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巨噬细胞特异性启动子调控的真核表达载体的构建及靶向性研究
被引量：
1
1
作者
文阳安
郭金英
+5 位作者
余晓林
岑东
刘靳波
陈彦
张健
涂植光
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期441-443,共3页
目的:构建巨噬细胞特异性启动子调控的靶向巨噬细胞的真核表达载体。方法:PCR方法合成巨噬细胞特异性启动子,并将其插入带有绿色荧光蛋白(GFP)基因的真核表达载体pEGFP-N1中,替代CMV启动子。利用脂质体转染法,将其与红色荧光蛋白真核表...
目的:构建巨噬细胞特异性启动子调控的靶向巨噬细胞的真核表达载体。方法:PCR方法合成巨噬细胞特异性启动子,并将其插入带有绿色荧光蛋白(GFP)基因的真核表达载体pEGFP-N1中,替代CMV启动子。利用脂质体转染法,将其与红色荧光蛋白真核表达载体(pERFP-N1)共转染巨噬细胞和非巨噬细胞,通过荧光显微镜观察GFP和RFP在不同细胞中的表达水平来鉴定启动子的靶向性。结果:成功构建了巨噬细胞特异性启动子调控的真核表达载体,并且能在巨噬细胞中高效特异性地表达报告基因。结论:构建的靶向巨噬细胞的真核表达载体能提高目的基因的表达特异性,为提高基因治疗胞内菌感染的靶向性及降低毒副作用奠定了实验基础。
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关键词
巨噬细胞
细胞特异性
启动子
真核表达载体
胞内菌感染
基因治疗
在线阅读
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职称材料
抗血管生成肽βpep-25重组原核表达质粒的构建及鉴定
2
作者
李恩孝
刘陕西
+3 位作者
杨广笑
王全颖
吴胤瑛
施璠
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期154-156,160,共4页
目的:合成抗血管生成肽βpep-25片断,构建并鉴定含βpep-25肽的重组原核表达质粒。方法:人工设计合成βpep-25肽序列片断,经测序正确后,利用基因克隆技术将其克隆到pGEM-Teasy载体中,构建重组质粒pGEM-T-βpep-25;用NaeI和BamHI双酶切pG...
目的:合成抗血管生成肽βpep-25片断,构建并鉴定含βpep-25肽的重组原核表达质粒。方法:人工设计合成βpep-25肽序列片断,经测序正确后,利用基因克隆技术将其克隆到pGEM-Teasy载体中,构建重组质粒pGEM-T-βpep-25;用NaeI和BamHI双酶切pGEM-T-βpep-25后,将T-βpep-25肽片断克隆到经NaeI和BamHI双酶切的重组载体pBV220-NT4中,构建重组原核表达质粒pBV220-NT4-βpep-25,并对其分别用BamHI酶切,EcoRI和BamHI双酶切分析。结果:经酶切分析和DNA测序人工合成的肽βpep-25序列(113bp)与文献报道结果一致;分别用BamHI酶切,EcoRI和BamHI双酶切重组原核表达质粒pBV220-NT4-βpep-25可以得到4030bp、364bp和3666bp的片段,结果表明目的肽片段已经成功地克隆到了重组表达载体中,说明重组原核表达质粒构建成功。结论:抗血管生成肽βpep-25重组原核表达质粒的构建成功,为进一步在细胞内外及动物模型研究其作用机制和抗肿瘤作用奠定了基础。
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关键词
抗血管生成
肽
βpep-25
原核表达载体
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职称材料
题名
巨噬细胞特异性启动子调控的真核表达载体的构建及靶向性研究
被引量：
1
1
作者
文阳安
郭金英
余晓林
岑东
刘靳波
陈彦
张健
涂植光
机构
重庆医科大学医学检验系
西南大学医院
重庆医科大学附属第一医院骨科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期441-443,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(30600790)
文摘
目的:构建巨噬细胞特异性启动子调控的靶向巨噬细胞的真核表达载体。方法:PCR方法合成巨噬细胞特异性启动子,并将其插入带有绿色荧光蛋白(GFP)基因的真核表达载体pEGFP-N1中,替代CMV启动子。利用脂质体转染法,将其与红色荧光蛋白真核表达载体(pERFP-N1)共转染巨噬细胞和非巨噬细胞,通过荧光显微镜观察GFP和RFP在不同细胞中的表达水平来鉴定启动子的靶向性。结果:成功构建了巨噬细胞特异性启动子调控的真核表达载体,并且能在巨噬细胞中高效特异性地表达报告基因。结论:构建的靶向巨噬细胞的真核表达载体能提高目的基因的表达特异性,为提高基因治疗胞内菌感染的靶向性及降低毒副作用奠定了实验基础。
关键词
巨噬细胞
细胞特异性
启动子
真核表达载体
胞内菌感染
基因治疗
Keywords
macrophage
cell-specific
promoter
eukary- otic expression vector
intracellular bacterial infection
gene therapy
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
抗血管生成肽βpep-25重组原核表达质粒的构建及鉴定
2
作者
李恩孝
刘陕西
杨广笑
王全颖
吴胤瑛
施璠
机构
西安交通大学医学院第一附属医院肿瘤内科
西安华广生物工程有限公司
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期154-156,160,共4页
基金
陕西省科学技术研究发展计划项目(No.2004K11-G3)
文摘
目的:合成抗血管生成肽βpep-25片断,构建并鉴定含βpep-25肽的重组原核表达质粒。方法:人工设计合成βpep-25肽序列片断,经测序正确后,利用基因克隆技术将其克隆到pGEM-Teasy载体中,构建重组质粒pGEM-T-βpep-25;用NaeI和BamHI双酶切pGEM-T-βpep-25后,将T-βpep-25肽片断克隆到经NaeI和BamHI双酶切的重组载体pBV220-NT4中,构建重组原核表达质粒pBV220-NT4-βpep-25,并对其分别用BamHI酶切,EcoRI和BamHI双酶切分析。结果:经酶切分析和DNA测序人工合成的肽βpep-25序列(113bp)与文献报道结果一致;分别用BamHI酶切,EcoRI和BamHI双酶切重组原核表达质粒pBV220-NT4-βpep-25可以得到4030bp、364bp和3666bp的片段,结果表明目的肽片段已经成功地克隆到了重组表达载体中,说明重组原核表达质粒构建成功。结论:抗血管生成肽βpep-25重组原核表达质粒的构建成功,为进一步在细胞内外及动物模型研究其作用机制和抗肿瘤作用奠定了基础。
关键词
抗血管生成
肽
βpep-25
原核表达载体
Keywords
antiangiogenesis
peptide
βpep-25
prokary-
otic
expression
vector
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
巨噬细胞特异性启动子调控的真核表达载体的构建及靶向性研究
文阳安
郭金英
余晓林
岑东
刘靳波
陈彦
张健
涂植光
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
抗血管生成肽βpep-25重组原核表达质粒的构建及鉴定
李恩孝
刘陕西
杨广笑
王全颖
吴胤瑛
施璠
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
0
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