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草地螟普通气味结合蛋白Ⅰ(Lsti-GOBP1)蛋白表达纯化及结合特性分析
被引量:
14
1
作者
孙红岩
尹姣
+3 位作者
冯红林
李克斌
席景会
曹雅忠
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第4期381-389,共9页
气味结合蛋白在昆虫对寄主挥发性气味识别过程中有着重要的生理功能。本研究通过对草地螟Loxostege sticticalis L.普通气味结合蛋白Ⅰ(Lsti-GOBP1)进行克隆及原核表达的基础上,分离纯化得到体外重组的Lsti-GOBP1蛋白。并利用N-苯基-1-...
气味结合蛋白在昆虫对寄主挥发性气味识别过程中有着重要的生理功能。本研究通过对草地螟Loxostege sticticalis L.普通气味结合蛋白Ⅰ(Lsti-GOBP1)进行克隆及原核表达的基础上,分离纯化得到体外重组的Lsti-GOBP1蛋白。并利用N-苯基-1-萘胺(N-phenyl-1-naphthylamine,1-NPN)作为荧光探针研究了Lsti-GOBP1蛋白与醇类、醛类、酯、烯等50种气味标样的结合特性,结果表明Lsti-GOBP1可与其中35种气味化合物结合,但只有1-己醇、1-庚醇、肉桂醛和莰烯4种气味标样能在20μmol/L浓度(探针与蛋白结合的饱和浓度值)下将1-NPN从Lsti-GOBP1中替换50%,其结合常数分别为8.997,7.283,7.289和9.814μmol/L。据此可以得出,Lsti-GOBP1蛋白的气味物质结合谱很广,同时具有较强的特异性,其中1-己醇、1-庚醇、肉桂醛、莰烯等化合物在草地螟识别寄主植物气味物质的过程中起重要作用。
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关键词
草地螟
普通气味结合蛋白Ⅰ
蛋白表达
纯化
N-苯基-
1
-萘胺
荧光结合实验
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职称材料
斜纹夜蛾普通气味结合蛋白基因SlitGOBP1的克隆及序列分析
被引量:
8
2
作者
钟国华
李苗孟
+2 位作者
胡美英
罗倩
马金亮
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第2期38-43,共6页
通过PCR扩增结合RACE技术克隆获得斜纹夜蛾Spodoptera litura普通气味结合蛋白1(GOBP1)基因(Slit—GOBP1)全序列.序列测定和结构分析表明,SlitGOBP1阅读框全长为495bp,编码164个氨基酸残基,预测相对分子质量和等电点分别为19270...
通过PCR扩增结合RACE技术克隆获得斜纹夜蛾Spodoptera litura普通气味结合蛋白1(GOBP1)基因(Slit—GOBP1)全序列.序列测定和结构分析表明,SlitGOBP1阅读框全长为495bp,编码164个氨基酸残基,预测相对分子质量和等电点分别为19270和5.29,与已报道的10种鳞翅目昆虫GOBP1相似性为90%-41%.cDNA序列GenBank登录号为EF159978.SlitGOBP1序列中有6个保守的半胱氨酸位点,具有GOBP1的典型特征.SlitGOBP1编码的蛋白呈酸性,整个分子呈亲水性,在第40-60位和100位以后的氨基酸表现亲脂性,蛋白质二级结构主要由α螺旋构成.氨基酸序列系统进化树分析表明,昆虫间GOBP1分子具有明显的保守性,SlitGOBP1与夜蛾科的烟青虫Helicoverpa assulta、烟芽夜蛾Heliothis virescerts和棉铃虫Helicoverpa armigera GOBP1属于一个分支,相似性分别为78.1%、87.6%和79.9%、这些结果为进一步了解斜纹夜蛾感受环境信息分子机制,研制昆虫行为调节剂提供了基础.
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关键词
斜纹夜蛾
普通气味结合蛋白
1
基因克隆
序列分析
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职称材料
八字地老虎GOBP1基因的克隆、序列分析与原核表达
3
作者
王舒
韩岚岚
+1 位作者
赵寅
赵奎军
《大豆科学》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期467-472,共6页
GOBP1蛋白作为昆虫化学感受机制的重要蛋白,对于研究气味调控防治害虫有重要意义。采用RT-PCR技术以八字地老虎的触角总RNA为模板进行克隆得到1条1 260 bp的八字地老虎GOBP1基因片段(GenBank登录号为JX978464),编码161个氨基酸残基,预...
GOBP1蛋白作为昆虫化学感受机制的重要蛋白,对于研究气味调控防治害虫有重要意义。采用RT-PCR技术以八字地老虎的触角总RNA为模板进行克隆得到1条1 260 bp的八字地老虎GOBP1基因片段(GenBank登录号为JX978464),编码161个氨基酸残基,预测分子量约为18.6 kD,等电点5.14。生物信息学在线预测分析表明:八字地老虎GOBP1核苷酸序列与黄地老虎Agrotis segetum(登录号为DQ838577.1)同源性最高,为97%,与其他昆虫的同源性达80%以上。构建了重组表达质粒pET21-b/Acni GOBP1原核表达后检测到18.6 kD的外源蛋白,Western bolt检测该蛋白是目的蛋白。结果为深入研究GOBP1基因以及通过气味调控防治害虫提供了基础资料。
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关键词
大豆
八字地老虎
克隆
原核表达
序列分析
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职称材料
题名
草地螟普通气味结合蛋白Ⅰ(Lsti-GOBP1)蛋白表达纯化及结合特性分析
被引量:
14
1
作者
孙红岩
尹姣
冯红林
李克斌
席景会
曹雅忠
机构
吉林大学植物科学学院
中国农业科学院植物保护研究所
出处
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第4期381-389,共9页
基金
公益性行业(农业)科研专项(201003079)
文摘
气味结合蛋白在昆虫对寄主挥发性气味识别过程中有着重要的生理功能。本研究通过对草地螟Loxostege sticticalis L.普通气味结合蛋白Ⅰ(Lsti-GOBP1)进行克隆及原核表达的基础上,分离纯化得到体外重组的Lsti-GOBP1蛋白。并利用N-苯基-1-萘胺(N-phenyl-1-naphthylamine,1-NPN)作为荧光探针研究了Lsti-GOBP1蛋白与醇类、醛类、酯、烯等50种气味标样的结合特性,结果表明Lsti-GOBP1可与其中35种气味化合物结合,但只有1-己醇、1-庚醇、肉桂醛和莰烯4种气味标样能在20μmol/L浓度(探针与蛋白结合的饱和浓度值)下将1-NPN从Lsti-GOBP1中替换50%,其结合常数分别为8.997,7.283,7.289和9.814μmol/L。据此可以得出,Lsti-GOBP1蛋白的气味物质结合谱很广,同时具有较强的特异性,其中1-己醇、1-庚醇、肉桂醛、莰烯等化合物在草地螟识别寄主植物气味物质的过程中起重要作用。
关键词
草地螟
普通气味结合蛋白Ⅰ
蛋白表达
纯化
N-苯基-
1
-萘胺
荧光结合实验
Keywords
Loxostege sticticalis
general
odorant
binding
protein
Ⅰ
(gobp
1)
protein
expression
purification
N-phenyl-
1
-naphthylamine
fluorescent
binding
assay
分类号
Q966 [生物学—昆虫学]
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职称材料
题名
斜纹夜蛾普通气味结合蛋白基因SlitGOBP1的克隆及序列分析
被引量:
8
2
作者
钟国华
李苗孟
胡美英
罗倩
马金亮
机构
华南农业大学昆虫毒理研究室
出处
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第2期38-43,共6页
基金
国家自然科学基金(30671387和30770291)
农药与化学生物学教育部重点实验室开放基金
文摘
通过PCR扩增结合RACE技术克隆获得斜纹夜蛾Spodoptera litura普通气味结合蛋白1(GOBP1)基因(Slit—GOBP1)全序列.序列测定和结构分析表明,SlitGOBP1阅读框全长为495bp,编码164个氨基酸残基,预测相对分子质量和等电点分别为19270和5.29,与已报道的10种鳞翅目昆虫GOBP1相似性为90%-41%.cDNA序列GenBank登录号为EF159978.SlitGOBP1序列中有6个保守的半胱氨酸位点,具有GOBP1的典型特征.SlitGOBP1编码的蛋白呈酸性,整个分子呈亲水性,在第40-60位和100位以后的氨基酸表现亲脂性,蛋白质二级结构主要由α螺旋构成.氨基酸序列系统进化树分析表明,昆虫间GOBP1分子具有明显的保守性,SlitGOBP1与夜蛾科的烟青虫Helicoverpa assulta、烟芽夜蛾Heliothis virescerts和棉铃虫Helicoverpa armigera GOBP1属于一个分支,相似性分别为78.1%、87.6%和79.9%、这些结果为进一步了解斜纹夜蛾感受环境信息分子机制,研制昆虫行为调节剂提供了基础.
关键词
斜纹夜蛾
普通气味结合蛋白
1
基因克隆
序列分析
Keywords
Spodoptera litura
general odorant binding protein 1 (gobp1)
gene cloning
sequence analysis
分类号
S433.4 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
八字地老虎GOBP1基因的克隆、序列分析与原核表达
3
作者
王舒
韩岚岚
赵寅
赵奎军
机构
东北农业大学农学院
黑龙江省富裕县农业技术推广中心
出处
《大豆科学》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期467-472,共6页
基金
现代农业产业技术体系建设专项(CARS-04)
公益性行业(农业)专项资助(201103002)
文摘
GOBP1蛋白作为昆虫化学感受机制的重要蛋白,对于研究气味调控防治害虫有重要意义。采用RT-PCR技术以八字地老虎的触角总RNA为模板进行克隆得到1条1 260 bp的八字地老虎GOBP1基因片段(GenBank登录号为JX978464),编码161个氨基酸残基,预测分子量约为18.6 kD,等电点5.14。生物信息学在线预测分析表明:八字地老虎GOBP1核苷酸序列与黄地老虎Agrotis segetum(登录号为DQ838577.1)同源性最高,为97%,与其他昆虫的同源性达80%以上。构建了重组表达质粒pET21-b/Acni GOBP1原核表达后检测到18.6 kD的外源蛋白,Western bolt检测该蛋白是目的蛋白。结果为深入研究GOBP1基因以及通过气味调控防治害虫提供了基础资料。
关键词
大豆
八字地老虎
克隆
原核表达
序列分析
Keywords
Soybean
Agrotis c-nigrum
general
odorant
binding
protein
1
Cloning
Prokaryotic expression
Sequence analysis
分类号
S435.651 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
草地螟普通气味结合蛋白Ⅰ(Lsti-GOBP1)蛋白表达纯化及结合特性分析
孙红岩
尹姣
冯红林
李克斌
席景会
曹雅忠
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
14
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
斜纹夜蛾普通气味结合蛋白基因SlitGOBP1的克隆及序列分析
钟国华
李苗孟
胡美英
罗倩
马金亮
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
8
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
八字地老虎GOBP1基因的克隆、序列分析与原核表达
王舒
韩岚岚
赵寅
赵奎军
《大豆科学》
CAS
CSCD
北大核心
2013
0
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