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电击法诱导细胞融合实验研究 被引量:2
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作者 王宏刚 李烨 +6 位作者 陈成彬 王春国 陈力 宋文芹 白艳玲 张金红 刘方 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2017年第1期53-55,共3页
分别利用两种不同的荧光染料Dio和DiI对细胞进行标记,使细胞膜可以发出绿色或红色荧光;然后选择合适的条件,使用细胞融合仪诱导2个细胞融合成为1个细胞;最后,通过荧光显微镜观察,成功融合的细胞可以同时观察到红色荧光和绿色荧光。该实... 分别利用两种不同的荧光染料Dio和DiI对细胞进行标记,使细胞膜可以发出绿色或红色荧光;然后选择合适的条件,使用细胞融合仪诱导2个细胞融合成为1个细胞;最后,通过荧光显微镜观察,成功融合的细胞可以同时观察到红色荧光和绿色荧光。该实验可以帮助学生掌握电击诱导细胞融合的原理和操作方法,培养学生的科研兴趣,提高学生的综合素质。 展开更多
关键词 细胞融合 电击法 实验教学 教学改革
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植物血凝素-ECM830细胞融合法融合黑色素瘤细胞
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作者 米蕊芳 刘福生 金贵善 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期515-518,共4页
目的以黑色素瘤细胞为模型,研究高效率肿瘤细胞融合方法。方法慢病毒荧光标记黑色素瘤细胞,ECM830电融合法及改良的植物血凝素(PHA)-ECM830电融合仪细胞融合法融合黑色素瘤细胞,流式分选黑色素瘤融合细胞,碘化亚啶染色法测定DNA含量。... 目的以黑色素瘤细胞为模型,研究高效率肿瘤细胞融合方法。方法慢病毒荧光标记黑色素瘤细胞,ECM830电融合法及改良的植物血凝素(PHA)-ECM830电融合仪细胞融合法融合黑色素瘤细胞,流式分选黑色素瘤融合细胞,碘化亚啶染色法测定DNA含量。结果荧光标记带有绿色和红色荧光的黑色素瘤细胞,通过PHAECM830细胞融合法获得黑色素瘤融合细胞,细胞融合效率较ECM830电融合法从0.50%提升到7.18%,流式分选得到单一的黑色素瘤融合细胞,DNA含量分析显示黑色素瘤融合细胞的DNA含量翻倍,体内外实验表明黑色素瘤融合细胞增殖速度降低。结论运用改良的PHA-ECM830细胞融合法成功高效得到黑色素瘤融合细胞,黑色素瘤融合细胞增殖速度降低。 展开更多
关键词 植物血凝素 ECM830 细胞融合法 黑色素瘤细胞
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s-lap/GFP融合蛋白在Hela细胞中的表达与定位 被引量:1
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作者 宋忆淑 宋志宇 +2 位作者 费向东 贺冰 李玉新 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期39-41,共3页
目的 :观察 s- lap/ GFP融合蛋白在 Hela细胞中的表达及定位。方法 :根据 s- lap基因的编码区序列 ,应用 PCR技术突变其 3′末端终止密码子 ,并通过基因重组技术将其与 GFP基因融合 ,构建 s- lap/ GFP重组质粒 ;采用脂质体转染法 ,将 s-... 目的 :观察 s- lap/ GFP融合蛋白在 Hela细胞中的表达及定位。方法 :根据 s- lap基因的编码区序列 ,应用 PCR技术突变其 3′末端终止密码子 ,并通过基因重组技术将其与 GFP基因融合 ,构建 s- lap/ GFP重组质粒 ;采用脂质体转染法 ,将 s- lap/ GFP融合基因转入 Hela细胞中 ,用荧光显微镜观察其表达。结果 :s- lap/ GFP重组质粒序列测定的结果与预期设计完全一致。荧光显微镜显示 ,在转染 GFP基因的 Hela细胞中 ,荧光呈网状均匀分布于细胞浆内 ,而细胞核内低表达 ;在转染 s- lap/ GFP融合基因的 Hela细胞中 ,荧光均匀分布于整个细胞 ,尤其以细胞核内高表达。结论 :s- lap/ GFP融合蛋白可在人 Hela细胞中表达 ,并主要定位于细胞核。 展开更多
关键词 s-lap/GFP融合蛋白 重组融合蛋白质类/遗传学 基因融合/方法 HELA细胞
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