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猪瘟病毒囊膜蛋白E2的锚定序列部分缺失对其在细胞内表达的影响
被引量：
1
1
作者
贺番
王靖飞
+1 位作者
郝永清
仇华吉
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第5期342-346,共5页
为了将猪瘟病毒(CFSV)的囊膜蛋白表达在细胞表面,本研究根据与CSFV同属的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的囊膜蛋白E2锚定序列,推测出CSFV的E2锚定序列。利用生物信息学软件对CSFV的E2锚定序列进行分析、建模与部分缺失,构建成4种不同的表达CSF...
为了将猪瘟病毒(CFSV)的囊膜蛋白表达在细胞表面,本研究根据与CSFV同属的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的囊膜蛋白E2锚定序列,推测出CSFV的E2锚定序列。利用生物信息学软件对CSFV的E2锚定序列进行分析、建模与部分缺失,构建成4种不同的表达CSFV囊膜蛋白EmsE1E2的片段。将以上4种片段分别连接到真核表达载体pCAGGS中,转染幼仓鼠肾(BHK21)细胞,利用抗E2蛋白的单克隆抗体对表达蛋白进行westernblot检测与间接免疫荧光(IFA)检测,研究结果表明:跨膜区中锚定序列的部分缺失会降低E2在细胞内的表达,为猪瘟伪型病毒的研制提供了实验依据。
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关键词
猪瘟病毒
e2
囊膜蛋白
锚定序列
分子模拟技术
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职称材料
含绿色荧光蛋白基因和猪瘟E_2基因的伪狂犬病毒Bartha-K_(61)株TK基因缺失转移载体的构建
被引量：
11
2
作者
范伟兴
张雪莲
+2 位作者
魏荣
赵宏坤
陈溥言
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2003年第3期3-8,共6页
提取伪狂犬病毒 ( PRV) Bartha- K6 1 株基因组 DNA为 PCR扩增模板 ,并根据 Genbank已发表的 PRV Kaplan株 UL区 UL2 5、U L2 4、U L2 3、U L2 2基因序列 ,选择保守序列设计了两对引物 ,这两对引物分别扩增出位于 UL2 3( TK)两侧 (含部...
提取伪狂犬病毒 ( PRV) Bartha- K6 1 株基因组 DNA为 PCR扩增模板 ,并根据 Genbank已发表的 PRV Kaplan株 UL区 UL2 5、U L2 4、U L2 3、U L2 2基因序列 ,选择保守序列设计了两对引物 ,这两对引物分别扩增出位于 UL2 3( TK)两侧 (含部分TK基因 )的可用于同源重组的左臂片段 ( L )和右臂片段 ( R) ,L包括部分 UL 2 5、全部 UL 2 4、部分 TK,R包括部分 TK及部分U L2 2 ,L 和 R的拼接片段中 TK基因内部缺失 2 70个核苷酸。将 L 片段和 R片段克隆于 p Bluescript M13-载体上 ,获得p SKL R;再将绿色荧光蛋白载体 p EGFP- C1上含 GFP及其多克隆位点的完整的基因表达盒插入 p SKL R的 L 片段和 R片段之间构成转移载体 p SKL KG;又将猪瘟病毒 1.2 3 kb的 E2 ( CSFV- E2 )基因片段插入 p SKL RG的多克隆位点的 Bg1 与 Pst 之间获得转移载体 p SKL
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关键词
绿色荧光蛋白基因
伪狂犬病
伪狂犬病毒Bartha-K61株
TK基因
EGFP基因
猪瘟病毒
e2
基因
基因缺失
转移载体
疫苗
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职称材料
猪瘟病毒新疆南疆野毒株E_2基因高变区扩增及序列分析
3
作者
孟庆玲
陈创夫
+1 位作者
高丰
贾桂珍
《塔里木农垦大学学报》
2001年第4期12-16,共5页
参考已发表在GenBank中CSFVAlfort毒株的E2 蛋白基因序列 ,选择其抗原编码高变区作为扩增的靶区域 ,设计了一对特异性引物。用异硫氰酸胍 -酚 -氯仿一步法提取猪瘟病料细胞总RNA ,对其进行了RT -PCR扩增。结果得到了与设计大小 2 72bp...
参考已发表在GenBank中CSFVAlfort毒株的E2 蛋白基因序列 ,选择其抗原编码高变区作为扩增的靶区域 ,设计了一对特异性引物。用异硫氰酸胍 -酚 -氯仿一步法提取猪瘟病料细胞总RNA ,对其进行了RT -PCR扩增。结果得到了与设计大小 2 72bp完全相符的核酸带 ,并对PCR产物直接进行了核苷酸序列测定。将所测序列与中国C株同段序列进行了比较和分析。结果发现与中国C株核苷酸的同源性均为 82 .8% ;推导的氨基酸同源性为 88.3% ;两野毒株均有 33个碱基发生改变。并用此病料对 4 0日龄易感仔猪成功进行了人工感染试验 ,结果发现能引起比较典型的猪瘟临床症状和病理变化 。
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关键词
猪瘟病毒
新疆南疆野毒株
e2
基因高变区
PCR
序列分析
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职称材料
题名
猪瘟病毒囊膜蛋白E2的锚定序列部分缺失对其在细胞内表达的影响
被引量：
1
1
作者
贺番
王靖飞
郝永清
仇华吉
机构
内蒙古农业大学动物科学与医学学院
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第5期342-346,共5页
基金
国家973计划项目(2005CB523202)
文摘
为了将猪瘟病毒(CFSV)的囊膜蛋白表达在细胞表面,本研究根据与CSFV同属的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的囊膜蛋白E2锚定序列,推测出CSFV的E2锚定序列。利用生物信息学软件对CSFV的E2锚定序列进行分析、建模与部分缺失,构建成4种不同的表达CSFV囊膜蛋白EmsE1E2的片段。将以上4种片段分别连接到真核表达载体pCAGGS中,转染幼仓鼠肾(BHK21)细胞,利用抗E2蛋白的单克隆抗体对表达蛋白进行westernblot检测与间接免疫荧光(IFA)检测,研究结果表明:跨膜区中锚定序列的部分缺失会降低E2在细胞内的表达,为猪瘟伪型病毒的研制提供了实验依据。
关键词
猪瘟病毒
e2
囊膜蛋白
锚定序列
分子模拟技术
Keywords
classical
swine
fever
virus
envelope
glycoprotein
e2
membrane anchor
molecular mimicking
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
含绿色荧光蛋白基因和猪瘟E_2基因的伪狂犬病毒Bartha-K_(61)株TK基因缺失转移载体的构建
被引量：
11
2
作者
范伟兴
张雪莲
魏荣
赵宏坤
陈溥言
机构
南京农业大学动物医学院
山东农业大学动物科技学院
出处
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2003年第3期3-8,共6页
文摘
提取伪狂犬病毒 ( PRV) Bartha- K6 1 株基因组 DNA为 PCR扩增模板 ,并根据 Genbank已发表的 PRV Kaplan株 UL区 UL2 5、U L2 4、U L2 3、U L2 2基因序列 ,选择保守序列设计了两对引物 ,这两对引物分别扩增出位于 UL2 3( TK)两侧 (含部分TK基因 )的可用于同源重组的左臂片段 ( L )和右臂片段 ( R) ,L包括部分 UL 2 5、全部 UL 2 4、部分 TK,R包括部分 TK及部分U L2 2 ,L 和 R的拼接片段中 TK基因内部缺失 2 70个核苷酸。将 L 片段和 R片段克隆于 p Bluescript M13-载体上 ,获得p SKL R;再将绿色荧光蛋白载体 p EGFP- C1上含 GFP及其多克隆位点的完整的基因表达盒插入 p SKL R的 L 片段和 R片段之间构成转移载体 p SKL KG;又将猪瘟病毒 1.2 3 kb的 E2 ( CSFV- E2 )基因片段插入 p SKL RG的多克隆位点的 Bg1 与 Pst 之间获得转移载体 p SKL
关键词
绿色荧光蛋白基因
伪狂犬病
伪狂犬病毒Bartha-K61株
TK基因
EGFP基因
猪瘟病毒
e2
基因
基因缺失
转移载体
疫苗
Keywords
PRV Bartha-K 61 strain
classical swine fever virus envelope glycoprotein e2
deletion of thymidine Kinase gene
transfer vector
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
猪瘟病毒新疆南疆野毒株E_2基因高变区扩增及序列分析
3
作者
孟庆玲
陈创夫
高丰
贾桂珍
机构
塔里木农垦大学动物科技学院
石河子大学动物科技学院
解放军军需大学动物科技学院
出处
《塔里木农垦大学学报》
2001年第4期12-16,共5页
基金
新疆生产建设兵团课题
文摘
参考已发表在GenBank中CSFVAlfort毒株的E2 蛋白基因序列 ,选择其抗原编码高变区作为扩增的靶区域 ,设计了一对特异性引物。用异硫氰酸胍 -酚 -氯仿一步法提取猪瘟病料细胞总RNA ,对其进行了RT -PCR扩增。结果得到了与设计大小 2 72bp完全相符的核酸带 ,并对PCR产物直接进行了核苷酸序列测定。将所测序列与中国C株同段序列进行了比较和分析。结果发现与中国C株核苷酸的同源性均为 82 .8% ;推导的氨基酸同源性为 88.3% ;两野毒株均有 33个碱基发生改变。并用此病料对 4 0日龄易感仔猪成功进行了人工感染试验 ,结果发现能引起比较典型的猪瘟临床症状和病理变化 。
关键词
猪瘟病毒
新疆南疆野毒株
e2
基因高变区
PCR
序列分析
Keywords
classical
swine
fever
virus
CSFV
hypervariable region sequence of E 2 gene
sequence analysis
分类号
S852.651 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪瘟病毒囊膜蛋白E2的锚定序列部分缺失对其在细胞内表达的影响
贺番
王靖飞
郝永清
仇华吉
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
含绿色荧光蛋白基因和猪瘟E_2基因的伪狂犬病毒Bartha-K_(61)株TK基因缺失转移载体的构建
范伟兴
张雪莲
魏荣
赵宏坤
陈溥言
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2003
11
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
猪瘟病毒新疆南疆野毒株E_2基因高变区扩增及序列分析
孟庆玲
陈创夫
高丰
贾桂珍
《塔里木农垦大学学报》
2001
0
在线阅读
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职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
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