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草地螟普通气味结合蛋白Ⅰ(Lsti-GOBP1)蛋白表达纯化及结合特性分析 被引量:14
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作者 孙红岩 尹姣 +3 位作者 冯红林 李克斌 席景会 曹雅忠 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期381-389,共9页
气味结合蛋白在昆虫对寄主挥发性气味识别过程中有着重要的生理功能。本研究通过对草地螟Loxostege sticticalis L.普通气味结合蛋白Ⅰ(Lsti-GOBP1)进行克隆及原核表达的基础上,分离纯化得到体外重组的Lsti-GOBP1蛋白。并利用N-苯基-1-... 气味结合蛋白在昆虫对寄主挥发性气味识别过程中有着重要的生理功能。本研究通过对草地螟Loxostege sticticalis L.普通气味结合蛋白Ⅰ(Lsti-GOBP1)进行克隆及原核表达的基础上,分离纯化得到体外重组的Lsti-GOBP1蛋白。并利用N-苯基-1-萘胺(N-phenyl-1-naphthylamine,1-NPN)作为荧光探针研究了Lsti-GOBP1蛋白与醇类、醛类、酯、烯等50种气味标样的结合特性,结果表明Lsti-GOBP1可与其中35种气味化合物结合,但只有1-己醇、1-庚醇、肉桂醛和莰烯4种气味标样能在20μmol/L浓度(探针与蛋白结合的饱和浓度值)下将1-NPN从Lsti-GOBP1中替换50%,其结合常数分别为8.997,7.283,7.289和9.814μmol/L。据此可以得出,Lsti-GOBP1蛋白的气味物质结合谱很广,同时具有较强的特异性,其中1-己醇、1-庚醇、肉桂醛、莰烯等化合物在草地螟识别寄主植物气味物质的过程中起重要作用。 展开更多
关键词 草地螟 普通气味结合蛋白Ⅰ 蛋白表达 纯化 N-苯基-1-萘胺 荧光结合实验
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八字地老虎GOBP1基因的克隆、序列分析与原核表达
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作者 王舒 韩岚岚 +1 位作者 赵寅 赵奎军 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期467-472,共6页
GOBP1蛋白作为昆虫化学感受机制的重要蛋白,对于研究气味调控防治害虫有重要意义。采用RT-PCR技术以八字地老虎的触角总RNA为模板进行克隆得到1条1 260 bp的八字地老虎GOBP1基因片段(GenBank登录号为JX978464),编码161个氨基酸残基,预... GOBP1蛋白作为昆虫化学感受机制的重要蛋白,对于研究气味调控防治害虫有重要意义。采用RT-PCR技术以八字地老虎的触角总RNA为模板进行克隆得到1条1 260 bp的八字地老虎GOBP1基因片段(GenBank登录号为JX978464),编码161个氨基酸残基,预测分子量约为18.6 kD,等电点5.14。生物信息学在线预测分析表明:八字地老虎GOBP1核苷酸序列与黄地老虎Agrotis segetum(登录号为DQ838577.1)同源性最高,为97%,与其他昆虫的同源性达80%以上。构建了重组表达质粒pET21-b/Acni GOBP1原核表达后检测到18.6 kD的外源蛋白,Western bolt检测该蛋白是目的蛋白。结果为深入研究GOBP1基因以及通过气味调控防治害虫提供了基础资料。 展开更多
关键词 大豆 八字地老虎 克隆 原核表达 序列分析
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