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人CIDE3基因克隆和真核表达载体构建及促凋亡作用的研究被引量：5: 1; 作者王淑芳李青 +5 位作者姚丽程虹张静叶菁李繁烦李南林《医学研究生学报》 CAS 2007年第7期682-684,688,787,共5页; 目的:克隆人诱导细胞死亡的DFF45样效应因子3(CIDE3)全长基因,构建真核表达质粒pcDNA3.l(+)-CIDE3,并检测其促凋亡作用。方法:①提取人腹部皮下白色脂肪组织的总RNA,经RT-PCR获得CIDE3全长基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.l(+),构建重组... 展开更多; 关键词人诱导细胞死亡的DFF45样效应因子3 基因克隆真核表达凋亡; 在线阅读下载PDF 职称材料

利用Cre/loxP重组系统构建甜菜碱合成酶多基因表达载体被引量：4: 2; 作者王亮苏乔安利佳《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期749-754,共6页; 通过使用一套基于Cre/loxP重组系统的植物多基因表达载体构建系统,将辽宁碱蓬（Suaeda liaotungesis kitag）的胆碱单加氧酶（CMO）基因、甜菜碱醛脱氢酶（BADH）基因以及烟草的核基质结合区（MAR）序列构建到同一表达载体上,得到可直... 展开更多; 关键词 CRE/LOXP重组系统甘氨酸甜菜碱 CMO BADH MAR 多基因表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

拟南芥rd29A的功能鉴定及植物表达载体的构建被引量：2: 3; 作者吴杨贺俐 +1 位作者赵书环张木清《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2008年第6期614-619,共6页; 利用PCR技术从拟南芥(Arabidopsis thaliana)基因组中分离了rd29A基因上游420 bp的调控序列,序列分析表明,该片段与已报道的rd29A启动子有100%的同源性,包括DRE、ABRE等顺式作用元件.用rd29A启动子构建了具有绿色荧光蛋白(GFP)基因的植... 展开更多; 关键词 RD29A 启动子甘蔗表达载体 DREB; 在线阅读下载PDF 职称材料

植物抗体基因工程：Ⅲ．马铃薯Y病毒小鼠中和抗体链基因的序列分析及其植物表达载体的构建被引量：1: 4; 作者刘德虎陈三凤 +1 位作者王海扬李刚强《高技术通讯》 CAS CSCD 1995年第4期46-46,共1页; 序列分析表明，马铃薯Ｙ病毒小鼠中和抗体轻链基因（Ｋ６）全长为９５６个核苷酸碱基（不包括ｐｏｌｙ（Ａ）尾巴），其中包括５＇端非编码区３１个核苷酸碱基，编码轻链信号肽的５７个核苷酸碱基，编码成熟蛋白的６５７个核苷酸基和３... 展开更多; 关键词马铃薯Y病毒单克隆抗体基因工程植物抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

突变型PUMA质粒的构建及表达被引量：1: 5; 作者黄伟万福生《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第4期341-345,共5页; 目的构建促凋亡基因p53上调凋亡调制物(PU-MA)的真核表达载体和针对其磷酸化位点定点突变的真核表达载体,为进一步研究其功能奠定基础。方法通过PCR方法从pCEP4-(HA)2-PUMA质粒中扩增PUMA基因,并克隆到pIRES2-EGFP载体上,构建PUMA真核... 展开更多; 关键词 p53上调凋亡调制物 PIRES2-EGFP 定点突变真核表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

丙型肝炎病毒丝氨酸蛋白酶基因痘苗病毒表达载体的构建及序列分析: 6; 作者汪涛齐连权 +3 位作者徐俊杰郭华章金伯泉王海涛《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第3期176-177,200,共3页; 应用反转录巢式PCR扩增出丙型肝炎病毒丝氨酸蛋白酶基因,并克隆到痘苗病毒表达载体pSC65中。载体上设计一测序引物,经序列测定证明,已将543个bp长的丝氨酸蛋白酶基因片段正确插入载体。此结果为丙型肝炎病毒NS3区丝氨酸蛋白酶基因在痘... 展开更多; 关键词丙型肝炎病毒丝氨酸蛋白酶痘苗病毒表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

GFP-pl6融合基因表达载体的构建: 7; 作者李华刘维全 +2 位作者崔振中金春元王太一《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1997年第2期125-128,共4页; 本文报道了以ＧＦＰ（绿色荧光蛋白）基因为报告基因，ｐｌ６基因为目的基因，将ｐｌ６基因分别插入ＧＦＰ基因的上游和下游，构建成ＧＦＰ－ｐｌ６融合基因表达载体ｐＣｐｌ６Ｇ和ｐＣＧｐ１６，并通过酶切、电泳技术对重组体进行了鉴定。; 关键词融合基因表达载体转基因动物模型 P16基因 GFP基因 CG 构建目的基因重组体绿色荧光蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人CIDE3基因克隆和真核表达载体构建及促凋亡作用的研究被引量：5: 1; 作者王淑芳李青姚丽程虹张静叶菁李繁烦李南林; 机构第四军医大学西京医院病理科第四军医大学西京医院血管外科; 出处《医学研究生学报》 CAS 2007年第7期682-684,688,787,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(批准号:30671087); 文摘目的:克隆人诱导细胞死亡的DFF45样效应因子3(CIDE3)全长基因,构建真核表达质粒pcDNA3.l(+)-CIDE3,并检测其促凋亡作用。方法:①提取人腹部皮下白色脂肪组织的总RNA,经RT-PCR获得CIDE3全长基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.l(+),构建重组质粒pcDNA3.l(+)-CIDE3,并进行序列测定。②用脂质体法将pcDNA3.l(+)-CIDE3转染人宫颈癌细胞系HeLa细胞,通过TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果:①经RT-PCR扩增得到特异性717 bp的目的片段,构建的重组质粒pcDNA3.l(+)-CIDE3经序列测定,结果与Genbank发表的序列完全一致。②转染Hela细胞后,经Tunel染色法检测发现,转染pcDNA3.l(+)-CIDE3后有大约25%的细胞发生了凋亡,与转染空质粒pcDNA3.l(+)(<5%)及未转染质粒的细胞相比,其凋亡细胞明显增多。结论:成功克隆了人CIDE3全长基因,构建了真核表达质粒pcDNA3.l(+)-CIDE3,并验证了CIDE3基因可诱导细胞发生凋亡的生物学作用,为进一步研究CIDE3的生物学功能奠定了坚实基础。; 关键词人诱导细胞死亡的DFF45样效应因子3 基因克隆真核表达凋亡; Keywords Cell death-inducing DFFd5-1ike effectors 3 Gene clone Eukaryotic expressionvector Apoptosis; 分类号 R780.2 [医药卫生—口腔医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名利用Cre/loxP重组系统构建甜菜碱合成酶多基因表达载体被引量：4: 2; 作者王亮苏乔安利佳; 机构大连理工大学环境与生命学院生物科学与工程系; 出处《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期749-754,共6页; 基金 863计划（JY03-B-18）资助项目.; 文摘通过使用一套基于Cre/loxP重组系统的植物多基因表达载体构建系统,将辽宁碱蓬（Suaeda liaotungesis kitag）的胆碱单加氧酶（CMO）基因、甜菜碱醛脱氢酶（BADH）基因以及烟草的核基质结合区（MAR）序列构建到同一表达载体上,得到可直接用于农杆菌转化的植物表达载体pYLTAC747H-MAR-BADH-CMO-MAR.该甜菜碱合成酶多基因表达载体的成功构建为进一步进行植物的遗传转化,以有效提高转基因植株的耐盐性提供了实验基础.实验中,用热激法替代了电击法进行质粒的大肠杆菌转化,并去掉了透析等步骤,简化了构建过程.; 关键词 CRE/LOXP重组系统甘氨酸甜菜碱 CMO BADH MAR 多基因表达载体; Keywords Cre/loxP recombination system, glycinebetaine, CMO, BADH, MAR, muhi-gene plant expressionvector; 分类号 Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名拟南芥rd29A的功能鉴定及植物表达载体的构建被引量：2: 3; 作者吴杨贺俐赵书环张木清; 机构福建农林大学农业部甘蔗生理生态与遗传改良重点实验室井冈山大学生命科学学院; 出处《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2008年第6期614-619,共6页; 基金国家“863”计划课题“糖料新品种选育”(2001AA241191) 国家自然科学基金(30370901) 教育部高等学校博士学科点专项科研基金项目(20040389009); 文摘利用PCR技术从拟南芥(Arabidopsis thaliana)基因组中分离了rd29A基因上游420 bp的调控序列,序列分析表明,该片段与已报道的rd29A启动子有100%的同源性,包括DRE、ABRE等顺式作用元件.用rd29A启动子构建了具有绿色荧光蛋白(GFP)基因的植物表达载体,通过基因枪导入法转化甘蔗愈伤组织,经过抗性筛选获得再生植株,在PEG胁迫下,用荧光显微镜观察到s65t(GFP)基因在愈伤组织和叶片中表达,通过PCR鉴定获得了5株转基因植株.同时本文还构建了由rd29A调控的DREB2B基因的植物表达载体rd29A-dreb-hyg.; 关键词 RD29A 启动子甘蔗表达载体 DREB; Keywords rd29A promoter Saccharum officinarum expressionvector dehydration responsive elements binding protein; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名植物抗体基因工程：Ⅲ．马铃薯Y病毒小鼠中和抗体链基因的序列分析及其植物表达载体的构建被引量：1: 4; 作者刘德虎陈三凤王海扬李刚强; 机构中国农业科学院生物技术研究中心分子生物学室; 出处《高技术通讯》 CAS CSCD 1995年第4期46-46,共1页; 基金国家自然科学基金 863青年科学基金; 文摘序列分析表明，马铃薯Ｙ病毒小鼠中和抗体轻链基因（Ｋ６）全长为９５６个核苷酸碱基（不包括ｐｏｌｙ（Ａ）尾巴），其中包括５＇端非编码区３１个核苷酸碱基，编码轻链信号肽的５７个核苷酸碱基，编码成熟蛋白的６５７个核苷酸基和３＇端非编码区的２１１个核苷酸碱基。与已知的其它Ｋ轻链基因（ＭＲＫ１６）相比，核苷酸的序列同源性为９８．７％，由核苷酸序列所推导出的氨基酸序列同源性为９７．０％，其变异主要发生在三个抗原识别位点内（ＣＯＲ）。将完整的抗体轻链基因正向插入植物表达载体ｐＢ１２１中的原ＧＵＳ基因位置上，置于花椰菜花叶病毒３５Ｇ启动子控制之下，获得了能够在植物细胞内表达马铃薯Ｙ病毒中和抗体轻链基因的植物表达载体ｐＹＬ。; 关键词马铃薯Y病毒单克隆抗体基因工程植物抗体; Keywords Potato Virus Y,Immunoglobulin,Kappa light chain,Sequence analysis,Plant expressionvector; 分类号 S188 [农业科学—农业基础科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名突变型PUMA质粒的构建及表达被引量：1: 5; 作者黄伟万福生; 机构南昌大学生物化学与分子生物学教研室南昌大学实验动物科学部; 出处《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第4期341-345,共5页; 基金江西省自然科学基金(编号:2010JZY0237); 文摘目的构建促凋亡基因p53上调凋亡调制物(PU-MA)的真核表达载体和针对其磷酸化位点定点突变的真核表达载体,为进一步研究其功能奠定基础。方法通过PCR方法从pCEP4-(HA)2-PUMA质粒中扩增PUMA基因,并克隆到pIRES2-EGFP载体上,构建PUMA真核表达载体pIRES2-EGFP-(HA)2-PUMA,利用定点突变技术构建pIRES2-EGFP-(HA)2-PUMA-T28G,行PCR及测序鉴定;脂质体分别将两种质粒转染Hela细胞,同时设未转染的阴性对照组及转染空载体组(4个实验组);PI染色观察PUMA对细胞的促凋亡作用;流式细胞仪检测细胞凋亡率;RT-PCR检测PUMA的表达;Western blot检测突变型PUMA蛋白和标签蛋白的表达。结果经PCR及测序结果表明,正确构建野生型、突变型PUMA重组质粒,PUMA基因第10位氨基酸的第28～30位碱基由丝氨酸(TCC)突变为丙氨酸(GCC),其他碱基均无突变;野生型、突变型PUMA重组质粒转染Hela细胞荧光显微镜观察到绿色荧光,而PI染色观察到野生型、突变型PUMA对Hela细胞的促凋亡作用;流式细胞术检测结果显示突变型和野生型PUMA转染组凋亡率高于阴性对照组和空载体转染组;Western blot和RT-PCR检测出目的基因的高表达。结论成功构建了PUMA基因及其定点突变载体,为深入研究PUMA基因的抑癌功能及其翻译后调节奠定基础。; 关键词 p53上调凋亡调制物 PIRES2-EGFP 定点突变真核表达载体; Keywords P53-upregulated modifier of apoptosis plRES2-EGFP site-directed mutagenesis ukaryotic expressionvector; 分类号 R737.33 [医药卫生—肿瘤] R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名丙型肝炎病毒丝氨酸蛋白酶基因痘苗病毒表达载体的构建及序列分析: 6; 作者汪涛齐连权徐俊杰郭华章金伯泉王海涛; 机构航天医学工程研究所军事医学科学院微生物流行病研究所第四军医大学免疫学教研室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第3期176-177,200,共3页; 基金国家自然科学基金!No.39630 0 2 0; 文摘应用反转录巢式PCR扩增出丙型肝炎病毒丝氨酸蛋白酶基因,并克隆到痘苗病毒表达载体pSC65中。载体上设计一测序引物,经序列测定证明,已将543个bp长的丝氨酸蛋白酶基因片段正确插入载体。此结果为丙型肝炎病毒NS3区丝氨酸蛋白酶基因在痘苗病毒中的表达,以及建立HCV特异的CTL靶细胞打下基础。; 关键词丙型肝炎病毒丝氨酸蛋白酶痘苗病毒表达载体; Keywords hepatitisCvirus serineprotease vacciniavirus expressionvector; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名GFP-pl6融合基因表达载体的构建: 7; 作者李华刘维全崔振中金春元王太一; 机构中国医科大学实验动物学部解放军农牧大学军事兽医研究所病毒室中国农业大学生物学院动物生化室; 出处《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1997年第2期125-128,共4页; 文摘本文报道了以ＧＦＰ（绿色荧光蛋白）基因为报告基因，ｐｌ６基因为目的基因，将ｐｌ６基因分别插入ＧＦＰ基因的上游和下游，构建成ＧＦＰ－ｐｌ６融合基因表达载体ｐＣｐｌ６Ｇ和ｐＣＧｐ１６，并通过酶切、电泳技术对重组体进行了鉴定。; 关键词融合基因表达载体转基因动物模型 P16基因 GFP基因 CG 构建目的基因重组体绿色荧光蛋白; Keywords GFP gene pl6 gene Fusion gene expressionvector; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人CIDE3基因克隆和真核表达载体构建及促凋亡作用的研究	王淑芳李青姚丽程虹张静叶菁李繁烦李南林	《医学研究生学报》 CAS	2007	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	利用Cre/loxP重组系统构建甜菜碱合成酶多基因表达载体	王亮苏乔安利佳	《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心	2007	4	在线阅读下载PDF 职称材料
3	拟南芥rd29A的功能鉴定及植物表达载体的构建	吴杨贺俐赵书环张木清	《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2008	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	植物抗体基因工程：Ⅲ．马铃薯Y病毒小鼠中和抗体链基因的序列分析及其植物表达载体的构建	刘德虎陈三凤王海扬李刚强	《高技术通讯》 CAS CSCD	1995	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	突变型PUMA质粒的构建及表达	黄伟万福生	《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心	2013	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	丙型肝炎病毒丝氨酸蛋白酶基因痘苗病毒表达载体的构建及序列分析	汪涛齐连权徐俊杰郭华章金伯泉王海涛	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD	1999	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	GFP-pl6融合基因表达载体的构建	李华刘维全崔振中金春元王太一	《中国实验动物学报》 CAS CSCD	1997	0	在线阅读下载PDF 职称材料