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通过型固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定中华鳖中8种抗病毒药物及2种代谢物
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作者 王亚琴 王坤 +3 位作者 柯庆青 谭羽翀 王鼎南 李诗言 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期1164-1172,共9页
本研究以中华鳖中8种抗病毒药物(antiviral drugs,ATVs)及2种代谢物为研究对象,采用Wallelut Lipoclean磷脂去除小柱净化样品,建立了通过型固相萃取净化模式与超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)相结合的快速检测方法。样品在37℃... 本研究以中华鳖中8种抗病毒药物(antiviral drugs,ATVs)及2种代谢物为研究对象,采用Wallelut Lipoclean磷脂去除小柱净化样品,建立了通过型固相萃取净化模式与超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)相结合的快速检测方法。样品在37℃下经酸性磷酸酯酶酶解,1%乙酸乙腈提取,通过型固相萃取小柱净化,40℃下氮吹浓缩后采用UHPLC-MS/MS检测,多反应监测(MRM)模式采集数据,内标法定量。针对不同ATVs之间极性差异大的特点,实验优化了仪器参数和前处理条件,重点对色谱柱进行了筛选并排除了生物内源性物质尿苷对利巴韦林的分析干扰,同时讨论了前处理过程中提取液和净化小柱选择对提取效率和净化效果的影响。在最优实验条件下,10种目标物在一定质量浓度范围内线性关系良好,相关系数(r 2)为0.994~0.998,方法检出限(MDL)为0.05~1.1μg/kg,方法定量限(MQL)为0.18~3.8μg/kg。在低、中、高3个添加水平下10种目标物的平均回收率范围为82.5%~103%,相对标准偏差(RSD)为3.11%~12.1%。该方法操作简便、快速、灵敏,重复性好,可用于大批量样品的同时快速检测,并成功应用于省级水产品质量安全风险监测工作。 展开更多
关键词 通过型固相萃取 亲水作用色谱 超高效液相色谱-串联质谱 抗病毒药物 代谢物 中华鳖
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高效液相色谱-质谱技术在蛋白质组学中的应用 被引量:1
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作者 刘威 翁凌霄 +1 位作者 高明霞 张祥民 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期601-612,共12页
蛋白质组学研究在生物医学领域发挥了重要作用,然而研究面临的主要难点在于其研究对象的复杂性和多样性。随着质谱技术的快速发展,高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)分离分析复杂生物样品已经成为蛋白质组学研究的基础工具。蛋白质组学的研究... 蛋白质组学研究在生物医学领域发挥了重要作用,然而研究面临的主要难点在于其研究对象的复杂性和多样性。随着质谱技术的快速发展,高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)分离分析复杂生物样品已经成为蛋白质组学研究的基础工具。蛋白质组学的研究从肽段分离,延伸到蛋白质和蛋白质复合物的分离,随着分析物的分子质量不断增大,其结构和组成复杂性也持续增加,分子特性也发生改变。面对不同的蛋白质组学研究对象,选择不同的分离模式、分离条件以及固定相参数是进行深度蛋白质组学研究的关键。本文综述了实验室常用的液相色谱分离模式,包括反相色谱(RPLC)、亲水相互作用色谱(HILIC)、疏水相互作用色谱(HIC)、离子交换色谱(IEC)和体积排阻色谱(SEC),以及其不同的组合模式与质谱联用在自下而上(bottom-up)分析、自上而下(top-down)分析、蛋白-蛋白相互作用分析中应用的研究。具体分析了色谱流动相与被分析对象之间的兼容性问题、色谱流动相与质谱兼容性问题,以及多维色谱中不同色谱模式之间流动相的兼容性问题。重点关注存在不兼容问题时研究者所提出的解决方案。此外,本文还评述了HPLC-MS结合样本前处理的方法在外泌体和单细胞蛋白质组学中的应用研究。总之,文章聚焦于近年来HPLC-MS技术在蛋白质组学中的研究进展,旨在为未来蛋白质组学领域的研究提供参考。 展开更多
关键词 高效液相色谱 反相液相色谱 亲水相互作用色谱 疏水作用色谱 离子交换色谱 体积排阻色谱 蛋白质组学
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用低交换容量聚苯乙烯型强酸性阳离子交换树脂柱色谱分离中性氨基酸 被引量:17
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作者 刘菊湘 刘国栋 +4 位作者 阎虎生 程晓辉 何炳林 姜根华 杨国英 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2001年第12期2100-2103,共4页
通过磺化苯乙烯 -二乙烯苯共聚物或商品化的聚苯乙烯型强酸性阳离子交换树脂 ( 0 0 1× 7)的逆磺化反应 ,得到一系列不同交换容量的聚苯乙烯型强酸性阳离子交换树脂 .研究了丙氨酸和缬氨酸及缬氨酸和亮氨酸在这些树脂柱上的色谱分... 通过磺化苯乙烯 -二乙烯苯共聚物或商品化的聚苯乙烯型强酸性阳离子交换树脂 ( 0 0 1× 7)的逆磺化反应 ,得到一系列不同交换容量的聚苯乙烯型强酸性阳离子交换树脂 .研究了丙氨酸和缬氨酸及缬氨酸和亮氨酸在这些树脂柱上的色谱分离 .结果表明 ,用两种方法得到的树脂对丙氨酸和缬氨酸的色谱分离性能基本相同 ;同时中性氨基酸与聚苯乙烯型强酸性阳离子交换树脂之间的作用包括离子作用和疏水作用 ,且二者之间存在协同作用 . 展开更多
关键词 氨基酸 阳离子交换树脂 疏水作用 色谱 聚苯乙烯 分离 性能 色谱柱 蛋白质水解液
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一种疏水色谱填料的特性及应用的研究 被引量:7
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作者 王云 郭敏亮 +3 位作者 姜守磊 陈天 姜涌明 陈云 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期354-356,共3页
以交联壳聚糖为基质 ,正戊醛为配基 ,利用改进的方法制备了疏水作用色谱 (HIC)填料 ,并对该色谱填料的吸附行为和应用作了研究。结果表明 ,此类填料对蛋白质的吸附行为符合疏水相互作用理论 ,对α 淀粉酶的纯化活性回收率大于 80 %。
关键词 疏水作用色谱 填料 壳聚糖 吸附行为
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重组灵芝免疫调节蛋白的纯化及其性质 被引量:5
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作者 朱建强 梁重阳 +3 位作者 冯凯 盖晓东 孙新 孙非 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第4期753-756,共4页
采用超滤浓缩、强阴离子交换、疏水作用和凝胶色谱等方法,对毕赤酵母表达的rGlip进行分离和纯化,对离子交换色谱中rGlip与固相结合的最佳pH值进行了考察,并对纯化产物的活性进行了鉴定.rGlip在215nm处有强的紫外吸收,经激光解析电离时... 采用超滤浓缩、强阴离子交换、疏水作用和凝胶色谱等方法,对毕赤酵母表达的rGlip进行分离和纯化,对离子交换色谱中rGlip与固相结合的最佳pH值进行了考察,并对纯化产物的活性进行了鉴定.rGlip在215nm处有强的紫外吸收,经激光解析电离时间飞行质谱鉴定其相对分子量为12722,经反相液相色谱鉴定纯度≥97%.设计rGlip的疏水作用色谱,有效地去除色素.凝血实验结果表明,rGlip可以凝集绵羊血红细胞,但对人血A,B,AB和O型等红细胞无凝集作用,有类似凝集素的生物学活性. 展开更多
关键词 灵芝 阴离子交换色谱 疏水作用色谱 凝胶过滤色谱 纯化
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疏水膜色谱法对生物大分子的快速纯化 被引量:3
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作者 杨利 陈小明 +2 位作者 贾凌云 邹汉法 张玉奎 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期335-338,共4页
首次采用自制的分别级合了辛基、丁基、苯基及聚乙二醇-4000的4种常用疏水基团的纤维素疏水膜色谱柱,以键合了辛基、苯基的SepharoseCL-4B凝胶柱为对照,考察了疏水膜色谱柱对牛血清白蛋白(BSA)的动态吸附容量及流速对吸附容量的影... 首次采用自制的分别级合了辛基、丁基、苯基及聚乙二醇-4000的4种常用疏水基团的纤维素疏水膜色谱柱,以键合了辛基、苯基的SepharoseCL-4B凝胶柱为对照,考察了疏水膜色谱柱对牛血清白蛋白(BSA)的动态吸附容量及流速对吸附容量的影响。疏水膜色谱柱对蛋白及酶具有较好的疏水吸附及纯化作用,但吸附容量比相应的琼脂糖凝胶柱低得多。增大流速及降低蛋白溶液质量浓度对疏水膜色谱柱的吸附容量影响较小,这些性能使膜色谱柱非常适合于大体积低质量浓度蛋白溶液(如基团工程培养液)的分离纯化。牛肝过氧化氢酶(BLC)经苯基膜色谱柱一步纯化,比活力提高11.8倍,蛋白回收率近100%,分离过程仅十几分钟。 展开更多
关键词 膜色谱 分离 纯化 生物大分子 BSA BLC 疏水色谱
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胍变及脲变α-淀粉酶的研究 Ⅰ.用高效疏水色谱法研究变性机理和复性效率 被引量:7
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作者 白泉 卫引茂 耿信笃 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期284-287,共4页
用疏水性强弱不同的两种色谱柱对7.0mol/L盐酸胍及8.0mol/L脲变性的α-淀粉酶变体和在疏水色谱介质表面上折叠的中间体进行了分离和复性。通过研究和比较发现,两者的变性机理和形成折叠中间体的个数以及复性效率均不... 用疏水性强弱不同的两种色谱柱对7.0mol/L盐酸胍及8.0mol/L脲变性的α-淀粉酶变体和在疏水色谱介质表面上折叠的中间体进行了分离和复性。通过研究和比较发现,两者的变性机理和形成折叠中间体的个数以及复性效率均不相同。在用疏水性较弱的疏水色谱柱对脲变α-淀粉酶的折叠中间体进行分离时,得到了疏水性接近连续的、数目很多的中间体。用疏水性较强的疏水色谱柱对胍变α-淀粉酶进行复性的效果较好。还研究了柱温变化对其折叠、分离效果和复性效率的影响。 展开更多
关键词 高效疏水色谱 蛋白折叠 Α-淀粉酶 胍变 脲变
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用高效疏水色谱法对多种脲变α-淀粉酶折叠中间体的研究 被引量:6
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作者 白泉 卫引茂 +1 位作者 耿明晖 耿信笃 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1997年第8期1291-1295,共5页
用高效疏水色谱法对用脲变性的α-淀粉酶的体外折叠中间体进行了分离,发现脲变α-淀粉酶折叠至少有19个中间体,而且,这些中间体在色谱流出液中可稳定一周.这一结论已由电泳、离子交换色谱和体积排阻色谱法证实.此外,还用紫外吸收... 用高效疏水色谱法对用脲变性的α-淀粉酶的体外折叠中间体进行了分离,发现脲变α-淀粉酶折叠至少有19个中间体,而且,这些中间体在色谱流出液中可稳定一周.这一结论已由电泳、离子交换色谱和体积排阻色谱法证实.此外,还用紫外吸收光谱和荧光发射光谱研究了这些折叠中间体与天然α-淀粉酶构象之间的差异. 展开更多
关键词 蛋白折叠 折叠中间体 Α淀粉酶 HPhic α-Amy
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用疏水色谱对还原型胍变性牛胰岛素的折叠特性研究 被引量:4
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作者 白泉 孔宇 耿信笃 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第8期1483-1488,共6页
用疏水相互色谱 (HPHIC)对还原胍变性牛胰岛素在疏水界面上的折叠与复性进行了研究 .结果表明 ,采用普通流动相时 ,对还原胍变胰岛素的复性效果较差 ,而采用氧化型流动相可使其复性效率提高到 66% ,并用反相色谱 (RPLC)、紫外吸收光谱... 用疏水相互色谱 (HPHIC)对还原胍变性牛胰岛素在疏水界面上的折叠与复性进行了研究 .结果表明 ,采用普通流动相时 ,对还原胍变胰岛素的复性效果较差 ,而采用氧化型流动相可使其复性效率提高到 66% ,并用反相色谱 (RPLC)、紫外吸收光谱、荧光光谱及 MALDI-TOF对其复性效果进行了验证 .同时与体积排阻色谱 (SEC)和稀释法对还原胍变胰岛素的复性结果进行了比较 .结果表明 ,SEC根本无法使还原胍变胰岛素复性 ,而稀释法的复性效率仅有 2 % .这进一步表明 HPHIC是变性蛋白复性的有效工具 ,变性蛋白在疏水界面折叠过程中 ,蛋白质与固定相之间的疏水相互作用对蛋白折叠起着关键性的作用 。 展开更多
关键词 疏水色谱 还原型胍变性 牛胰岛素 折叠特性 蛋白 体积排阻色谱 稀释法 复性
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疏水色谱法的进展及其在生化研究中的应用 被引量:13
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作者 刘彤 耿信笃 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期30-34,共5页
着重评述了疏水色谱法的理论研究及疏水固定相中无机填料、有机填料、非多孔填料以及大孔膜的新发展,并对疏水色谱法在生物大分子的分离、纯化和生化研究中的应用,包括在蛋白质复性、折叠和分子构象变化等方面的应用作了介绍,全文包... 着重评述了疏水色谱法的理论研究及疏水固定相中无机填料、有机填料、非多孔填料以及大孔膜的新发展,并对疏水色谱法在生物大分子的分离、纯化和生化研究中的应用,包括在蛋白质复性、折叠和分子构象变化等方面的应用作了介绍,全文包括62篇文献和一张表格。 展开更多
关键词 hic 疏水色谱 固定相 生物大分子 分离
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应用Octyl Sepharose FF疏水层析分离好食脉孢霉发酵产生的纤溶酶 被引量:7
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作者 邓永平 刘晓兰 郑宏臣 《中国酿造》 CAS 北大核心 2008年第10期21-24,共4页
疏水层析是分离纯化蛋白质和多肽等生物大分子的常用方法,采用Octyl Se pharose FF疏水层析填料对好食脉孢霉(N.sitophila)发酵产生的纤溶酶进行了初步分离,比较了样品初始盐浓度、缓冲液pH值和洗脱方式对分离效果的影响。实验结果表明... 疏水层析是分离纯化蛋白质和多肽等生物大分子的常用方法,采用Octyl Se pharose FF疏水层析填料对好食脉孢霉(N.sitophila)发酵产生的纤溶酶进行了初步分离,比较了样品初始盐浓度、缓冲液pH值和洗脱方式对分离效果的影响。实验结果表明,采用样品初始盐浓度为40%、缓冲液pH值为7.4和步阶式梯度洗脱方式对样品分离效果较好,经测定样品中有3种疏水性不同的纤溶活性组分,其中活性组分Ⅲ经Octyl Sepharose FF疏水层析分离后比活力为855.56U/mg,总纯化倍数为7.12倍。 展开更多
关键词 疏水层析 分离 样品初始盐浓度 缓冲液pH值 洗脱方式
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疏水作用色谱填料研究进展 被引量:4
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作者 李玉龙 孙彦 胡宗定 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期114-117,共4页
疏水作用色谱法(HIC)是一种有效的蛋白质分离纯化方法。综述了HIC填料的基质和配基的发展过程,举例说明了不同HIC填料对蛋白质的分离纯化效率,指出了制备型HIC填料的现状及其发展趋势。
关键词 疏水作用色谱法 色谱填料 蛋白质
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蛋白质在疏水色谱中保留的热力学参数的测定 被引量:5
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作者 赵建国 卫引茂 耿信笃 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期583-585,共3页
研究了0~50℃内五种蛋白质在疏水色谱(HIC)中的保留行为。蛋白分子在HIC中的保留行为遵循Van'tHoff方程,并求得蛋白质分子在HIC中保留的热力学参数(△H°,△S°,△C°p和△G°)。发现蛋白质的保留由熵控制,焓、熵... 研究了0~50℃内五种蛋白质在疏水色谱(HIC)中的保留行为。蛋白分子在HIC中的保留行为遵循Van'tHoff方程,并求得蛋白质分子在HIC中保留的热力学参数(△H°,△S°,△C°p和△G°)。发现蛋白质的保留由熵控制,焓、熵和热容量三个热力学参数都与绝对温度倒数间存在线性关系,并求得热容量为零的收敛温度。 展开更多
关键词 生物大分子 疏水色谱 保留 热力学参数
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疏水界面上标准蛋白质吸附等温线的研究 被引量:6
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作者 边六交 耿信笃 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1995年第2期201-205,共5页
测定了几种具有代表性的标准蛋白质在疏水色谱填料上的吸附等温线。除溶菌酶和牛血清白蛋白的吸附近似呈线性外,细胞色素-c、肌红蛋白、胰岛素、α-淀粉酶和卵清蛋白均呈凸型吸附。用Langmuir、计量置换吸附模型(SDM-... 测定了几种具有代表性的标准蛋白质在疏水色谱填料上的吸附等温线。除溶菌酶和牛血清白蛋白的吸附近似呈线性外,细胞色素-c、肌红蛋白、胰岛素、α-淀粉酶和卵清蛋白均呈凸型吸附。用Langmuir、计量置换吸附模型(SDM-A)、BET和Jovanovic吸附模型对这些蛋白的吸附等温线拟合后发现,SDM-A关系式能够良好描述这7种蛋白的吸附,Langmuir关系仅能较好地描述后5种蛋白质的吸附。而Jovanovic和BET关系式对上述两类蛋白质吸附的描述欠妥。实验发现对于不同盐浓度条件下卵清蛋白的吸附,用SDM-A和Langmuir公式拟合所得的参数与盐浓度之间呈现出一定的规律性。 展开更多
关键词 吸附等温线 蛋白质 色谱
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三步层析法分离毕赤酵母工程菌中表达的新疆家蚕抗菌肽 被引量:2
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作者 窦君 郑树涛 +1 位作者 王娉 张富春 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2007年第5期710-714,共5页
通过离子交换层析、疏水作用层析和分子排阻层析等三步层析的方法,分离纯化了毕赤酵母工程菌所表达的新疆家蚕抗菌肽。结果表明,三步层析后,SDS电泳显示单一条带,分子量约为7.0 kDa;所纯化的新疆家蚕抗菌肽具有较强的抗菌活性。该纯化... 通过离子交换层析、疏水作用层析和分子排阻层析等三步层析的方法,分离纯化了毕赤酵母工程菌所表达的新疆家蚕抗菌肽。结果表明,三步层析后,SDS电泳显示单一条带,分子量约为7.0 kDa;所纯化的新疆家蚕抗菌肽具有较强的抗菌活性。该纯化工艺的建立,为新疆家蚕抗菌肽在饲料添加剂、农用抗生素等方面的广泛应用奠定基础。 展开更多
关键词 新疆家蚕抗菌肽 离子交换层析 疏水作用层析 分子排阻层析 纯化
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盐酸胍对疏水色谱中蛋白质保留行为的影响 被引量:3
16
作者 冯文科 姜新其 耿信笃 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1994年第10期1450-1453,共4页
研究了变性剂盐酸胍对几种蛋白质在高效疏水色谱中保留行为的影响。用液相色谱中溶质的计量置换保留模型和测流动相表面张力及蛋白质紫外吸收光谱方法研究的结果表明:在低浓度范围内,盐酸胍主要以疏水作用影响蛋白质的保留;而在高浓... 研究了变性剂盐酸胍对几种蛋白质在高效疏水色谱中保留行为的影响。用液相色谱中溶质的计量置换保留模型和测流动相表面张力及蛋白质紫外吸收光谱方法研究的结果表明:在低浓度范围内,盐酸胍主要以疏水作用影响蛋白质的保留;而在高浓度区域内,盐酸胍的存在则显著影响蛋白质分子的构象,使其保留行为发生变化. 展开更多
关键词 蛋白质 疏水色谱 盐酸胍 保留行为
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弱阳离子交换色谱中疏水作用对蛋白保留的影响 被引量:4
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作者 孙萱 杨云 耿信笃 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期6-10,共5页
选取了四种常用的弱阳离子交换(WCX)商品柱以研究标准蛋白在其上的色谱保留行为。发现在疏水色谱(HIC)模式下,蛋白在这四种WCX商品柱上也有不同程度的保留特征,且洗脱曲线呈现出保留值随盐浓度变化的"U"型。从分子力学角度定... 选取了四种常用的弱阳离子交换(WCX)商品柱以研究标准蛋白在其上的色谱保留行为。发现在疏水色谱(HIC)模式下,蛋白在这四种WCX商品柱上也有不同程度的保留特征,且洗脱曲线呈现出保留值随盐浓度变化的"U"型。从分子力学角度定性解释了因疏水相互作用力的存在影响了蛋白在WCX色谱柱上洗脱顺序的改变。运用计量置换理论(SDT)中的两组线性方程进一步证实了WCX和HIC中蛋白与固定相间相互作用力的性质,在HIC中为非选择性作用力,而在离子交换色谱(IEC)中为选择性作用力。这四种色谱柱中的两种事实上可在WCX和HIC两种模式下,对标准蛋白进行分离且有较好的分离效果,有可能作为二维色谱柱来使用。 展开更多
关键词 离子交换色谱 疏水色谱 计量置换 混合保留机理 蛋白分离
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重组人干扰素-γ的制备与鉴定 被引量:3
18
作者 吴丹 高栋 +1 位作者 白泉 耿信笃 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期206-211,共6页
用聚乙二醇200疏水相互作用色谱固定相(PEG200-STHIC)分别在色谱柱和色谱饼上完成了一步复性并同时纯化来源于大肠杆菌(E.coli)表达的重组人干扰素-γ(rhIFN-γ)。为了能使色谱分离方法用于不同来源的rhIFN-γ的纯化,对rhIFN-γ在反相... 用聚乙二醇200疏水相互作用色谱固定相(PEG200-STHIC)分别在色谱柱和色谱饼上完成了一步复性并同时纯化来源于大肠杆菌(E.coli)表达的重组人干扰素-γ(rhIFN-γ)。为了能使色谱分离方法用于不同来源的rhIFN-γ的纯化,对rhIFN-γ在反相色谱、离子交换色谱、固定化镍离子亲和色谱上的保留行为也进行了研究。色谱柱纯化的rhIFN-γ收集液经排阻色谱除盐和冷冻干燥得到rhIFN-γ干粉。用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对rhIFN-γ干粉进行了测定,rhIFN-γ单体的相对分子质量为17184.0,二聚体的相对分子质量为34204.4。用细胞病变抑制法(CPEI)测定rhIFN-γ干粉的比活性为9.5×108IU/mg。用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定rhIFN-γ干粉的纯度高于95%。用色谱柱复性并同时纯化rhIFN-γ的质量回收率达到93.7%,纯度高于95%,比活性为4.3×107IU/mg。结果表明,采用PEG200-STHIC色谱柱复性并同时纯化rhIFN-γ是一种十分高效的方法。 展开更多
关键词 重组人干扰素-γ 蛋白折叠液相色谱法 高效疏水色谱 复性 纯化
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高效疏水作用色谱法对还原变性溶菌酶的折叠研究 被引量:3
19
作者 王彦 耿信笃 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期218-221,共4页
首次用高效疏水相互作用色谱(HPHIC)研究了还原变性溶菌酶(Lys)的复性。对还原变性Lys在3种疏水性不同的色谱柱上的复性情况进行了考察,发现还原变性Lys在疏水性最弱的XDM GM1型色谱柱上的复性效率最高,当Lys质量浓度为2 0g/L时,其复性... 首次用高效疏水相互作用色谱(HPHIC)研究了还原变性溶菌酶(Lys)的复性。对还原变性Lys在3种疏水性不同的色谱柱上的复性情况进行了考察,发现还原变性Lys在疏水性最弱的XDM GM1型色谱柱上的复性效率最高,当Lys质量浓度为2 0g/L时,其复性效率可达到94 6%。 展开更多
关键词 高效疏水相互作用色谱 还原变性 溶菌酶 蛋白质 折叠 复性
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疏水作用色谱中流动相组成对溶质保留行为的影响 被引量:1
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作者 赵建国 姚丛 +1 位作者 卫引茂 耿信笃 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期481-484,共4页
首次研究了疏水作用色谱 (HIC)中芳香醇同系物在不同种类盐流动相中的保留行为。以计量置换保留模型中的参数Z分析了HIC中小分子与生物大分子保留行为的差别 ,以及不同流动相组成对两种类型溶质的洗脱范围及洗脱能力的影响。与反相色谱... 首次研究了疏水作用色谱 (HIC)中芳香醇同系物在不同种类盐流动相中的保留行为。以计量置换保留模型中的参数Z分析了HIC中小分子与生物大分子保留行为的差别 ,以及不同流动相组成对两种类型溶质的洗脱范围及洗脱能力的影响。与反相色谱相似 ,芳香醇在HIC中的保留仍存在同系物规律。比较了小分子和生物大分子在不同盐溶液中的Z值变化 ,表明流动相中的盐仅改变小分子与固定相的水合程度 ,而对生物大分子 ,除改变其和固定相水合程度外 。 展开更多
关键词 疏水作用色谱 芳香醇同系物 生物大分子 保留行为 分离 流动相 蛋白质 保留机理
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