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过表达NHE1通过上调钙蛋白酶活性降低RAW264.7细胞ABCA1蛋白表达 被引量:4
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作者 莫显刚 王兰 +5 位作者 郭静 洪伟 龙世棋 张莉 向凝 杨涓 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期12-16,共5页
目的探讨过表达钠氢交换体1(NHE1)对RAW264.7细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白表达的影响。方法采用Ad NHE1腺病毒感染RAW264.7细胞,Western blot法检测NHE1-EGFP融合蛋白的表达,激光共聚焦显微镜技术检测NHE1-EGFP融合蛋白细... 目的探讨过表达钠氢交换体1(NHE1)对RAW264.7细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白表达的影响。方法采用Ad NHE1腺病毒感染RAW264.7细胞,Western blot法检测NHE1-EGFP融合蛋白的表达,激光共聚焦显微镜技术检测NHE1-EGFP融合蛋白细胞内定位,酸负载p H回复检测NHE1活性,Western blot法检测NHE1-EGFP融合蛋白对RAW264.7细胞ABCA1蛋白水平及钙蛋白酶(calpain)活性的影响,加入calpain抑制剂N-乙酰基-L-亮氨酰-L-亮氨酰-L-正亮氨酸(ALLN),Western blot法检测肝脏X受体激动剂TO-901317诱导ABCA1蛋白表达水平的影响。结果 Ad NHE1腺病毒感染RAW264.7细胞后,高表达NHE1-EGFP融合蛋白,定位在细胞质及细胞膜。NHE1-EGFP融合蛋白可降低ABCA1蛋白的表达水平并提高calpain活性,而calpain抑制剂ALLN能阻断ABCA1蛋白表达水平降低。结论 NHE1过表达通过上调calpain活性而降低ABCA1蛋白表达水平。 展开更多
关键词 钠氢交换体1(NHE1) 钙蛋白酶(calpain) RAW264.7细胞 三磷酸腺苷结合盒转运体a1(abca1) TO-901317
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Amiloride通过抑制缺氧诱导的NHE1表达而延缓calpain介导的ABCA1降解 被引量:5
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作者 莫显刚 张莉 +4 位作者 张洛超 王龙 向凝 杨涓 宋翔 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1992-1997,共6页
目的:研究缺氧对钠氢交换体1(NHE1)表达、细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)和钙蛋白酶(calpain)活性的影响,探讨NHE1抑制剂阿米洛利(amiloride)对ABCA1降解的影响以及与calpain相关的机制。方法:RAW264.7细胞缺氧0、12、24和48 h。MTT法检测... 目的:研究缺氧对钠氢交换体1(NHE1)表达、细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)和钙蛋白酶(calpain)活性的影响,探讨NHE1抑制剂阿米洛利(amiloride)对ABCA1降解的影响以及与calpain相关的机制。方法:RAW264.7细胞缺氧0、12、24和48 h。MTT法检测细胞活力,real-time PCR及Western blot检测NHE1的表达。流式细胞术检测[Ca2+]i,荧光素法检测细胞内calpain活性。进而,经缺氧24 h处理的细胞,cycloheximide干预条件下,NHE1抑制剂amiloride处理6 h及12 h,检测ABCA1蛋白含量。最后,给予calpain抑制剂ALLN及细胞内钙螯合剂BAPTA共孵育12 h,检测ABCA1含量及calpain活性。结果:缺氧呈时间依赖方式抑制细胞增殖。缺氧促进NHE1表达上调,增加[Ca2+]i及calpain活性。缺氧加速ABCA1蛋白降解,而amiloride减缓ABCA1蛋白降解。ALLN及BAPTA升高ABCA1蛋白含量,降低calpain活性。结论:Amiloride延缓calpain介导的ABCA1降解,提示缺氧诱导NHE1表达可能至少部分参与ABCA1蛋白降解。 展开更多
关键词 三磷酸腺苷结合盒转运体a1 阿米洛利 钠氢交换体1 钙蛋白酶
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电针丰隆穴对高脂血症大鼠主动脉弓ABCA1mRNA表达和血液流变学的影响 被引量:1
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作者 武欢 黄浩 +3 位作者 王东 田佳玉 陈盈芳 张红星 《辽宁中医杂志》 CAS 2013年第4期794-796,共3页
目的:探讨电针丰隆穴对高脂血症的治疗作用及其作用机制。方法:36只健康SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组,每组12只。采用高脂饮食饲料饲喂法建立高脂血症大鼠模型。造模28天后,电针组开始电针丰隆穴治疗。治疗结束后,检测各组大... 目的:探讨电针丰隆穴对高脂血症的治疗作用及其作用机制。方法:36只健康SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组,每组12只。采用高脂饮食饲料饲喂法建立高脂血症大鼠模型。造模28天后,电针组开始电针丰隆穴治疗。治疗结束后,检测各组大鼠血脂及全血黏度、血浆黏度、红细胞聚集指数,并用原位杂交法检测各组大鼠主动脉弓组织中ABCA1mRNA表达水平。结果:与空白组相比,模型组大鼠TC、LDL-C水平显著上升(P<0.01),主动脉弓ATP结合盒转运子A1(ATP binding cassette transporter A1,ABCA1)mRNA表达降低(P<0.01),全血黏度、血浆黏度及红细胞聚集指数明显升高(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,电针组大鼠TC、LDL-C水平显著降低(P<0.01),主动脉弓AB-CA1mRNA表达升高(P<0.05),全血黏度、血浆黏度及红细胞聚集指数明显降低(P<0.01,P<0.05)。结论:电针丰隆穴有良好的降脂及防治AS的作用,其机制与上调ABCA1表达以及改善血液流变性有关。 展开更多
关键词 高脂血症 电针丰隆穴 ATP结合盒转运子a1 血液流变学
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