期刊文献+
共找到180篇文章
< 1 2 9 >
每页显示 20 50 100
基于免疫磁珠的喹乙醇磁酶联免疫吸附法的建立与应用
1
作者 陈子怡 宋妍灵 +5 位作者 孙俊杰 李因来 翟璐 张尧峰 冯俊丽 金仁耀 《食品与生物技术学报》 北大核心 2025年第7期149-160,共12页
【目的】建立基于免疫磁珠的喹乙醇(olaquindox,OLA)磁酶联免疫吸附法(magnetic bead enzyme-linked immunosorbent assay,MELISA)。【方法】首先合成喹乙醇酶标半抗原(OLA-HS-HRP),并制备免疫磁珠,随后利用偶联完成的免疫磁珠与OLA-HS-... 【目的】建立基于免疫磁珠的喹乙醇(olaquindox,OLA)磁酶联免疫吸附法(magnetic bead enzyme-linked immunosorbent assay,MELISA)。【方法】首先合成喹乙醇酶标半抗原(OLA-HS-HRP),并制备免疫磁珠,随后利用偶联完成的免疫磁珠与OLA-HS-HRP,对MELISA的最佳反应条件进行筛选与优化。【结果】免疫磁珠与OLA-HS-HRP的最佳工作稀释倍数分别为100倍和8000倍,抗体稀释液为含体积分数5%甲醇的PBS缓冲液(0.010 mol/L,pH 7.0);在优化条件下建立的标准方程为y=13.593ln x+17.173(R^(2)=0.9943),其中IC_(10)值、IC_(20)值、IC_(50)值、IC_(80)值分别为0.59、1.23、11.19、101.70 ng/mL;该方法的回收率为93.17%~106.83%,变异系数(CV)<7%。【结论】该研究建立的MELISA灵敏度高且结果可靠,不仅为OLA残留检测提供了新方法,也为食品安全领域中其他小分子药物检测提供了理论依据与参考。 展开更多
关键词 喹乙醇 单克隆抗体 酶标半抗原 免疫磁珠 磁酶联免疫吸附法
在线阅读 下载PDF
鸡蛋中氟苯尼考残留的AlphaLISA检测方法的建立
2
作者 孙志文 王忠 +5 位作者 于莹 赵营 张晶晶 魏紫嫣 方芳 马立才 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第4期11-19,共9页
本试验旨在建立可检测鸡蛋中氟苯尼考(FF)残留的均相光激化学发光免疫分析方法(AlphaLISA)。通过化学方法合成FF生物素半抗原,利用O-羧甲基羟胺法偶联FF抗体与受体微球,通过筛选确定鸡蛋样品稀释倍数,采用棋盘法确定FF抗体标记受体微球... 本试验旨在建立可检测鸡蛋中氟苯尼考(FF)残留的均相光激化学发光免疫分析方法(AlphaLISA)。通过化学方法合成FF生物素半抗原,利用O-羧甲基羟胺法偶联FF抗体与受体微球,通过筛选确定鸡蛋样品稀释倍数,采用棋盘法确定FF抗体标记受体微球和FF生物素半抗原的浓度,最后基于FF抗体标记受体微球、FF生物素半抗原和链霉亲和素修饰供体微球,优化建立了检测鸡蛋中FF残留的AlphaLISA检测方法,并评价其灵敏度、特异性、准确性和重复性,及与国家标准方法GB 31658.20—2022《动物性食品中酰胺醇类药物及其代谢物残留量的测定液相色谱-串联质谱法》的一致性。质谱分析结果显示,FF生物素半抗原与目标分子的分子量一致(636 Da)。经评估,鸡蛋样品离心上清液采用25倍稀释方案。建立的AlphaLISA方法对鸡蛋中FF的检测限为0.57μg/kg,定量限为0.92μg/kg;添标回收率介于87.00%~99.50%,日内和日间变异系数均低于5%;与氟苯尼考胺的交叉反应率较高(93.27%),与12种常见兽药的交叉反应率极低(<0.1%);与国家标准方法比较,2种方法在5个添加浓度点的检测结果高度一致(R2=0.997)。结果表明,本试验建立的AlphaLISA具有高灵敏度、准确性、重复性和操作简便等优点,适用于鸡蛋中FF残留的快速检测,为鸡蛋安全监测提供了高效且可行的方案。 展开更多
关键词 鸡蛋 氟苯尼考 均相光激化学发光免疫分析方法(AlphaLISA) 半抗原
在线阅读 下载PDF
对硫磷半抗原改造及其免疫抗体 被引量:15
3
作者 张存政 刘贤进 +2 位作者 余向阳 王冬兰 高亮 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期37-40,共4页
将对硫磷代谢类似物进行了改造 ,以重氮化方法使之分别与牛血清蛋白 (BSA)、卵清蛋白 (OVA)载体蛋白连接 ,并分别作为免疫原与包被原进行抗血清制备及ELISA试验 ,结果产生了特异性抗体。在对硫磷的标准抑制曲线中 ,当pH 7 4时 ,I50 为 5... 将对硫磷代谢类似物进行了改造 ,以重氮化方法使之分别与牛血清蛋白 (BSA)、卵清蛋白 (OVA)载体蛋白连接 ,并分别作为免疫原与包被原进行抗血清制备及ELISA试验 ,结果产生了特异性抗体。在对硫磷的标准抑制曲线中 ,当pH 7 4时 ,I50 为 5 2ng·mL-1,检测限可低于 0 1ng·mL-1。交叉试验表明 :产生的特异性抗体与对硫磷反应明显 ,与其代谢的初级产物有交叉反应 ,与结构类似物 4硝基苯酚及其他类似物交叉反应不明显 。 展开更多
关键词 对硫磷 半抗原改造 免疫抗体 免疫分析 免疫优化 农药残留 检测
在线阅读 下载PDF
克百威人工抗原的合成与鉴定 被引量:34
4
作者 朱国念 吴银良 程敬丽 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期47-53,共7页
以 2 ,3-二氢 - 2 ,2 -二甲基 - 7-苯并呋喃酚为反应原料 ,在通光条件下合成了 2 ,3-二氢 - 2 ,2 -二甲基 - 7-苯并呋喃基氯甲酸酯 .然后 ,以其作为反应原料与氨基已酸或氨基丁酸反应 ,在不同条件下合成了具有羧基的两种活性半抗原 6- [... 以 2 ,3-二氢 - 2 ,2 -二甲基 - 7-苯并呋喃酚为反应原料 ,在通光条件下合成了 2 ,3-二氢 - 2 ,2 -二甲基 - 7-苯并呋喃基氯甲酸酯 .然后 ,以其作为反应原料与氨基已酸或氨基丁酸反应 ,在不同条件下合成了具有羧基的两种活性半抗原 6- [〔(2 ,3-二氢 - 2 ,2 -二甲基 - 7-苯并呋喃基氧 )羰基〕氨基 ]已酸 (BFNH)和4 - [〔(2 ,3-二氢 - 2 ,2 -二甲基 - 7-苯并呋喃基氧 )羰基〕氨基 ]丁酸 (BFNB) .半抗原和牛血清蛋白 (BSA)经碳二亚胺法偶联得到了其免疫原 ,BFNH- BSA和 BFNB- BSA的结合比分别为 10∶ 1和 13∶ 1,同时利用混合酸酐法和卵清蛋白经偶联得到包被抗原 ,BFNH- OVA和 BFNB- OVA的结合比分别为 4∶ 1和3∶ 展开更多
关键词 克百威 半抗原 人工抗原 合成 鉴定 免疫分析 农药残留
在线阅读 下载PDF
2甲4氯人工抗原的合成与鉴定 被引量:26
5
作者 施海燕 吴慧明 +1 位作者 程敬丽 朱国念 《农药学学报》 CAS CSCD 2004年第2期20-24,共5页
以除草剂2甲4氯(MCPA,简写为M)、氯化亚砜、氨基己酸和氨基丁酸等为起始原料,经两步化学反应分别合成了两种MCPA半抗原:6-(2-甲基-4-氯苯氧乙酰基)氨基己酸(MC)和4-(2-甲基-4-氯苯氧乙酰基)氨基丁酸(MB)。并通过碳二亚胺法和混合酸酐法... 以除草剂2甲4氯(MCPA,简写为M)、氯化亚砜、氨基己酸和氨基丁酸等为起始原料,经两步化学反应分别合成了两种MCPA半抗原:6-(2-甲基-4-氯苯氧乙酰基)氨基己酸(MC)和4-(2-甲基-4-氯苯氧乙酰基)氨基丁酸(MB)。并通过碳二亚胺法和混合酸酐法将MCPA、MC和MB分别与载体蛋白(BSA、OVA)偶联制备了2甲4氯的免疫抗原和包被抗原。再将M-BSA、MC-BSA和MB-BSA分别免疫新西兰大白兔获得了3种抗2甲4氯的多克隆抗体:抗M-BSA抗体(M-Ab)、抗MC-BSA抗体(MC-Ab)和抗MB-BSA抗体(MB-Ab),当相应的包被抗原浓度均为4μg/mL时,相应的冻干粉效价分别为1.0×106,1.2×106和2.0×106。在同源反应中,仅M-Ab适用于2甲4氯的残留检测,其线性浓度范围为0.01~10mg/L(IC50为1.3mg/L,MC-Ab和MB-Ab均大于50mg/L),最低检测限为0.01mg/L。研究结果为进一步研制2甲4氯快速检测试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 2甲4氯 半抗原 人工抗原 合成
在线阅读 下载PDF
沙丁胺醇人工抗原合成及鉴定研究 被引量:18
6
作者 袁利鹏 孙远明 +4 位作者 雷红涛 沈玉栋 黄晓钰 潘科 黄杰 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第12期276-280,共5页
用琥珀酸酐将沙丁胺醇活化后制备出半抗原沙丁胺醇半琥珀酸,经电喷雾电离质谱(ESI-MS)、红外光谱(IR)和核磁共振(1H-NMR)鉴定合成成功,同时证实琥珀酸酐连结在沙丁胺醇乙醇胺的羟基处,且半抗原以内胺盐形式存在。用混合酸酐、活泼酯方... 用琥珀酸酐将沙丁胺醇活化后制备出半抗原沙丁胺醇半琥珀酸,经电喷雾电离质谱(ESI-MS)、红外光谱(IR)和核磁共振(1H-NMR)鉴定合成成功,同时证实琥珀酸酐连结在沙丁胺醇乙醇胺的羟基处,且半抗原以内胺盐形式存在。用混合酸酐、活泼酯方法将沙丁胺醇琥珀半酸分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原和包被抗原,经紫外吸收法鉴定偶联成功,偶联比分别为12.8:1、23:1。本研究为进一步制备沙丁胺醇抗体奠定了基础。 展开更多
关键词 沙丁胺醇 半抗原 鉴定
在线阅读 下载PDF
Milbemycin Oxime半抗原设计及其抗体制备 被引量:16
7
作者 刘媛 刘贤进 +2 位作者 余向阳 张存政 陈育如 《农药学学报》 CAS CSCD 2005年第3期285-288,共4页
通过milbemycin oxime A4、A3(MILO)肟羟基与琥珀酸酐反应,合成了半抗原MILO-5-琥珀酰半酯,采用碳化二亚胺法将其与载体蛋白BSA偶联制备人工抗原.以此人工抗原免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,抗体效价达1:12 800;用此抗体建立的间接竞... 通过milbemycin oxime A4、A3(MILO)肟羟基与琥珀酸酐反应,合成了半抗原MILO-5-琥珀酰半酯,采用碳化二亚胺法将其与载体蛋白BSA偶联制备人工抗原.以此人工抗原免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,抗体效价达1:12 800;用此抗体建立的间接竞争酶联免疫吸附(CI-ELISA)检测方法,线性范围在16.00~4 394.18 ng/mL,最低检测限(I10)为6.28 ng/mL. 展开更多
关键词 milbemycin OXIME 半抗原 酶联免疫吸附法(ELISA)
在线阅读 下载PDF
氯霉素多克隆抗体的制备及免疫活性研究 被引量:12
8
作者 黄雅丽 程敬丽 +1 位作者 桂文君 朱国念 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期180-185,共6页
为建立氯霉素的免疫分析方法,由氯霉素原药与丁二酸酐反应合成了氯霉素两种半抗原(CAP-HS1、CAP-HS2),分别纯化后经质谱法(MS)分析鉴定结构.纯化的半抗原与牛血清蛋白(BSA)以碳二亚胺法偶联得到人工抗原.将免疫抗原分别免疫... 为建立氯霉素的免疫分析方法,由氯霉素原药与丁二酸酐反应合成了氯霉素两种半抗原(CAP-HS1、CAP-HS2),分别纯化后经质谱法(MS)分析鉴定结构.纯化的半抗原与牛血清蛋白(BSA)以碳二亚胺法偶联得到人工抗原.将免疫抗原分别免疫免子获得了相应抗体.当包被抗原的浓度为10μg·mL^-1时,抗CAP-HS1和CAP-HS2的冻干粉效价分别为8.39×10^6和6.55×10^4(OD490nm=1.0).研究了抗原抗体反应的亲和力和竞争抑制能力,其中抗CAP-HS1抗体适合免疫分析,检测线性范围为0.2~100ng·mL^-1,最低检测限IC20为0.239ng·mL^-1,抗CAP-HS1抗体对各类似物如甲砜霉素、氟甲砜霉素的交叉反应率分别为0.025%和0.166%,对其他类抗生素的交叉反应率〈2×10^-5. 展开更多
关键词 氯霉素 半抗原合成 人工抗原 抗体 ELISA
在线阅读 下载PDF
隐孔雀石绿半抗原与全抗原设计、合成及鉴定 被引量:10
9
作者 沈玉栋 王宇 +3 位作者 孙远明 雷红涛 王弘 肖治理 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第7期263-266,共4页
从偶联位点、偶联活性基团的性质及半抗原的合成与偶联方法分析,设计了系列不同结构的半抗原和人工抗原及其合成方法。以N,N-二甲基苯胺、苯甲醛衍生物为原料,Amberlyst15树脂为催化剂,在温和条件下合成出3种隐孔雀石绿半抗原;进一步采... 从偶联位点、偶联活性基团的性质及半抗原的合成与偶联方法分析,设计了系列不同结构的半抗原和人工抗原及其合成方法。以N,N-二甲基苯胺、苯甲醛衍生物为原料,Amberlyst15树脂为催化剂,在温和条件下合成出3种隐孔雀石绿半抗原;进一步采用活泼酯和重氮化法分别将获得的半抗原与牛血清白蛋白(BSA)偶联,形成相应全抗原。半抗原和全抗原分别经减压硅胶柱色谱及透析纯化后,采用质谱、核磁共振及紫外扫描光谱等分析手段进行了鉴定,结果表明半抗原及免疫全抗原均合成成功,满足了进一步免疫、筛选高质量抗体和建立检测方法的需要。同时,采用分子模拟手段对抗原表面半抗原决定簇的前线分子轨道分布情况进行了仿真模拟分析,讨论了前线轨道的分布可能对抗体特性造成的影响,为进一步的半抗原构效关系研究提供理论支持。 展开更多
关键词 孔雀石绿 半抗原 全抗原 合成 鉴定
在线阅读 下载PDF
大黄素-BSA不同表位构型的免疫原性和特异性研究 被引量:14
10
作者 李丽华 刘文泰 +4 位作者 戴军 窦玉红 王茹 刘艳臣 彭洋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期419-422,共4页
目的:研究不同偶联法制备大黄素-BSA的大黄素表位构型及其免疫原性和特异性。方法:用重氮化对氨基苯甲酸偶联法和琥珀酸酐偶联法制备两种不同表位构型的大黄素-BSA1和大黄素-BSA2抗原,免疫小鼠制备抗血清,用醋酸纤维素膜双向免疫扩散法... 目的:研究不同偶联法制备大黄素-BSA的大黄素表位构型及其免疫原性和特异性。方法:用重氮化对氨基苯甲酸偶联法和琥珀酸酐偶联法制备两种不同表位构型的大黄素-BSA1和大黄素-BSA2抗原,免疫小鼠制备抗血清,用醋酸纤维素膜双向免疫扩散法检测免疫原性及其抗体特异性。结果:大黄素-BSA1和大黄素-BSA2抗血清与大黄素反应的抗体效价分别为1∶144 0±357.771和1∶440±219.089,二者有极显著性差异(P=0.006)。分别与大黄素等五种蒽醌类化合物反应,前者对大黄素有较高特异性,抗原结合效价可达1∶1 843.2±457.947。后者对大黄素的特异性较低,结合效价仅为1∶8.8±4.382。结论:两种偶联法制备大黄素-BSA的表位构型不同,其免疫原性和特异性存在着显著差异。重氮化对氨基苯甲酸偶联法制备大黄素-BSA的免疫原性较高、大黄素特异性较强。 展开更多
关键词 抗原抗体反应 双向免疫扩散法 大黄素 半抗原-载体偶联法 表位
在线阅读 下载PDF
半抗原免疫分析在食品安全检测中的应用 被引量:9
11
作者 张小莺 赵津子 +2 位作者 陈琛 韩水仲 田泽华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第17期397-401,共5页
综述近几年来关于小分子半抗原的设计、人工抗原合成的研究,以及人工抗原合成中尚存在的问题和计算机模拟技术在半抗原合成中的应用;介绍多克隆抗体、单克隆抗体、卵黄抗体及基因工程抗体在食品安全检测中的应用,分析近年来ELISA、胶体... 综述近几年来关于小分子半抗原的设计、人工抗原合成的研究,以及人工抗原合成中尚存在的问题和计算机模拟技术在半抗原合成中的应用;介绍多克隆抗体、单克隆抗体、卵黄抗体及基因工程抗体在食品安全检测中的应用,分析近年来ELISA、胶体金免疫层析和新兴的免疫传感器技术研究与应用现状和发展趋势。半抗原免疫学检测方法具有较低的检测极限、快速、方便、低廉等优势,是食品安全检测的发展方向。半抗原合成的可控设计、有效抗体的规模化生产,通过与新型免疫分析技术结合以期达到高通量、低成本、实时多重检测是今后食品安全免疫学检测中重要的技术突破点。 展开更多
关键词 免疫分析法 半抗原 食品安全
在线阅读 下载PDF
氟虫腈半抗原设计及抗体制备 被引量:22
12
作者 董健 刘贤进 韩召军 《江苏农业学报》 CSCD 2001年第3期172-175,共4页
以氟虫腈 (F)及其一种类似物 (FH)作为半抗原 ,采用碳化二亚胺法 (EDC)和戊二醛法将氟虫腈偶联到载体蛋白上 ,采用活性酯法将FH偶联到载体蛋白BSA和OVA上作为人工抗原。载体为BSA的偶联物作为免疫原免疫新西兰大白兔 ,其中FH2 934、FH2 ... 以氟虫腈 (F)及其一种类似物 (FH)作为半抗原 ,采用碳化二亚胺法 (EDC)和戊二醛法将氟虫腈偶联到载体蛋白上 ,采用活性酯法将FH偶联到载体蛋白BSA和OVA上作为人工抗原。载体为BSA的偶联物作为免疫原免疫新西兰大白兔 ,其中FH2 934、FH2 962、F2 895产生了特异性抗体 ,间接ELISA测定效价分别为 2 5 60 0、12 80 0、1280 0 ,其中检测低限 (LLQ)最低达 0 2 μg/L。 展开更多
关键词 氟虫腈 人工半抗原 抗体 吡唑类杀虫剂 农药残留检测 免疫分析 制备 偶联
在线阅读 下载PDF
人工模拟加卤酶Ⅰ.半抗原合成,表征和生物活性测定 被引量:9
13
作者 祁超 丁兰 +5 位作者 刘立岩 耿昊 张玉静 赵大庆 刘仔 倪嘉缵 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期533-535,共3页
rac-Tetra(m-nitrobenzene)porphyrin, H2TNO2PP, synthesized from o-nitro-benzaldehyde and pyrrole was reduced to H2TamPP, from which tetra(o-phenylacetyl benzene) porphyrin and especially its α,α,α,α-isomer were... rac-Tetra(m-nitrobenzene)porphyrin, H2TNO2PP, synthesized from o-nitro-benzaldehyde and pyrrole was reduced to H2TamPP, from which tetra(o-phenylacetyl benzene) porphyrin and especially its α,α,α,α-isomer were obtained. The α,α,α,α-isomer was used as hapten to immunize BALB/C mice. The latter gave antibody value of 320 as determined by ELISA method, indicating that the artificial hapten could induce the production of antibody without use of carrier. 展开更多
关键词 加卤酶 半抗原 卟啉衍生物 生物活性 合成
在线阅读 下载PDF
拟除虫菊酯类农药酶免疫分析方法研究进展 被引量:14
14
作者 王春梅 程敬丽 +1 位作者 刘毅华 朱国念 《农药学学报》 CAS CSCD 2008年第1期15-22,共8页
对拟除虫菊酯类单一农药残留和多残留酶免疫分析方法的研究进展进行了综述。在介绍单一农药残留酶免疫分析方法中半抗原分子设计和ELISA方法建立的基础上,指出刚性连接臂是菊酯类农药免疫半抗原分子设计的一般原则,包被原和免疫原采用... 对拟除虫菊酯类单一农药残留和多残留酶免疫分析方法的研究进展进行了综述。在介绍单一农药残留酶免疫分析方法中半抗原分子设计和ELISA方法建立的基础上,指出刚性连接臂是菊酯类农药免疫半抗原分子设计的一般原则,包被原和免疫原采用不同的载体蛋白和不同结构的半抗原有利于菊酯类农药ELISA方法的建立。在介绍菊酯类农药多残留酶免疫分析方法时,剖析了通用免疫半抗原的结构特点,阐述了宽谱特异性抗体的筛选方法,揭示了在菊酯类农药多残留酶免疫分析法中存在竞争半抗原的选择具有盲目性、宽谱特异性抗体对不同农药的特异性差异较大的问题。并对拟除虫菊酯类农药通用免疫半抗原设计及多残留酶免疫分析技术的发展趋势进行了探讨。 展开更多
关键词 拟除虫菊酯 酶免疫分析 半抗原设计 农药残留
在线阅读 下载PDF
硫代磷酸二乙酯类农药半抗原设计及抗体识别特性 被引量:15
15
作者 谢桂勉 孙远明 +4 位作者 徐振林 李永祥 雷红涛 王弘 沈玉栋 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第11期2193-2198,共6页
通过分析硫代磷酸二乙酯类农药的结构特点,设计并合成了系列半抗原;采用活泼酯法将半抗原分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联制备了系列免疫原和包被原;通过免疫新西兰大白兔获得了相应抗硫代磷酸二乙酯类农药的类特异性抗体.建... 通过分析硫代磷酸二乙酯类农药的结构特点,设计并合成了系列半抗原;采用活泼酯法将半抗原分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联制备了系列免疫原和包被原;通过免疫新西兰大白兔获得了相应抗硫代磷酸二乙酯类农药的类特异性抗体.建立检测硫代磷酸二乙酯类农药的间接竞争酶联免疫分析(ELISA)方法,分析探讨了免疫半抗原结构对抗体特性的影响,并阐述了包被半抗原结构对ELISA灵敏度的影响规律.结果表明,手臂取代位置在苯环对位且手臂较短的免疫原具有较好的免疫效果,同时异源包被可以显著提高ELISA方法的灵敏度.由抗体PAb-H1和包被原H6-OVA建立的间接竞争ELISA方法可以同时检测7个广泛使用的有机磷农药,其半抑制浓度(IC50)分别为蝇毒磷(0.013 mg/L)、对硫磷(0.348 mg/L)、喹硫磷(0.022 mg/L)、三唑磷(0.035 mg/L)、甲拌磷(0.751 mg/L)、除线磷(0.850 mg/L)及辛硫磷(1.301mg/L),最低检测限符合国内外相关有机磷药物最大允许残留限量标准(MRLS)的检测要求. 展开更多
关键词 有机磷农药 类特异性抗体 异源包被 酶联免疫分析
在线阅读 下载PDF
农药残留酶联免疫吸附分析技术研究进展 被引量:13
16
作者 刘冰 魏松红 +2 位作者 尹晓东 何智勇 白莹莹 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第21期6484-6484,6515,共2页
酶联免疫吸附分析法具有灵敏度高、特异性强、方便快捷的特点,在现场筛选和大量样品的快速检测中显示了其独特的优势。简要介绍了农药残留酶联免疫吸附分析技术的关键环节及其应用,并对该技术存在的问题和应用前景进行了讨论。
关键词 农药残留 酶联免疫吸附分析 半抗原 抗体
在线阅读 下载PDF
抗苯巴比妥单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其免疫学特性鉴定 被引量:10
17
作者 王自良 张改平 +3 位作者 杨艳艳 张海棠 王选年 邓瑞广 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期336-340,317,共6页
苯巴比妥(PB)经化学修饰在其苯环上引入活性基团氨基,合成半抗原对氨基苯巴比妥(pAPB),用重氮化法将pAPB偶联于BSA,合成人工抗原BSA-pAPB,并用红外(IR)、紫外(UV)、SDS-PAGE鉴定;用BSA-pAPB免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术建立抗PB的单克... 苯巴比妥(PB)经化学修饰在其苯环上引入活性基团氨基,合成半抗原对氨基苯巴比妥(pAPB),用重氮化法将pAPB偶联于BSA,合成人工抗原BSA-pAPB,并用红外(IR)、紫外(UV)、SDS-PAGE鉴定;用BSA-pAPB免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术建立抗PB的单克隆抗体mAb(PB mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备PB mAb,并鉴定其免疫学特性。结果表明,BSA-pAPB偶联成功,偶联率为1∶19;筛选出1B9、3C4、3F6、4E6共4株杂交瘤细胞,其中最好的4E6株间接ELISA效价细胞培养上清为1∶8.1×102,腹水为1∶6.4×105,同种型为IgG1/κ,亲和常数(Ka)为2.08×1010L/mol,对PB的半数抑制浓度(IC50)为11.35μg/L,与巴比妥的交叉反应率(CR%)为12.4%,与其他化合物无CR。本试验研制出高效价、敏感、特异的PB mAb,可用于PB残留检测的免疫学实验。 展开更多
关键词 苯巴比妥 半抗原 人工抗原 单克隆抗体 免疫学特性
在线阅读 下载PDF
复合免疫制备3种有机磷农药单克隆抗体的技术研究 被引量:10
18
作者 吴芸茹 王利民 +3 位作者 娄旸 刘扬 胡白石 刘凤权 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期94-99,共6页
以α-氨基丁酸和农药中间体为原料合成了甲基对硫磷、杀螟硫磷和甲基毒死蜱3种有机磷农药人工半抗原(H1、H2和H3);通过活泼酯法将H1、H2和H3分别交联于牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)上制备免疫原和包被原。以等体积混合的H1-BSA、H2... 以α-氨基丁酸和农药中间体为原料合成了甲基对硫磷、杀螟硫磷和甲基毒死蜱3种有机磷农药人工半抗原(H1、H2和H3);通过活泼酯法将H1、H2和H3分别交联于牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)上制备免疫原和包被原。以等体积混合的H1-BSA、H2-BSA和H3-BSA复合免疫BALB/c小鼠,采用常规杂交瘤技术制备单克隆抗体获4株抗上述复合抗原的单克隆抗体,其中甲基对硫磷1株(H9/A3),杀螟硫磷2株(H9/B3、C8/H6),甲基毒死蜱1株(G7/F5)。所获4株抗体的类型及亚类均为IgG1,轻链均为κ链,间接ELISA法测定腹水效价均高达1×106。间接竞争ELISA法测定H9/A3、C8/H6和G7/F5细胞株的抑制中浓度(I50)分别为107.0、40.4和75.2μg.L-1,且与类似物无交叉反应。本研究建立了一种可在较短的研制周期内,通过单次细胞融合获得多种不同农药的单克隆抗体的有效方法。 展开更多
关键词 甲基对硫磷 杀螟硫磷 甲基毒死蜱 半抗原 单克隆抗体 ELISA
在线阅读 下载PDF
环丙沙星单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:6
19
作者 杨先乐 黄宣运 +3 位作者 胡鲲 方伟 王炼 姜有声 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第12期16-20,共5页
通过改进的碳二亚胺法制备环丙沙星-牛血清白蛋白偶联物(CIP-BSA),用紫外扫描、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法鉴定偶联物。利用制备的CIP-BSA偶联物作为免疫原,免疫Balb/c小鼠,用杂交瘤技术制备环丙沙星单克隆抗体,... 通过改进的碳二亚胺法制备环丙沙星-牛血清白蛋白偶联物(CIP-BSA),用紫外扫描、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法鉴定偶联物。利用制备的CIP-BSA偶联物作为免疫原,免疫Balb/c小鼠,用杂交瘤技术制备环丙沙星单克隆抗体,并对其效价、亲和力和特异性进行鉴定。结果表明:CIP-BSA的偶联比为30:1。经间接酶联免疫吸附(ELISA)法筛选,共筛出两株敏感、特异的杂交瘤细胞(JY-1、JY-2)。这两株细胞的腹水经纯化后的抗体效价分别为5.12×106、2.56×106,亲和力常数分别为2.88×109、2.46×109L/mol,两抗体均为IgG1a,取亲和力高的JY-1进行竞争抑制测定,IC50值可以达到9.83ng/mL。该单抗仅与恩诺沙星存在交叉反应,交叉反应率为95%。通过验证得到的JY-1细胞株分泌的单克隆抗体可用于水产品中环丙沙星残留的快速检测。 展开更多
关键词 环丙沙星 半抗原 抗体 免疫
在线阅读 下载PDF
甲硝唑半抗原及全抗原合成与鉴定 被引量:6
20
作者 雷红涛 沈玉栋 +3 位作者 刘文字 邱志超 杨瑾 孙远明 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期101-104,共4页
在微波加热条件下,将甲硝唑与琥珀酸酐反应,合成半抗原甲硝唑半琥珀酸酯,氢核磁共振、电喷雾质谱、红外光谱方法的鉴定结果表明,目标半抗原合成成功;通过活泼酯法将半抗原与载体蛋白偶联制备甲硝唑全抗原,紫外光谱法鉴定结果表明,全抗... 在微波加热条件下,将甲硝唑与琥珀酸酐反应,合成半抗原甲硝唑半琥珀酸酯,氢核磁共振、电喷雾质谱、红外光谱方法的鉴定结果表明,目标半抗原合成成功;通过活泼酯法将半抗原与载体蛋白偶联制备甲硝唑全抗原,紫外光谱法鉴定结果表明,全抗原合成成功. 展开更多
关键词 甲硝唑 半抗原 全抗原 鉴定
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 9 下一页 到第
使用帮助 返回顶部