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细胞外囊泡微流控分选技术研究进展
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作者 曹昌铭 李震 +2 位作者 田艳红 安荣 任天令 《中国生物医学工程学报》 北大核心 2025年第1期89-100,共12页
细胞外囊泡(EVs)是细胞向外部环境释放的膜结构颗粒,广泛存在于血液、尿液和唾液等体液中,包含蛋白质及核酸等多种生物分子,可作为多种疾病的生物标记物,其提取与分析对疾病的快速诊断与治疗至关重要。传统的EVs分选技术,如差速超速离心... 细胞外囊泡(EVs)是细胞向外部环境释放的膜结构颗粒,广泛存在于血液、尿液和唾液等体液中,包含蛋白质及核酸等多种生物分子,可作为多种疾病的生物标记物,其提取与分析对疾病的快速诊断与治疗至关重要。传统的EVs分选技术,如差速超速离心,存在样本需求量大且仪器设备昂贵等局限,而微流控分选技术因其微型化、高回收率和集成化等优势,更适合于医疗机构的实际应用。文中将微流控分选方法分类为无标记被动分选、无标记主动分选、固定基底免疫亲和分选以及游离微珠免疫亲和分选,并综述了各类方法在EVs分离领域的研究进展,概括和比较了各类方法在纯度、回收率、通量以及芯片制备难度等方面的差异和特点,展望了EVs微流控分选技术的发展方向,包括改善分选指标、降低分选成本和减小分离截止尺寸等改进目标。在无标记分选中,声泳具有纯度高、通量高以及可分选纳米EVs的优势,且能单片集成EVs浓度的声学传感模块,更具发展前景;而免疫亲和分选,因使用游离微珠技术,凭借其捕获效率高且芯片可复用的优势,更适用于连续和批量化的分选应用。 展开更多
关键词 细胞外囊泡 微流控分选技术 无标记分选 免疫亲和分选 分离
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超高效液相色谱-串联三重四级杆质谱法同时测定运动马饲料中12种真菌毒素 被引量:1
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作者 龚豪杰 李冰杰 《中国饲料》 北大核心 2025年第5期118-124,共7页
为建立超高效液相色谱-串联三重四级杆质谱法同时测定饲料中12种真菌毒素含量的方法,实验样品经乙腈-水-甲酸溶液(840:159:1,V/V/V)提取后,再用免疫亲和柱对提取液进行净化处理。结果显示:在所考察的浓度范围内12种真菌毒素的线性关系良... 为建立超高效液相色谱-串联三重四级杆质谱法同时测定饲料中12种真菌毒素含量的方法,实验样品经乙腈-水-甲酸溶液(840:159:1,V/V/V)提取后,再用免疫亲和柱对提取液进行净化处理。结果显示:在所考察的浓度范围内12种真菌毒素的线性关系良好,相关系数(R2)均大于0.995;方法检出限为0.14~2.67μg/kg、定量限位0.47~8.90μg/kg;在S_(1)样品中进行0.01、0.05、1.0μg/kg的三水平加标回收,其中12种真菌毒素的平均加标回收率为77.25%~98.65%;相对标准偏差(RSD)为0.12%~8.23%。研究表明,该方法具有灵敏度高、分析时间短、结果准确的特点,适用于饲料中多种真菌毒素的测定。 展开更多
关键词 真菌毒素 饲料 高效液相色谱-串联三重四级杆质谱法 免疫亲和柱
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免疫亲和层析技术协同酶联免疫吸附法检测赭曲霉毒素A 被引量:6
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作者 张蕴哲 张先舟 +1 位作者 袁耀武 张伟 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第10期257-264,共8页
利用免疫亲和层析技术(immunoaffinity chromatography,IAC)对样品中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)进行捕获与浓缩,利用酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法对IAC捕获的目标物OTA进行测定。IAC与ELISA中的抗OTA... 利用免疫亲和层析技术(immunoaffinity chromatography,IAC)对样品中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)进行捕获与浓缩,利用酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法对IAC捕获的目标物OTA进行测定。IAC与ELISA中的抗OTA单克隆抗体来自不同的克隆株,分属不同独特型,与OTA结合靶点的选择性存在差异,IAC与ELISA协同检测,可以有效过滤OTA结构类似物造成的干扰,提高免疫分析的特异性与灵敏度。该方法用于加标样品测定时,OTA的检出限为0.2 ng/g,定量限为0.4 ng/g,OTA的平均回收率为75.9%,与单一的ELISA法相比,该方法虽然回收率略低,但灵敏度可以显著提高,达到ELISA法的60倍。通过对49份样品的实际检测,该方法检出阳性样品与国标法的符合率达到100%,漏检率为0%,由此可见,该方法在准确性上表现出明显的优势。作为一种综合免疫分析技术,该方法不需要大型仪器设备,对操作环境没有严格要求,便于基层实验室对样品中OTA的分析。 展开更多
关键词 免疫亲和层析技术 酶联免疫吸附法 检测 赭曲霉毒素A
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复合免疫亲和柱净化-超高效液相色谱-串联质谱法测定衢枳壳中5种真菌毒素的含量 被引量:1
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作者 张萌萌 雷美康 +3 位作者 庞明利 王莹莹 周垄芳 蒋永祥 《理化检验(化学分册)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1061-1066,共6页
提出了题示方法测定衢枳壳样品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2和赭曲霉毒素A的含量。样品经过体积比79∶20∶1的乙腈-水-乙酸混合溶液超声提取,离心,上清液用p H 7.0磷酸盐缓冲液稀释,用复合免疫亲和柱净化,过滤,滤液中的目标物在XDB C18... 提出了题示方法测定衢枳壳样品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2和赭曲霉毒素A的含量。样品经过体积比79∶20∶1的乙腈-水-乙酸混合溶液超声提取,离心,上清液用p H 7.0磷酸盐缓冲液稀释,用复合免疫亲和柱净化,过滤,滤液中的目标物在XDB C18色谱柱上用不同体积比的体积比1∶9的甲醇-5 mmol·L^(-1)乙酸铵混合溶液和体积比9∶1的甲醇-5 mmol·L^(-1)乙酸铵混合溶液的混合溶液分离,电喷雾离子源正离子(ESI+)和多反应监测(MRM)模式检测,同位素内标法定量。结果显示:5种真菌毒素与其同位素内标质量浓度比和对应的峰面积比在一定范围内呈线性关系,检出限为0.05~0.20μg·kg^(-1)。3个加标浓度水平下阴性样品中5种真菌毒素的回收率为82.7%~97.3%,测定值的相对标准偏差(n=6)为5.2%~12%。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素 赭曲霉毒素A 复合免疫亲和柱 超高效液相色谱-串联质谱法 衢枳壳
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测定玉米中伏马毒素的免疫亲和层析净化高效液相色谱法 被引量:17
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作者 李为喜 郑床木 +5 位作者 武力 李欣 李静梅 宋敬可 杨秀兰 王步军 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期556-562,共7页
伏马毒素(Fumonisins)是串珠镰刀菌繁殖产生的一类真菌毒素。玉米在生长和储存过程中极易受到伏马毒素的侵染。流行病学研究结果表明,受到伏马毒素污染的玉米及其制品可导致马白脑软化症、猪肺水肿综合症,还可诱发人类食管癌和胎儿神经... 伏马毒素(Fumonisins)是串珠镰刀菌繁殖产生的一类真菌毒素。玉米在生长和储存过程中极易受到伏马毒素的侵染。流行病学研究结果表明,受到伏马毒素污染的玉米及其制品可导致马白脑软化症、猪肺水肿综合症,还可诱发人类食管癌和胎儿神经管畸形等疾病。本研究建立了应用免疫亲和柱净化高效液相色谱测定玉米中伏马毒素B1和B2的方法,同时,运用统计学方法对该法进行了准确性和再现性评价。结果表明,FB1和FB2线性范围分别为0.06~5.00μgmL1和0.04~2.50μgmL1,回收率分别为76.6%~93.8%和77.9%~93.4%,FB1和FB2方法定量限分别为0.09mgkg1和0.06mgkg1,实验室内重复性测定的变异系数均低于5%,实验室间再现性测定的变异系数低于6%。上述结果说明该方法的线性、准确度、精密度、灵敏度及同一实验室重复性和多家实验室的再现性评价结果优良,适合作为伏马毒素的测定方法。应用该方法对310份玉米进行了伏马毒素的测定,结果表明,大田、存储玉米伏马毒素总量范围分别为0.20~9.06mgkg1和0.21~6.10mgkg1,建议应加强玉米中伏马毒素污染水平监控,保证人畜健康。 展开更多
关键词 玉米 伏马毒素 高效液相色谱 免疫亲和柱
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免疫亲和柱高效液相色谱法快速测定牛奶和奶粉中黄曲霉毒素M_1、B_1、B_2、G_1、G_2 被引量:27
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作者 李佐卿 章再婷 +2 位作者 谢东华 康继韬 孙大为 《理化检验(化学分册)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期406-408,共3页
采用单克隆抗体免疫亲和技术作为直接从样品中分离提取黄曲霉毒素的特效手段,提取液挥干后,经衍生用HPLC荧光检测器测定。对鲜奶和高脂奶粉(脂肪含量25%)在0.01,0.05,0.1和0.1,0.5,1.0μg.L-1水平对黄曲霉毒素M1、B1、B2、G1、G2测定平... 采用单克隆抗体免疫亲和技术作为直接从样品中分离提取黄曲霉毒素的特效手段,提取液挥干后,经衍生用HPLC荧光检测器测定。对鲜奶和高脂奶粉(脂肪含量25%)在0.01,0.05,0.1和0.1,0.5,1.0μg.L-1水平对黄曲霉毒素M1、B1、B2、G1、G2测定平均回收率(n=10)为66.0%~97.0%;相对标准偏差(n=10)为1.04%~14.0%。方法的检出限低于0.01μg.L-1(鲜奶),0.1μg.kg-1(奶粉)。 展开更多
关键词 HPLC 免疫亲和柱 黄曲霉毒素 测定
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高效液相色谱快速测定玉米中黄曲霉毒素的研究 被引量:11
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作者 罗小虎 王韧 +4 位作者 王莉 李永富 沈利杨 王勇 陈正行 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第6期99-103,共5页
黄曲霉毒素(AFT)主要是由真菌产生的具有严重毒性的化学结构类似的次级代谢产物,玉米极易受其污染。通过考察不同激发波长(λEx)和发射波长(λEm)、不同流动相组成,免疫亲和柱(IAC)净化与未经净化的样品对AFT检测结果的影响... 黄曲霉毒素(AFT)主要是由真菌产生的具有严重毒性的化学结构类似的次级代谢产物,玉米极易受其污染。通过考察不同激发波长(λEx)和发射波长(λEm)、不同流动相组成,免疫亲和柱(IAC)净化与未经净化的样品对AFT检测结果的影响。结果表明,入Ex为360nm,μEm为440nm,流动相组成为水-甲醇(65:35),玉米中AFr检测分离效果最好;且未经IAC净化的样品,虽有一些杂质干扰检测结果,但方法的线性范围(0.04~26ng)和检出限(0.1μg/kg)仍良好,方法加标回收率在81.7%-94.3%,标准偏差在3.6%~6.2%,日内、日间精密度分别为4.5%~5.1%和4.8%~5.5%。该方法具有快速、准确、重现性好、稳定性高、成本低的优点,适合大批次污染AFT的玉米检测。 展开更多
关键词 高效液相色谱 黄曲霉毒素 玉米 免疫亲和柱 检测
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牛副结核ELISA诊断方法研究 被引量:13
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作者 何昭阳 韩有库 +2 位作者 顾万钧 钱爱东 李卯年 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第1期57-60,共4页
本文建立了牛副结核病ELISA诊断方法。采用亲和层析抗原。被检血清以高压粉碎草分枝杆菌吸收原进行吸收。该方法的敏感性76%,特异性97%,通过对2483头奶牛进行检测,检出率为6.1%,并与常规的补反和变态反应进行了比较。作者认为:牛副结... 本文建立了牛副结核病ELISA诊断方法。采用亲和层析抗原。被检血清以高压粉碎草分枝杆菌吸收原进行吸收。该方法的敏感性76%,特异性97%,通过对2483头奶牛进行检测,检出率为6.1%,并与常规的补反和变态反应进行了比较。作者认为:牛副结核ELISA可以替代补反,做为检测牛副结核的一种有力手段。 展开更多
关键词 牛副结核病 ELISA 亲和抗原
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免疫亲和柱同时净化-HPLC法测定植物油中黄曲霉毒素和玉米赤霉烯酮 被引量:16
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作者 鲍蕾 吕宁 +7 位作者 吴振兴 静平 许艳丽 江帆 董韬 果旗 王雄 王岳 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期306-309,共4页
建立了免疫亲和柱同时净化-高效液相色谱法检测植物油中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2和玉米赤霉烯酮的分析方法。黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的方法的定量限均为0.1μg/kg,玉米赤霉烯酮的方法的定量限为5.0μg/kg,相对标准偏差低于10.4%,... 建立了免疫亲和柱同时净化-高效液相色谱法检测植物油中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2和玉米赤霉烯酮的分析方法。黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的方法的定量限均为0.1μg/kg,玉米赤霉烯酮的方法的定量限为5.0μg/kg,相对标准偏差低于10.4%,回收率为82.0%~95.5%。该方法简便快速、灵敏准确、重现性好,可以用于对植物油中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2和玉米赤霉烯酮进行快速定量检测。 展开更多
关键词 免疫亲和柱 快速定量检测 植物油 黄曲霉毒素 玉米赤霉烯酮
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脑立清丸等6种中成药中黄曲霉毒素G_2、G_1、B_2、B_1的测定 被引量:19
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作者 郑荣 毛丹 +4 位作者 王少敏 许勇 张道广 王柯 季申 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期418-422,共5页
目的:建立了脑立清丸等6种中成药中黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的HPLC测定方法。方法:样品经70%甲醇提取、免疫亲和柱净化后,用高效液相色谱-柱后衍生-荧光检测器进行分析测定。结果:黄曲霉毒素G2、B2在1.5~60pg范围内线性关系良好,黄曲... 目的:建立了脑立清丸等6种中成药中黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的HPLC测定方法。方法:样品经70%甲醇提取、免疫亲和柱净化后,用高效液相色谱-柱后衍生-荧光检测器进行分析测定。结果:黄曲霉毒素G2、B2在1.5~60pg范围内线性关系良好,黄曲霉毒素G1、B1在5~200pg范围内线性关系良好,r>0.9999。回收率在60%~120%之间。结论:该方法快速简便,准确,可作为脑立清丸、人参养荣丸、人参健脾丸、三七片、金水宝胶囊和百令胶囊中黄曲霉毒素的含量测定方法。 展开更多
关键词 中成药 HPLC 黄曲霉毒素 免疫亲和柱
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药食两用类食品中赭曲霉毒素A的高效液相色谱-荧光检测方法 被引量:10
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作者 傅武胜 邱文倩 +3 位作者 郑奎城 吕华东 郭斌 严小波 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第14期298-302,共5页
目的:采用免疫亲和净化和高效液相色谱技术,建立淀粉、糖类药食两用食品中赭曲霉毒素A的测定方法。方法:样品粉末经甲醇-水(8:2,V/V)涡旋、超声及振摇提取,提取液以磷酸盐缓冲液稀释后,用商品免疫亲和柱净化,含有赭曲霉毒素A的甲醇洗脱... 目的:采用免疫亲和净化和高效液相色谱技术,建立淀粉、糖类药食两用食品中赭曲霉毒素A的测定方法。方法:样品粉末经甲醇-水(8:2,V/V)涡旋、超声及振摇提取,提取液以磷酸盐缓冲液稀释后,用商品免疫亲和柱净化,含有赭曲霉毒素A的甲醇洗脱液用高效液相色谱技术分析,C18反相色谱柱分离,荧光检测器测定。结果:赭曲霉毒素A的最低检出浓度为1.0μg/kg(RSN=3);在0.5~100ng/mL范围内,峰面积与质量浓度呈线性关系(r=0.9995);以不含赭曲霉毒素A的太子参、莲子、薏苡、麦冬和龙眼肉为加标基质,加标水平为1~8μg/kg时,平均回收率在81.8%~107%之间,RSD为1.66%~15.0%(n=3)。结论:免疫亲和柱能和高效液相色谱-荧光检测相结合取得较为满意的结果,准确度高、精密度好,满足欧盟对食品饲料中OTA检测方法的要求,适合于淀粉、糖类药食两用食品中赭曲霉毒素A的测定。 展开更多
关键词 药食两用食品 赭曲霉毒素A 免疫亲和净化 高效液相色谱法
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运用免疫亲和柱和高效液相色谱(HPLC)检测啤酒大麦中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇 被引量:8
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作者 王志萍 王德良 +3 位作者 冯作山 杨静 王晓娟 陈旭 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期137-139,共3页
采用免疫亲和柱净化、高效液相色谱定量等方法对啤酒大麦中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)进行检测。向啤酒大麦中加入标准品,加标的范围在0.10~2.00μg/g,加标回收率为92.04%~97.29%,相对标准偏差是0.92%~2.67%。检出限是0.01μg/g。所... 采用免疫亲和柱净化、高效液相色谱定量等方法对啤酒大麦中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)进行检测。向啤酒大麦中加入标准品,加标的范围在0.10~2.00μg/g,加标回收率为92.04%~97.29%,相对标准偏差是0.92%~2.67%。检出限是0.01μg/g。所测样品中DON的含量范围在0.0123~0.0926μg/g,其中江浙、云南和东北产区的啤酒大麦中DON含量较高。 展开更多
关键词 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 高效液相色谱 啤酒大麦 免疫亲和柱
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免疫亲和-光化学衍生高效液相色谱检测花生及花生制品中黄曲霉毒素 被引量:11
13
作者 李军 田苗 +3 位作者 于一芒 王宏伟 卫锋 王雄 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期93-96,共4页
建立了免疫亲和柱净化、柱后光化学衍生、高效液相色谱法结合荧光检测器测定花生及花生制品中黄曲霉毒素的新方法。方法的检出限为0.25μg/kg,相对标准偏差低于10%,回收率为64%-101%。该方法简便快速、灵敏准确、重复性好,满足... 建立了免疫亲和柱净化、柱后光化学衍生、高效液相色谱法结合荧光检测器测定花生及花生制品中黄曲霉毒素的新方法。方法的检出限为0.25μg/kg,相对标准偏差低于10%,回收率为64%-101%。该方法简便快速、灵敏准确、重复性好,满足出入境检验检疫工作的需要。 展开更多
关键词 免疫亲和柱 光化学衍生 高效液相色谱 花生及花生制品 黄曲霉毒素
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粮食中呕吐毒素含量的免疫亲和柱净化超高效液相色谱法快速测定 被引量:19
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作者 谢刚 王松雪 张艳 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1362-1366,共5页
建立了免疫亲和柱净化/超高效液相色谱法快速测定粮食中呕吐毒素(DON)的检测方法。样品经纯水提取后,用免疫亲和柱净化、浓缩,Waters Acquity UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱分离,以甲醇-水(10∶90)为流动相,流速为0.1 m... 建立了免疫亲和柱净化/超高效液相色谱法快速测定粮食中呕吐毒素(DON)的检测方法。样品经纯水提取后,用免疫亲和柱净化、浓缩,Waters Acquity UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱分离,以甲醇-水(10∶90)为流动相,流速为0.1 mL/min,进样量1μL,用Acquity紫外检测器在220 nm处进行检测,保留体积不足0.5 mL,整个分析过程用时不足45 min。呕吐毒素在0.5~10.0 mg/L范围内线性关系良好,相关系数(r2)为0.999 96;检出限(S/N=3)为0.15 ng,定量下限(S/N=10)为0.5 ng,加标回收率为84%~98%,相对标准偏差为2.9%~5.9%。该方法简便快速、灵敏度高、重现性好、溶剂用量少且环保,适用于原粮中呕吐毒素的快速测定。 展开更多
关键词 粮食 呕吐毒素 超高效液相色谱 免疫亲和柱
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免疫亲和柱净化/高效液相色谱法同时测定动物源性食品中16种磺胺类药物残留 被引量:21
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作者 袁中珍 张雷 +4 位作者 唐柏彬 郗存显 王国民 游丽娜 赵华 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期478-482,共5页
建立了免疫亲和柱净化/高效液相色谱法(IAC/HPLC)同时测定动物源性食品中16种磺胺类药物残留的分析方法。样品经80%乙醇提取,稀释后用磺胺类药物免疫亲和柱净化,高效液相色谱法检测。以Agi-lent Eclipse XDB-C18为分离色谱柱,甲醇-磷酸... 建立了免疫亲和柱净化/高效液相色谱法(IAC/HPLC)同时测定动物源性食品中16种磺胺类药物残留的分析方法。样品经80%乙醇提取,稀释后用磺胺类药物免疫亲和柱净化,高效液相色谱法检测。以Agi-lent Eclipse XDB-C18为分离色谱柱,甲醇-磷酸盐缓冲液(pH 3.5)为流动相梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,进样量为50μL,检测波长为270 nm,整个分析过程不超过42 min。实验结果表明,磺胺类药物在10~200μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999。在20、50、100μg/kg的加标水平下,16种磺胺类药物的平均回收率为62%~104%,相对标准偏差为0.9%~6.6%,检出限(S/N=3)为4~10μg/kg。该方法简便快速、灵敏度高、溶剂用量少且环保,适用于动物源性食品中磺胺类药物残留的测定。 展开更多
关键词 磺胺类药物 免疫亲和柱 高效液相色谱法
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免疫亲和色谱-气相色谱/质谱法(IAC-GC/MS)检测猪肝中的沙丁胺醇与克伦特罗 被引量:20
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作者 王建平 史为民 沈建忠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期271-275,共5页
制备出抗沙丁胺醇的抗血清,提取、纯化IgG制备免疫亲和色谱柱,针对沙丁胺醇与克伦特罗的动态柱容量分别为400 ng/mL基质和416 ng/mL基质。猪肝样品匀浆后用稀盐酸提取,经免疫亲和色谱柱纯化,再用GC/MS检测,即为IAC-GC/MS法。对沙丁胺醇... 制备出抗沙丁胺醇的抗血清,提取、纯化IgG制备免疫亲和色谱柱,针对沙丁胺醇与克伦特罗的动态柱容量分别为400 ng/mL基质和416 ng/mL基质。猪肝样品匀浆后用稀盐酸提取,经免疫亲和色谱柱纯化,再用GC/MS检测,即为IAC-GC/MS法。对沙丁胺醇的检测限为0.5 ng/g,定量限为2 ng/g,对克伦特罗的检测限为0.8ng/g,定量限为2.5 ng/g。空白组织按照1、5、10、20 ng/g的浓度添加药物,沙丁胺醇在空白肝中的添加回收率为78.4%-106.9%,克伦特罗的添加回收率为77.1%-102.9%。本研究建立的检测猪肝中沙丁胺醇与克伦特罗的IAC-GC/MS法乃国内首次报道。 展开更多
关键词 沙丁胺醇 克伦特罗 免疫亲和色谱 GC/MS 猪肝
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用免疫亲和柱分离、高效液相色谱法测定花生和玉米中黄曲霉毒素的研究 被引量:13
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作者 王光建 何才云 +2 位作者 鲁长豪 赵建忠 王勇 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期238-240,246,共4页
建立了用免疫亲和柱分离净化、高效液相色谱法测定花生和玉米中黄曲霉毒素(AFT)B_1、B_2、G_1、G_2的方法。采用60%甲醇提取样品中的AFT,氢氧化铁沉淀吸附除去样品液中大部分杂质,再经过亲和柱将AFT截留,... 建立了用免疫亲和柱分离净化、高效液相色谱法测定花生和玉米中黄曲霉毒素(AFT)B_1、B_2、G_1、G_2的方法。采用60%甲醇提取样品中的AFT,氢氧化铁沉淀吸附除去样品液中大部分杂质,再经过亲和柱将AFT截留,进一步与杂质分离,洗脱后,加三氟乙酸衍生化处理,反相高效液相色谱法分离定量。对样品中四种AFT的最低可测下限浓度均为1μg/kg,样品加标5~10μg/kgAFT,回收率在76.9%~113.6%范围内。 展开更多
关键词 高效液相色谱 黄曲霉毒素 花生 玉米
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免疫亲和柱-高效液相色谱法检测乳制品中氯霉素 被引量:8
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作者 李应国 赵旭博 +6 位作者 张雷 李贤良 郗存显 王国民 王雄 果旗 李正国 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2011年第4期53-54,62,共3页
建立免疫亲和柱富集净化、高效液相色谱-紫外法快速测定牛奶和奶粉中氯霉素残留物。样品用乙酸乙酯提取,经免疫亲和色谱柱纯化,应用液相色谱-紫外法检测。结果表明,牛奶和奶粉添加氯霉素,回收率为79.6%~108.6%,变异系数小于10%;方法检... 建立免疫亲和柱富集净化、高效液相色谱-紫外法快速测定牛奶和奶粉中氯霉素残留物。样品用乙酸乙酯提取,经免疫亲和色谱柱纯化,应用液相色谱-紫外法检测。结果表明,牛奶和奶粉添加氯霉素,回收率为79.6%~108.6%,变异系数小于10%;方法检测灵敏度0.1μg/L。该方法能够特异性的纯化牛奶和奶粉样品中的氯霉素,免疫亲和柱(IAC)净化是一种简单,快速,准确的方法。 展开更多
关键词 氯霉素残留物检测 免疫亲和柱净化富集 液相色谱-紫外法 牛奶
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抗CMTM4多克隆抗体的制备、纯化和鉴定 被引量:11
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作者 李婷 郭晓欢 +5 位作者 王彧 Markus Plate 邵陆宁 宋泉声 马大龙 韩文玲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期41-44,共4页
目的:制备抗CMTM4的多肽抗体并鉴定其性能。方法:通过TMHMM、DNAStar等软件对CMTM4的3种剪接体,CMTM4-v1,v2和v3的蛋白序列进行分析,选取了4段序列合成多肽并与钥孔戚血蓝素(KLH)偶联。其中第1、2、3条多肽为3种剪接体共有,混合后免疫家... 目的:制备抗CMTM4的多肽抗体并鉴定其性能。方法:通过TMHMM、DNAStar等软件对CMTM4的3种剪接体,CMTM4-v1,v2和v3的蛋白序列进行分析,选取了4段序列合成多肽并与钥孔戚血蓝素(KLH)偶联。其中第1、2、3条多肽为3种剪接体共有,混合后免疫家兔,制备Ab1;而第4条多肽为CMTM4-v1所特有,单独免疫家兔,制备Ab2。ELISA法检测抗体效价。免疫亲和层析法纯化后,进行West-ern blot和免疫组织化学检测,鉴定这2种抗体的特异性与适用范围。结果:得到兔抗人CMTM4多肽抗体Ab1和Ab2,效价分别达1∶105和1∶106。纯化后的Ab1用于Western blot可特异识别超表达的CMTM4-v1和v2,并可用于免疫组织化学实验;而Ab2仅可用于Western blot,特异性识别超表达的CMTM4-v1。Ab1还可特异识别小鼠内源性Cmtm4。结论:用多肽免疫家兔制备的2种抗CMTM4抗体不仅具有较高的效价以及特异性,并且Ab1还可以特异识别小鼠Cmtm4,为CMTM4的功能研究提供了有力的支持。 展开更多
关键词 CMTM4 多肽抗体 免疫亲和纯化
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利用鸡蛋特异性抗体IgY的免疫亲和色谱 被引量:5
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作者 陈天豹 李珑 +2 位作者 徐小华 张蓉真 饶平凡 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期563-566,共4页
以牛血清白蛋白(BSA)作为抗原,利用偶联上BSA的Sepharose-4B的亲和色谱材料从鸡蛋蛋黄中一步分离特异性抗BSA 抗体。经SDS-PAGE、双向免疫扩散检验,所洗脱的样品为电泳纯的特异性抗体。反之,将所得... 以牛血清白蛋白(BSA)作为抗原,利用偶联上BSA的Sepharose-4B的亲和色谱材料从鸡蛋蛋黄中一步分离特异性抗BSA 抗体。经SDS-PAGE、双向免疫扩散检验,所洗脱的样品为电泳纯的特异性抗体。反之,将所得抗体再偶联到POROSHY上可分离抗原。同时考察了母鸡免疫过程中特异性抗体随时间的变化趋势。 展开更多
关键词 鸡蛋 特异性抗体 IGY 免疫亲和色谱
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