甘草次酸通过β-catenin/TCF4通路抑制肝细胞癌SMMC-7721细胞的恶性生物学行为

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作者 佘茁萃 吕烈洋 +2 位作者 吴迪 尚姝贤 吕俊 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第3期288-293,共6页

目的:探讨甘草次酸(GA)调节β-连环蛋白(β-catenin)/转录因子4(TCF4)信号通路对肝细胞癌SMMC-7721细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化(EMT)的影响及其机制。方法:以HCC细胞SMMC-7721为研究对象,将其随机分为对照、L-GA、M-GA、H-GA组... 目的:探讨甘草次酸(GA)调节β-连环蛋白(β-catenin)/转录因子4(TCF4)信号通路对肝细胞癌SMMC-7721细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化(EMT)的影响及其机制。方法:以HCC细胞SMMC-7721为研究对象,将其随机分为对照、L-GA、M-GA、H-GA组(50、100、200μmol/L GA)、GA+LiCl组(200μmol/L GA+40μmol/Lβ-catenin激活剂LiCl)。采用平板克隆实验、Transwell实验、流式细胞术检测GA对SMMC-7721细胞增殖、迁移和侵袭及细胞凋亡的影响,WB法检测GA对SMMC-7721细胞中β-catenin/TCF4通路蛋白(β-catenin、TCF4)和EMT相关蛋白(E-cadherin、vimentin)表达的影响。构建SMMC-7721细胞裸鼠移植瘤模型,观察GA对荷瘤裸鼠移植瘤生长及β-catenin、TCF4蛋白表达的影响。结果:与对照组相比,L-GA、M-GA、H-GA组SMMC-7721细胞克隆数、迁移和侵袭数、β-catenin、TCF4、vmentin蛋白表达均显著降低(均P<0.05),细胞凋亡率、E-cadherin蛋白表达均升高(均P<0.05);与H-GA组相比,GA+LiCl组细胞克隆数、迁移和侵袭数、β-catenin、TCF4、vimentin蛋白表达均显著升高(均P<0.05),细胞凋亡率、E-cadherin蛋白表达均显著降低(均P<0.05)。荷瘤裸鼠模型实验显示,GA组裸鼠移植瘤质量和体积、β-catenin和TCF4蛋白阳性率均显著低于对照组(均P<0.05)。结论:GA显著抑制SMMC-7721细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT进程,进而抑制HCC的进展,其机制可能是通过抑制β-catenin/TCF4信号通路实现的。 展开更多

关键词 甘草次酸 β-连环蛋白/转录因子4 肝细胞癌 smmc-7721细胞 增殖 迁移 侵袭 上皮间质转化

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抑制肝癌SMMC-7721细胞TWIST基因表达对细胞侵袭能力的影响 被引量：1

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作者 乔泽强 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第3期359-361,共3页

目的:探讨抑制肝癌SMMC-7721细胞中TWIST基因表达对其侵袭能力的影响。方法:将靶向TWIST基因的siRNA序列和阴性对照siRNA序列转染入人肝癌SMMC-7721细胞,同时以未转染细胞作空白对照。于转染后48h,采用半定量RT-PCR和Western blot法检... 目的:探讨抑制肝癌SMMC-7721细胞中TWIST基因表达对其侵袭能力的影响。方法:将靶向TWIST基因的siRNA序列和阴性对照siRNA序列转染入人肝癌SMMC-7721细胞,同时以未转染细胞作空白对照。于转染后48h,采用半定量RT-PCR和Western blot法检测各组细胞TWIST、E-cadherin mRNA和蛋白的表达,Boyden侵袭小室检测细胞体外侵袭能力的变化。结果:3组TWIST、E-cadherin mRNA和蛋白表达,以及穿膜细胞数差异有统计学意义(F=32.023、38.732和24.034、49.083、44.387,P<0.001);TWIST siRNA组TWIST mRNA和蛋白的表达低于空白和阴性对照组,E-cadherin mRNA和蛋白的表达高于空白和阴性对照组,TWIST siRNA组穿膜细胞数较空白对照组和阴性对照组下降(P<0.05)。结论:抑制肝癌SMMC-7721细胞TWIST基因表达可以抑制肝癌细胞上皮间质转化的发生,同时可有效降低肝癌细胞的侵袭转移能力。 展开更多

关键词 TWIST E—cadherin smmc-7721细胞 肝癌

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三种斑蝥素金属衍生物对肝癌细胞SMMC-7721增殖抑制比较

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作者 朱欣婷 惠景 +4 位作者 刘云 范芳 晏容 雷欣睿 李晓飞 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期1230-1237,共8页

比较镁(Mg)、钙(Ca)、锶(Sr)三种金属元素与斑蝥素结合后对其体外抗肝癌活性的影响。以人肝癌细胞SMMC-7721为实验细胞株,采用SRB法检测细胞增殖抑制率,平板集落形成实验检测细胞的集落形成能力,Hoechst 33342染色法观察细胞核形态变化... 比较镁(Mg)、钙(Ca)、锶(Sr)三种金属元素与斑蝥素结合后对其体外抗肝癌活性的影响。以人肝癌细胞SMMC-7721为实验细胞株,采用SRB法检测细胞增殖抑制率,平板集落形成实验检测细胞的集落形成能力,Hoechst 33342染色法观察细胞核形态变化,流式细胞术检测细胞凋亡和周期的情况。三种金属元素结合斑蝥素(CTD)后都能抑制细胞的增殖,且成剂量依赖关系。CTD抑制细胞增殖的活性仍强于斑蝥素酸钙(CaCTD)和斑蝥素酸锶(Sr-CTD),但明显弱于斑蝥素酸镁(Mg-CTD)。当给药浓度为0. 7μg/m L时,Mg-CTD组无细胞集落的形成,且抑制细胞集落形成的能力强于CTD组。而Ca-CTD和Sr-CTD抑制细胞集落形成作用无统计学意义。三种斑蝥素金属衍生物中,Mg-CTD引起细胞凋亡最多,其细胞凋亡率为11. 1%,且强于CTD阳性对照组。此外,CTD、Mg-CTD和Ca-CTD可以引起细胞G2/M期阻滞,其阻滞能力由强到弱的顺序为:Mg-CTD、CTD、Ca-CTD;而Sr-CTD对细胞G_2/M期的阻滞能力不明显。镁、钙、锶三种元素对斑蝥素体外抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响差异很大,镁元素与斑蝥素结合后在体外能增强斑蝥素的抗肝癌活性,而钙和锶元素则降低其抗肝癌活性。 展开更多

关键词 斑蝥素 金属衍生物 人肝癌smmc-7721细胞

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重组人内皮抑素对人肝癌细胞SMMC-7721增殖及凋亡的影响

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作者 宋立文 王洪林 刘波 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第23期2490-2494,共5页

目的初步研究Wnt通路在重组人血管内皮抑素(rh-Endostatin,ES)诱导人肝癌细胞SMMC-7721增殖、凋亡过程中的作用及可能机制。方法分别以50、100、200、400μg/ml ES体外处理人肝癌细胞株SMMC-7721,利用MTT比色法检测不同浓度、时间ES作... 目的初步研究Wnt通路在重组人血管内皮抑素(rh-Endostatin,ES)诱导人肝癌细胞SMMC-7721增殖、凋亡过程中的作用及可能机制。方法分别以50、100、200、400μg/ml ES体外处理人肝癌细胞株SMMC-7721,利用MTT比色法检测不同浓度、时间ES作用下的细胞增殖状态;利用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡;Western blot检测β连环蛋白(β-catenin)、糖原合酶激酶3β(GSK-3β)表达;应用RT-PCR检测Wnt信号通路下游基因survivin及cyclin D1 mRNA表达情况。结果不同浓度的ES对人肝癌细胞SMMC-7721具有不同程度的生长抑制作用,且存在时间剂量效应,ES作用48 h和72 h后,SMCC-7721细胞抑制率分别为(10.45±0.73)%和(21.81±0.55)%(50μg/ml);(15.42±1.91)%和(27.81±0.92)%(100μg/ml);(23.64±0.43)%和(31.07±0.13)%(200μg/ml);(28.88±0.63)%和(43.76±0.55)%(400μg/ml)。与24 h各浓度组相比差异有统计学意义(P=0.000)。各浓度ES处理后,SMMC-7721细胞G1期细胞比例与对照组比较差异有统计学意义(P=0.00);SMMC-7721细胞经ES作用72 h后,随ES浓度升高,细胞凋亡率增加,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。ES能显著降低细胞β-catenin蛋白表达(P=0.000),但对GSK-3β蛋白表达无明显影响。ES能下调Wnt信号通路下游转录因子survivin及cyclin D1 mRNA水平。结论 ES通过促进β-catenin蛋白降解,降低Wnt信号通路下游癌基因survivin及cyclin D1 mRNA的转录,从而抑制SMMC-7721细胞增殖,并诱导细胞凋亡。ES抑制增殖、诱导凋亡的作用与GSK-3β蛋白表达无关。 展开更多

关键词 重组人血管内皮抑素 增殖及凋亡 WNT信号通路 人肝癌细胞smmc-7721

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橙皮素衍生物对肝癌细胞SMMC-7721的促凋亡作用 被引量：2

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作者 赵雨欣 孙莹茵 +2 位作者 黄成 马陶陶 李俊 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第7期1003-1007,共5页

目的以橙皮素为原型,合成了新型化合物HY-12,研究其体外对SMMC-7721细胞的促凋亡作用及机制。方法在3个时间点(24、48、72 h)采用MTT比色法观察不同浓度HY-12对肝癌细胞、肝细胞增殖的影响,计算半数抑制率(IC50)。根据结果选取了24 h,12... 目的以橙皮素为原型,合成了新型化合物HY-12,研究其体外对SMMC-7721细胞的促凋亡作用及机制。方法在3个时间点(24、48、72 h)采用MTT比色法观察不同浓度HY-12对肝癌细胞、肝细胞增殖的影响,计算半数抑制率(IC50)。根据结果选取了24 h,12.5×10-6,25×10-6,50×10-6mol/L 3个浓度进行下述实验。通过Annexin V/PI双染,流式细胞仪检测细胞凋亡率;制备细胞爬片,Hoechst 33342染色,在荧光倒置显微镜下观察细胞凋亡的形态学改变;采用Western blot法检测细胞凋亡相关因子Bcl-2、Bax蛋白水平的表达情况。结果 (1)MTT法显示在对肝细胞活性无显著影响的前提下,HY-12在体外可抑制SMMC-7721细胞的增殖,且具有剂量-时间依赖性;(2)流式细胞仪检测显示HY-12作用后,SMMC-7721细胞凋亡率增加,且呈浓度依赖性趋势;(3)经Hoechst 33342染色,药物处理后细胞核皱缩断裂呈现亮蓝色新月状;(4)Western blot结果显示药物处理可以使Bax蛋白表达上调,相反地Bcl-2蛋白表达下调。结论橙皮素衍生物HY-12有明显抑制肝癌细胞SMMC-7721增殖作用。其机制可能是通过调节Bcl-2、Bax表达以诱导细胞凋亡。HY-12可能成为治疗肝癌的有效化疗药物。 展开更多

关键词 肝癌 人肝癌细胞smmc-7721 橙皮素 BCL-2 BAX

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腺病毒介导的干扰素-β基因对SMMC-7721细胞凋亡的影响 被引量：1

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作者 高红伟 李印 +4 位作者 郭长青 马军 张丽荣 曹新广 于泳 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第6期1178-1182,共5页

目的:观察腺病毒介导的干扰素-β(IFN-β)基因能否诱导人肝癌SMMC-7721细胞体外凋亡。方法:用HEK293A细胞扩增重组腺病毒介导的人干扰素-β(AdhIFN-β)基因,经纯化后用空斑形成实验法测定病毒滴度;分别用AdhIFN-β基因和重组腺病毒介导... 目的:观察腺病毒介导的干扰素-β(IFN-β)基因能否诱导人肝癌SMMC-7721细胞体外凋亡。方法:用HEK293A细胞扩增重组腺病毒介导的人干扰素-β(AdhIFN-β)基因,经纯化后用空斑形成实验法测定病毒滴度;分别用AdhIFN-β基因和重组腺病毒介导的绿色荧光蛋白(AdGFP)基因转染人肝癌SMMC-7721细胞,并设空白对照组,应用免疫细胞化学方法检测hIFN-β基因的表达,应用Hochest33342荧光染色法和流式细胞术检测转染重组AdhIFN-β基因组、空载体组和对照组细胞的凋亡情况。结果:重组腺病毒经HEK293A细胞扩增、纯化后滴度可达2×1011pfu/mL,且40MOI的腺病毒即可获得95%以上的转染效率;免疫细胞化学法检测到外源性hIFN-β基因在SMMC-7721细胞中的蛋白表达产物;荧光染色法检测到重组AdhIFN-β基因组细胞明显发生了凋亡,而重组AdGFP组和空白对照组细胞凋亡不明显;流式细胞术检测到转染重组AdhIFN-β基因组细胞凋亡率[(28.27±4.21)%]高于转染空载体组[(2.08±0.89)%]和对照组[(1.53±0.70)%](F=377.625,P<0.001),后2组细胞凋亡率比较差异无统计学意义。结论:腺病毒介导的hIFN-β基因能诱导体外肝癌细胞发生凋亡。 展开更多

关键词 腺病毒载体 干扰素-Β 肝癌 凋亡 smmc-7721细胞

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miR-223-3p通过靶向RAC1调控肝细胞癌SMMC-7721细胞的增殖和凋亡 被引量：9

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作者 戚欣 王会子 +2 位作者 陈旭东 张天琦 于小琳 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期664-670,共7页

目的:探讨miR-223-3p通过调控Ras相关C3肉毒素底物1(Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1,RAC1)对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:选用2016年8月至2018年8月吉林市中心... 目的:探讨miR-223-3p通过调控Ras相关C3肉毒素底物1(Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1,RAC1)对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:选用2016年8月至2018年8月吉林市中心医院手术切除的30例HCC组织及其癌旁组织标本和人HCC细胞系SMMC-7721、Bel-7402、HepG2及人正常肝细胞QSG-7701,用qPCR检测HCC组织和细胞系中miR-223-3p的表达水平。分别将miR-223-3p mimics、miR-223-3p inhibitor和siRAC1转染至SMMC-7721细胞,通过CCK-8、克隆形成实验和Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测SMMC-7721细胞的增殖、克隆形成和凋亡水平。用双荧光素酶报告基因实验检测miR-223-3p与RAC1的靶向关系,Western blotting检测细胞中RAC1蛋白的表达水平。结果:miR-223-3p在HCC组织的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.01),其表达水平与肿瘤大小、TNM分期及肿瘤分化病理特征相关(P<0.05或P<0.01);miR-223-3p在HCC细胞系表达水平显著低于QSG-7701细胞(均P<0.01),以在SMMC-7721细胞中表达水平最低。双荧光素酶报告基因实验证实RAC1是miR-223-3p靶基因,miR-223-3p靶向负调控RAC1的表达。转染miR-223-3p mimics显著抑制SMMC-7721细胞的增殖和克隆形成能力(P<0.05或P<0.01),并促进细胞凋亡(P<0.01);转染miR-223-3p inhibtor则逆转miR-223-3p mimics对细胞的抑制作用。结论:过表达miR-223-3p抑制HCC细胞增殖和克隆形成能力并促进细胞凋亡,其机制可能与靶向下调RAC1表达有关。 展开更多

关键词 miR-223-3p Ras相关C3肉毒素底物1 肝细胞癌 smmc-7721细胞 增殖 凋亡

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大黄虫丸含药血清对肝癌SMMC-7721细胞能量代谢的影响 被引量：5

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作者 吴丽 倪子惠 +2 位作者 赵佳妤 张希琼 曹可馨 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1473-1478,共6页

目的研究大黄虫丸含药血清对肝癌SMMC-7721细胞能量代谢的影响。方法 SMMC-7721敏感、耐药(阿霉素)细胞给予不同浓度含药血清,考察含药血清对2种细胞活力和耐药细胞耐药指数的影响。然后,通过流式细胞术评价含药血清和阿霉素对细胞内... 目的研究大黄虫丸含药血清对肝癌SMMC-7721细胞能量代谢的影响。方法 SMMC-7721敏感、耐药(阿霉素)细胞给予不同浓度含药血清,考察含药血清对2种细胞活力和耐药细胞耐药指数的影响。然后,通过流式细胞术评价含药血清和阿霉素对细胞内阿霉素含有量的影响,检测ATP水平,分析含药血清对2种细胞能量代谢表型的影响。结果含药血清可显著抑制细胞活力;与阿霉素联用时,还能逆转耐药指数。结论大黄虫丸含药血清的抗肝癌机制可能与抑制线粒体能量代谢、降低细胞内ATP水平有关,与阿霉素联用时效果可更显著。 展开更多

关键词 大黄[庶虫]虫丸 含药血清 肝癌smmc-7721细胞 能量代谢 阿霉素

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山楂原花青素对人肝癌SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响 被引量：10

9

作者 孙思明 徐宏伟 +4 位作者 郭凯元 郭梦冉 崔胜男 崔同 檀建新 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第5期189-196,共8页

目的:探讨山楂原花青素提取物、表儿茶素和原花青素B2对人肝癌SMMC-7721细胞增殖及凋亡的影响。方法:体外培养SMMC-7721细胞,噻唑蓝法检测不同质量浓度山楂原花青素对细胞增殖的影响;4’,6-二脒基-2-苯基吲哚染色法观察细胞凋亡,Western... 目的:探讨山楂原花青素提取物、表儿茶素和原花青素B2对人肝癌SMMC-7721细胞增殖及凋亡的影响。方法:体外培养SMMC-7721细胞,噻唑蓝法检测不同质量浓度山楂原花青素对细胞增殖的影响;4’,6-二脒基-2-苯基吲哚染色法观察细胞凋亡,Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白的表达;检测每组细胞中过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、Na^+K^+-ATP酶活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果:山楂原花青素提取物、表儿茶素和原花青素B_2呈时间和质量浓度依赖性地显著抑制SMMC-7721细胞的增殖(P<0.05),促进细胞凋亡;与对照组相比,SMMC-7721细胞中SOD、CAT、GSH-Px、Na^+K^+-ATP酶活力降低,MDA含量升高;细胞凋亡相关蛋白半胱天冬酶-8、半胱天冬酶-3、Bcl-2相关X蛋白表达量和多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶片段化增加,Bcl-2表达量降低。结论:山楂原花青素可通过影响抗氧化酶活力和细胞凋亡相关蛋白来抑制SMMC-7721细胞增殖,促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 山楂原花青素 抗氧化活性 人肝癌smmc-7721细胞 细胞增殖 细胞凋亡

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siRNA沉默ARK5基因对SMMC-7721细胞侵袭及MMP-2蛋白分泌的影响

10

作者 蒋清虎 马吉安 +1 位作者 谭孝华 吴忠均 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2016年第6期723-726,共4页

目的:观察siRNA沉默ARK5基因的表达对肝癌SMMC-7721细胞侵袭及MMP-2蛋白分泌的影响。方法:采用qRT-PCR和Western blot法检测SMMC-7721细胞和正常肝细胞LO2中ARK5的表达。体外合成靶向ARK5基因的siRNA,转染肝癌SMMC-7721细胞,并设阴性对... 目的:观察siRNA沉默ARK5基因的表达对肝癌SMMC-7721细胞侵袭及MMP-2蛋白分泌的影响。方法:采用qRT-PCR和Western blot法检测SMMC-7721细胞和正常肝细胞LO2中ARK5的表达。体外合成靶向ARK5基因的siRNA,转染肝癌SMMC-7721细胞,并设阴性对照和空白对照,采用Western blot方法检测3组细胞中ARK5蛋白的表达,通过Transwell小室模型检测细胞的体外侵袭能力,采用ELISA法检测细胞培养基中MMP-2蛋白的含量。结果:SMMC-7721细胞中ARK5 mRNA和蛋白的表达水平高于LO2细胞(P<0.05);沉默ARK5基因后,SMMC-7721细胞的侵袭受到抑制,且MMP-2蛋白的分泌水平低于阴性对照和空白对照(P<0.05)。结论:沉默ARK5基因可能通过MMP-2途径抑制SMMC-7721细胞的侵袭。 展开更多

关键词 肝癌 侵袭 ARK5基因 RNA干扰 smmc-7721细胞

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肝癌组织和肝癌HepG2、SMCC-7721细胞株β-catenin的表达 被引量：2

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作者 金世龙 刘宏鸣 +4 位作者 刘宝华 肖静 杨俊涛 顾红光 申海军 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期826-829,共4页

目的研究肝癌组织和肝癌HepG2、SMCC-7721细胞株β-catenin表达及分布情况。方法收集20例肝癌组织和3例正常肝组织标本,利用免疫组织化学、免疫细胞化学和Western blot法检测肝癌组织和肝癌HepG2、SMCC-7721细胞株β-catenin的表达及分... 目的研究肝癌组织和肝癌HepG2、SMCC-7721细胞株β-catenin表达及分布情况。方法收集20例肝癌组织和3例正常肝组织标本,利用免疫组织化学、免疫细胞化学和Western blot法检测肝癌组织和肝癌HepG2、SMCC-7721细胞株β-catenin的表达及分布特征。结果免疫组化结果显示,β-catenin在肝癌细胞膜的分布不均匀、不连续,甚至缺如,在低分化肝癌细胞膜的表达较高分化癌少,而在细胞质呈高表达。有18例(90%)肝癌细胞膜β-catenin表达量明显减少,10例(50%)在胞膜的分布不连续或缺如;17例(85%)细胞质有明显的β-catenin积聚,而且分布不均匀。随肝癌分化程度不同,β-catenin表达也有明显差异,7例(77.8%)高分化肝癌细胞膜β-catenin分布较为清楚连续,细胞质表达量较多。分布均匀;4例(80%)低分化肝癌细胞膜β-catenin表达较少,细胞质β-catenin分布不均匀,呈点状积聚;中度分化的肝癌细胞膜和细胞质内β-catenin分布界于高低分化之间,5例(83.3%)细胞质β-cate- nin表达阳性。免疫细胞化学检测显示HepG2、SMCC-7721细胞株胞膜β-catenin表达不明显,胞质及胞核则有大量β-catenin积聚。Western blot检测显示肝癌组织和HepG2、SMCC-7721细胞株的胞质和胞核均有β-catenin表达,且在胞核内积聚。结论肝癌组织和肝癌细胞株胞膜β-catenin表达较少,而胞质β-catenin分布较多,胞核β-catenin积聚明显,其分布与肝癌分化程度相关。 展开更多

关键词 癌 肝细胞 Β-CATENIN HEPG2细胞株 SMCC-7721细胞株

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载多西紫杉醇脂质微泡联合超声靶向微泡破裂对人肝癌细胞增殖和凋亡影响的初步研究 被引量：5

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作者 康娟 吴小翎 +3 位作者 张大志 周智 胡鹏 王志刚 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1698-1702,共5页

目的:初步研究载多西紫杉醇脂质微泡(docetaxel-loaded lipid microbubbles,LDLM)联合超声靶向微泡破裂(ultrasound targeted microbubbles destruction,UTMD)对人SMMC-7721肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:体外培养人SMMC-7721细胞,确... 目的:初步研究载多西紫杉醇脂质微泡(docetaxel-loaded lipid microbubbles,LDLM)联合超声靶向微泡破裂(ultrasound targeted microbubbles destruction,UTMD)对人SMMC-7721肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:体外培养人SMMC-7721细胞,确定适宜的多西紫杉醇浓度,细胞分为6组,比较各组的细胞增殖抑制率、超微结构改变、凋亡率和细胞周期分布。结果:载药微泡+超声组的细胞增殖抑制率明显高于其他组,与其他各组相比差异有统计学意义(P=0.000);电镜下观察载药微泡+超声组的凋亡细胞最多;流式细胞仪检测结果显示载药微泡+超声组的细胞凋亡率最高(P=0.000),LDLM+US组G0/G1期细胞比例明显减少,为(0.79±0.27)%(P=0.000),G2/M期细胞比例升高最明显,为(90.54±0.48)%(P=0.000)。结论:LDLM联合UTMD可抑制人SMMC-7721细胞的增殖、促进其凋亡,为后续进一步从蛋白、基因层面探索其作用的机制奠定了重要基础。 展开更多

关键词 超声微泡 多西紫杉醇 人肝癌细胞系 载药微泡 人smmc-7721细胞

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siArid2重组腺病毒载体的构建及其对肝癌细胞增殖的影响

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作者 段玉洁 聂丽珠 +3 位作者 田玲 李治 陈震 唐霓 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1998-2003,共6页

目的：通过RNA干扰技术沉默内源性抑癌基因Arid2（si Arid2）的表达,观察其对肝癌细胞生长及细胞周期的影响。方法：设计3对特异性沉默Arid2基因的shRNA序列,分别克隆到腺病毒骨架载体上形成重组腺病毒质粒。将质粒转染到HEK293细胞中,... 目的：通过RNA干扰技术沉默内源性抑癌基因Arid2（si Arid2）的表达,观察其对肝癌细胞生长及细胞周期的影响。方法：设计3对特异性沉默Arid2基因的shRNA序列,分别克隆到腺病毒骨架载体上形成重组腺病毒质粒。将质粒转染到HEK293细胞中,包装和扩增形成完整高滴度的重组腺病毒Adsi Arid2-1-3。用构建好的腺病毒感染人肝癌SMMC-7721细胞,Western blotting方法检测Arid2蛋白的表达,筛选干扰效果最佳的重组腺病毒。MTS技术和流式细胞术观察干扰Arid2基因后肝癌细胞增殖和细胞周期的变化。结果：成功构建了高滴度的重组腺病毒Adsi Arid2-1-3。经Western blotting鉴定,Adsi Arid2-3为抑制效果最佳的重组腺病毒。MTS结果显示,Adsi Arid2组细胞在72 h、96 h的吸光度值与空细胞组和Adsicontrol组相比增高,细胞增殖速率明显加快。流式细胞术检测结果显示,Adsi Arid2组处于G1期、S期的细胞百分比与空细胞组和Adsicontrol组相比,G1期细胞百分比明显减少,S期细胞百分比明显增多。结论：成功构建干扰Arid2的重组质粒及重组腺病毒。沉默Arid2可以促进肝癌细胞的增殖,促进其由G1期向S期的转换。 展开更多

关键词 基因 Arid2 肝细胞癌 smmc-7721细胞 细胞增殖 细胞周期

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β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅱ、Ⅴ表达的亚细胞结构定位研究

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作者 沈爱国 何江虹 +3 位作者 丁斐 朱敏 王汉洲 顾建新 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期277-282,共6页

为了研究β-1,4-半乳糖基转移酶 和 (β-1,4-Gal T- and )蛋白表达的亚细胞结构定位 ,本实验构建了β-1,4-Gal T- 和 融合绿色荧光蛋白 (GFP)表达质粒 ,分别将构建的质粒转染到 PC12细胞和肝癌 772 1细胞中 ,在荧光显微镜下观察β-1... 为了研究β-1,4-半乳糖基转移酶 和 (β-1,4-Gal T- and )蛋白表达的亚细胞结构定位 ,本实验构建了β-1,4-Gal T- 和 融合绿色荧光蛋白 (GFP)表达质粒 ,分别将构建的质粒转染到 PC12细胞和肝癌 772 1细胞中 ,在荧光显微镜下观察β-1,4-Gal T- 和 在其中表达的亚细胞结构定位。发现 ,β-1,4-Gal T- 和 主要表达在这两种细胞的细胞核旁的 Golgi复合体 ,说明它们主要分布在 Golgi复合体上。提示它们可能是在 展开更多

关键词 Β-1 4-半乳糖基转移酶 表达 亚细胞结构 定位 肝癌细胞

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基于能量代谢系统评价延胡索乙素对人肝癌细胞的影响 被引量：1

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作者 尹逊哲 刘作家(指导) 郭焱(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期426-430,共5页

目的:利用Seahorse XFp体外细胞能量代谢分析系统探讨延胡索乙素(THP)对人肝癌(HCC)SMMC-7721细胞能量代谢的影响。方法:不同浓度的THP作用SMMC-7721细胞后,CCK-8法检测THP对SMMC-7721细胞增殖的影响;采用Seahorse XFp细胞能量代谢分析... 目的:利用Seahorse XFp体外细胞能量代谢分析系统探讨延胡索乙素(THP)对人肝癌(HCC)SMMC-7721细胞能量代谢的影响。方法:不同浓度的THP作用SMMC-7721细胞后,CCK-8法检测THP对SMMC-7721细胞增殖的影响;采用Seahorse XFp细胞能量代谢分析系统检测THP对SMMC-7721细胞线粒体呼吸和糖酵解的影响;优化Seahorse XFp细胞能量代谢分析系统检测SMMC-7721细胞线粒体压力(OCR)和糖酵解条件;流式细胞术检测THP诱导SMMC-7721细胞的凋亡率及细胞周期;Western blot检测SMMC-7721细胞中caspase-3、caspase-9及cytochrome c蛋白的表达差异。结果:THP处理后的SMMC-7721细胞增殖明显受到抑制,且具有时间和剂量效应关系;OCR最优条件为:葡糖糖浓度2.5 mol/L、谷氨酰胺0.2 mol/L、丙酮酸钠0.1 mol/L,寡霉素1μmol/L、FCCP 1μmol/L、鱼藤酮0.5μmol/L;ECAR最优条件为:葡糖糖10 mmol/L、寡霉素10μmol/L、2-DG 50 mmol/L。THP(150μg/ml)作用SMMC-7721细胞24 h后,线粒体呼吸作用被抑制,线粒体基础呼吸、ATP产量及最大呼吸能力均下降;同时抑制糖酵解作用,糖酵解能力、最大糖酵解能力及糖酵解储备均下降;流式细胞术结果显示细胞凋亡率升高,G1期细胞增多,且阻滞在G1期;同时,caspase-9及cytochrome c蛋白表达水平显著升高,形成凋亡小体上调caspase-3表达。结论:THP显著抑制人HCC细胞SMMC-7721的线粒体呼吸和糖酵解作用,延缓细胞周期进程,诱导线粒体途径的细胞凋亡。 展开更多

关键词 延胡索乙素 人肝癌smmc-7721细胞 Seahorse XFp 氧化磷酸化 糖酵解

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GSTZ1重组腺病毒的构建及影响肝癌细胞迁移能力的研究

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作者 杨翼 李晶晶 +6 位作者 梁利 高庆祝 郑亚秋 潘娥 汪凯 唐霓 单幼兰 《重庆医科大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第7期821-827,共7页

目的:构建人谷胱甘肽-S-转移酶Z1(glutathione S-transferase zeta 1,GSTZ1)重组腺病毒,并初步研究GSTZ1调控粘附连接信号通路(adhesion junction pathway)靶基因SMAD3、IGF1R等影响肝癌细胞的迁移能力。方法:PCR扩增GSTZ1 cDNA序列并... 目的:构建人谷胱甘肽-S-转移酶Z1(glutathione S-transferase zeta 1,GSTZ1)重组腺病毒,并初步研究GSTZ1调控粘附连接信号通路(adhesion junction pathway)靶基因SMAD3、IGF1R等影响肝癌细胞的迁移能力。方法:PCR扩增GSTZ1 cDNA序列并克隆到腺病毒载体pAd Track-TO4,构建重组腺病毒质粒p Ad Track-GSTZ1,将重组质粒用Lipofectamine 2000转染至HEK293细胞中,包装、扩增成高滴度重组腺病毒AdGSTZ1。首先,将SMMC-7721细胞设为3组:Mock组、AdGFP组和AdGSTZ1组,Mock组为空白对照组,AdGFP组为感染腺病毒AdGFP的对照组,AdGSTZ1组为感染腺病毒AdGSTZ1的实验组。然后,通过Transwell实验和MTS实验观察其对肝癌细胞迁移增殖能力的影响,进一步经qRT-PCR及Western blot技术研究GSTZ1通过调控粘附连接信号通路关键分子影响肝癌细胞的迁移。结果:成功构建了高滴度重组腺病毒AdGSTZ1,经Western blot鉴定GSTZ1在SMMC-7721细胞中的表达。Transwell实验结果表明,AdGSTZ1组与Mock组及AdGFP组相比,能够明显抑制人肝癌细胞的迁移能力;与Mock组相比,抑制率为(68.10±1.63)%(P=0.000),与AdGFP组相比,抑制率为(50.70±0.99)%(P=0.000)。MTS实验结果表明,AdGSTZ1组在72 h和96 h的吸光度值分别为(1.13±0.08)和(1.28±0.07),AdGFP组72 h和96 h的吸光度值分别为(1.28±0.03)和(1.45±0.03),AdGSTZ1组在96 h的吸光度值与对照组相比明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。另外q RT-PCR及Western blot结果显示,与Mock组和AdGFP组相比,AdGSTZ1感染细胞内粘附连接信号通路中靶基因SMAD3、IGF1R等的表达明显降低。q RT-PCR结果显示,AdGSTZ1组与AdGFP组相比,TGFBR1相对表达量为(0.58±0.13)(t=4.609,P=0.010),SMAD3相对表达量为(0.51±0.08)(t=8.030,P=0.000),ERBB2相对表达量为(0.46±0.09)(t=9.384,P=0.000),IGF1R相对表达量为(0.45±0.02)(t=14.480,P=0.000),FARP2相对表达量为(0.37±0.13)(t=7.082,P=0.028)。Western blot表明,SMAD3组中,AdGFP组的蛋白相对表达量为(0.96±0.18),AdGSTZ1实验组的蛋白相对表达量(0.39±0.01)(P=0.001)。IGF1R组中,AdGFP组的蛋白相对表达量为(0.97±0.05),AdGSTZ1实验组的蛋白相对表达量(0.44±0.02)(P=0.000)。结论:GSTZ1通过调控粘附连接信号通路相关靶基因的表达抑制肝癌细胞的迁移。 展开更多

关键词 GSTZ1 smmc-7721细胞 粘附连接信号通路 肝癌 细胞迁移

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