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酶联免疫吸附法检测动物源性食品中恩诺沙星残留量
被引量:
16
1
作者
杨熠
孟坤杰
+2 位作者
赵红琼
米克热木.沙衣布扎提
张小莺
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017年第8期239-243,共5页
为检测动物源性食品中恩诺沙星残留量,评估基于卵黄抗体的间接竞争酶联免疫吸附法检测恩诺沙星的可行性,用活性脂法将恩诺沙星同卵清蛋白偶联制备免疫原和包被抗原并用紫外光谱进行验证。用聚乙二醇-6000提取卵黄抗体。五免之后效价达...
为检测动物源性食品中恩诺沙星残留量,评估基于卵黄抗体的间接竞争酶联免疫吸附法检测恩诺沙星的可行性,用活性脂法将恩诺沙星同卵清蛋白偶联制备免疫原和包被抗原并用紫外光谱进行验证。用聚乙二醇-6000提取卵黄抗体。五免之后效价达到峰值1∶32 000。用间接竞争酶联免疫吸附法确定包被原质量浓度、卵黄抗体的稀释倍数和IC_(50)分别为38 ng/m L、1∶64 000和18.207 ng/m L,回归曲线方程为y=0.891 1-0.016 5x(R^2=0.990)。结果表明,制备的抗恩诺沙星卵黄抗体为进一步建立检测动物源性食品中恩诺沙星的残留的免疫方法提供参考依据。
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关键词
恩诺沙星
卵黄抗体
药物残留
酶联免疫吸附法
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职称材料
雌二醇单克隆抗体制备及胶体金侧流层析免疫分析方法的建立
2
作者
王金魁
丁明月
+3 位作者
毛烨炫
宋莲军
黄现青
张西亚
《食品安全质量检测学报》
CAS
北大核心
2023年第18期201-210,共10页
目的探讨雌二醇(17β-estradiol,E2)的3号位和17号位引入活性基团制备的半抗原对抗体灵敏度的影响,选用灵敏度较高的抗体建立一种牛奶中E2胶体金侧流层析免疫分析方法(colloidalgold-basedlateral flow immunoassay,CG-LFA)。方法从E2的...
目的探讨雌二醇(17β-estradiol,E2)的3号位和17号位引入活性基团制备的半抗原对抗体灵敏度的影响,选用灵敏度较高的抗体建立一种牛奶中E2胶体金侧流层析免疫分析方法(colloidalgold-basedlateral flow immunoassay,CG-LFA)。方法从E2的3号位羟基和17号位羟基引入活性基团分别制备半抗原H1a和H2,偶联载体蛋白制备完全抗原,经过动物免疫和细胞融合筛选,制备单克隆抗体(monoclonal antibodies,mAbs),采用间接竞争酶联免疫吸附实验(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,icELISA)对mAbs性能进行评估,筛选出灵敏度最高的mAb,最后采用静电吸附法将胶体金标记抗体为探针,构建牛奶中E2的CG-LFA。结果制备了H1a-7B7、H1a-7B12、H1a-9C7、H1a-10E7、H2-2E2、H2-3C10、H2-4A10和H2-6D28种mAbs,经过icELISA评估,其半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)分别为0.116、0.207、0.072、0.370、0.442、6.170、0.415和4.411 ng/mL,最终选取H1a-9C7,构建牛奶中E2的LFA,消线(cut-off)值为6.00ng/mL,与苯甲酸雌二醇和雌三醇的交叉反应率分别为101.31%和2.43%,在真实样本加标回收实验中,检测结果与液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)结果一致。结论E2的3号位引入活性基团设计合成的半抗原所制备的E2抗体灵敏度,比17号位引入活性基团制备的抗体灵敏度高,并且建立的LFA准确度良好,为牛奶中E2快速检测提供了一定的技术手段。
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关键词
雌二醇
单克隆抗体
间接竞争酶联免疫吸附实验
胶体金侧流层析免疫分析
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职称材料
题名
酶联免疫吸附法检测动物源性食品中恩诺沙星残留量
被引量:
16
1
作者
杨熠
孟坤杰
赵红琼
米克热木.沙衣布扎提
张小莺
机构
新疆农业大学动物医学学院
西北农林科技大学动医学院
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017年第8期239-243,共5页
基金
国家自然科学基金面上项目(31572556)
2016年度国家外国专家局国文教专家聘请计划学校重点项目(X2015017)
中国-上合组织国家动物疫病与动物源性食品安全检测创新平台项目(2016E03012)
文摘
为检测动物源性食品中恩诺沙星残留量,评估基于卵黄抗体的间接竞争酶联免疫吸附法检测恩诺沙星的可行性,用活性脂法将恩诺沙星同卵清蛋白偶联制备免疫原和包被抗原并用紫外光谱进行验证。用聚乙二醇-6000提取卵黄抗体。五免之后效价达到峰值1∶32 000。用间接竞争酶联免疫吸附法确定包被原质量浓度、卵黄抗体的稀释倍数和IC_(50)分别为38 ng/m L、1∶64 000和18.207 ng/m L,回归曲线方程为y=0.891 1-0.016 5x(R^2=0.990)。结果表明,制备的抗恩诺沙星卵黄抗体为进一步建立检测动物源性食品中恩诺沙星的残留的免疫方法提供参考依据。
关键词
恩诺沙星
卵黄抗体
药物残留
酶联免疫吸附法
Keywords
enrofloxacin
IgY
antibiotic residues
indirect
competitive
enzyme-linked
immunosorbent
immunoassay
(
ic-elisa
)
分类号
S859.79 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
雌二醇单克隆抗体制备及胶体金侧流层析免疫分析方法的建立
2
作者
王金魁
丁明月
毛烨炫
宋莲军
黄现青
张西亚
机构
河南农业大学食品科学技术学院
出处
《食品安全质量检测学报》
CAS
北大核心
2023年第18期201-210,共10页
基金
河南科技攻关项目(222102310162)
国家自然科学基金项目(32172298)。
文摘
目的探讨雌二醇(17β-estradiol,E2)的3号位和17号位引入活性基团制备的半抗原对抗体灵敏度的影响,选用灵敏度较高的抗体建立一种牛奶中E2胶体金侧流层析免疫分析方法(colloidalgold-basedlateral flow immunoassay,CG-LFA)。方法从E2的3号位羟基和17号位羟基引入活性基团分别制备半抗原H1a和H2,偶联载体蛋白制备完全抗原,经过动物免疫和细胞融合筛选,制备单克隆抗体(monoclonal antibodies,mAbs),采用间接竞争酶联免疫吸附实验(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,icELISA)对mAbs性能进行评估,筛选出灵敏度最高的mAb,最后采用静电吸附法将胶体金标记抗体为探针,构建牛奶中E2的CG-LFA。结果制备了H1a-7B7、H1a-7B12、H1a-9C7、H1a-10E7、H2-2E2、H2-3C10、H2-4A10和H2-6D28种mAbs,经过icELISA评估,其半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)分别为0.116、0.207、0.072、0.370、0.442、6.170、0.415和4.411 ng/mL,最终选取H1a-9C7,构建牛奶中E2的LFA,消线(cut-off)值为6.00ng/mL,与苯甲酸雌二醇和雌三醇的交叉反应率分别为101.31%和2.43%,在真实样本加标回收实验中,检测结果与液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)结果一致。结论E2的3号位引入活性基团设计合成的半抗原所制备的E2抗体灵敏度,比17号位引入活性基团制备的抗体灵敏度高,并且建立的LFA准确度良好,为牛奶中E2快速检测提供了一定的技术手段。
关键词
雌二醇
单克隆抗体
间接竞争酶联免疫吸附实验
胶体金侧流层析免疫分析
Keywords
17β-estradiol
monoclonal antibody
indirect
competitive
enzyme-linked
immunosorbent
assay
colloidal gold-based lateral flow
immunoassay
分类号
TS252.7 [轻工技术与工程—农产品加工及贮藏工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
酶联免疫吸附法检测动物源性食品中恩诺沙星残留量
杨熠
孟坤杰
赵红琼
米克热木.沙衣布扎提
张小莺
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017
16
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
雌二醇单克隆抗体制备及胶体金侧流层析免疫分析方法的建立
王金魁
丁明月
毛烨炫
宋莲军
黄现青
张西亚
《食品安全质量检测学报》
CAS
北大核心
2023
0
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