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抗碱性成纤维细胞生长因子单克隆抗体的制备及特异性分析 被引量:9
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作者 向军俭 刘小青 +1 位作者 廖俊珊 林剑 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期371-374,共4页
以纯化的重组碱性成纤维细胞生长因子为抗原,免疫小鼠取其脾细胞与SP2/0细胞的融合,获得了多株稳定分泌抗碱性成纤维细胞生长因子单克隆抗体杂交瘤细胞株;并以Westernblot和单克隆抗体抑制碱性成纤维细胞生长因子促... 以纯化的重组碱性成纤维细胞生长因子为抗原,免疫小鼠取其脾细胞与SP2/0细胞的融合,获得了多株稳定分泌抗碱性成纤维细胞生长因子单克隆抗体杂交瘤细胞株;并以Westernblot和单克隆抗体抑制碱性成纤维细胞生长因子促进BALB/C3T3细胞生长作用以及ABC免疫组化分析了抗体的特异性。 展开更多
关键词 BFGF 单克隆抗体 制备 特异性分析
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碱性成纤维细胞生长因子单克隆抗体ELISA微量检测技术 被引量:3
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作者 向军俭 徐晓鹏 +2 位作者 王宏 邓宁 杨红宇 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期337-341,共5页
目的:用本室制备的单克隆抗体建立间接ELISA检测微量bFGF的技术。方法:将抗重组牛碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的杂交瘤细胞株,经再克隆化,选择高亲和力的抗bFGF杂交瘤细胞2H2。用ProteinA亲和层析法对2H2腹水型单抗进行纯化。结果:用2... 目的:用本室制备的单克隆抗体建立间接ELISA检测微量bFGF的技术。方法:将抗重组牛碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的杂交瘤细胞株,经再克隆化,选择高亲和力的抗bFGF杂交瘤细胞2H2。用ProteinA亲和层析法对2H2腹水型单抗进行纯化。结果:用2H2mAb建立了高灵敏度的间接、竞争ELISA检测bFGF方法,灵敏度分别达到10和1.0pg/孔,并用间接ELISA检测神经胶质瘤细胞SWO38上清中的bFGF含量。结论:为实验研究和临床应用提供了微量bFGF的检测方法。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) 酶联免疫吸附测定 单克隆抗体
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碱性成纤维细胞生长因子抗体的研究进展 被引量:2
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作者 任哲 杨汝德 +1 位作者 王一飞 林剑 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期279-282,285,共5页
Basic fibroblast growth factor (bFGF) has been used in wound healing, bone healing, vascular grafting, lens regeneration and limp regeneration. Anti-bFGF antibody is thought to be an major important reagent for bFGF r... Basic fibroblast growth factor (bFGF) has been used in wound healing, bone healing, vascular grafting, lens regeneration and limp regeneration. Anti-bFGF antibody is thought to be an major important reagent for bFGF research. This review summarizes the development of anti-bFGF antibody in recent years including preparation, screening, identification and application in order to provide reference to the studies of this field in our country. 展开更多
关键词 细胞融合 单克隆抗体 BFGF
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碱性成纤维细胞生长因子单克隆抗体联合洛铂对肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响 被引量:2
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作者 赵凤芝 赵建夫 +8 位作者 孙一帆 苏嘉敏 全强 罗镇明 向军俭 王宏 傅岳武 谭小玲 徐萌 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期783-788,共6页
目的:研究碱性成纤维细胞生长因子单克隆抗体(monoclonal antibody to basic fibroblast growth factor,b FGF m Ab)联合洛铂(lobaplatin,LBP)对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响及其可能机制。方法:CCK-8法检测药物对A549细胞活性的影响。... 目的:研究碱性成纤维细胞生长因子单克隆抗体(monoclonal antibody to basic fibroblast growth factor,b FGF m Ab)联合洛铂(lobaplatin,LBP)对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响及其可能机制。方法:CCK-8法检测药物对A549细胞活性的影响。Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡率。激光共聚焦显微镜观察细胞核的形态。Western blotting检测细胞内凋亡相关蛋白表达。结果:CCK-8法检测结果显示,细胞培养48 h后,bFGF mAb组和LBP组的细胞增殖受到抑制,但两药联用后的增殖抑制作用明显高于单用LBP及bFGF mAb(P<0.05)。Annexin V-FITC/PI结果显示,联合组早期、晚期凋亡率分别为(27.83±1.23)%和(39.32±1.01)%,与b FGF mAb的(6.25±0.19)%、(14.54±0.25)%和LBP的(16.54±0.39)%、(21.02±0.98)%相比,明显高于单药组的抑制率(P<0.01)。激光共聚焦显微镜显示联合用药诱导的细胞核裂解率较单用b FGF m Ab及LBP的细胞核裂解率明显增多。Western blotting检测结果显示联合组BAX、Caspase-3、Caspase-9、PARP表达量较药物单用组明显增加,而Bcl-2、cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9、cleaved-PARP表达量明显降低。结论:b FGF m Ab联合LBP通过抑制Bcl-2、cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9、cleaved-PARP表达,上调BAX、Caspase-3、Caspase-9和PARP蛋白表达,对肺腺癌A549细胞起到抑制增殖和诱导凋亡的作用。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子单克隆抗体 洛铂 肺腺癌 细胞增殖 凋亡
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抗bFGF单克隆抗体的鉴定及其意义 被引量:1
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作者 向军俭 刘小青 +2 位作者 黄立 刘嵘 梁秋健 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第4期275-277,共3页
用重组牛bFGF免疫Balb/c小鼠,通过细胞融合,以反向间接血凝和间接ELISA筛选,以及有限稀释法克隆化,建立了9株稳定分泌抗bFGF单克隆抗体(mAb)杂交瘤细胞。对其中3株用Westernblot和生物活性抗... 用重组牛bFGF免疫Balb/c小鼠,通过细胞融合,以反向间接血凝和间接ELISA筛选,以及有限稀释法克隆化,建立了9株稳定分泌抗bFGF单克隆抗体(mAb)杂交瘤细胞。对其中3株用Westernblot和生物活性抗体中和实验进行了鉴定。结果显示,mAb可结合重组牛或人bFGF,并能抑制bFGF刺激Balb/c3T3细胞的生长;腹水的ELISA滴度为1∶3000;用其中2株mAb建立的双抗体夹心ELISA法灵敏度可达50pg/孔。本文还讨论了抗bFGFmAb的应用价值。 展开更多
关键词 BFGF 单克隆抗体 鉴定 肿瘤
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猪烧伤创面中碱性成纤维细胞生长因子的免疫定位
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作者 戴方平 刘玉亮 +2 位作者 韦多 陈玉林 葛绳德 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期22-25,共4页
碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)具有调节皮肤成纤维细胞、表皮细胞增殖,促进猪烧伤创面愈合等生物活性。本研究进一步用辣根过氧化物酶(HRP)标记的bFGF单克隆抗体来研究猪浅Ⅱ°烧伤创面对外源性bFGF吸收和代谢... 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)具有调节皮肤成纤维细胞、表皮细胞增殖,促进猪烧伤创面愈合等生物活性。本研究进一步用辣根过氧化物酶(HRP)标记的bFGF单克隆抗体来研究猪浅Ⅱ°烧伤创面对外源性bFGF吸收和代谢。实验结果表明,随着用药时间的不同,外源性bFGF在创面各层的分布不一。bFGF可通过毛囊上皮进入,也可有一个由表皮向真皮逐渐转移的过程。研究结果提示浅度烧伤创面对外源性bFGF的吸收可能是一个主动的过程。 展开更多
关键词 成纤维细胞 生长因子 烧伤 免疫定位
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碱性成纤维细胞生长因子及其单克隆抗体对侵袭性垂体腺瘤裸鼠皮下移植瘤的作用
7
作者 娄四龙 戴勤弼 +2 位作者 毛德强 霍钢 廖正步 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第19期2004-2007,共4页
目的探讨用碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)及其不同浓度单克隆抗体(bFGF-Mab)的方法对裸鼠人侵袭性垂体腺瘤移植瘤血管生成和肿瘤生长的影响及可能机制。方法建立50只人侵袭性垂体腺瘤裸鼠皮下移植瘤模型... 目的探讨用碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)及其不同浓度单克隆抗体(bFGF-Mab)的方法对裸鼠人侵袭性垂体腺瘤移植瘤血管生成和肿瘤生长的影响及可能机制。方法建立50只人侵袭性垂体腺瘤裸鼠皮下移植瘤模型,按区组随机排列方法分成bFGF组,30、20、10μg/ml 3个抗体浓度的bFGF-Mab组及生理盐水对照组,每组10只,分别给予不同处理后8周终止实验,每周测量肿瘤体积,绘制移植瘤体积曲线;对移植瘤组织用免疫组化法检测CD31的表达,以计算肿瘤组织微血管密度(microvessel density,MVD)。结果与对照组、bFGF组比较,bFGF-Mab组对移植瘤的生长及肿瘤血管生成有明显抑制作用,以30μg/ml组的抑瘤率(55.71%)最高(P<0.01);bFGF-Mab各浓度组肿瘤组织中MVD均明显下降,30μg/ml组(3.36±1.26)下降最明显(P<0.01)。结论 bFGF-Mab处理后对裸鼠侵袭性垂体腺瘤皮下移植瘤具有较强的体内抑瘤效应,可能是通过抑制细胞增殖活性及肿瘤血管生成而达到抑制垂体腺瘤的侵袭性生长的。 展开更多
关键词 侵袭性垂体腺瘤 bFGF-Mab 抑瘤效应
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碱性成纤维生长因子单克隆抗体联合伊立替康抑制小细胞肺癌H223细胞的增殖 被引量:3
8
作者 廖湘晖 徐萌 向军俭 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1535-1539,共5页
目的探讨碱性成纤维生长因子(bFGF)单克隆抗体与伊立替康联合应用体外对抑制小细胞肺癌细胞株增殖和凋亡的作用及可能机制。方法 CCK8检测bFGF单克隆抗体联合伊立替康对小细胞肺癌株H223增殖的抑制作用。Annegin V-FITC/PI染色流式细胞... 目的探讨碱性成纤维生长因子(bFGF)单克隆抗体与伊立替康联合应用体外对抑制小细胞肺癌细胞株增殖和凋亡的作用及可能机制。方法 CCK8检测bFGF单克隆抗体联合伊立替康对小细胞肺癌株H223增殖的抑制作用。Annegin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测新型bFGF单克隆抗体联合伊立替康对小细胞肺癌株H223凋亡的影响。Western blotting分析bFGFm Ab联合CPT-11对AKT和ERK1/2磷酸化水平的影响。结果 bFGF单克隆抗体、伊立替康剂量依赖性抑制小细胞肺癌株H223的增殖,bFGF单克隆抗体组、伊立替康组及bFGF单克隆抗体联合伊立替康组对小细胞肺癌株H223的增殖抑制率分别为18.73%、21.96%、54.30%,联合用药组抑制率明显高于单药组(P<0.05)。bFGF单克隆抗体、伊立替康剂量依赖性诱导小细胞肺癌株H223的凋亡,bFGF单克隆抗体组、伊立替康组及bFGF单克隆抗体联合伊立替康组诱导小细胞肺癌株H223的早期凋亡率分别为2.7%、4.3%、6.5%,联合用药组凋亡率明显高于单药组(P<0.05)。bFGF单克隆抗体组、CPT-11组及bFGF单克隆抗体联合CPT-11组可明显抑制p-AKT蛋白和p-ERK1/2蛋白的水平,差异有显著性,而对AKT、ERK1/2蛋白则影响不大。bFGF抗体联合CPT-11一方面通过抑制p-AKT蛋白和p-ERK1/2蛋白的水平来抑制肿瘤细胞的增殖和转移。结论 bFGF单克隆抗体联合伊立替康对小细胞肺癌株H223具有协同抑制作用,其机制与抑制细胞增殖和促进细胞凋亡有关。信号通路分析结果表明bFGF单克隆抗体联合伊立替康能有效阻断与bFGF相关的MAPK/ERK和PI3K/AKT信号通路。 展开更多
关键词 碱性成纤维生长因子 bfgf单克隆抗体 伊立替康 小细胞肺癌 增殖 凋亡 MAPK/ERK1/2 PI3K/AKT
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负载抗sca-1抗体和碱性成纤维细胞生长因子的脱细胞膀胱基质的生物性能研究 被引量:1
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作者 李建奎 梁志清 徐惠成 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第22期2176-2181,共6页
目的观察负载抗sca-1抗体(anti-sca-1)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)-脱细胞膀胱基质(urinary bladder matrix,UBM)生物支架的生物学性能,探讨其作为新型盆底修复材料的可能性。方法通过双特异性化... 目的观察负载抗sca-1抗体(anti-sca-1)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)-脱细胞膀胱基质(urinary bladder matrix,UBM)生物支架的生物学性能,探讨其作为新型盆底修复材料的可能性。方法通过双特异性化学交联试剂4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐(sulfosuccinimidyl 4-[N-maleimidomethyl]cyclohexane-1-carboxylate,sulfosmcc)将anti-sca-1和b FGF特异性结合到UBM上,得到anti-sca-1/b FGF-UBM生物支架。通过扫描电子显微镜观察生物支架表面结构,CCK-8(cell counting kit-8)间接检测体外富集sca-1阳性细胞情况,免疫荧光观察支架诱导小鼠骨髓间充质干细胞(mouse mesenchymal stem cells,m MSCs)分化成熟情况。结果扫描电子显微镜显示anti-sca-1和b FGF能特异性的结合到UBM上。anti-sca-1和b FGF组荧光强度明显高于对照组(P<0.05)。anti-sca-1/b FGF-UBM生物支架富集的sca-1阳性细胞明显较对照组多(P<0.05)。免疫荧光观察结果提示anti-sca-1/b FGF-UBM生物支架可以促进m MSCs向平滑肌细胞分化。结论 anti-sca-1/b FGF-UBM生物支架显示出了良好的生物性能,既能富集sca-1阳性细胞,又能进一步促进细胞分化成熟。 展开更多
关键词 抗sca-1抗体 碱性成纤维细胞生长因子 脱细胞膀胱基质 生物支架 生物性能
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FGF2人源化单抗E12及其联合顺铂/紫杉醇体外抑制乳腺癌细胞增殖作用的研究 被引量:3
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作者 张宇 黄建芳 +2 位作者 徐萌 王宏 向军俭 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1187-1194,共8页
目的:研究人源化FGF2单抗体E12体外联合化疗药物抑制乳腺癌肿瘤细胞增殖的作用。方法:分析人源化FGF2单抗可变区人源氨基酸序列比率;SDS-PAGE和HPLC检测单抗纯度;ELISA测定单抗效价;BSA法检测单抗浓度;CCK-8法检测单抗联合化疗药物对乳... 目的:研究人源化FGF2单抗体E12体外联合化疗药物抑制乳腺癌肿瘤细胞增殖的作用。方法:分析人源化FGF2单抗可变区人源氨基酸序列比率;SDS-PAGE和HPLC检测单抗纯度;ELISA测定单抗效价;BSA法检测单抗浓度;CCK-8法检测单抗联合化疗药物对乳腺癌肿瘤细胞株的细胞增殖抑制作用;流式细胞术检测FGF2单抗联合化疗药物对乳腺癌细胞株的促凋亡作用;使用Discovery Studio 4.5软件对单抗的表位进行分析。结果:单抗可变区人源氨基酸序列比率重链为98.89%,轻链为100.00%;单抗纯度为99.02%;单抗ELISA效价为1/243 000;单抗浓度为8.74 mg/ml;CCK-8结果表明顺铂为10、5、2.5、0.625μg/ml时,单抗+顺铂组比顺铂组对MCF-7细胞抑制率提高了14.5%、10.4%、1.5%、0.5%;对MDAMB453细胞抑制率提高了15.5%、14.8%、13.0%、6.8%,紫杉醇为1.0、0.1、0.01μg/ml时,单抗+紫杉醇组比紫杉醇组对MCF-7细胞抑制率提高了14.5%、11.1%、9.3%,紫杉醇为0.1、0.01、0.001μg/ml时,单抗+紫杉醇组比紫杉醇组对MDAMB453细胞的抑制率提高了18.6%、19.9%、6.8%;流式结果表明,单抗、紫杉醇及单抗+紫杉醇组的MCF-7细胞在Annexin V/PI双阳性区所占比例提高了6.13%、7.36%和12.83%,同理MDA-MB453细胞所占比例提高了4.86%、7.1%和14.1%,单抗、顺铂及单抗+顺铂组MCF-7细胞在Annexin V/PI双阳性区所占比例提高了6.39%、9.46%和17.76%,同理MDA-MB453细胞所占比例提高了5.38%、9.06%和19.39%;表位分析结果表明FGF2单抗有效封闭FGF2与受体结合的部分位点。结论:FGF2人源单抗E12人源化程度较高;FGF2人源化单抗联合化疗药物相对单药组可较明显地提高肿瘤细胞增殖抑制作用以及促细胞凋亡作用;本研究为FGF2抗体药物研发提供了前期基础。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子 人源化单克隆抗体 E12 MCF-7 MDA-MB453 顺铂 紫杉醇 联合用药
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