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载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样3A蛋白在宫颈癌进化发育中的研究进展
1
作者 贺海威 徐明娟 《海军军医大学学报》 北大核心 2025年第6期798-802,共5页
载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样3A(APOBEC3A)突变是宫颈癌的一个主要驱动因素。APOBEC3A与人乳头瘤病毒(HPV)关系密切:一方面可以有效抑制HPV感染,另一方面又可以促进HPV DNA整合入宫颈角质细胞。本文综述了HPV与APOBEC3A错综复杂的相... 载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样3A(APOBEC3A)突变是宫颈癌的一个主要驱动因素。APOBEC3A与人乳头瘤病毒(HPV)关系密切:一方面可以有效抑制HPV感染,另一方面又可以促进HPV DNA整合入宫颈角质细胞。本文综述了HPV与APOBEC3A错综复杂的相互作用,并分析了其所涉及的病毒机制和细胞信号通路。大量研究证实,APOBEC3A基因可以有效诱导包括宫颈癌在内的多种恶性肿瘤的进化发育,而在临床样本中,癌细胞中APOBEC3A蛋白的表达水平却并不太高。本文还展望了宫颈癌中的APOBEC3A活性的意义以及潜在的治疗价值。 展开更多
关键词 载脂蛋白b mRNA编辑酶催化多肽样3A 宫颈肿瘤 进化 发育
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APOBEC3G对HIV-1及其Vif缺失株的抑制作用 被引量：1
2
作者 李岚 曾毅 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第2期177-181,共5页
目的研究细胞内在抗病毒因子APOBEC3G对HIV-1及其Vif缺失株的抑制作用。方法 HIV-1野生株病毒(BH10WT)和Vif缺失株病毒(BH10ΔVif)分别由转染293T细胞获得,通过感染MT4和H9细胞,分别检测其反转录酶活性。用分子克隆技术构建APOBEC3G与... 目的研究细胞内在抗病毒因子APOBEC3G对HIV-1及其Vif缺失株的抑制作用。方法 HIV-1野生株病毒(BH10WT)和Vif缺失株病毒(BH10ΔVif)分别由转染293T细胞获得,通过感染MT4和H9细胞,分别检测其反转录酶活性。用分子克隆技术构建APOBEC3G与绿色荧光蛋白融合表达的质粒pEGFP-3G。HIV-1野生株和Vif缺失株质粒与不同剂量的pEGFP-3G共转染293T细胞,APOBEC3G-GFP在细胞内融合表达定位通过荧光显微镜观察。所生成的子代病毒粒子的感染力分别由MAGI检测和反转录酶活性检测方法定量。结果 BH10 WT病毒在H9细胞和MT4细胞中均有所复制,在感染MT4细胞后4 d已经具有较高的反转录酶活性。BH10ΔVif病毒感染H9细胞产生的子代病毒的反转录酶活性接近细胞对照水平,而其在MT4细胞中产生的子代病毒的反转录酶活性在感染后12 d有所显现,即非允许性H9细胞内APOBEC3G对ΔVif病毒株具有很强的抑制作用。与绿色荧光蛋白融合表达的APOBEC3G蛋白定位于细胞质。BH10ΔVif转染293T细胞后生成的病毒滴度为2.75×104 U/mL,随着pEGFP-3G共转染量的升高,所产生的子代病毒滴度从1.48×103 U/mL显著降至0.33×103 U/mL。与0.2μg质粒pEGFP-3G共转染产生的BH10ΔVif病毒的感染力比不表达APOBEC3G的相同病毒的感染力降低近20倍。结论 APOBEC3G具有抗HIV活性,同时HIV Vif在病毒复制过程中发挥关键作用,两者之间相互作用的量效关系为我们构建抗病毒药物筛选平台奠定了可靠的实验基础。 展开更多
关键词 HIV-1 病毒感染因子 载脂蛋白bmRNA编辑酶催化多肽样蛋白3G
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Apobec-1重组腺病毒治疗肾性高脂血症的实验研究
3
作者 孔海波 胡波 胡鹏 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第8期1049-1053,共5页
目的探讨肝脏获得性表达载脂蛋白B编辑催化多肽-1(Apobec-1)对肾性血脂代谢紊乱的调控效应。方法30只健康普通级雄性新西兰兔随机分为假手术组、肾病组、Apobec-1治疗组,每组10只。肾病组、Apobec-1治疗组适应性喂养1周后行左肾切除术,... 目的探讨肝脏获得性表达载脂蛋白B编辑催化多肽-1(Apobec-1)对肾性血脂代谢紊乱的调控效应。方法30只健康普通级雄性新西兰兔随机分为假手术组、肾病组、Apobec-1治疗组,每组10只。肾病组、Apobec-1治疗组适应性喂养1周后行左肾切除术,术后1周耳缘静脉注射阿霉素(4 mg/kg)构建肾病模型。术后11周Apobec-1治疗组耳缘静脉注射Apobec-1重组腺病毒(1×1013病毒颗粒/kg)。术后12周处死所有兔,并摘除右侧肾脏和肝脏,分别留取血液及24 h尿液,检测24 h尿蛋白(24UPr)、白蛋白(Alb)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、血脂等指标,HE染色观察肾脏病理,Western blot检测肝脏Apobec-1、载脂蛋白B48(Apo B48)蛋白表达水平。结果 1与假手术组比较,肾病组24UPr、BUN、Cr、总胆固醇(TC)、总三酰甘油(TG)、极低密度脂蛋白(VLDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、载脂蛋白B100(Apo B100)明显升高(P<0.05),而Alb水平明显下降(P<0.05);2与肾病组比较,Apobec-1治疗组TC、TG、VLDL-C、LDL-C、Apo B100、Apo B48水平明显下降(P<0.05);3与假手术组比较,Apobec-1治疗组24UPr、BUN、Cr明显升高(P<0.05),而Alb、Apo B48明显下降(P<0.05);4 Western blot结果显示,与假手术组、肾病组比较,Apobec-1治疗组肝脏Apobec-1、Apo B48表达明显上调(P<0.01)。结论肾性高脂血症中,肝脏获得性表达Apobec-1,重建Apo B mRNA编辑,增加Apo B48-脂蛋白的合成,进而起到一定的降脂效应。 展开更多
关键词 高脂血症 载脂蛋白b编辑催化多肽-1 载脂蛋白 b100 载脂蛋白b48
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宫颈癌组织APOBEC3A蛋白的表达与高危型HPV感染的相关性研究 被引量：10
4
作者 陈姗 狄娜 +4 位作者 秦君璞 郑婷婷 李丹 周莉 张帝开 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期845-849,共5页
目的:探讨宫颈癌组织中载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3A(APOBEC3A)表达与高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系。方法:采用免疫组化法检测26例宫颈癌、27例宫颈上皮内瘤变(CIN)I～III和22例正常宫颈组织APOBEC3A蛋白的表达,同时使... 目的:探讨宫颈癌组织中载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3A(APOBEC3A)表达与高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系。方法:采用免疫组化法检测26例宫颈癌、27例宫颈上皮内瘤变(CIN)I～III和22例正常宫颈组织APOBEC3A蛋白的表达,同时使用凯普分型检测试剂盒对3组样品分别进行高危HPV16/HPV18分型检测。以脂质体法转染APOBEC3A质粒进入HeLa细胞,RT-qPCR与Western blotting验证APOBEC3A对高危型HPV18 E6 mRNA以及蛋白表达的影响。结果:宫颈癌组织、CIN组织以及正常宫颈组织中APOBEC3A蛋白表达的阳性率分别为46.2%、92.6%和86.4%,宫颈癌组织中APOBEC3A蛋白表达较正常宫颈组织明显下降(P<0.01)。宫颈癌组织、CIN及正常宫颈组织中HPV16感染阳性率分别为92.3%、77.8%和54.5%;HPV18感染阳性率分别为80.8%、51.8%和68.2%;APOBEC3A蛋白表达与HPV18感染阳性率呈负相关(P<0.05)。增加HeLa细胞中APOBEC3A的表达明显降低了HPV18 E6 mRNA以及蛋白的表达。结论:在宫颈癌组织中APOBEC3A高表达可以对抗HPV18感染,并抑制HPV18 E6的转录和表达。 展开更多
关键词 载脂蛋白b mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3A 人乳头状瘤病毒 宫颈肿瘤
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猪APOBEC3F基因克隆及真核表达载体的构建与鉴定 被引量：4
5
作者 孙宇 罗佳 +1 位作者 马玉媛 章金刚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第18期1904-1906,共3页
目的克隆猪载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3F(apolipoprotein B mRNA editing enzyme,catalyticpolypeptide 3F,APOBEC3F)基因,构建真核表达载体实现其在体外表达与鉴定。方法分离4头21周龄,体质量25～30kg的雌性健康五指山猪的外... 目的克隆猪载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3F(apolipoprotein B mRNA editing enzyme,catalyticpolypeptide 3F,APOBEC3F)基因,构建真核表达载体实现其在体外表达与鉴定。方法分离4头21周龄,体质量25～30kg的雌性健康五指山猪的外周血单个核细胞,Trizol法提取细胞总RNA,RT-PCR特异性扩增目的基因,目的基因插入真核表达载体pDsRed1-N1及改造的pCDNA3-Flage载体构建表达质粒并在PK-15细胞中进行表达。激光共聚焦显微镜及Western blot鉴定目的基因的表达。结果克隆的目的基因与公布的基因序列同源性达99%;激光共聚焦显微镜显示目的基因在PK-15细胞表达,且表达产物定位于细胞质内;Western blot检测示表达的目的蛋白大小与预期相符。结论成功构建了猪APOBEC3F真核表达载体。 展开更多
关键词 APObEC3F 克隆 真核表达载体 鉴定
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APOBEC3蛋白与HPV及宫颈癌的研究进展 被引量：5
6
作者 魏智(综述) 赵洪波 +2 位作者 张涛 冯璇 杜琰(审校) 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期271-276,共6页
宫颈癌是严重威胁女性健康的恶性肿瘤之一,已知人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染是宫颈癌的主要病因,但具体机制尚不明确。人载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽(apolipoprotein B mRNA-editing enzyme catalytic polypeptide,AP... 宫颈癌是严重威胁女性健康的恶性肿瘤之一,已知人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染是宫颈癌的主要病因,但具体机制尚不明确。人载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽(apolipoprotein B mRNA-editing enzyme catalytic polypeptide,APOBEC)家族是一组能够编辑DNA或RNA序列的胞苷脱氨酶。APOBEC3成员是固有免疫系统的重要成员,在抗病毒感染防御过程中扮演重要角色。APOBEC3与多种肿瘤的发生发展密切相关,可能与HPV感染以及宫颈癌的关系尤为密切。APOBEC3B可能通过“协助”HPV病毒使抑癌蛋白失活及促进HPV病毒癌蛋白的突变,从而促进癌症的发生。本文就APOBEC3与HPV清除、突变和宫颈癌发生方面的研究进行综述。 展开更多
关键词 载脂蛋白b mRNA编辑催化多肽3(APObEC3) 宫颈癌 人乳头瘤病毒(HPV)
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人天然免疫蛋白载脂蛋白B mRNA编辑酶催化亚基3A(APOBEC3A)的克隆表达及活性鉴定
7
作者 成珊 曹丽妍 +2 位作者 杜娟 王文勇 郭晏海 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期179-184,共6页
目的构建载脂蛋白B mRNA编辑酶催化亚基3A(APOBEC3A)表达载体,真核细胞表达APOBEC3A并鉴定其胞嘧啶脱氨酶活性。方法构建APOBEC3A真核表达载体pc DNA3.0-APOBEC3A,转染HEK293T细胞和Hep G2细胞。Western blot法鉴定APOBEC3A蛋白表达,免... 目的构建载脂蛋白B mRNA编辑酶催化亚基3A(APOBEC3A)表达载体,真核细胞表达APOBEC3A并鉴定其胞嘧啶脱氨酶活性。方法构建APOBEC3A真核表达载体pc DNA3.0-APOBEC3A,转染HEK293T细胞和Hep G2细胞。Western blot法鉴定APOBEC3A蛋白表达,免疫荧光细胞化学染色确定APOBEC3A在HEK293T细胞和Hep G2细胞的定位,利用组蛋白(His)标签蛋白纯化方法富集纯化APOBEC3A蛋白,荧光偏振技术检测APOBEC3A脱氨酶活性。结果 DNA测序证实pc DNA3.0-APOBEC3A插入长600 bp的APOBEC3A基因序列;该质粒能在HEK293T细胞和Hep G2细胞表达APOBEC3A,APOBEC3A在HEK293T细胞中主要分布于胞质,在Hep G2细胞中胞质和胞核均匀分布;纯化获得的APOBEC3A对单链DNA中TTCA序列具有胞嘧啶脱氨基活性。结论成功构建APOBEC3A真核表达载体,APOBEC3A在HEK293T细胞和Hep G2细胞定位不同,表达的APOBEC3A具有胞嘧啶脱氨基活性。 展开更多
关键词 固有免疫 载脂蛋白b mRNA编辑酶催化亚基3A(APObEC3A) 胞嘧啶脱氨酶 克隆表达
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癌症新型的诊疗靶点——APOBEC
8
作者 鲁晶晶 门姝含 韩英伦 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期152-158,共7页
APOBEC("载脂蛋白质B mRNA编辑催化多肽")是一类进化保守的胞苷脱氨酶家族。在人体内,已知含有保守的DNA胞嘧啶脱氨酶结构域的基因共有11种,包括AID、APOBEC1、APOBEC2、APOBEC3基因家族APOBEC3A、APOBEC3B、APOBEC3C、APOBEC... APOBEC("载脂蛋白质B mRNA编辑催化多肽")是一类进化保守的胞苷脱氨酶家族。在人体内,已知含有保守的DNA胞嘧啶脱氨酶结构域的基因共有11种,包括AID、APOBEC1、APOBEC2、APOBEC3基因家族APOBEC3A、APOBEC3B、APOBEC3C、APOBEC3DE、APOBEC3F、APOBEC3G、APOBEC3H(分别称为A3A、A3B、A3C、A3D、A3F、A3G和A3H)和APOBEC4。APOBEC利用其脱氨酶活性通过与RNA和/或DNA结合,催化mRNA或使DNA中的胞嘧啶核苷酸转变为尿嘧啶,或者胞嘧啶核苷酸转变为胸腺嘧啶核苷酸,进而完成各自不同的功能。目前研究发现,AID及APOBEC3(A3s)的7种脱氨酶在人类的天然免疫和适应性免疫防御过程中发挥重要的作用,且在口腔癌,肺癌(腺癌和鳞状细胞癌),结直肠癌和乳腺癌等的诊疗过程中具有重要的潜在应用价值。AID可以通过将胞嘧啶脱氨基成尿嘧啶,来启动SHM(体细胞超突变)和CSR(类别转换重组),进而在抗体多样性方面发挥作用。它的异常表达能够使B细胞淋巴瘤等恶性肿瘤的发病频率显著增加。而A3A、A3B通过胞嘧啶到尿嘧啶转换,以及自身表达量上调而在乳腺癌和肺癌诊疗中起作用。A3G通过APOBEC3G/miR-29/MMP2为了解结直肠癌肝转移和开发治疗晚期结肠癌的有效疗法开辟了新的途径。综上所述,本文将以AID,A3A,A3B,A3G为例子,对APOBEC在癌症诊断和治疗方面的应用进行综述,以期为进一步药物研究和临床应用等提供参考。 展开更多
关键词 载脂蛋白b mRNA编辑催化多肽 癌症 诊断 治疗
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APOBEC3B调控葡萄膜黑色素瘤复制应激的研究
9
作者 宗春燕 何杰 +2 位作者 张哲 贾仁兵 沈键锋 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1034-1044,共11页
目的·研究载脂蛋白B mRNA编辑酶催化亚基3B(apolipoprotein B mRNA editing enzyme catalytic subunit 3B,APOBEC3B)在葡萄膜黑色素瘤(uveal melanoma,UM)中的生物学功能以及对药物治疗敏感性的影响。方法·应用免疫组织化学... 目的·研究载脂蛋白B mRNA编辑酶催化亚基3B(apolipoprotein B mRNA editing enzyme catalytic subunit 3B,APOBEC3B)在葡萄膜黑色素瘤(uveal melanoma,UM)中的生物学功能以及对药物治疗敏感性的影响。方法·应用免疫组织化学染色和Western blotting,分别检测眼部黑色素瘤[UM和结膜黑色素瘤(conjunctival melanoma,CM)]组织和细胞中APOBEC3B蛋白的表达水平。通过检索癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库,分析UM中APOBEC3B表达水平与预后的关联。使用CRISPR-Cas9质粒APOBEC3B-sgRNA敲除UM细胞系OMM2.3中APOBEC3B基因,构建APOBEC3B敲除的OMM2.3稳转细胞系sgAPOBEC3B以及对照细胞系Vector;并通过克隆形成实验,探索APOBEC3B敲除对OMM2.3细胞增殖的影响。同时,通过APOBEC3B-shRNA和空载质粒建立APOBEC3B敲低的OMM2.3细胞shAPOBEC3B和对照细胞shCtrl,对其进行转录组测序(RNA sequencing,RNA-seq),检测差异基因,并通过基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)揭示APOBEC3B调控的下游通路。通过免疫荧光染色鉴定下游通路的关键蛋白。通过应用通路靶向药物处理,检测APOBEC3B对UM药物治疗敏感性的影响。结果·免疫组织化学染色结果表明眼部黑色素瘤(UM和CM)组织相较于良性色素痣组织APOBEC3B表达更高。Western blotting也表明包括OMM2.3细胞在内的大多数眼部黑色素瘤细胞相较于正常对照细胞(视网膜色素上皮细胞)APOBEC3B蛋白表达水平更高。并且TCGA数据库分析表明,APOBEC3B高表达的UM患者总生存期(P=0.032)和无病生存期(P=0.000)更短。然而APOBEC3B敲除并不影响OMM2.3细胞克隆形成的能力,APOBEC3B敲低也没有造成细胞周期的显著改变。shAPOBEC3B和shCtrl细胞系的RNA-seq差异基因富集分析结果显示,APOBEC3B参与调控OMM2.3细胞的复制应激相关通路,并且热图分析也显示APOBEC3B敲低后DNA复制应激相关通路基因表达发生改变。免疫荧光染色结果显示,APOBEC3B敲低后复制应激通路关键靶标磷酸化的复制蛋白A 32 kDa亚基(replication protein A 32 kDa subunit,RPA32)水平降低。在对APOBEC3B敲低的OMM2.3细胞和对照细胞的药物敏感性实验中,发现相较于shAPOBEC3B细胞,shCtrl细胞对细胞周期检测点激酶1(cell cycle checkpoint kinase 1,CHK1)抑制剂的敏感性更高。结论·APOBEC3B参与调控OMM2.3细胞复制应激相关通路,且APOBEC3B表达的OMM2.3细胞对CHK1抑制剂的处理更为敏感。 展开更多
关键词 载脂蛋白b mRNA编辑酶催化亚基3b(APObEC3b) 葡萄膜黑色素瘤 复制应激 细胞周期检测点激酶1(CHK1)抑制剂
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