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OA对人肝细胞HL-7702和肝癌细胞Bel-7402增殖的影响和对细胞凋亡的诱导作用研究 被引量:7
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作者 陈洋 颜天 +1 位作者 于仁成 周名江 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期86-92,共7页
以人肝细胞HL-7702和肝癌细胞Bel-7402为研究对象,通过MTT法、细胞外部形态观察、Annexin V-FITC&PI双染法及TUNEL法等方法,研究了腹泻性贝毒的主要组分大田软海绵酸(Okadaic acid,OA)对其增殖的影响及对细胞凋亡的诱导作用。结果表... 以人肝细胞HL-7702和肝癌细胞Bel-7402为研究对象,通过MTT法、细胞外部形态观察、Annexin V-FITC&PI双染法及TUNEL法等方法,研究了腹泻性贝毒的主要组分大田软海绵酸(Okadaic acid,OA)对其增殖的影响及对细胞凋亡的诱导作用。结果表明:OA对人两株细胞的增殖均有显著的抑制作用,24 h IC50分别为65ng/mL和60 ng/mL,且这种抑制作用呈剂量依赖性。OA导致两株细胞的形态均发生明显变化:细胞变圆,脱壁,细胞膜形成泡状突起,最终形成膜包裹的凋亡小体。Annexin V-FITC和PI双染法及TUNEL法检测均发现:OA能够诱导两株细胞发生不同程度的凋亡,且凋亡细胞的比例与OA的浓度相关。以上结果表明:OA能够通过抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡而对人肝细胞和肝癌细胞造成影响,且这种影响的程度与OA的浓度和作用时间密切相关。 展开更多
关键词 大田软海绵酸 人肝细胞hl-7702 人肝癌细胞BEL-7402 增殖 细胞凋亡
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玉米低聚肽促HL-7702人肝细胞增殖作用 被引量:4
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作者 刘艳 林峰 +3 位作者 金振涛 陈亮 易维学 蔡木易 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期43-46,共4页
采用MTT法测定细胞增殖、流式细胞术分析细胞周期及细胞存活率,对玉米低聚肽的促HL-7702人肝细胞增殖作用进行了研究。结果显示:玉米低聚肽在1~10 g/L内,可促进肝细胞生长,其促进作用与肽浓度呈正相关;给予肝细胞玉米低聚肽24 h后,细... 采用MTT法测定细胞增殖、流式细胞术分析细胞周期及细胞存活率,对玉米低聚肽的促HL-7702人肝细胞增殖作用进行了研究。结果显示:玉米低聚肽在1~10 g/L内,可促进肝细胞生长,其促进作用与肽浓度呈正相关;给予肝细胞玉米低聚肽24 h后,细胞周期中S期及G2/M期细胞的比例上升;并且在此浓度范围内,玉米低聚肽对肝细胞存活率及形态影响较小。研究表明,玉米低聚肽有促进HL-7702人肝细胞增殖及DNA合成的作用,可显著提高肝细胞活力,提示其在保肝护肝中可能具有一定作用。 展开更多
关键词 玉米低聚肽 hl-7702人肝细胞 增殖 细胞周期
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纳米氧化锌对人正常肝细胞HL-7702的毒性作用研究 被引量:1
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作者 刘鹏鹏 关荣发 +2 位作者 程歌 黄光荣 戴贤君 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第36期18023-18024,18026,共3页
[目的]研究食品添加剂纳米氧化锌对人正常肝细胞HL-7702的毒性作用。[方法]采用不同浓度(5、10、25、50、100、250μg/ml)的纳米氧化锌对HL-7702细胞进行染毒;光学显微镜下观察细胞的形态学变化;采用MTT法检测纳米氧化锌对HL-7702细胞... [目的]研究食品添加剂纳米氧化锌对人正常肝细胞HL-7702的毒性作用。[方法]采用不同浓度(5、10、25、50、100、250μg/ml)的纳米氧化锌对HL-7702细胞进行染毒;光学显微镜下观察细胞的形态学变化;采用MTT法检测纳米氧化锌对HL-7702细胞生长活性的影响;应用荧光探针活性氧检测技术检测细胞内活性氧(ROS)的生成情况。[结果]纳米氧化锌可引起HL-7702细胞形态变化;MTT检测显示,纳米氧化锌对HL-7702细胞的生长活性具有明显的抑制作用;荧光探针活性氧检测发现,染毒后HL-7702细胞内ROS的生成量增加。[结论]纳米氧化锌作为一种新型锌源,建议控制其添加量或使用量。 展开更多
关键词 纳米氧化锌 人正常肝细胞hl-7702 细胞毒性 食品添加剂
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人肝癌细胞系7721与原代人胎肝细胞用于体外培养HCV的对比研究
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作者 宋志强 郝飞 +2 位作者 闵峰 马巧玉 刘国栋 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期204-207,共4页
目的 研究丙型肝炎病毒 (HCV)在体外培养原代人胎肝细胞和人肝癌细胞系 772 1中复制和表达的异同 ,探讨HCV体外培养条件。方法 原代人胎肝细胞和人肝癌细胞系 772 1分别与HCV感染血清共孵育后 ,用逆转录 聚合酶链反应、原位杂交、免... 目的 研究丙型肝炎病毒 (HCV)在体外培养原代人胎肝细胞和人肝癌细胞系 772 1中复制和表达的异同 ,探讨HCV体外培养条件。方法 原代人胎肝细胞和人肝癌细胞系 772 1分别与HCV感染血清共孵育后 ,用逆转录 聚合酶链反应、原位杂交、免疫组化检测细胞和培养上清中的HCVRNA和抗原表达。结果 从孵育的第 2~ 3天 ,即可在细胞内和 /或培养上清中间断地检出HCVRNA(其中HCV在 772 1细胞株中的复制至少可达 66d ,HCV在人胎肝细胞中的复制持续 2 5d) ;HCV抗原可在感染细胞内得到稳定表达 ,感染细胞内存在HCV负链RNA杂交信号 ,且多位于细胞浆。结论 两种肝细胞对HCV易感 ,尤其是 772 1细胞可以稳定地支持HCV体外复制 ,可用于HCV体外长期培养的靶细胞。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 人胎肝细胞 7721细胞 细胞培养 细胞模型 HCV 肝癌
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hHGF调控肝纤维化信号转导途径研究 被引量:5
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作者 刘灏 陈景良 向国安 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期431-434,共4页
目的应用寡聚核苷酸基因表达谱芯片研究人肝细胞生长因子(hHGF)转染肝癌细胞系后基因表达谱的差异,分析hHGF抗肝纤维化的信号转导途径。方法应用包含20000条人类全长基因的寡聚核苷酸芯片ImaGene3.0检测hHGF转染的肝癌细胞系基因表达谱... 目的应用寡聚核苷酸基因表达谱芯片研究人肝细胞生长因子(hHGF)转染肝癌细胞系后基因表达谱的差异,分析hHGF抗肝纤维化的信号转导途径。方法应用包含20000条人类全长基因的寡聚核苷酸芯片ImaGene3.0检测hHGF转染的肝癌细胞系基因表达谱差异,并选择其中参与肝纤维化过程的存在表达上调基因[信号转导和转录激活因子1(STAT1)和丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)]用RT-PCR方法进行验证分析。结果基因芯片筛选出存在差异表达的基因,其中包括转录因子、细胞周期素、细胞因子相关蛋白、糖脂类物质代谢相关酶及细胞信号转导相关因子等,RT-PCR验证参与肝纤维化过程中的几种存在表达差异的基因,其中STAT1和MAPK1表达明显上调,与基因芯片分析结果一致。结论hHGF转染肝癌细胞系存在基因表达差异,可能影响细胞周期的调控、物质代谢相关过程及细胞信号转导系统,hHGF可能通过激活JAK/STAT通路和MAPK通路发挥其抗肝纤维化作用。 展开更多
关键词 肝细胞生长因子 HEPG2细胞 肝纤维化 基因芯片 基因表达
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Salubrinal对铜负荷诱导的PERK/eIF2α内质网应激信号通路介导肝细胞凋亡的干预作用 被引量:8
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作者 陈永华 杨文明 +1 位作者 江海林 唐露露 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期990-996,共7页
Wilson病是一种以肝损害为常见临床表现的常染色体隐性遗传铜代谢障碍性疾病,但铜蓄积导致的肝细胞损害的具体分子机制尚不明确。本研究拟采用硫酸铜模拟肝细胞铜负荷进行体外实验,选用Western印迹法测试铜负荷肝细胞内蛋白激酶R样内质... Wilson病是一种以肝损害为常见临床表现的常染色体隐性遗传铜代谢障碍性疾病,但铜蓄积导致的肝细胞损害的具体分子机制尚不明确。本研究拟采用硫酸铜模拟肝细胞铜负荷进行体外实验,选用Western印迹法测试铜负荷肝细胞内蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)及p-eIF2α蛋白质的表达;并探究特异性eIF2α磷酸化抑制剂Salubrinal对铜负荷诱导的肝细胞凋亡、胱天蛋白酶-3活性、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)mRNA转录的影响。选用流式细胞仪测试肝细胞凋亡率;比色法测试肝细胞内的胱天蛋白酶-3活性;Real-time PCR法检测肝细胞内CHOP mRNA转录水平。本研究结果显示:(1)铜负荷显示出时间依赖性地增加肝细胞内PERK及p-eIF2α蛋白质表达(P<0.05,P<0.01)。(2)相比较对照组,铜负荷培养肝细胞24 h明显增加了肝细胞的凋亡率(P<0.01),增强了肝细胞内的胱天蛋白酶-3活性,促进肝细胞内CHOP mRNA的转录,加入特异性eIF2α磷酸化抑制剂Salubrinal后可抑制上述过程。(3)相比较对照组,铜负荷促进肝细胞PERK及p-eIF2α蛋白质表达,加入特异性eIF2α磷酸化抑制剂Salubrinal后,对铜负荷诱导的肝细胞PERK蛋白质表达无影响(P>0.05),但可显著抑制铜负荷诱导的肝细胞p-eIF2α蛋白质表达(P<0.01)。本研究结果提示,铜负荷可以诱发肝细胞内质网应激,铜负荷引起的肝细胞凋亡机制与激活内质网应激PERK/eIF2α信号通路密切相关,Salubrinal具有干预该信号通路作用,能够抑制铜负荷后肝细胞的凋亡。 展开更多
关键词 铜负荷 凋亡 内质网应激 蛋白激酶R样内质网激酶 OUMS29人肝细胞系 Salubrinal
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他克莫思对rhHGF刺激ECV304细胞株表达MMP-9的抑制作用
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作者 刘晹 郑敏 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2004年第6期540-545,共6页
目的 :探讨重组人类肝细胞增殖因子 (rh HGF)刺激 ECV30 4细胞株表达基质金属蛋白酶 - 9(MMP- 9)的作用及他克莫思 (Tacrolimus,FK5 0 6 )的抑制作用。方法 :绘制正常 ECV30 4细胞株生长曲线 ,明确最适生长浓度及对数生长期 ;明确 rh HG... 目的 :探讨重组人类肝细胞增殖因子 (rh HGF)刺激 ECV30 4细胞株表达基质金属蛋白酶 - 9(MMP- 9)的作用及他克莫思 (Tacrolimus,FK5 0 6 )的抑制作用。方法 :绘制正常 ECV30 4细胞株生长曲线 ,明确最适生长浓度及对数生长期 ;明确 rh HGF及 FK5 0 6的作用浓度 ;流式细胞仪 (FCM)检测 ECV30 4细胞株的 MMP- 9水平。结果 :1ECV30 4细胞的最适生长浓度为 1.0 E+ 4 / ml,对数生长期为 3~ 5 d;rh HGF的作用浓度为 8ng/ ml,IC50 为 8.2 7ng/ ml;FK5 0 6的作用浓度为 5 0 ng/ ml,IC50 为 5 1.6 3ng/ ml。 2对照组 MMP- 9的表达量为 39.74 % ;培养基中加入rh HGF 8ng/ ml后 ,细胞存活率为 1.38816 9± 0 .10 2 0 33(P<0 .0 1) ,MMP- 9的表达量为 4 0 .32 % ;培养基中加入FK5 0 6 5 0 ng/ ml后 ,细胞存活率为 0 .39876 4± 0 .0 92 4 76 (P<0 .0 1) ,MMP- 9的表达量为 14 .6 1% ;培养基中加入FK5 0 6 5 0 ng/ ml15 min后加入 rh HGF8ng/ ml,细胞存活率为 0 .76 72 0 3± 0 .0 2 6 39(P<0 .0 1) ,MMP- 9的表达量为 35 .0 8%。结论 :rh HGF可刺激 ECV30 4细胞增殖 ,使 MMP- 9的表达量增加 ;FK5 0 6可抑制 ECV30 4细胞增殖 ,使 MMP- 9的表达量降低 ;FK5 0 6可拮抗 rh HGF所引起的 ECV30 4细胞增殖 ,从而使 MMP- 展开更多
关键词 肝细胞生长因子/血液 金属蛋白酶类/血液 重组人类肝细胞增殖因子 基质金属蛋白酶-9 ECV304细胞株 他克莫思 流式细胞仪
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