-SIV感染后TRPM2 shRNA PMVEC内SOD活性、GSH水平和Na^+-K^+-ATP、线粒体呼吸链复合物Ⅳ活性显著高于对照shRNA PMVEC(P<0.05或P<0.01);mtNOS活性则极显著低于shRNA PMVEC(P<0.01)。JC-1染色显示TRPM2-siRNA PMVEC线粒体膜电位水平高于对照shRNA PMVEC,但是AnnexinV-FITC/PI染色显示细胞凋亡则低于H9N2感染对照shRNA PMVEC。结果提示:TRPM2基因沉默有效减缓H9N2感染导致NOS产生,显著降低SOD、GSH、线粒体呼吸链复合物Ⅳ、Na^+-K^+-ATP的消耗以及线粒体膜电位的下降程度,进而有效缓解PMVEC线粒体损伤及细胞凋亡。 展开更多
关键词 TRPM2离子通道 H9N2流感病毒 短发卡RNA PMEVC 线粒体损伤
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禽流感病毒HA蛋白与人受体的分子对接 被引量:5
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作者 邓迎春 柳青 黄强 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2017年第3期633-641,共9页
血凝素(hemagglutinin,HA)是位于禽流感病毒表面的糖蛋白。在病毒感染过程中,HA与禽类宿主细胞表面受体结合,介导病毒膜与宿主核内体膜的融合,在传染过程中发挥关键作用。自然界中的禽流感病毒处于不断演化之中,其HA的禽受体结合位点常... 血凝素(hemagglutinin,HA)是位于禽流感病毒表面的糖蛋白。在病毒感染过程中,HA与禽类宿主细胞表面受体结合,介导病毒膜与宿主核内体膜的融合,在传染过程中发挥关键作用。自然界中的禽流感病毒处于不断演化之中,其HA的禽受体结合位点常常发生氨基酸变异。因此,当HA变异体与人受体结合能力较强时,禽流感病毒往往会发生跨种传播而感染人。为预防禽流感的跨种传播,人们迫切需要发展大规模快速检测或预测HA变异体与人受体结合亲和力的方法,以评估各种新发禽流感病毒的跨种传播能力,提前筛选出有潜在危险的病毒株。针对此问题,本研究以H7N9亚型的HA蛋白H7为研究对象,发展了一种运用分子对接的计算方法,预测HA变异体与人受体的结合亲和力。该方法的计算结果表明,H7与人受体的结合亲和力普遍弱于有较强传染人能力的H1,说明H7N9亚型病毒的跨种传播能力普遍较弱;但是,计算分析也揭示,部分新发的H7N9毒株的HA有强的人受体结合亲和力,提示在自然演化过程中,H7N9病毒有可能演化出具有较强的感染人能力的新毒株,这与2013年禽流感疫情的实际发生情况相一致。因此,本文所发展的计算方法可用于快速预测新发禽流感病毒HA与人受体的结合亲和力,为新发禽流感病毒的跨种传播风险评估提供理论依据。 展开更多
关键词 禽流感病毒 跨种传播 受体结合特异性 分子对接 结合自由能
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A型流感病毒神经氨酸酶蛋白功能研究进展 被引量:4
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作者 郑沁玫 顾敏 刘秀梵 《动物医学进展》 北大核心 2021年第10期66-70,共5页
A型流感病毒(IAV)的宿主谱广泛,对人类健康和畜禽养殖均构成严重威胁。神经氨酸酶(neuraminidase,NA)作为IAV囊膜表面主要的糖蛋白之一,在病毒的感染过程中至关重要,是常用的抗病毒药物作用靶点。以往关于NA蛋白的研究主要聚焦于其通过... A型流感病毒(IAV)的宿主谱广泛,对人类健康和畜禽养殖均构成严重威胁。神经氨酸酶(neuraminidase,NA)作为IAV囊膜表面主要的糖蛋白之一,在病毒的感染过程中至关重要,是常用的抗病毒药物作用靶点。以往关于NA蛋白的研究主要聚焦于其通过切割宿主细胞表面唾液酸与血凝素(hemagglutinin,HA)之间的α-2,6或α-2,3糖苷键以促进新生病毒粒子释放的功能方面,而近来不断有证据表明,神经氨酸酶蛋白在受体结合和宿主适应性方面同样发挥关键作用。论文综述了神经氨酸酶蛋白的结构特征,并对神经氨酸酶蛋白的酶催化活性、受体结合功能以及与HA蛋白的功能平衡方面进行了总结,以期为深入理解IAV感染的分子机制提供参考。 展开更多
关键词 A型流感病毒 神经氨酸酶 受体结合 唾液酸 血凝素-神经氨酸酶平衡
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H9N2亚型流感病毒感染过程中神经介素B及受体对NF-κB信号通路泛素酶的调控 被引量:1
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作者 田世茂 万乾晖 +5 位作者 许晓东 孔迎迎 田珂 唐钰冰 陈吉龙 杨桂红 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期3118-3126,共9页
神经介素B(neuromedin B,NMB)及受体(NMB receptor,NMBR)通过NF-κB信号通路参与抑制甲型流感病毒(influenza A virus,IAV)H1N1亚型(IAV/H1N1)的感染。但关于NMB和NMBR对NF-κB信号通路相关泛素蛋白酶的调控如何,尚未见报道。为探究NMB... 神经介素B(neuromedin B,NMB)及受体(NMB receptor,NMBR)通过NF-κB信号通路参与抑制甲型流感病毒(influenza A virus,IAV)H1N1亚型(IAV/H1N1)的感染。但关于NMB和NMBR对NF-κB信号通路相关泛素蛋白酶的调控如何,尚未见报道。为探究NMB和NMBR调控IAV诱导的NF-κB信号通路相关的泛素蛋白酶表达的影响,本研究基于IAV/H9N2感染sh-NMBR细胞与NMB刺激的A549细胞,采用RT-PCR、qRT-PCR及Western blot(WB)分析NMB和NMBR对H9N2感染引起的NF-κB信号通路相关的E3泛素连接酶Mind bomb-2(MIB2)和Ring Finger Protein 8(RNF8)及去泛素蛋白酶Cylindromatosis(CYLD)的表达变化。结果显示:H9N2感染sh-NMBR细胞中,RNF8和CYLD表达增加,MIB2表达和P65磷酸化水平降低;NMB激活A549细胞中NMBR的表达后,诱导细胞中RNF8和CYLD的表达水平下降,MIB2表达和P65磷酸化水平增加。结果表明:NMB和NMBR通过调控IAV/H9N2感染诱导的泛素蛋白酶的表达和P65活性,从而影响IAV/H9N2感染激活的NF-κB信号通路的功能,该结果为深入研究NMB和NMBR抑制甲型流感病毒感染的作用机制提供了理论基础。 展开更多
关键词 神经介素B 神经介素B受体 IAV/H9N2亚型 E3泛素连接酶 P65磷酸化
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神经介素B及其受体NMBR参与抗A型流感病毒H1N1亚型感染的信号通路 被引量:3
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作者 唐梦瑶 马逸杰 +2 位作者 田世茂 万乾晖 杨桂红 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期3215-3223,共9页
NMB/NMBR通过调节A型流感病毒(IAV/H1N1/PR8)感染诱导的细胞因子表达而参与抗IAV的先天性免疫反应。为探究其发挥抗IAV/H1N1感染的信号通路,本文用PR8和WSN毒株分别感染MLE-12细胞和小鼠,用NF-κB抑制剂BAY11-7028单独或联合NMB处理MLE... NMB/NMBR通过调节A型流感病毒(IAV/H1N1/PR8)感染诱导的细胞因子表达而参与抗IAV的先天性免疫反应。为探究其发挥抗IAV/H1N1感染的信号通路,本文用PR8和WSN毒株分别感染MLE-12细胞和小鼠,用NF-κB抑制剂BAY11-7028单独或联合NMB处理MLE-12细胞,小鼠后腿肌内注射NMB和NMBRA,采用RT-PCR和qRT-PCR分析NMB、NMBR、IL-6、IFN-α和NP基因表达变化,采用Western blot分析NMB、NMBR、P65/p-P65、IκBα和NP蛋白表达的变化。结果显示,BAY11-7028可促使PR8和WSN感染的MLE-12细胞中NMB、NMBR、IL-6和IFN-α基因表达水平均下降和NP基因表达水平上升,并降低NMB、NMBR和p-P65蛋白表达水平和提升IκBα和NP蛋白表达水平。然而,NMB联合BAY 11-7028诱导PR8或WSN感染后的细胞中IL-6和NP表达出现极显著下降和IFN-α显著上升。此外,NMB抑制PR8和WSN感染的小鼠肺组织内p-P65和NP蛋白表达水平和促进IκBα蛋白表达水平;NMBRA联合NMB抵消NMB对PR8或WSN感染后的这些蛋白表达水平的调节作用。综上表明,NMB/NMBR通过调节PR8和WSN感染的MLE-12细胞和小鼠体内的NF-κB信号通路上P65蛋白磷酸化和IκBα的表达,进而影响下游细胞因子IL-6和IFN-α基因的表达,从而发挥抗IAV/H1N1感染的先天性免疫应答反应。 展开更多
关键词 神经介素B 神经介素B受体 A型流感病毒H1N1 NF-ΚB
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胎羊肾细胞用于增殖H1N1亚型流感病毒的初步研究 被引量:2
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作者 向敏 高其双 +9 位作者 陈志华 黄海军 卢顺 彭霞 陶弼菲 占才耀 夏瑜 华娟 童伟文 王莲芳 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第2期52-55,共4页
为研究胎羊肾细胞用于H1N1亚型流感病毒增殖的可能性,采用胰酶消化法从胎羊肾组织中分离肾细胞进行传代培养,并采用间接免疫荧光法检测细胞表面的流感病毒受体,采用直接血凝法测定病毒培养物的血凝价。结果表明,该细胞表面有较丰富的流... 为研究胎羊肾细胞用于H1N1亚型流感病毒增殖的可能性,采用胰酶消化法从胎羊肾组织中分离肾细胞进行传代培养,并采用间接免疫荧光法检测细胞表面的流感病毒受体,采用直接血凝法测定病毒培养物的血凝价。结果表明,该细胞表面有较丰富的流感病毒受体,且α2,6-Gal受体的含量明显高于犬肾细胞(MDCK);用该细胞培养H1N1亚型流感病毒,其病毒培养物的血凝价达到29~210,略高于MDCK细胞的毒价;该细胞在体外连续传10代,其病毒培养物的血凝价没有明显改变。以上结果初步表明胎羊肾细胞可用于H1N1亚型流感病毒的增殖。 展开更多
关键词 胎羊肾细胞 流感病毒 受体
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连翘酯苷A对感染H9N2型禽流感小鼠Toll样受体4信号通路影响的研究 被引量:3
17
作者 盛楠 鲁冠杰 +2 位作者 付岳 田学琳 胡格 《北京农学院学报》 2020年第3期94-100,共7页
【目的】探究连翘酯苷A对感染H9N2型禽流感病毒小鼠Toll样受体4信号通路的影响。【方法】采用滴鼻方法建立小鼠H9N2型禽流感病毒急性肺损伤模型,120只小鼠随机分为5组(对照组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组),连翘酯苷A治疗连续... 【目的】探究连翘酯苷A对感染H9N2型禽流感病毒小鼠Toll样受体4信号通路的影响。【方法】采用滴鼻方法建立小鼠H9N2型禽流感病毒急性肺损伤模型,120只小鼠随机分为5组(对照组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组),连翘酯苷A治疗连续7 d,各组在3、5、7、14 d随机选3只小鼠,称量体质量后取肺组织进行肺水肿评估、细胞因子检测、病理切片制作及Toll样受体4相关蛋白变化检测。【结果】与对照组相比,模型组小鼠体质量显著下降出现肺水肿现象,加入连翘酯苷A治疗后体质量呈现上升趋势肺部症状减轻;显微镜观察,模型组小鼠肺部组织比对照组小鼠肺部组织损伤严重,加入连翘酯苷A治疗后有所缓解;模型组血清中细胞因子白介素6含量极显著高于对照组(P<0.01),加入连翘酯苷A治疗后,呈现下调趋势;与对照组相比,模型组髓样分化因子、核因子-κB及磷酸化核因子-κB蛋白表达量极显著高于对照组(P<0.01),中剂量组与高剂量组髓样分化因子、核因子-κB及磷酸化核因子-κB蛋白表达量极显著(P<0.01)低于模型组。【结论】连翘酯苷A可下调Toll样受体4信号通路相应蛋白减轻炎症因子释放。 展开更多
关键词 连翘酯苷A 小鼠 禽流感 TOLL样受体
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黄芪多糖对流感病毒性肺炎大鼠肺组织NLRP3信号通路的影响 被引量:9
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作者 沈钦华 李素娟 董苏一 《山西医科大学学报》 CAS 2021年第9期1154-1159,共6页
目的探究黄芪多糖(APS)对甲型流感病毒(IAV)性肺炎大鼠肺组织NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路的影响。方法将40只大鼠随机分为对照组、模型组、黄芪多糖低剂量组(APS-L组,50 mg/kg)和黄芪多糖高剂量组(APS-H组,100 mg/kg),每组10只。除... 目的探究黄芪多糖(APS)对甲型流感病毒(IAV)性肺炎大鼠肺组织NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路的影响。方法将40只大鼠随机分为对照组、模型组、黄芪多糖低剂量组(APS-L组,50 mg/kg)和黄芪多糖高剂量组(APS-H组,100 mg/kg),每组10只。除对照组外,其余各组大鼠采用甲型流感病毒H1N1滴鼻法建立病毒性肺炎模型。感染24 h后,APS-L组和APS-H组灌胃给予相应剂量的APS,对照组和模型组灌胃等量生理盐水,1次/d,持续5 d。给药结束后,观察大鼠一般状态,并计算大鼠肺指数。ELISA法检测肺匀浆中IL-1β、IL-18含量。HE染色观察肺组织病理学变化。qRT-PCR检测肺组织NLRP3 mRNA、IL-1βmRNA水平。Western blot检测肺组织NLRP3、cleaved Caspase-1蛋白表达。结果与对照组相比,模型组大鼠一般状态较差,肺组织出现明显病变,肺泡结构破坏,肺指数、肺组织IL-18、IL-1β、NLRP3 mRNA和蛋白、cleaved Caspase-1 P10、cleaved Caspase-1 P20蛋白表达显著增加(P<0.05)。与模型组相比,APS-L组和APS-H组大鼠一般状态和肺部的病理损伤明显改善,肺指数、肺组织IL-18、IL-1β、NLRP3 mRNA和蛋白、cleaved Caspase-1 P10、cleaved Caspase-1 P20蛋白表达明显降低(P<0.05),且APS-H组上述指标的变化均优于APS-L组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论APS可能通过抑制NLRP3炎症小体的活化,进而降低IL-1β、IL-18水平,减轻流感病毒感染引起的肺部炎性损伤。 展开更多
关键词 黄芪多糖 流感病毒性肺炎 甲型流感病毒H1N1 NOD样受体蛋白3
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一株广西鸡源H6亚型禽流感病毒全基因组序列分析及其重要生物学特性 被引量:2
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作者 李孟 谢芝勋 +10 位作者 李丹 罗思思 谢丽基 张民秀 黄娇玲 范晴 王盛 谢志勤 邓显文 曾婷婷 张艳芳 《安徽农业科学》 CAS 2020年第23期125-128,142,共5页
2017年对广西地区活禽交易市场进行低致病性禽流感流行病学调查,从采集的鸡咽喉和泄殖腔拭子中分离鉴定出一株鸡源H6N6亚型禽流感病毒,命名为A/chicken/Guangxi/286C10/2017(H6N6)。应用RT-PCR方法分别对分离毒株的8个基因片段进行扩增... 2017年对广西地区活禽交易市场进行低致病性禽流感流行病学调查,从采集的鸡咽喉和泄殖腔拭子中分离鉴定出一株鸡源H6N6亚型禽流感病毒,命名为A/chicken/Guangxi/286C10/2017(H6N6)。应用RT-PCR方法分别对分离毒株的8个基因片段进行扩增,同时将产物进行克隆和测序,然后对测序结果进行同源性比对及遗传进化分析。另外,还通过固相受体结合试验对毒株的唾液酸受体进行测定。结果显示,该分离株的HA基因与广东分离株A/chicken/Guangdong/G3249/2014(H6)的核苷酸同源性最高,裂解位点符合低致病性禽流感病毒的分子特征;NA基因与江西分离株A/duck/Ganzhou/GZ148/2016(H6N6)核苷酸同源性最高;内部基因中,PB1和NS基因来源于广东的鸡,PB2基因来源于越南的鸡,PA、NP和M基因来源于广西的鹅;同时,研究还发现该病毒的HA、NA、PA、NP和M基因来源H6亚型AIV,PB2、PB1和NS基因来源H9N2亚型AIV,推测A/chicken/Guangxi/286C10/2017(H6N6)可能是由不同地区、不同宿主来源的H6和H9亚型AIV通过基因重组产生的一株新的重配毒株。由于广西地理位置特殊,今后应加强对该地区H6亚型禽流感病毒变异情况的监测。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H6亚型 遗传进化 受体分析
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