生长激素和胰岛素对体外培养猪COCs的影响

1

作者 王星 罗光彬 +3 位作者 姜午旗 李晟阳 刘宗岳 宁方勇 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期318-321,共4页

研究了生长激素(STH)和胰岛素(Insulin)对体外培养猪COCs卵母细胞成熟及孤雌激活后卵裂、卵丘细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响,结果表明:STH和Insulin对卵母细胞的成熟和激活后卵裂具有双重效应,培养液中添加适当浓度的STH(... 研究了生长激素(STH)和胰岛素(Insulin)对体外培养猪COCs卵母细胞成熟及孤雌激活后卵裂、卵丘细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响,结果表明:STH和Insulin对卵母细胞的成熟和激活后卵裂具有双重效应,培养液中添加适当浓度的STH(0.15μg·mL-1)或Insulin(5μg·mL-1)可提高卵母细胞成熟率和卵裂率,与对照组及其他试验组相比差异显著(p<0.05)。在猪COCs体外成熟过程中,适当浓度STH和Insulin能抑制卵丘细胞凋亡,抑制Bax在卵丘细胞的表达。 展开更多

关键词 生长激素 胰岛素 卵母细胞成熟 卵丘细胞凋亡 猪cocs

在线阅读 下载PDF 职称材料

不同等级牛卵丘-卵母细胞复合体体外成熟后卵母细胞发育能力差异的机制分析

2

作者 王蕊 衡诺 +10 位作者 胡樱凡 王欢 朱妮 何维 轩秀丽 胡智辉 熊铿 巩建飞 郝海生 朱化彬 赵善江 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第9期4432-4451,共20页

旨在探究不同等级牛卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs)体外成熟后卵母细胞发育能力差异的分子机制。本试验以屠宰场卵巢来源的牛COCs为研究对象,参照国际胚胎技术学会手册根据卵丘细胞层数、卵丘细胞紧密程度和卵母... 旨在探究不同等级牛卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs)体外成熟后卵母细胞发育能力差异的分子机制。本试验以屠宰场卵巢来源的牛COCs为研究对象,参照国际胚胎技术学会手册根据卵丘细胞层数、卵丘细胞紧密程度和卵母细胞细胞质外观将牛COCs分为一二级(较好)和三四级(较差)两组,每组3次重复,每个重复组含100枚以上COCs,进行体外成熟培养。本研究通过Smart-seq2技术对成熟前后的一二级和三四级COCs的卵母细胞进行了转录组测序并对差异基因进行了分析验证,利用非靶向代谢组学技术对不同级别COCs的培养液进行了差异代谢物分析。结果显示:1)三四级COCs的卵母细胞体外成熟、受精后的卵裂率和囊胚率(60.59%±6.54%,22.11%±2.79%)显著低于一二级(78.09%±3.01%,32.56%±4.33%,P<0.05);2)Smart-seq测序结果显示,体外成熟前一二级和三四级COCs的卵母细胞中共筛选出541个显著差异表达基因(DEGs),体外成熟22~24 h(体外成熟后)一二级和三四级卵母细胞中共筛选出860个显著DEGs,GO和KEGG富集分析结果显示,这些DEGs主要与糖代谢、氧化磷酸化信号通路相关;3)数字PCR结果显示,体外成熟前后三四级COCs的卵母细胞中糖酵解相关基因PKM和电子传递链复合物I相关抑制基因NDUFA4L2的拷贝数水平均显著低于一二级(P<0.01),体外成熟后三四级卵母细胞中电子供体生成相关基因IDH3α的拷贝数水平显著低于一二级(P<0.05);同样体外成熟前后三四级COCs的卵丘细胞中NDUFA4L2 mRNA表达水平显著低于一二级(P<0.05),但是PKM和IDH3αmRNA表达水平却显著高于一二级(P<0.05,P<0.01);4)代谢物分析结果显示,不同级别COCs的培养液中共鉴定出69种显著上调差异代谢物,71种显著下调差异代谢物,功能富集分析发现差异代谢物主要富集在三羧酸循环(TCA)、糖酵解/糖异生等代谢通路上,进一步对差异代谢物(α-D-葡萄糖、丙酮酸、乳酸)进行相对丰度分析发现三四级COCs成熟液中α-D-葡萄糖含量显著高于一二级(P<0.01)。5)在三四级COCs体外成熟液中添加糖酵解产物丙酮酸钠能够显著提高三四级COCs体外成熟、受精后的卵裂率(72.54%±4.79%vs.61.71%±4.75%)和囊胚率(30.63%±4.15%vs.22.72%±2.39%,P<0.05)。综上,本研究表明三四级COCs的卵母细胞体外成熟后发育能力差可能是由于其本身糖酵解活性较弱,加之其外围卵丘细胞能量底物供给不足,导致卵母细胞成熟时能量不足,发育能力受限;通过添加丙酮酸钠能够明显改善三四级COCs的卵母细胞体外成熟后发育能力,研究结果为提高COCs利用率和胚胎生产效率提供了理论依据。 展开更多

关键词 牛 卵丘卵母细胞复合体 体外成熟 糖代谢 丙酮酸钠

在线阅读 下载PDF 职称材料

猪卵母细胞体外成熟的影响因素 被引量：2

3

作者 华再东 郑新民 +3 位作者 魏庆信 许厚强 刘西梅 李莉 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期280-284,共5页

通过采集屠宰场废弃猪卵巢，体外分离和培养猪卵母细胞，探讨基础培养基、激素、卵泡直径大小及卵丘细胞层数对猪卵母细胞体外成熟的影响。结果表明：改良TCM199（mTCM199）较NCSU-23培养猪卵母细胞成熟率显著提高（P〈0．05）；基础培... 通过采集屠宰场废弃猪卵巢，体外分离和培养猪卵母细胞，探讨基础培养基、激素、卵泡直径大小及卵丘细胞层数对猪卵母细胞体外成熟的影响。结果表明：改良TCM199（mTCM199）较NCSU-23培养猪卵母细胞成熟率显著提高（P〈0．05）；基础培养基中添加PMSG、hcG和pFF，卵母细胞体外成熟率（80．63％）显著高于仅添加其中一种；从卵泡直径3～6mm和大于6mm卵泡获得的卵丘卵母细胞复合体（COCs），其体外培养成熟率（83．33％和76．43％）极显著高于卵泡直径在3mm以下获得的COCs成熟率（30．94％）；根据卵丘细胞层数把COCs分为A、B、C3级，其中A级和B级卵母细胞成熟率差异不显著，但都极显著高于C级卵母细胞的成熟率。 展开更多

关键词 猪 卵母细胞 体外成熟 卵丘卵母细胞复合体

在线阅读 下载PDF 职称材料

月份对绵羊卵母细胞采卵数及体外成熟的影响 被引量：2

4

作者 曹忻 张德荣 +1 位作者 罗海玲 石国庆 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第6期2347-2350,共4页

为研究不同月份对绵羊卵母细胞采卵数及体外成熟的影响,采用切割法获得不同月份绵羊卵母细胞,统计分析可用卵母细胞数和体外培养成熟率。结果表明:随着月份的延续,卵母细胞获得数从5月的(3.53±0.27)(个/d)稳步增加到11月的(5.16
... 为研究不同月份对绵羊卵母细胞采卵数及体外成熟的影响,采用切割法获得不同月份绵羊卵母细胞,统计分析可用卵母细胞数和体外培养成熟率。结果表明:随着月份的延续,卵母细胞获得数从5月的(3.53±0.27)(个/d)稳步增加到11月的(5.16±0.15)(个/d),差异极显著(P<0.01)。卵母细胞体外成熟率也显著提高,其中8月份成熟率极显著高于5月、6月、7月(P<0.01);9月、10月、11月卵母细胞成熟率又极显著的高于8月(P<0.01),同时季节和气温对绵羊卵母细胞采卵数和利用也有显著影响(P<0.01)。因此,不同月份采卵显著影响可用绵羊卵母细胞数和卵母细胞体外成熟水平。 展开更多

关键词 月份 卵丘卵母细胞 卵母细胞体外成熟 绵羊

在线阅读 下载PDF 职称材料

猪卵母细胞极体排出的规律 被引量：1

5

作者 刘西梅 华再东 +3 位作者 魏庆信 乔宪凤 李莉 肖红卫 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第24期5172-5174,5190,共4页

试验把猪卵丘-卵母细胞复合体(Cumulus-oocyte complexes,COCs)于体外分别培养24、32、38、44、48和54 h,观察它们在不同时间排出的极体数,以研究体外卵母细胞排出极体的规律。结果表明,A级和B级的COCs培养48 h的极体排出率最高(83.2%和... 试验把猪卵丘-卵母细胞复合体(Cumulus-oocyte complexes,COCs)于体外分别培养24、32、38、44、48和54 h,观察它们在不同时间排出的极体数,以研究体外卵母细胞排出极体的规律。结果表明,A级和B级的COCs培养48 h的极体排出率最高(83.2%和65.7%),明显高于同级水平培养24、32和38 h的;不同级别COCs体外培养相同时间后,A级与B级的极体排出率差异不显著(P﹥0.05),但两者与C级的差异显著(P﹤0.05)。由此可见,A级、B级COCs能获得高的极体排出率,培养48 h的极体排出达到高峰,排出过程呈现前期上升快、后期下降慢的变化趋势。 展开更多

关键词 猪 卵丘-卵母细胞复合体 体外成熟 极体

在线阅读 下载PDF 职称材料

牛体外胚胎培养技术研究进展 被引量：1

6

作者 许红喜 于治国 孙晓玉 《中国牛业科学》 2018年第2期64-66,共3页

为提高优秀淘汰牛的利用价值,国内外对牛体外胚胎培养技术做了大量研究,本文针对牛体外卵子获得方式、卵子体外成熟培养、成熟卵母细胞与冻精或性控冻精体外受精及受精卵体外培养发育到囊胚等关键技术的研究进展做一综述。

关键词 活体采卵 卵丘细胞卵母细胞复合体 体外受精 囊胚

在线阅读 下载PDF 职称材料

雪龙黑牛试管胚胎产业化生产培养方法的建立 被引量：2

7

作者 许红喜 邢雪森 +3 位作者 王秀利 仇雪梅 刘雪江 吴蒙 《中国奶牛》 2012年第4期32-34,共3页

为充分利用雪龙兼松屠宰场废弃的优秀母牛卵巢,加速雪龙黑牛培育进程,满足高档牛肉市场需求,本文对胚胎生产体外受精3个关键技术环节进行了试验研究,共做了15批次试验,包括卵母细胞体外成熟培养的试验研究,卵母细胞体外受精试验研究以... 为充分利用雪龙兼松屠宰场废弃的优秀母牛卵巢,加速雪龙黑牛培育进程,满足高档牛肉市场需求,本文对胚胎生产体外受精3个关键技术环节进行了试验研究,共做了15批次试验,包括卵母细胞体外成熟培养的试验研究,卵母细胞体外受精试验研究以及受精卵体外培养试验研究。结果显示,卵母细胞的成熟率达98.6%,卵裂率为86.5%,囊胚发育率为36.8%。初步建立了一整套雪龙黑牛试管胚胎产业化生产培养方法和技术。 展开更多

关键词 卵母细胞卵丘细胞复合体 卵裂率 囊胚发育率:体外受精技术

在线阅读 下载PDF 职称材料

牛卵母细胞体外成熟和体外受精技术的研究进展 被引量：5

8

作者 柏家林 关红梅 《国外畜牧科技》 1998年第4期27-31,共5页

论述牛卵母细胞体外成熟和体外受精的最新研究进展，包括卵丘卵母细胞复合体、卵母细胞的体内、体外成熟，以及体内、体外的异常成熟和卵母细胞的体外成熟方法，无蛋白质、无血清系统的限定性培养液的研究进展，卵母细胞体外成熟状态与... 论述牛卵母细胞体外成熟和体外受精的最新研究进展，包括卵丘卵母细胞复合体、卵母细胞的体内、体外成熟，以及体内、体外的异常成熟和卵母细胞的体外成熟方法，无蛋白质、无血清系统的限定性培养液的研究进展，卵母细胞体外成熟状态与标志的某些理论上的突破；体外受精中精子供体的选择、精子活力和正常形态的选择、冷冻解冻精液的体外获能、精子的体外受精力，以及体外的异常受精； 展开更多

关键词 牛 卵母细胞 体外成熟 体外受精 精子获能

在线阅读 下载PDF 职称材料

孕晚期人未成熟卵母细胞的体外成熟:一种新的卵母细胞来源

9

作者 石宇 龙晓林 +6 位作者 杜红姿 黄玉玲 黄青 杨建华 张伟良 刘见桥 许海燕 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期1367-1371,共5页

目的探讨来源于孕晚期、自然周期及Gn刺激周期(包括超促排周期及IVM周期)的人未成熟卵母细胞体外成熟的差异及颗粒细胞对孕晚期卵母细胞体外成熟的影响。方法共获得未成熟卵母细胞1076枚,包括OCC633枚和DO453枚。其中OCC分为孕晚期组、... 目的探讨来源于孕晚期、自然周期及Gn刺激周期(包括超促排周期及IVM周期)的人未成熟卵母细胞体外成熟的差异及颗粒细胞对孕晚期卵母细胞体外成熟的影响。方法共获得未成熟卵母细胞1076枚,包括OCC633枚和DO453枚。其中OCC分为孕晚期组、自然周期组和IVM周期组;DO分为孕晚期组、自然周期组和超促排卵周期组;孕晚期来源的未成熟卵母细胞分为OCC组和DO组。所有未成熟卵母细胞体外成熟后,ICSI受精序贯培养,除IVM周期组行胚胎移植外,其余均培养至囊胚阶段。分别比较OCC和DO各组未成熟卵母细胞的成熟率、受精率、卵裂率和孕晚期组、自然周期组和超促排卵周期组的囊胚形成率,统计IVM周期组的移植周期妊娠率;比较孕晚期OCC组与DO组的成熟率、受精率、卵裂率和囊胚形成率。结果OCC:孕晚期组、自然周期组及IVM周期组的体外成熟率分别为74.3%、76.9%和82.2%,孕晚期组与IVM周期组相比具有统计学差异;三组受精率、卵裂率相比,孕晚期组和自然周期组囊胚形成率相比均未见统计学差异,IVM周期组移植周期妊娠率为20%。DO:超促排卵周期组体外成熟率最高(86.0%),明显高于自然周期组(72.5%)和孕晚期组(72.7%),P<0.01;孕晚期组受精率、卵裂率、囊胚形成率分别为65.0%、83.3%和38.5%,与其他两组相比均亦未见统计学差异。孕晚期OCC组与DO组的成熟率、受精率、卵裂率和囊胚形成率无差别。结论孕晚期来源的未成熟卵母细胞在体外具有同样的发育潜能,孕晚期捐献的卵母细胞可作为一种供卵来源;有无颗粒细胞并不影响孕晚期卵母细胞的发育能力。 展开更多

关键词 孕晚期 卵母细胞 体外成熟 精子注射 卵母细胞-卵丘复合体

在线阅读 下载PDF 职称材料

miRNA-205在猪卵母细胞成熟过程中表达规律及其调控作用的研究

10

作者 陈超 李万宏 +4 位作者 孙丽娜 陈树雄 陈璐 李纯锦 周虚 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第4期18-22,共5页

本试验旨在探索miRNA-205在猪卵母细胞成熟过程中表达规律及其调控功能。应用生物学软件TargetScan和microRNA.org对miRNA-205靶基因进行预测,利用实时荧光定量PCR方法分别检测miRNA-205及其靶基因在猪卵丘卵母细胞复合体(cumulus-oocyt... 本试验旨在探索miRNA-205在猪卵母细胞成熟过程中表达规律及其调控功能。应用生物学软件TargetScan和microRNA.org对miRNA-205靶基因进行预测,利用实时荧光定量PCR方法分别检测miRNA-205及其靶基因在猪卵丘卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs)成熟过程中0、24和48h表达量。结果表明,miRNA-205在猪COCs成熟过程中表达呈上升趋势,0h表达量最低,48h表达量最高。添加FSH、LH和EGF的成熟液组与成熟基液组相比,miRNA-205表达量显著下调,长正五聚蛋白(PTX3)表达量极显著上调(P<0.01),PTX3与miRNA-205的表达量呈负相关,卵丘细胞扩散标记基因肿瘤致死因子(TNFAIP6)和透明质酸合成酶(HAS2)的表达量极显著上调(P<0.01)。由此推断,miRNA-205保守序列可能与PTX3基因3′-UTR区特异性结合参与卵丘细胞扩散的调控。 展开更多

关键词 MIRNA 205 卵丘卵母细胞复合体 实时荧光定量PCR 卵母细胞成熟

在线阅读 下载PDF 职称材料

猪卵丘包裹层数与猪卵母细胞质量的相关性研究

11

作者 周荣 石俊松 +5 位作者 周秀 罗绿花 麦然标 王青来 蔡更元 吴珍芳 《广东畜牧兽医科技》 2014年第5期27-29,共3页

为探讨如何从大量的未成熟卵母细胞中挑选出合适的卵母细胞用于体外成熟培养,本研究根据猪卵丘-卵母细胞复合体（COCs）的颗粒细胞层数和胞质情况,把挑选的COCs分成A、B、C3个等级;体外成熟培养42~44 h后,所获得的成熟卵母细胞做孤雌激... 为探讨如何从大量的未成熟卵母细胞中挑选出合适的卵母细胞用于体外成熟培养,本研究根据猪卵丘-卵母细胞复合体（COCs）的颗粒细胞层数和胞质情况,把挑选的COCs分成A、B、C3个等级;体外成熟培养42~44 h后,所获得的成熟卵母细胞做孤雌激活,比较孤雌胚的发育能力。结果表明：A、B、C3级卵母细胞的成熟率之间没有差异（P〉0.05）,但是A级卵母细胞与B级卵母细胞的孤雌胚胎的囊胚率显著高于C级卵母细胞（P〈0.05）。说明卵丘细胞包裹层数不会影响卵母细胞的成熟率,但会影响其潜在的发育能力。 展开更多

关键词 猪 卵丘-卵母细胞复合体(cocs) 卵母细胞 质量

在线阅读 下载PDF 职称材料

ICR小鼠卵母细胞通过旁分泌机制促进排卵关键过程

12

作者 杨光平 张心悦 +1 位作者 时兰英 苏友强 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1055-1059,共5页

目的:利用国内医学研究常用ICR品系小鼠,在构建用于研究卵母细胞-卵丘细胞交互作用培养模型的基础上,研究卵母细胞及其产生的旁分泌因子生长分化因子9(GDF9)和骨形态发生蛋白15(BMP15)对排卵过程中的关键事件——卵丘扩展的调控作用。方... 目的:利用国内医学研究常用ICR品系小鼠,在构建用于研究卵母细胞-卵丘细胞交互作用培养模型的基础上,研究卵母细胞及其产生的旁分泌因子生长分化因子9(GDF9)和骨形态发生蛋白15(BMP15)对排卵过程中的关键事件——卵丘扩展的调控作用。方法:通过显微手术制备摘除卵母细胞后的卵丘细胞复合体(OOX),并通过与卵母细胞共培养或GDF9和BMP15处理研究卵母细胞及其特异释放的旁分泌因子对表皮生长因子(EGF)诱导卵丘扩展过程的调控。结果 :成功构建了ICR小鼠OOX培养模型,发现卵母细胞及其释放的旁分泌因子GDF9和BMP15为EGF诱导卵丘扩展所必需。结论:ICR小鼠卵母细胞通过旁分泌机制促进排卵关键过程。 展开更多

关键词 卵丘细胞复合体 卵母细胞 排卵 ICR小鼠 女性生殖

在线阅读 下载PDF 职称材料

降钙素基因相关肽对卵母细胞体外成熟的影响

13

作者 张哲 廖宏庆 +3 位作者 张硕屏 徐小明 龚斐 卢光琇 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期973-978,共6页

目的：探讨降钙素基因相关肽（calcitoningene．relatedpeptide，CGRP）对小鼠卵母细胞体外成熟的影响。方法：6周龄雌性昆明小鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素（pregnantmareserumgonadotropin，PMSG）10U48h后处死，取出卵巢收集卵母细... 目的：探讨降钙素基因相关肽（calcitoningene．relatedpeptide，CGRP）对小鼠卵母细胞体外成熟的影响。方法：6周龄雌性昆明小鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素（pregnantmareserumgonadotropin，PMSG）10U48h后处死，取出卵巢收集卵母细胞以30～40枚／孔的密度接种于培养板内，以不同浓度CGRV（0，10^-10，10^-9，10^-9mol／L）处理24h后检测生发泡破裂（germinalvesiclebreakdown，GVBD）率和第一极体（polarbodyI，PBI）排出率；收集、培养人卵巢颗粒细胞，以不同浓度CGRV（0，10^-10，10^-9，10^-8mol／L）处理24h后测定颗粒细胞内cAMP浓度。结果：外源性CGRP处理小鼠卵母细胞可浓度依赖性地降低GVBD率及PBI排出率；外源性CGRP处理人颗粒细胞，可浓度依赖性地增高细胞内cAMP浓度。结论：CGRP抑制小鼠卵母细胞成熟可能与其增加颗粒细胞内cAMP浓度有关。 展开更多

关键词 卵母细胞 体外成熟 降钙素基因相关肽 环磷酸腺苷

在线阅读 下载PDF 职称材料

EGF对猪卵母细胞体外成熟的影响

14

作者 焦亚飞 刘树林 +2 位作者 叶升 石德顺 黄奔 《黑龙江动物繁殖》 2020年第3期9-14,共6页

卵母细胞成熟质量是影响转基因猪生产效率的关键因素,而目前体外成熟的猪卵母细胞质量显著低于体内成熟,还有待研究提高。为此,试验以猪卵丘卵母细胞复合体(cumulus oocyte complexes,COCs)为研究对象,分析了表皮生长因子(epidermal gro... 卵母细胞成熟质量是影响转基因猪生产效率的关键因素,而目前体外成熟的猪卵母细胞质量显著低于体内成熟,还有待研究提高。为此,试验以猪卵丘卵母细胞复合体(cumulus oocyte complexes,COCs)为研究对象,分析了表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)对猪COCs体外成熟的影响,测定了卵母细胞第一极体排出率及孤雌激活后2-细胞率、4-细胞率及囊胚率,并分析了EGF对成熟相关基因和磷酸化Akt蛋白表达的影响。结果表明:(1)在成熟培养液中添加10 ng/mL EGF显著提高了卵母细胞第一极体排出率、2-细胞、4-细胞及囊胚比例,并且促进了卵丘细胞的扩展;(2)添加10 ng/mL EGF能促进猪卵母细胞GDF9、Akt、CDC2、细胞周期蛋白B(CyclinB1)、MOS和P34基因的表达水平;(3)添加10 ng/m L EGF可以显著提升Akt磷酸化水平。说明适宜浓度的EGF对猪卵母细胞的体外成熟具有促进作用,这一作用可能是通过激活PI3K/Akt信号通路实现的。 展开更多

关键词 EGF 猪 卵母细胞复合体 体外成熟 PI3K/AKT信号通路

在线阅读 下载PDF 职称材料