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蛋白酶体抑制剂对心肌缺血再灌注大鼠CHIP、HSP70的影响 被引量:3
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作者 戴翠莲 姜黔峰 张新民 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期550-553,共4页
目的观察蛋白酶体抑制剂MG-132(N-benz0y1 oxycarbonyl(Z)-Leu-Leuleucina1)对急性缺血再灌注大鼠心肌(carboxyl terminus of the Hsc70-interacting protein,CHIP)、HSP70的影响以探讨MG-132的心肌保护机制。方法选择SD大鼠结扎左冠状... 目的观察蛋白酶体抑制剂MG-132(N-benz0y1 oxycarbonyl(Z)-Leu-Leuleucina1)对急性缺血再灌注大鼠心肌(carboxyl terminus of the Hsc70-interacting protein,CHIP)、HSP70的影响以探讨MG-132的心肌保护机制。方法选择SD大鼠结扎左冠状动脉前降支30min制作心肌缺血再灌注模型,54只大鼠按随机数字表法分入以下各组:治疗(I/R+T)组于再灌注前5min静脉注射MG-132(0.75mg/kg),对照(I/R)组及假手术(Sham)组注射生理盐水,并将I/R组和I/R+T组分为再灌注2、24h及7d亚组(各亚组各8只大鼠),分别用荧光定量PCR法及Western blot法检测CHIP及HSP70的mRNA及蛋白质表达,并进行相关性分析。结果与I/R各时相组相比,I/R+T各时相组CHIP及HSP70的mRNA水平显著升高[(0.87±0.10)vs(0.50±0.06),(0.57±0.07)vs(0.33±0.04),(0.47±0.06)vs(0.19±0.03),P<0.01]。与I/R2、24h组相比I/R+T组CHIP及mRNA水平显著升高[(1.15±0.12)vs(0.57±0.07),(0.81±0.09)vs(0.44±0.06),P<0.01];MG-132上调了I/R+T各时相组HSP70的蛋白质表达,与I/R各组相比,差异均有统计学意义[(1.28±0.16)vs(0.79±0.08),(0.88±0.12)vs(0.58±0.12),(0.9±0.17)vs(0.50±0.09),P<0.01];MG-132上调了I/R+T2、24h组CHIP的蛋白质表达,与I/R2、24h组相比,差异有统计学意义[(1.43±0.15)vs(1.04±0.11),P<0.01;(1.16±0.11)vs(0.96±0.13)],P<0.05)。结论心肌缺血再灌注前适量静注MG-132能显著刺激缺血再灌注大鼠心脏CHIP表达,从而进一步上调HSP70水平,从而保护心肌。 展开更多
关键词 蛋白酶体抑制剂 热休克蛋白70羧基端相互作用蛋白 热休克蛋白70 心肌保护
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CHIP参与高糖介导下的血管内皮细胞损伤 被引量:4
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作者 乔先栋 刘婷 +1 位作者 洪丽英 付勇南 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1368-1374,共7页
目的:探讨热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白(CHIP)在高糖(HG)介导的血管内皮细胞损伤中的作用。方法:培养原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs),利用RNA干扰技术下调CHIP表达,再以5.5 mmol/L正常浓度葡萄糖(NG)或25.5 mmol/L高浓度葡萄糖(HG)... 目的:探讨热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白(CHIP)在高糖(HG)介导的血管内皮细胞损伤中的作用。方法:培养原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs),利用RNA干扰技术下调CHIP表达,再以5.5 mmol/L正常浓度葡萄糖(NG)或25.5 mmol/L高浓度葡萄糖(HG)处理24 h,实验前用甘露醇排除渗透压对实验的干扰,接着将细胞分成NG+siRNA NC组、NG+siRNA CHIP组、HG+siRNA NC组和HG+siRNA CHIP组。MTT法和TUNEL染色法分别检测细胞活力和凋亡率;ELISA试剂盒检测内皮素1(ET-1)的表达水平;二氢乙啶荧光染料法检测细胞内活性氧簇(ROS)水平;一氧化氮(NO)、超氧化物岐化酶(SOD)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)试剂盒分别检测细胞内NO水平及SOD、iNOS活性;RT-qPCR检测白细胞介素8(IL-8)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的mRNA表达量;Western blot检测CHIP、NADPH氧化酶(NOX)2、NOX4、p38、p65、p-p38、p-p65、Bax和Bcl-2蛋白表达水平。结果:与NG+siRNA NC组相比,HG+siRNA NC组HUVECs死亡率、凋亡率及IL-8和MCP-1 mRNA表达水平均升高(P<0.05),细胞内ROS水平升高(P<0.05),SOD活性下降(P<0.05),ET-1、NO水平及iNOS活性升高(P<0.05),pp38、p-p65和Bax蛋白水平升高(P<0.05)。与HG+siRNA NC组相比,HG+siRNA CHIP组HUVECs炎症反应和氧化应激反应明显增强,凋亡率显著升高(P<0.05),p-p38和p-p65蛋白水平升高(P<0.05)。结论:下调CHIP表达可加重HG介导的血管内皮细胞损伤。 展开更多
关键词 糖尿病 热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白 人脐静脉内皮细胞 细胞凋亡 氧化应激
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