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猴D型逆转病毒Ⅰ型cDNA合成及其分子克隆的建立
1
作者
陈志伟
《中国比较医学杂志》
CAS
1991年第2期29-34,共6页
利用随机引物法反转录合成SRV-1 ss-cDNA和ds—cDNA.将ds—cDNA平端连接到质粒pUC19中,转化E.Coli.DH5α菌.氨苄青霉素、X-gal培基和菌落杂交筛选,克隆阳性重组率为20.7%.EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切分析,12.7％的插入片段大于500bp。Souther...
利用随机引物法反转录合成SRV-1 ss-cDNA和ds—cDNA.将ds—cDNA平端连接到质粒pUC19中,转化E.Coli.DH5α菌.氨苄青霉素、X-gal培基和菌落杂交筛选,克隆阳性重组率为20.7%.EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切分析,12.7％的插入片段大于500bp。Southern杂交进一步确证,所选三株重组质粒(pSRV-127、pSRV-156和pSRV-169)的探针用插入片段(0.9kb、1.0kb和1.4kb),是SRV-1 cDNA片段.光敏生物素标记纯化pSRV-169DNA和pSRV-156cDNA片段制备探针,前者用于检测SRV-1病毒RNA,后者用于检测纯化病毒颗粒。碱性磷酸酶系统染色。
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关键词
SRV-1
cdna
合成
分子克隆
SOUTHERN杂交
光敏生物素探针
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职称材料
番木瓜环斑病毒检测新技术的建立及其在病毒——原生质体体系探索中的初步应用
被引量：
1
2
作者
陈枝楠
郑冠标
+3 位作者
林孔勋
范怀忠
张春霞
田波
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
1991年第3期75-77,共3页
为了有助于全面了解和评价番木瓜完整植株对番木瓜环斑病毒(PRV)的抗、感病性机制,建立单细胞侵染模型是一个重要途径。本研究首次建立了PRV-番木瓜原生质体实验体系;建立了检测 PRV的间接Dot-ELISA和检测PRV-RNA的 cDNA分子探针的方法...
为了有助于全面了解和评价番木瓜完整植株对番木瓜环斑病毒(PRV)的抗、感病性机制,建立单细胞侵染模型是一个重要途径。本研究首次建立了PRV-番木瓜原生质体实验体系;建立了检测 PRV的间接Dot-ELISA和检测PRV-RNA的 cDNA分子探针的方法和技术,并利用这2个检测技术对PRV在番木瓜原生质体中的行为动态进行了初步探索。
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关键词
番木瓜
环斑病毒
原生质体
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职称材料
草莓斑驳病毒的分子杂交检测
被引量：
5
3
作者
李丽丽
杨洪一
《湖南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第3期273-276,共4页
为探索分子杂交技术在草莓斑驳病毒(Strawberry mottle virus,SMoV)检测中的运用,利用CTAB法从草莓叶片中提取总核酸,并以此为模板,利用特异引物扩增SMoV非编码区序列,经克隆、测序获得SMoV非编码区序列。系统进化分析结果显示:本研究...
为探索分子杂交技术在草莓斑驳病毒(Strawberry mottle virus,SMoV)检测中的运用,利用CTAB法从草莓叶片中提取总核酸,并以此为模板,利用特异引物扩增SMoV非编码区序列,经克隆、测序获得SMoV非编码区序列。系统进化分析结果显示:本研究中的分离物与GenBank中已报道的分离物的亲缘关系较远,独立形成1个小的进化支。以带有病毒特异片段的质粒为模板,运用PCR技术制备了地高辛标记的cDNA探针。以草莓感染SMoV叶片为试材,利用地高辛标记探针可有效检测草莓叶片中的SMoV,草莓总核酸样品稀释10倍后仍可有效检测。
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关键词
草莓斑驳病毒
分子杂交技术
cdna
探针
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职称材料
题名
猴D型逆转病毒Ⅰ型cDNA合成及其分子克隆的建立
1
作者
陈志伟
机构
中国医学科学院实验动物研究所
出处
《中国比较医学杂志》
CAS
1991年第2期29-34,共6页
文摘
利用随机引物法反转录合成SRV-1 ss-cDNA和ds—cDNA.将ds—cDNA平端连接到质粒pUC19中,转化E.Coli.DH5α菌.氨苄青霉素、X-gal培基和菌落杂交筛选,克隆阳性重组率为20.7%.EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切分析,12.7％的插入片段大于500bp。Southern杂交进一步确证,所选三株重组质粒(pSRV-127、pSRV-156和pSRV-169)的探针用插入片段(0.9kb、1.0kb和1.4kb),是SRV-1 cDNA片段.光敏生物素标记纯化pSRV-169DNA和pSRV-156cDNA片段制备探针,前者用于检测SRV-1病毒RNA,后者用于检测纯化病毒颗粒。碱性磷酸酶系统染色。
关键词
SRV-1
cdna
合成
分子克隆
SOUTHERN杂交
光敏生物素探针
Keywords
SRV-1
cdna
synthesis
molecular
cloning Southern hybridization Photobiotin
probe
分类号
R [医药卫生]
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职称材料
题名
番木瓜环斑病毒检测新技术的建立及其在病毒——原生质体体系探索中的初步应用
被引量：
1
2
作者
陈枝楠
郑冠标
林孔勋
范怀忠
张春霞
田波
机构
华南农业大学植物病毒研究室
中国科学院微生物所
出处
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
1991年第3期75-77,共3页
基金
国家教委科学基金
文摘
为了有助于全面了解和评价番木瓜完整植株对番木瓜环斑病毒(PRV)的抗、感病性机制,建立单细胞侵染模型是一个重要途径。本研究首次建立了PRV-番木瓜原生质体实验体系;建立了检测 PRV的间接Dot-ELISA和检测PRV-RNA的 cDNA分子探针的方法和技术,并利用这2个检测技术对PRV在番木瓜原生质体中的行为动态进行了初步探索。
关键词
番木瓜
环斑病毒
原生质体
Keywords
Papaya Ringspot Virus
Indirect Dot-ELISA
cdna molecular probe
Virus-Protoplast System
Model of Single-Cell Infection
分类号
S436.68 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
草莓斑驳病毒的分子杂交检测
被引量：
5
3
作者
李丽丽
杨洪一
机构
黑龙江省林业科学研究所
东北林业大学生命科学学院
出处
《湖南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第3期273-276,共4页
基金
中央高校基本科研业务费项目(DL13EA06–3)
文摘
为探索分子杂交技术在草莓斑驳病毒(Strawberry mottle virus,SMoV)检测中的运用,利用CTAB法从草莓叶片中提取总核酸,并以此为模板,利用特异引物扩增SMoV非编码区序列,经克隆、测序获得SMoV非编码区序列。系统进化分析结果显示:本研究中的分离物与GenBank中已报道的分离物的亲缘关系较远,独立形成1个小的进化支。以带有病毒特异片段的质粒为模板,运用PCR技术制备了地高辛标记的cDNA探针。以草莓感染SMoV叶片为试材,利用地高辛标记探针可有效检测草莓叶片中的SMoV,草莓总核酸样品稀释10倍后仍可有效检测。
关键词
草莓斑驳病毒
分子杂交技术
cdna
探针
Keywords
Strawberry mottle virus
molecular
hybridization
cdna
probe
分类号
S668.4 [农业科学—果树学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猴D型逆转病毒Ⅰ型cDNA合成及其分子克隆的建立
陈志伟
《中国比较医学杂志》
CAS
1991
0
在线阅读
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职称材料
2
番木瓜环斑病毒检测新技术的建立及其在病毒——原生质体体系探索中的初步应用
陈枝楠
郑冠标
林孔勋
范怀忠
张春霞
田波
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
1991
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
草莓斑驳病毒的分子杂交检测
李丽丽
杨洪一
《湖南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2014
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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