鸡关节软骨Ⅱ型胶原蛋白结构及性能表征 被引量：13

1

作者 吴雷 郑娟 +1 位作者 刘文涛 李国英 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期86-90,共5页

从鸡关节软骨中得到的高纯度Ⅱ型胶原蛋白进行结构和性能的表征。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示仅有1条α带和1条β带,无其他杂蛋白带和I型胶原的条带,表明得到的Ⅱ型胶原纯度较高。紫外、红外和圆二色谱结果表明,该Ⅱ型... 从鸡关节软骨中得到的高纯度Ⅱ型胶原蛋白进行结构和性能的表征。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示仅有1条α带和1条β带,无其他杂蛋白带和I型胶原的条带,表明得到的Ⅱ型胶原纯度较高。紫外、红外和圆二色谱结果表明,该Ⅱ型胶原蛋白保持了完整的二级结构,即三股螺旋结构。氨基酸测定结果表明,Ⅱ型胶原含有较多的亚氨基酸,采用差示扫描量热法测得其变性温度高达40.2℃;Zeta电位法测得Ⅱ型胶原等电点偏弱酸性为5.06。 展开更多

关键词 鸡关节软骨 ⅱ型胶原蛋白 结构 性能

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鸡胸软骨粉中Ⅱ型胶原的提取及结构分析 被引量：12

2

作者 陆雪芹 许时婴 曹慧 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第4期76-80,共5页

以鸡胸软骨为原料制备软骨粉,采用盐酸胍溶解去除非胶原成分后,添加胃蛋白酶酶解提取软骨粉Ⅱ型胶原。SDS-PAGE电泳和RP-HPLC色谱证实了所提取的软骨粉Ⅱ型胶原具有较高的纯度。氨基酸组成分析、紫外吸收光谱、FT-IR谱图、圆二色谱和差... 以鸡胸软骨为原料制备软骨粉,采用盐酸胍溶解去除非胶原成分后,添加胃蛋白酶酶解提取软骨粉Ⅱ型胶原。SDS-PAGE电泳和RP-HPLC色谱证实了所提取的软骨粉Ⅱ型胶原具有较高的纯度。氨基酸组成分析、紫外吸收光谱、FT-IR谱图、圆二色谱和差示扫描量热分析的测定结果表明软骨粉Ⅱ型胶原保持天然构象,结构没有受到破坏。 展开更多

关键词 鸡胸软骨 ⅱ型胶原 结构

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鸡MHC B-LBⅡ新等位基因检测及多态性研究 被引量：8

3

作者 徐日福 李奎 +5 位作者 陈国宏 强巴央宗 莫德林 李长春 樊斌 刘榜 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1247-1255,共9页

在鸡的基因组中扩增了MHC B-LBⅡ基因第2外显子长度为374bp的片段,通过克隆、测序,发现了20个B-LBⅡ新等位基因.对第2外显子6个限制性酶切位点(AluⅠ、CaiⅠ、CfrⅠ、Hinl Ⅰ、HinfⅠ和RsaⅠ)的PCR-RFLP多态性进行分析,并运用在这6个位... 在鸡的基因组中扩增了MHC B-LBⅡ基因第2外显子长度为374bp的片段,通过克隆、测序,发现了20个B-LBⅡ新等位基因.对第2外显子6个限制性酶切位点(AluⅠ、CaiⅠ、CfrⅠ、Hinl Ⅰ、HinfⅠ和RsaⅠ)的PCR-RFLP多态性进行分析,并运用在这6个位点所观测的纯合基因型组合对B-LBⅡ等位基因进行初步检测,结果显示,该方法的等位基因检出率可达65%,等位基因主型检出率为68.75%.对B-LBⅡ基因7个单倍型和20个等位基因第2外显子多态性分析表明,核苷酸的多态变异位点为63个,其中简约性信息位点48个,单变异位点15个;仅在中国地方鸡种所检测到的简约性信息位点13个,单变异位点11个.序列同源性达90.6%～99.5%;核苷酸异义替换率为14.64%±2.67%,高于同义替换率2.92%±0.94%.为鸡B-LBⅡ基因多态性进化机制研究提供了参考资料. 展开更多

关键词 等位基因 中国地方鸡种B-LBⅱ基因 多态性

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鸡胸软骨中Ⅱ型胶原的制备工艺优化 被引量：3

4

作者 程媛 曹慧 +2 位作者 徐斐 于劲松 袁敏 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第6期24-28,共5页

对鸡胸软骨Ⅱ型胶原的制备工艺进行优化。采用盐酸胍和Na Cl 2种抽提方法去除杂蛋白,然后用胃蛋白酶酶解并考察酶解温度、酶解时间和酶添加量对胶原提取率的影响。结果表明:4 mol/L的盐酸胍能有效去除杂蛋白;当酶解温度18℃、胃蛋白酶... 对鸡胸软骨Ⅱ型胶原的制备工艺进行优化。采用盐酸胍和Na Cl 2种抽提方法去除杂蛋白,然后用胃蛋白酶酶解并考察酶解温度、酶解时间和酶添加量对胶原提取率的影响。结果表明:4 mol/L的盐酸胍能有效去除杂蛋白;当酶解温度18℃、胃蛋白酶添加量1.59%、酶解43 h时提取率最高,且此条件下的胶原提取率为56.54%,且保持着完整的二级结构。经过酶解后制备的Ⅱ型胶原电泳图谱出现α、β2条带,无其他杂带,Ⅱ型胶原纯度较高。 展开更多

关键词 鸡胸软骨 ⅱ型胶原 提取

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京海黄鸡IGF-Ⅱ基因SNPs及其与生产性能关系研究 被引量：3

5

作者 杨凤萍 李其松 +3 位作者 戴国俊 谢恺舟 施会强 王金玉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1470-1475,共6页

以京海黄鸡为材料,采用PCR-SSCP技术测定IGF-Ⅱ基因3个SNPs位点,同时分析它们对不同周龄体重及产蛋性状的遗传效应。结果显示,3个位点分别发生C→G、G→C、G→A的单碱基突变,各检测到3种基因型,P1位点偏离Hardy-Weinberg平衡状态(P<0... 以京海黄鸡为材料,采用PCR-SSCP技术测定IGF-Ⅱ基因3个SNPs位点,同时分析它们对不同周龄体重及产蛋性状的遗传效应。结果显示,3个位点分别发生C→G、G→C、G→A的单碱基突变,各检测到3种基因型,P1位点偏离Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.05)。最小二乘方差分析表明,AA与BB基因型个体300日龄产蛋数存在显著差异(P<0.05),A为增效等位基因,B为减效等位基因;CD基因型个体12周龄体质量显著高于CC型(P<0.05);EE、EF基因型个体300日龄平均蛋质量显著高于FF型(P<0.05),E为增效等位基因,F为减效等位基因。联合基因型AA/CC/EF平均蛋质量显著高于AB/CD/EE与AB/CD/EF(P<0.05);AB/CD/EF基因型个体300日龄体质量显著高于AA/CC/EF、BB/DD/EE型(P<0.05)。 展开更多

关键词 京海黄鸡 IGF-ⅱ SNPS 组合基因型 生产性能

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鸡关节软骨Ⅱ型胶原的制备 被引量：10

6

作者 曹慧 许时婴 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第4期148-152,共5页

本文以鸡关节软骨为原料制备Ⅱ型胶原。在酸性条件下添加不同浓度的胃蛋白酶酶解鸡关节软骨Ⅱ型胶原三股螺旋链的端肽,使Ⅱ型胶原由不溶性转变为可溶性,研究底物粘度随酶解时间的变化,确定最佳的酶浓度及酶解时间。采用DEAE-Sephalose C... 本文以鸡关节软骨为原料制备Ⅱ型胶原。在酸性条件下添加不同浓度的胃蛋白酶酶解鸡关节软骨Ⅱ型胶原三股螺旋链的端肽,使Ⅱ型胶原由不溶性转变为可溶性,研究底物粘度随酶解时间的变化,确定最佳的酶浓度及酶解时间。采用DEAE-Sephalose CL 6B离子交换柱和去离子水重复洗涤两种方法对酶解样品进行纯化制得Ⅱ型胶原,研究表明,胃蛋白酶最适添加浓度1%(W/W),最佳酶解时间24h。两种纯化方法的Ⅱ型胶原提取率分别为67%和81%。SDS-PAGE电泳、高效液相色谱、氨基酸成分分析及紫外吸收光谱测定结果证实了由鸡关节软骨所制备的Ⅱ型胶原具有较高纯度。 展开更多

关键词 ⅱ型胶原 制备 鸡关节软骨

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中药复方多糖对不同MHC B-Lβ Ⅱ基因型鸡淋巴细胞中NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA表达的影响 被引量：4

7

作者 马昭 朱晓庆 +4 位作者 杨莉 刘晓婷 张保军 谷新利 商云霞 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第12期3446-3452,共7页

为探讨中药复方多糖(compound Chinese herbal medicine polysaccharides,cCHMPS)对不同MHC B-LβⅡ基因型鸡免疫调节作用的影响,采用PCR-SSCP方法将200羽白羽肉鸡按不同MHC B-LβⅡ基因型分组,采集不同MHC B-LβⅡ基因型鸡的外周血淋... 为探讨中药复方多糖(compound Chinese herbal medicine polysaccharides,cCHMPS)对不同MHC B-LβⅡ基因型鸡免疫调节作用的影响,采用PCR-SSCP方法将200羽白羽肉鸡按不同MHC B-LβⅡ基因型分组,采集不同MHC B-LβⅡ基因型鸡的外周血淋巴细胞,分别加入终剂量为100、75、50、0μg/mL的cCHMPS,共培养24h,采用实时荧光定量PCR方法检测cCHMPS对鸡淋巴细胞NF-κB、TNF-α、IL-6mRNA表达量的影响。结果显示:与对照组相比,cCHMPS能显著增强不同MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞NF-κB、TNF-α、IL-6mRNA的表达量(P<0.05)。并且同一基因型鸡中,当cCHMPS剂量为50μg/mL时,AB、AA基因型鸡淋巴细胞NF-κB、TNF-α、IL-6mRNA表达量显著高于其他剂量组(P<0.05);AC基因型鸡淋巴细胞NF-κB、IL-6mRNA的表达量显著高于其他剂量组(P<0.05);AC基因型鸡淋巴细胞TNF-αmRNA的表达量在cCHMPS为100μg/mL时显著高于其他剂量组(P<0.05)。综上所述,cCHMPS能不同程度的促进各MHC B-LβⅡ基因型鸡NF-κB、TNF-α、IL-6mRNA的表达,且不同MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞最适中药复方多糖免疫调节剂量不同。 展开更多

关键词 中药复方多糖 MHCBLβⅱ基因型 鸡淋巴细胞 细胞因子

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香附酮抑制鸡致病性大肠杆菌诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞炎症作用的研究 被引量：1

8

作者 张立艳 郭勋 +8 位作者 夏方 胡汐柔 秦倩倩 张翠 宋舟 申海清 伊鹏霏 韦旭斌 付本懂 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第8期92-96,共5页

本试验通过建立鸡致病性大肠杆菌O78(APEC-O78)感染的鸡肺泡Ⅱ型上皮细胞的体外炎症模型,研究了不同浓度香附酮对TNF-α、IL-10分泌及TLR-4和TLR-5mRNA表达水平的影响。结果显示,0.5μg/mL香附酮能显著降低TNF-α的分泌水平(P<0.05)... 本试验通过建立鸡致病性大肠杆菌O78(APEC-O78)感染的鸡肺泡Ⅱ型上皮细胞的体外炎症模型,研究了不同浓度香附酮对TNF-α、IL-10分泌及TLR-4和TLR-5mRNA表达水平的影响。结果显示,0.5μg/mL香附酮能显著降低TNF-α的分泌水平(P<0.05),同时1μg/mL香附酮能极显著促进IL-10的分泌(P<0.01)。0.1、0.5和1μg/mL香附酮均能极显著降低TLR-4mRNA的表达水平(P<0.01),而不影响TLR-5mRNA的表达水平(P>0.05)。结果表明,香附酮可能通过TLR-4受体信号通路,抑制APEC-O78感染的鸡肺泡Ⅱ型上皮细胞促炎因子的产生,增加抑炎因子的产生,进而发挥其抗炎作用。 展开更多

关键词 香附酮 鸡大肠杆菌O78(APEC-O78) 鸡肺泡ⅱ型上皮细胞 炎症 信号通路

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鸡Ⅱ型胶原对伴有肠道损伤大鼠佐剂性关节炎的影响 被引量：1

9

作者 岳莉 王华 +5 位作者 刘丽华 郑咏秋 张运芳 沈玉先 魏伟 徐叔云 《安徽医科大学学报》 CAS 2003年第5期360-363,共4页

目的　观察非甾体抗炎药所致肠道损伤时口服及喷雾给予鸡Ⅱ型胶原 (CⅡ )对大鼠佐剂性关节炎 (AA)的治疗作用 ,并比较鸡CⅡ 2种制剂疗效的差异。方法　在建立大鼠AA模型的基础上 ,以 15mg/kg的美洛昔康诱导AA大鼠肠炎 ,给予不同剂型鸡C... 目的　观察非甾体抗炎药所致肠道损伤时口服及喷雾给予鸡Ⅱ型胶原 (CⅡ )对大鼠佐剂性关节炎 (AA)的治疗作用 ,并比较鸡CⅡ 2种制剂疗效的差异。方法　在建立大鼠AA模型的基础上 ,以 15mg/kg的美洛昔康诱导AA大鼠肠炎 ,给予不同剂型鸡CⅡ (2 0 μg/kg) ,连续 7d。 结果　致炎后 2 0d ,鸡CⅡ喷雾组对AA大鼠的继发性炎症有明显的抑制作用。致炎后第 2 4天 ,鸡CⅡ灌胃 (ig)组作用出现 ,至第 2 8天时鸡CⅡig组作用消失 ,鸡CⅡ喷雾组仍对AA大鼠的继发性炎症有抑制作用。粪便隐血 (OB)检验结果和髓过氧化物酶 (MPO)水平均高于正常组 ,表明模型复制成功。鸡CⅡ能显著逆转肠道损伤 ,降低升高的MPO和OB检验结果。结论　鸡CⅡ对伴有肠道损伤的AA大鼠具有明显的治疗作用 。 展开更多

关键词 佐剂性关节炎 鸡ⅱ型胶原 肠道损伤 大鼠 治疗 非甾体抗炎药 药物疗法 类风湿性关节炎

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静脉表型分子COUP-TFⅡ表达降低对血管内皮细胞衰老的影响 被引量：1

10

作者 赖亚宇 周骐 +3 位作者 郑微 靳鹏 顾文竹 武晓静 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1345-1352,共8页

目的:观察静脉表型分子鸡卵清蛋白上游启动子转录因子Ⅱ(COUP-TFⅡ)表达对血管内皮细胞衰老的影响和分子机制。方法:通过RT-qPCR检测比较人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中COUP-TFⅡ的表达情况。使用10^(-5)mol/L... 目的:观察静脉表型分子鸡卵清蛋白上游启动子转录因子Ⅱ(COUP-TFⅡ)表达对血管内皮细胞衰老的影响和分子机制。方法:通过RT-qPCR检测比较人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中COUP-TFⅡ的表达情况。使用10^(-5)mol/L血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导HUVEC衰老,通过COUP-TFⅡ特异性小干扰RNA(siCOUP-TFⅡ)转染HUVEC使其COUP-TFⅡ的表达降低,利用β-半乳糖苷酶染色、Western blot、CCK-8、细胞计数等方法分别观察siCOUP-TFⅡ对AngⅡ诱导的血管内皮细胞衰老及增殖的影响,通过Western blot检测Akt信号分子的表达变化。结果:与HCAEC相比,HUVEC中COUP-TFⅡ呈显著高表达;用siCOUP-TFⅡ抑制HUVEC的COUP-TFⅡ表达时,能显著促进AngⅡ诱导的内皮细胞衰老并抑制内皮细胞增殖和p-Akt蛋白水平;加入Akt激动剂SC79(4 mg/L)能够部分逆转siCOUP-TFⅡ对AngⅡ诱导的HUVEC衰老和增殖的影响。结论:COUP-TFⅡ表达降低可促进血管内皮细胞衰老并抑制内皮细胞增殖,其机制可能与调节Akt信号有关。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 血管内皮细胞 细胞衰老 细胞增殖 鸡卵清蛋白上游启动子转录因子ⅱ

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口服鸡源性Ⅱ型胶原蛋白诱导实验性CIA小鼠免疫耐受(英文) 被引量：1

11

作者 李卫东 冉国侠 +2 位作者 沈建英 滕惠玲 林志彬 《北京医科大学学报》 CSCD 2000年第3期214-218,共5页

评价口服鸡源性Ⅱ型胶原蛋白 (chickentypeⅡcollagen ,CCⅡ )对胶原性关节炎 (collagen inducedarthritis,CIA)小鼠的抗炎及免疫作用的影响。方法 :以CCⅡ蛋白与福氏完全佐剂免疫昆明种小鼠 ,并于第 2 1天强化免疫 1次。CCⅡ于致敏前... 评价口服鸡源性Ⅱ型胶原蛋白 (chickentypeⅡcollagen ,CCⅡ )对胶原性关节炎 (collagen inducedarthritis,CIA)小鼠的抗炎及免疫作用的影响。方法 :以CCⅡ蛋白与福氏完全佐剂免疫昆明种小鼠 ,并于第 2 1天强化免疫 1次。CCⅡ于致敏前第 5天即开始灌胃给药 ,共 2 0d。每周两次评价多发性关节炎评分。以ELISA法测定CIA小鼠血清抗CⅡ抗体。以流式细胞测定法测定小鼠脾T淋巴细胞亚型。以ELISA法测定佐剂性关节炎大鼠腹腔巨噬细胞IL 1分泌水平。结果 :口服CCⅡ 5 μg·kg-1和 5 0 μg·kg-1可明显降低多发性关节炎评分值 ,而25 0 μg·kg-1剂量组则无作用 ;CCⅡ 5 μg·kg-1剂量组可抑制CIA小鼠升高了的血清抗CⅡ抗体水平 ;口服CCⅡ可使CIA小鼠升高的L3T4+/Lyt 2 +值有所降低。口服CCⅡ可使佐剂性关节炎大鼠升高了的IL 1水平有所降低。结论 :口服CCⅡ可抑制CIA小鼠多发性关节炎的发生 ,此作用可能有体液免疫和细胞免疫两种机制参与。以上作用的发生为剂量依赖性的 ,即小剂量作用最强。 展开更多

关键词 免疫受 鸡源性ⅱ型胶原 胶原性关节炎

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超滤法分离提取鸡胸软骨中硫酸软骨素和Ⅱ型胶原蛋白 被引量：4

12

作者 李燕妮 《化学与生物工程》 CAS 2011年第2期49-51,共3页

研究了超滤法分离提取鸡胸软骨中硫酸软骨素和Ⅱ型胶原蛋白的工艺。确定超滤工艺为:鸡胸软骨水解液用截留分子量为10 kDa的超滤膜,在0.3 MPa、10℃截留得到硫酸软骨素,收率达97.1%;超滤透过液用截留分子量为3kDa的超滤膜,在0.6 MPa、10... 研究了超滤法分离提取鸡胸软骨中硫酸软骨素和Ⅱ型胶原蛋白的工艺。确定超滤工艺为:鸡胸软骨水解液用截留分子量为10 kDa的超滤膜,在0.3 MPa、10℃截留得到硫酸软骨素,收率达97.1%;超滤透过液用截留分子量为3kDa的超滤膜,在0.6 MPa、10℃脱盐浓缩,得到Ⅱ型胶原蛋白,收率达95.1%。 展开更多

关键词 鸡胸软骨 超滤 硫酸软骨素 ⅱ型胶原蛋白

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鸡MHC Ⅱ类分子部分基因的原核表达及单克隆抗体的制备与鉴定 被引量：2

13

作者 叶平 余为一 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第28期15668-15669,共2页

[目的]制备鸡MHCⅡ类分子的单克隆抗体。[方法]在分析鸡MHCII类分子蛋白序列基础上,选取鸡MHCⅡα链基因第2～6外显子和β链基因第3～6外显子进行原核表达,以纯化的融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,经克隆... [目的]制备鸡MHCⅡ类分子的单克隆抗体。[方法]在分析鸡MHCII类分子蛋白序列基础上,选取鸡MHCⅡα链基因第2～6外显子和β链基因第3～6外显子进行原核表达,以纯化的融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,经克隆和间接ELISA筛选阳性细胞株。[结果]共得到1株分泌鸡MHCⅡα链抗体和2株MHCⅡβ链抗体的杂交瘤细胞,分别命名为MHCⅡα-4、Ⅱβ6-2和Ⅱβ6-31,其腹水效价分别为1∶256000、1∶256000和1∶1280000。Western blotting分析表明其特异性强,能与相应蛋白结合。[结论]成功获得了3株稳定分泌抗鸡MHCⅡ类分子抗体的杂交瘤细胞。 展开更多

关键词 鸡MHCⅱ类分子 单克隆抗体 鉴定

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鸡Ⅱ型星状病毒绝对定量real-time PCR的建立及应用 被引量：1

14

作者 赵伟 武宗仪 +1 位作者 秦爱建 钱琨 《中国家禽》 北大核心 2020年第12期30-35,共6页

研究旨在建立一种检测鸡Ⅱ型星状病毒(CAstV)绝对定量的检测方法。采用PCR方法扩增Ⅱ型CAstV保守区域基因RdRp部分基因,将其克隆至pGEM-T载体作为阳性标准质粒,并根据获得的RdRp基因设计合成一对133 bp引物,成功建立了Ⅱ型CAstV的绝对定... 研究旨在建立一种检测鸡Ⅱ型星状病毒(CAstV)绝对定量的检测方法。采用PCR方法扩增Ⅱ型CAstV保守区域基因RdRp部分基因,将其克隆至pGEM-T载体作为阳性标准质粒,并根据获得的RdRp基因设计合成一对133 bp引物,成功建立了Ⅱ型CAstV的绝对定量real-time PCR的检测方法。结果显示:研究构建的检测方法线性关系良好,检测灵敏度为10copies/μL,且对常见的禽源病毒均无非特异性扩增,特异性好。应用建立的绝对定量real-time PCR检测了病毒感染1日龄雏鸡不同组织样品,掌握了鸡Ⅱ型星状病毒在鸡体内不同组织内的分布及增殖情况。试验成功建立了Ⅱ型CAstV绝对定量real-time PCR检测方法,该方法特异性强、灵敏度高、重复性好,为进一步深入研究Ⅱ型CAstV的生物学特性提供了检测手段。 展开更多

关键词 鸡ⅱ型星状病毒 RdRp基因 绝对定量 real-time PCR

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鸡卵清蛋白上游启动子转录因子Ⅱ在人胃癌组织中的表达及临床意义

15

作者 李增亮 姜宝飞 +2 位作者 李伟 徐皓 徐泽宽 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期892-896,共5页

目的:检测鸡卵清蛋白上游启动子转录因子Ⅱ(COUP-TFⅡ)在人胃癌组织中的表达,并探讨其临床意义及其影响胃癌发生、发展的可能分子机制。方法:收集66例手术切除的胃癌组织和相对应的癌旁非肿瘤组织标本,采用免疫组织化学法检测标本中COUP... 目的:检测鸡卵清蛋白上游启动子转录因子Ⅱ(COUP-TFⅡ)在人胃癌组织中的表达,并探讨其临床意义及其影响胃癌发生、发展的可能分子机制。方法:收集66例手术切除的胃癌组织和相对应的癌旁非肿瘤组织标本,采用免疫组织化学法检测标本中COUP-TFⅡ和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白的表达,分析COUP-TFⅡ与患者临床病理特征及预后之间的关系,以及COUP-TFⅡ与其潜在靶基因MMP-2的相关性。结果:COUP-TFⅡ蛋白在胃癌和癌旁组织中的阳性表达率分别为65.2%(43/66)和19.7%(13/66),两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。COUP-TFⅡ蛋白的表达与胃癌的浸润深度、分化程度、淋巴结转移及TNM分期密切相关(P<0.05),而与患者的性别、年龄、肿瘤大小无关(P>0.05)。COUP-TFⅡ蛋白阳性表达的患者术后平均生存时间比阴性表达者短,分别为(26.8±2.6)个月和(36.4±3.0)个月(χ2=4.118,P=0.042)。MMP-2蛋白在胃癌和癌旁组织中的阳性表达率分别为78.8%(52/66)和34.8%(23/66),两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。COUP-TFⅡ与MMP-2蛋白在胃癌组织中的表达呈正相关(r=0.310,P=0.011)。结论:COUP-TFⅡ蛋白与胃癌的发生、发展、侵袭、转移以及不良预后密切相关,推测可能是通过调控MMP-2的表达而发挥作用。 展开更多

关键词 胃癌 鸡卵清蛋白上游启动转录因子ⅱ 基质金属蛋白酶-2 免疫组织化学

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不同日龄鸡肺脏中MHC-Ⅱ+细胞的分布规律 被引量：1

16

作者 张英楠 张桂山 +1 位作者 徐晶 杨树宝 《畜牧兽医杂志》 2021年第5期10-12,19,共4页

为了解鸡肺脏不同时期的免疫状态,本实验选择不同日龄的海兰白鸡的肺脏组织,利用免疫组织化学方法研究MHC-Ⅱ细胞的出现、定位分布及数量变化过程。结果显示,MHC-Ⅱ细胞最初于胚胎13 d出现。胚胎13 d至18 d期间,MHC-Ⅱ细胞数量有所增多... 为了解鸡肺脏不同时期的免疫状态,本实验选择不同日龄的海兰白鸡的肺脏组织,利用免疫组织化学方法研究MHC-Ⅱ细胞的出现、定位分布及数量变化过程。结果显示,MHC-Ⅱ细胞最初于胚胎13 d出现。胚胎13 d至18 d期间,MHC-Ⅱ细胞数量有所增多,并主要分布在三级支气管的肺房房间隔中。1日龄时,MHC-Ⅱ细胞在小叶间结缔组织中也有分布。4日龄时,在初级支气管与次级支气管交汇处有淋巴细胞的聚集物,即形成了明显的支气管相关性淋巴组织(BALT),此时BALT中的大多数细胞都表达MHC-Ⅱ,成为主要的细胞群体。7至14日龄时,MHC-Ⅱ细胞数量逐渐增加,在呼吸性毛细管管壁上出现较多的MHC-Ⅱ细胞。21至90日龄时,无论是BALT中,还是肺小叶中MHC-Ⅱ细胞的数量都持续增加,并且遍布于整个肺脏。结果表明,鸡肺脏中MHC-Ⅱ细胞的分布和数量均呈现日龄相关性变化,并且其变化可以反映出胚胎期及出壳初期肺脏中抗原呈递细胞较少,随后日龄显著增多,从而进行有效的抗原递呈,参与免疫应答。 展开更多

关键词 鸡 肺脏 MHC-ⅱ+细胞 抗原呈递细胞 分布

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鸡传染性支气管炎病毒S1基因和鸡II型干扰素基因在重组鸡痘病毒中的共表达 被引量：10

17

作者 孙永科 田占成 +5 位作者 王云峰 童光志 智海东 刘胜旺 王玫 杨增岐 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期800-806,共7页

将鸡II型干扰素(ChIFNγ)基因和鸡传染性支气管炎病毒S1基因同时插入到鸡痘病毒转移载体中,构建含有这2个基因的鸡痘病毒转移载体pSY-ChIFNγS1。采用脂质体法将该质粒转染鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞(CEF),经过8轮蓝斑筛选,得到纯化... 将鸡II型干扰素(ChIFNγ)基因和鸡传染性支气管炎病毒S1基因同时插入到鸡痘病毒转移载体中,构建含有这2个基因的鸡痘病毒转移载体pSY-ChIFNγS1。采用脂质体法将该质粒转染鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞(CEF),经过8轮蓝斑筛选,得到纯化的能够同时表达鸡II型干扰素和鸡传染性支气管炎病毒S1基因的重组鸡痘病毒rFPV-ChIFNγS1。rFPV-ChIFNγS1接种28日龄的SPF鸡1周后,可以检测到针对传染性支气管炎病毒S1基因的ELISA抗体,重组病毒接种鸡的CD4+、CD8+和γδTCR阳性T淋巴细胞的百分比含量显著高于非免疫对照鸡(P<0.05);免疫4周后用传染性支气管炎LX4强毒株攻击,rFPV-ChIFNγS1免疫组仅有1只出现轻微的呼吸道症状(1/16),而非免疫对照组则有16只发病(16/16),并有2只出现死亡(2/16),表明rFPV-ChIFNγS1对接种鸡可以产生良好的保护效果。 展开更多

关键词 传染性支气管炎病毒 鸡ⅱ型干扰素 重组鸡痘病毒

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Treg细胞在VIP治疗实验性类风湿性关节炎中的作用研究 被引量：8

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作者 王红 席晔斌 +3 位作者 邓少华 郝静 李伟毅 陈广洁 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期557-561,共5页

目的:本研究探讨血管活性肠肽(VIP)治疗实验性类风湿性关节炎的免疫调节机制及Treg细胞参与的调节。方法:本研究以鸡Ⅱ型胶原(CCⅡ)诱导的Wistar大鼠实验性类风湿性关节炎(CIA)为动物模型,分析大鼠关节指数评分和关节病理变化,通过细胞... 目的:本研究探讨血管活性肠肽(VIP)治疗实验性类风湿性关节炎的免疫调节机制及Treg细胞参与的调节。方法:本研究以鸡Ⅱ型胶原(CCⅡ)诱导的Wistar大鼠实验性类风湿性关节炎(CIA)为动物模型,分析大鼠关节指数评分和关节病理变化,通过细胞因子检测分析Th1/Th2平衡关系;通过流式细胞术和功能实验分析Treg的变化,评价VIP的治疗作用和机制。结果:我们的研究显示体内经VIP治疗的CIA大鼠在临床和组织学水平均得到了保护和缓解。其抑制作用与下列因素有关:抑制致病性T细胞的增殖,免疫应答由Th1型应答向Th2型应答转换,以及上调了具有抑制T细胞活化和增殖作用的CD4+CD25+Treg细胞数量与功能。结论:本研究揭示了VIP可通过调节Th1/Th2平衡和上调Treg细胞来抑制致病性T细胞的活性,从而保护、缓解实验性关节炎。 展开更多

关键词 血管活性肠肽(VIP) CIA 鸡ⅱ型胶原(CCⅱ) CD4+CD25+TREG

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同源GnRH对无血清培养鸡卵泡颗粒细胞孕酮分泌的作用 被引量：7

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作者 汪琳仙 刘金中 张才乔 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期330-335,共6页

选用产蛋规律的鸡，在一个产蛋序列中，排卵前１～３ｈ剖腹收集各级卵泡，分离颗粒层建立卵泡颗粒细胞无血清单层贴壁培养模型。在此基础上，用不同剂量鸡促性腺激素释放激素（ＧｎＲＨ－Ⅱ）单独处理或与羊ＬＨ（ｏＬＨ）协同处理，并... 选用产蛋规律的鸡，在一个产蛋序列中，排卵前１～３ｈ剖腹收集各级卵泡，分离颗粒层建立卵泡颗粒细胞无血清单层贴壁培养模型。在此基础上，用不同剂量鸡促性腺激素释放激素（ＧｎＲＨ－Ⅱ）单独处理或与羊ＬＨ（ｏＬＨ）协同处理，并使用ＧｎＲＨ－Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ（ＧＡ），以观察ＧｎＲＨ－Ⅱ对颗粒细胞孕酮分泌的影响。研究获得了以下结果：（１）ＧｎＲＨ－Ⅱ对鸡不同卵抱（Ｆ１、Ｆ３、Ｆ５）颗粒细胞孕酮分泌均有促进作用，并呈现剂量－反应关系；（２）ＧｎＲＨ－对ｏＬＨ促鸡卵泡颗粒细胞孕酮的分泌有明显的协同作用；（３）ＧｎＲＨ拮抗物使ＧｎＲＨ－Ⅱ的促卵泡颗粒细胞孕酮分泌作用受到阻断。 展开更多

关键词 GnRH-ⅱ 孕酮 鸡 卵泡颗粒细胞 无血清培养

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胶原诱导的关节炎小鼠脾脏单个核细胞TLR8的表达及其与相关细胞因子的关系

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作者 毛飞 许文荣 +4 位作者 钱晖 朱伟 严永敏 高硕 许化溪 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期312-314,318,共4页

目的:观察Toll样受体8(TLR8)在鸡Ⅱ型胶原诱导的关节炎模型小鼠脾脏单个核细胞中的表达及其与IL-10等细胞因子表达的关系。方法:12只DBA/1J小鼠随机分成造模组和阴性对照组。造模组小鼠采用鸡Ⅱ型胶原诱导,在诱导后的第27天出现关节红... 目的:观察Toll样受体8(TLR8)在鸡Ⅱ型胶原诱导的关节炎模型小鼠脾脏单个核细胞中的表达及其与IL-10等细胞因子表达的关系。方法:12只DBA/1J小鼠随机分成造模组和阴性对照组。造模组小鼠采用鸡Ⅱ型胶原诱导,在诱导后的第27天出现关节红肿时处死所有小鼠。用ELISA测定小鼠外周血的TNF-α,HE染色观察小鼠关节的炎症变化,Real-time PCR检测脾脏单个核细胞表达IL-10、IL-17A、IL-1β及TLR8的水平。结果:HE染色结果显示,造模组小鼠关节部位与阴性对照组相比出现明显的炎症细胞浸润;造模组小鼠的外周血血清TNF-α水平较阴性对照组明显升高(P<0.01);模型小鼠脾脏单个核细胞表达IL-10、IL-17A、TLR8和IL-1β的水平也明显高于阴性对照组(P<0.01或P<0.05)。相关性分析表明,TLR8的表达与IL-10的表达呈负相关(r=0.945;P<0.01),而与IL-17A、IL-1β无明显相关性(P>0.05)。结论:TLR8在鸡Ⅱ型胶原诱导的关节炎模型小鼠脾脏单个核细胞中的表达水平明显升高。尽管IL-10的表达水平也高于对照组,但其与TLR8的表达呈现明显负相关。 展开更多

关键词 TLR8 鸡ⅱ型胶原 类风湿性关节炎 小鼠

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