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题名胞内劳森氏菌PCR检测方法的建立与应用
被引量：9
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作者
董炳梅
唐娜
王金良
苗立中
沈志强
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机构
山东绿都生物科技有限公司
山东省滨州畜牧兽医研究院
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出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期370-373,共4页
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基金
山东省自主创新重大专项(2008ZHZX1A1103)
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文摘
为建立一种适用于临床检测胞内劳森氏菌(Lawsonia intracellularis,LI)的检测方法,本研究通过比较提取粪便样品基因组DNA的不同方法,结合PCR方法特异性扩增aspA基因检测临床样品中的LI。敏感性试验表明,阳性样本最低检出量为1.7×102copies/μL;特异性试验表明,该方法对大肠杆菌、沙门氏菌、流行性腹泻病毒和伪狂犬病病毒扩增结果均为阴性;对102份临床样品阳性检出率为12.75%,与ELISA试剂盒检测结果符合率达88.04%;不同方法提取粪便样品基因组DNA对PCR检测敏感性的影响结果表明,固相吸附法最低检出量为2.9×102copies/μL,显著优于Chelex-100+Triton X-100法(3.32×103copies/μL)和蛋白酶K-CTAB法(2.45×106copies/μL)。因此,固相吸附法结合PCR方法进行检测具有快速、特异、敏感、重复性好等优点,适用于猪增生性肠炎的临床发病诊断及流行病学监测。
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关键词
胞内劳森氏菌
猪增生性肠炎
PCR
固相吸附法
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Keywords
Lawsonia intracellularis
porcine proliferative enteritis
PCR
guanidine thiocyanate-diatomaceous earth
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分类号
S852.61
[农业科学—基础兽医学]
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