家蝇幼虫抗菌肽对铜绿假单胞菌感染小鼠创面的抗菌活性 被引量：10

1

作者 陈曼 胡启飞 +2 位作者 文阳安 周义文 涂植光 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期91-94,共4页

通过超声处理诱导家蝇幼虫产生抗菌肽,观察抗菌肽对铜绿假单胞菌感染小鼠创面的抗菌作用。超声处理诱导家蝇幼虫产生抗菌肽,经分离纯化后,体外试验分析抗菌肽的抑菌特性。结果表明,术后对照组小鼠相比其他两组活动减少,且3组白细胞计数... 通过超声处理诱导家蝇幼虫产生抗菌肽,观察抗菌肽对铜绿假单胞菌感染小鼠创面的抗菌作用。超声处理诱导家蝇幼虫产生抗菌肽,经分离纯化后,体外试验分析抗菌肽的抑菌特性。结果表明,术后对照组小鼠相比其他两组活动减少,且3组白细胞计数均减少。14 d后对照组存活率为30%,明显少于磺胺米隆组90%(P<0.05)和抗菌肽组80%(P<0.05)。对照组小鼠的重量在第6 d开始下降,明显少于其他两组(P<0.05)。而无菌对照组无死亡,重量持续增加。因此,超声处理能诱导家蝇幼虫产生抗菌肽,其对铜绿假单胞菌感染的ICR小鼠创面有较强抗感染作用,能明显增加其存活率。 展开更多

关键词 家蝇 抗菌肽 超声诱导 铜绿假单胞菌 伤口感染

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家蝇新型抗菌肽Muscin的基因克隆、表达模式及抑菌活性 被引量：8

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作者 杨雪 唐婷 +4 位作者 王一丽 刘欣 曹新茹 倪志华 柳峰松 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期617-624,共8页

【目的】鉴定家蝇Musca domestica(Linnaeus)中一种新型抗菌肽(Muscin)基因,并分析其功能。【方法】通过数字基因表达谱和生物信息学分析,在家蝇转录组中筛选得到一条抗菌肽基因,命名为muscin。以实时荧光定量PCR技术研究该基因的组织... 【目的】鉴定家蝇Musca domestica(Linnaeus)中一种新型抗菌肽(Muscin)基因,并分析其功能。【方法】通过数字基因表达谱和生物信息学分析,在家蝇转录组中筛选得到一条抗菌肽基因,命名为muscin。以实时荧光定量PCR技术研究该基因的组织分布以及用大肠杆菌Escherichia coli和金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus混合细菌刺激后的表达量变化。并对合成肽Muscin进行抑菌活性检测及溶血率测定。【结果】muscin基因c DNA序列全长379 bp,包含完整的开放阅读框153 bp。推导Muscin多肽序列由50个氨基酸残基组成,N端含有由25个氨基酸残基组成的信号肽。成熟肽中富含疏水性氨基酸残基和带正电荷的氨基酸残基,理论等电点为9.39。基因定量结果显示muscin基因在血细胞和脂肪体中表达量最高。通过细菌刺激进行免疫诱导后,幼虫体内该基因的表达水平明显上调,并在6 h达到高峰。抑菌和溶血实验显示c-Muscin对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌具有广谱抑菌活性,且溶血活性较低。【结论】Muscin是一种新型的广谱抗菌肽,可能参与家蝇抗菌免疫反应,且具有一定药物开发潜质。 展开更多

关键词 家蝇 抗菌肽 基因克隆 生物信息学分析 表达量 抑菌活性 溶血实验

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细菌诱导家蝇蛹抗菌物质的分离纯化 被引量：5

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作者 党向利 柴一秋 +1 位作者 翁宏飚 张文庆 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2011年第2期166-172,共7页

家蝇生境中充满病原菌,其有效的防防机制成为研究的热点。通过三氟乙酸缓冲液浸提、热处理、固相萃取以及两次RP-HPLC等方法,从混合细菌液诱导的家蝇蛹中分离纯化出4种具有抗菌活性的物质。结果表明,提取的家蝇蛹粗提液抗菌谱较广,对多... 家蝇生境中充满病原菌,其有效的防防机制成为研究的热点。通过三氟乙酸缓冲液浸提、热处理、固相萃取以及两次RP-HPLC等方法,从混合细菌液诱导的家蝇蛹中分离纯化出4种具有抗菌活性的物质。结果表明,提取的家蝇蛹粗提液抗菌谱较广,对多种微生物具有不同程度的抗菌作用,且抗菌效果好于天然肽类防腐剂和一些化学防腐保鲜剂。4种抗菌物质中包括3个抗菌肽和1个抗菌化合物。Tricine-SDS-PAGE结果显示3个抗菌肽的分子量分别约为12kDa、8kDa和4kDa。本研究表明细菌诱导家蝇蛹中具有丰富的抗菌物质。 展开更多

关键词 家蝇 抗菌肽 化合物 抗菌活性 纯化

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家蝇幼虫抗菌肽对阴沟肠杆菌感染小鼠创面的抗菌活性 被引量：3

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作者 陈曼 文阳安 +2 位作者 刘银河 周义文 涂植光 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2008年第12期1430-1433,共4页

目的:观察抗菌肽对阴沟肠杆菌感染小鼠创面的抗菌作用。方法:超声处理诱导家蝇幼虫产生抗菌肽,经分离纯化后,体外实验分析抗菌肽的抑菌特性。取ICR小鼠30只,切除背部1cm×1cm全层皮肤,涂抹阴沟肠杆菌菌液作为感染模型,随机分为3组... 目的:观察抗菌肽对阴沟肠杆菌感染小鼠创面的抗菌作用。方法:超声处理诱导家蝇幼虫产生抗菌肽,经分离纯化后,体外实验分析抗菌肽的抑菌特性。取ICR小鼠30只,切除背部1cm×1cm全层皮肤,涂抹阴沟肠杆菌菌液作为感染模型,随机分为3组。伤后2h和每天各组分别用等渗生理盐水、100g/L的磺胺米隆或0.1g/L抗菌肽滤纸湿敷,伤前和伤后3d抽血观察白细胞变化;伤后3d痂下肌肉组织细菌定量和计算存活率。结果:抗菌肽纯化蛋白对阴沟肠杆菌的抑菌活性较强;术后3组白细胞记数均减少,对照组显著低于其他两组(P<0.05);痂下肌肉组织细菌定量抗菌肽组(99±32)×102CFU/g和磺胺米隆组(87±31)×102CFU/g,均显著低于对照组(504±338)×103CFU/g(P<0.01);对照组伤后3d存活率明显少于其他两组(P<0.05)。结论:超声处理能诱导家蝇幼虫产生抗菌肽,其对阴沟肠杆菌感染的ICR小鼠创面有较强抗感染作用。 展开更多

关键词 家蝇 抗菌肽 超声诱导 伤口感染 阴沟肠杆菌

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家蝇幼虫抗菌活性诱导研究 被引量：2

5

作者 汤晴 顾若兰 +1 位作者 孙文种 窦桂芳 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期98-100,131,共4页

目的探讨针刺损伤方法对家蝇幼虫抗菌肽类物质诱导表达的影响,并对所得抗菌肽粗提液的保存条件进行了研究。方法人工饲养的家蝇5日龄幼虫,针刺损伤体壁后,制备抗菌肽粗提液,分别置4℃和-20℃保存30d,BCA蛋白测定试剂盒测定蛋白含量。并... 目的探讨针刺损伤方法对家蝇幼虫抗菌肽类物质诱导表达的影响,并对所得抗菌肽粗提液的保存条件进行了研究。方法人工饲养的家蝇5日龄幼虫,针刺损伤体壁后,制备抗菌肽粗提液,分别置4℃和-20℃保存30d,BCA蛋白测定试剂盒测定蛋白含量。并以大肠埃希菌为指示菌,琼脂打孔扩散法抑菌试验检测抗菌活性大小。结果针刺损伤诱导后提取的抗菌肽粗提液对大肠埃希菌的抑菌活性高于未诱导组,粗提液于4℃保存比-20℃保存更有利于抗菌肽的活性保持。结论针刺损伤法可诱导家蝇幼虫产生抗菌肽类物质,抗菌肽粗提液置于4℃保存更有利于抗菌肽活性的保持。 展开更多

关键词 家蝇幼虫 抗菌肽 诱导 针刺 抗菌活性

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家蝇抗菌肽祛痘功效性评价及其产品开发 被引量：3

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作者 张悦 蒋林 +2 位作者 王德友 周立武 常志英 《日用化学工业》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期438-440,共3页

采用肉汤稀释法测得家蝇抗菌肽对痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes)的最低抑菌浓度(MIC)为0.078 mg/mL。根据GB 15979—2002《一次性使用卫生用品卫生标准》中附录C 4"溶出性抗(抑)菌产品抑菌性能试验方法",测得家蝇抗... 采用肉汤稀释法测得家蝇抗菌肽对痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes)的最低抑菌浓度(MIC)为0.078 mg/mL。根据GB 15979—2002《一次性使用卫生用品卫生标准》中附录C 4"溶出性抗(抑)菌产品抑菌性能试验方法",测得家蝇抗菌肽在添加质量分数为1%,2%,3%和5%时的抑菌率分别为34.21%,42.42%,99.99%和99.99%。根据QB/T1857—2004中润肤膏霜的卫生指标及感官、理化指标的试验方法及检验标准对该祛痘产品进行检测,结果表明各项指标均符合标准中的要求,且进一步的加速稳定性试验表明,产品的稳定性较好,未见分层、变色、变质和变味等现象的发生。 展开更多

关键词 化妆品添加剂 家蝇抗菌肽 祛痘功效 痤疮丙酸杆菌 抑菌活性

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家蝇抗菌肽及其基因工程研究进展 被引量：3

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作者 王鑫 刘晖 +1 位作者 沈玉娟 曹建平 《安徽农业科学》 CAS 2013年第10期4273-4275,共3页

家蝇抗菌肽是家蝇体液免疫中的重要组成部分,是对细菌、病毒、真菌、肿瘤细胞和原虫均有抑制作用的小分子蛋白。随着细菌的耐药性和耐药菌株的出现,人们对家蝇抗菌肽的研究愈来愈关注,文中对家蝇抗菌肽的结构分类、生物学特性、表达调... 家蝇抗菌肽是家蝇体液免疫中的重要组成部分,是对细菌、病毒、真菌、肿瘤细胞和原虫均有抑制作用的小分子蛋白。随着细菌的耐药性和耐药菌株的出现,人们对家蝇抗菌肽的研究愈来愈关注,文中对家蝇抗菌肽的结构分类、生物学特性、表达调控和基因工程等方面进行了综述,并对其未来发展进行了展望。 展开更多

关键词 家蝇 抗菌肽 分类 生物学特性 基因工程

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家蝇的养殖及其生理生化研究进展 被引量：9

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作者 常斌 韩日畴 《昆虫天敌》 CSCD 2007年第1期33-39,共7页

家蝇是一种重要的可再生性昆虫资源。蝇蛆(家蝇幼虫)具有很高的营养价值,可用作动物饲料;其体壁富含几丁质,是药物的原材料;体内含有特殊的抗菌物质,具有很强的抗菌作用。本文综述了家蝇的生物学、生理生化特征、抗菌物质的应用、大量... 家蝇是一种重要的可再生性昆虫资源。蝇蛆(家蝇幼虫)具有很高的营养价值,可用作动物饲料;其体壁富含几丁质,是药物的原材料;体内含有特殊的抗菌物质,具有很强的抗菌作用。本文综述了家蝇的生物学、生理生化特征、抗菌物质的应用、大量培养方法以及基因操作方面的进展,为可生性昆虫资源的研究提供了参考。 展开更多

关键词 家蝇 资源昆虫 抗菌肽 几丁质 转基因家蝇

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家蝇Denfensin-1基因的克隆、诱导表达及启动子活性分析 被引量：4

9

作者 卢丹 郑立 +3 位作者 王欣欣 王凡 唐婷 柳峰松 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期854-863,共10页

【目的】鉴定一种新的家蝇Musca domestica防御素基因,并分析其功能。【方法】从家蝇转录组数据库中鉴定了1条新的防御素基因cDNA序列,并将其命名为家蝇防御素1(Md-defensin-1)基因Mdde-1。利用生物信息学网站、软件预测其结构等信息。... 【目的】鉴定一种新的家蝇Musca domestica防御素基因,并分析其功能。【方法】从家蝇转录组数据库中鉴定了1条新的防御素基因cDNA序列,并将其命名为家蝇防御素1(Md-defensin-1)基因Mdde-1。利用生物信息学网站、软件预测其结构等信息。以实时荧光定量PCR技术研究该基因的表达模式,并且利用基因步移技术获得了启动子序列,同时采取细胞转染技术验证Mdde-1启动子活性。【结果】该序列包含一个276 bp的开放阅读框,编码91个氨基酸残基。推导的氨基酸序列N端包括1个23个氨基酸残基的信号肽和1个28个氨基酸残基的前肽。成熟肽由40个氨基酸残基组成,含有1个典型的CSαβ基序。实时荧光定量PCR结果显示,家蝇2龄幼虫受金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus(G+)刺激后Mdde-1表达明显上调,而大肠杆菌Escherichia coli(G-)刺激后表达下调;Mdde-1在家蝇幼虫受到热激时呈上调表达。为进一步研究其调控机制,克隆了Mdde-1启动子,并证明了该启动子具有活性。【结论】据此认为Mdde-1是一种新的家蝇防御素,并且在免疫革兰氏阳性菌方面发挥重要作用;同时我们首先证明了Mdde-1的启动子具有活性。本研究为进一步研究家蝇防御素的作用机制奠定了基础。 展开更多

关键词 家蝇 先天免疫 抗菌肽 防御素 基因克隆 启动子

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肽聚糖识别蛋白PGRP-SC在家蝇肠道免疫中的功能分析 被引量：4

10

作者 路永鹏 顾冀海 +3 位作者 高一夫 唐婷 柳峰松 黄大卫 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期269-277,共9页

【目的】探究家蝇Musca domestica幼虫肽聚糖识别蛋白PGRP-SC在应对肠道入侵细菌中的作用。【方法】通过投喂表达Md PGRP-SC dsRNA的宿主大肠杆菌Escherichia coli干扰家蝇初孵幼虫Md PGRP-SC基因表达,并利用q PCR技术检测干扰效果;在... 【目的】探究家蝇Musca domestica幼虫肽聚糖识别蛋白PGRP-SC在应对肠道入侵细菌中的作用。【方法】通过投喂表达Md PGRP-SC dsRNA的宿主大肠杆菌Escherichia coli干扰家蝇初孵幼虫Md PGRP-SC基因表达,并利用q PCR技术检测干扰效果;在荧光显微镜下观察干扰后试虫肠道内表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的大肠杆菌存活情况,同时通过比色法检测干扰后试虫肠道组织内的H2O2含量,利用q PCR检测试虫肠道内抗菌肽基因的表达情况。【结果】q PCR结果显示,投喂干扰24 h后家蝇幼虫体内Md PGRP-SC基因的相对表达量显著降低。对PGRP-SC干扰组和GFP对照组试虫投喂表达GFP的大肠杆菌,30 min后干扰组家蝇肠道内荧光亮度弱于GFP对照组。同时,干扰组试虫肠道内H2O2含量与空白对照或GFP对照组相比均没有显著差异,而干扰组中抗菌肽表达水平显著高于GFP对照组。【结论】Md PGRP-SC在控制家蝇幼虫肠道免疫敏感程度中起作用。 展开更多

关键词 家蝇 肠道免疫 肽聚糖识别蛋白 活性氧 抗菌肽

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家蝇微生物感染对RNA干扰GNBP3基因的作用

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作者 胡亚 罗嫚 吴建伟 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2022年第1期162-169,共8页

为了研究家蝇Musca domestica微生物感染对RNA干扰GNBP3基因的作用,评价微生物感染后对下游抗菌肽水平的影响,本研究用RNA干扰技术沉默家蝇GNBP3基因探索最佳沉默时间及效果,检测RNA干扰后家蝇幼虫存活及化蛹情况,通过微生物喂食途径感... 为了研究家蝇Musca domestica微生物感染对RNA干扰GNBP3基因的作用,评价微生物感染后对下游抗菌肽水平的影响,本研究用RNA干扰技术沉默家蝇GNBP3基因探索最佳沉默时间及效果,检测RNA干扰后家蝇幼虫存活及化蛹情况,通过微生物喂食途径感染,采用实时荧光定量PCR方法检测抗菌肽基因(cecropins、defensin、diptericin)的表达情况。结果显示注射dsGNBP3后家蝇GNBP3基因在24 h达到有效沉默,沉默GNBP3基因后家蝇幼虫的化蛹率及存活率降低。RNA干扰GNBP3基因后,在未感染组中,cecropins的表达量显著性降低;白色念珠菌感染后,cecropins的表达与未感染组呈相似的趋势(P<0.0001);而大肠杆菌和金黄色葡萄球菌感染后,cecropins的表达量显著提高(P<0.05)。对家蝇diptericin基因的表达量进行分析,在未感染组中,diptericin的表达量显著性降低(P<0.0001);而大肠杆菌和白色念珠菌感染后,diptericin的表达量显著提高(P<0.05);但金黄色葡萄球菌感染后其表达在两组间无统计学意义(P>0.05)。对家蝇defensin基因的表达量进行分析,在未感染组中,defensin的表达量显著性降低(P<0.05);而白色念珠菌、大肠杆菌及金黄色葡萄球菌感染后其表达在两组间均无统计学意义(P>0.05)。家蝇GNBP3基因在24 h时得到有效沉默并使抗菌肽基因的表达降低,细菌感染能够增高抗菌肽基因(cecropins、diptericin)的表达,而真菌感染时抗菌肽基因的表达各不相同。推测各抗菌肽基因间呈协同调节抗真菌的作用,且家蝇GNBP3基因在抗真菌免疫中起到一定作用,但可能同时存在其它抗真菌途径以共同完成家蝇先天性免疫系统对真菌的免疫应答。 展开更多

关键词 RNA干扰 革兰氏阴性菌结合蛋白3(GNBP3) 感染 抗菌肽 家蝇

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