人绒毛外滋养层细胞HTR-8/SVneo中Toll样受体mRNA的表达及对吲哚胺2,3-双加氧酶mRNA水平的影响 被引量：1

1

作者 许巍 杨贵波 +7 位作者 端家忠 王越 姚文荣 刘学庆 陈雪梅 丁裕斌 王应雄 何俊琳 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1559-1564,共6页

目的系统检测人绒毛外滋养细胞HTR-8/SVneo中Toll样受体(TLR)mRNA的表达情况,定量分析TLRs配体刺激前后吲哚胺2,3双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)mRNA的表达差异。方法 RT-PCR检测HTR-8/SVneo细胞中TLR 1-10mRNA的表达情况;... 目的系统检测人绒毛外滋养细胞HTR-8/SVneo中Toll样受体(TLR)mRNA的表达情况,定量分析TLRs配体刺激前后吲哚胺2,3双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)mRNA的表达差异。方法 RT-PCR检测HTR-8/SVneo细胞中TLR 1-10mRNA的表达情况;实时荧光定量RT-PCR检测TLR3、TLR4、TLR7/8、TLR9配体刺激前后IDO mRNA表达水平。结果 HTR-8/SVneo细胞中有IDO及TLR 1-10 mRNA表达;在48 h内IDO mRNA表达随着时间延长,呈升高趋势;IDO mRNA的表达与培养基营养状况相关;TLRs配体刺激后,除TLR-3转录水平表达下调外,TLR-4、7、8、9 mRNA表达均上调;poly(I∶C)刺激后IDO mRNA表达低于正常组,IFN-γ刺激后表达高于正常组(P<0.05)。结论 TLRs mRNA的表达提示该细胞具有抗感染作用;HTR-8/Svneo细胞中IDO mRNA的表达与母胎界面营养状况相关;TLRs配体刺激剂对TLRs及IDO mRNA表达的影响不仅验证了TLRs的功能活性,而且提示了IDO在抗病原体免疫应激中可依赖TLRs途径发挥作用。 展开更多

关键词 HTR-8 SVneo toll样受体 吲哚胺2 3双加氧酶

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Toll样受体在U937细胞的表达及其作用研究 被引量：11

2

作者 熊芳 王兴兵 +5 位作者 张佳华 刘伟 孙思 刘黎琼 王萍 黄士昂 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第3期449-453,共5页

本研究探讨急性髓系白血病的免疫治疗中以Toll样受体(TLRs)为靶点的可能性,研究人急性髓系白血病U937细胞TLR的表达及TLR8受体激动剂ssRNA40/LyoVec对其增殖、凋亡和细胞周期的影响。运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测U937细胞TLR1-9... 本研究探讨急性髓系白血病的免疫治疗中以Toll样受体(TLRs)为靶点的可能性,研究人急性髓系白血病U937细胞TLR的表达及TLR8受体激动剂ssRNA40/LyoVec对其增殖、凋亡和细胞周期的影响。运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测U937细胞TLR1-9mRNA的表达,用流式细胞术检测TLR8的表达。用不同浓度的TLR8激动剂ssRNA40/LyoVec作用于体外培养的U937细胞后,采用CCK-8法检测细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期。结果表明:U937细胞表达TLR1-9,TLR8激动剂ssRNA40/LyoVec作用于U937细胞明显地抑制了U937细胞生长,抑制率可达70%,且呈明显的量效关系;作用后处于G0/G1期细胞比例由(44.67±1.05)%增高到(54.08±1.19)%,但凋亡细胞的比例无明显变化。结论:TLR1-9可在U937细胞中表达,TLR8激动剂ssRNA40/LyoVec具有抗肿瘤细胞增殖的作用,使细胞阻滞在G0/G1期,但无明显的促凋亡作用。 展开更多

关键词 toll样受体 TLR8激动剂 U937细胞 ssRNA40/LyoVec

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核因子-κB和p38丝裂原活化蛋白激酶调节脂多糖诱导的气道上皮细胞白细胞介素8的表达 被引量：8

3

作者 李亚清 严建平 +1 位作者 许武林 王宏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期182-186,共5页

目的探讨脂多糖(LPS)对HBE4-E6/E7细胞IL-8表达的影响及Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR-4)、p38MAPK、NF-κB在其中的作用。方法在量效实验中,分别以0、0.1、1、10、100μg.L-1 LPS刺激HBE4-E6/E7细胞24 h;在时效实验中,以10μg.... 目的探讨脂多糖(LPS)对HBE4-E6/E7细胞IL-8表达的影响及Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR-4)、p38MAPK、NF-κB在其中的作用。方法在量效实验中,分别以0、0.1、1、10、100μg.L-1 LPS刺激HBE4-E6/E7细胞24 h;在时效实验中,以10μg.L-1 LPS分别刺激HBE4-E6/E7细胞0、8、12、16、24 h。以100μg.L-1 TAK-242、10 mg.L-1SB202190、50 mg.L-1 PDTC预处理HBE4-E6/E7细胞,以100μg.L-1 LPS刺激24 h。半定量RT-PCR法检测IL-8mRNA表达;酶联免疫吸附试验检测IL-8蛋白水平;凝胶阻滞分析实验检测NF-κB活性。结果 HBE4-E6/E7细胞IL-8 mRNA的表达随LPS刺激剂量的增加明显增加(P<0.05);在24 h内,以10μg.L-1 LPS刺激时,IL-8 mRNA的表达随刺激时间的延长明显增加(P<0.05)。TAK-242、SB202190和PDTC均能明显抑制LPS诱导的HBE4-E6/E7细胞IL-8 mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。TAK-242和PDTC均能明显抑制LPS诱导的NF-κB的活性(P<0.05);SB202190不能抑制LPS诱导的NF-κB活性(P>0.05)。结论 LPS能诱导HBE4-E6/E7细胞IL-8的表达,TLR4、p38MAPK、NF-κB均参与调控LPS诱导的气道上皮细胞IL-8的表达,且p38 MAPK是通过不依赖NF-κB信号途径来参与调节的。 展开更多

关键词 toll样受体4 白细胞介素8 核因子-KAPPAB P38 气道上皮细胞

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肝素通过TLR4减少脂多糖刺激的人内皮细胞IL-8表达 被引量：3

4

作者 李旭 李鑫 马晓春 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1699-1701,共3页

目的:观察肝素对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的人内皮细胞白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)水平的影响,并探讨Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR 4)在其中的可能影响。方法:用LPS(10mg/L)刺激人肺微血管内皮细胞诱导损伤,... 目的:观察肝素对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的人内皮细胞白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)水平的影响,并探讨Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR 4)在其中的可能影响。方法:用LPS(10mg/L)刺激人肺微血管内皮细胞诱导损伤,肝素治疗组提前15 min分别加入100 U/L及103U/L普通肝素,正常对照组加入等量磷酸盐缓冲液。分别在刺激2、6、12 h收集细胞上清,采用酶联免疫吸附法测定上清中IL-8的浓度。在刺激2、6、12 h收集细胞提取RNA,应用实时荧光定量聚合酶链反应检测各组细胞中IL-8、CD14及TLR4mRNA水平变化。结果:与正常对照组比较,LPS刺激组IL-8 mRNA水平增高,6 h达到高峰,其蛋白水平于12 h达到高峰。LPS刺激下TLR4 mRNA水平增高,6 h达到高峰,肝素降低其水平,差异有统计学意义(P<0.05)。未检测到CD14 mRNA的表达。结论:LPS刺激下人肺微血管内皮细胞IL-8表达增加。肝素可能通过调节TLR4降低IL-8的水平,从而发挥保护作用。 展开更多

关键词 脂多糖类 内皮细胞 肝素 受体 toll样 白细胞介素8

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丹蛭降糖胶囊对糖尿病大鼠心肌组织TLR4、TNF-α、IL-8表达和心脏病理影响 被引量：5

5

作者 李中南 程丽华 +3 位作者 马超 窦德梅 邢宇婷 邢艳阳 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 2017年第2期325-331,共7页

目的:本文主要探讨丹蛭降糖胶囊(Dan Zhi Jiang Tang Capsule,DJC)对糖尿病大鼠心肌组织Toll样受体4(Toll-Like Receptor 4,TLR4)、肿瘤坏死因子α(Tumor Necrosis Factorα,TNFα)、白介素-8(Interleukin-8,IL-8)的干预及对心脏病理的... 目的:本文主要探讨丹蛭降糖胶囊(Dan Zhi Jiang Tang Capsule,DJC)对糖尿病大鼠心肌组织Toll样受体4(Toll-Like Receptor 4,TLR4)、肿瘤坏死因子α(Tumor Necrosis Factorα,TNFα)、白介素-8(Interleukin-8,IL-8)的干预及对心脏病理的影响。方法:取50只雄性大鼠,除正常组8只外,其余组给予高脂饲料喂养4周,按35 mg·kg-1给大鼠腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)1次,建立糖尿病大鼠模型。造模成功后将大鼠随机分为模型组、DJC高剂量组、DJC低剂量组、吡格列酮组。DIC高、低剂量组每日分别给予1.08、0.54 g·kg-1灌胃,吡咯列酮组予10 mg·kg-1灌胃,模型组、正常组予以等量生理盐水灌胃,连续8周,并继续喂高脂饲料;测定血糖、Hb A1c、血脂;观察心肌组织TLR4、TNF-α、IL-8蛋白表达。结果:与正常组相比,模型组大鼠心肌组织TLR4、TNFα、IL-8表达增加(P<0.01);与模型组相比,DJC高、低剂量组大鼠心肌组织TLR4、TNFα、IL-8表达减少(P<0.05或P<0.01)。病理染色发现模型组大鼠心肌组织严重受损,DJC高剂量组大鼠心肌组织损伤程度明显减轻,且优于低剂量组和吡格列酮组。与正常组相比,模型组大鼠血糖、Hb A1c、TG、TC、LDL-C水平明显升高(P<0.05或P<0.01),与模型组相比,DJC高、低剂量组大鼠血糖、Hb A1c、TG、TC、LDL-C水平明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论:丹蛭降糖胶囊能够明显下调TLR4、TNF-α、IL-8高表达水平,减轻糖尿病大鼠心肌病变程度;具有良好的降糖调脂作用。 展开更多

关键词 丹蛭降糖胶囊 心脏病理 toll样受体4 肿瘤坏死因子α 白介素-8

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胶原诱导的关节炎小鼠脾脏单个核细胞TLR8的表达及其与相关细胞因子的关系

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作者 毛飞 许文荣 +4 位作者 钱晖 朱伟 严永敏 高硕 许化溪 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期312-314,318,共4页

目的:观察Toll样受体8(TLR8)在鸡Ⅱ型胶原诱导的关节炎模型小鼠脾脏单个核细胞中的表达及其与IL-10等细胞因子表达的关系。方法:12只DBA/1J小鼠随机分成造模组和阴性对照组。造模组小鼠采用鸡Ⅱ型胶原诱导,在诱导后的第27天出现关节红... 目的:观察Toll样受体8(TLR8)在鸡Ⅱ型胶原诱导的关节炎模型小鼠脾脏单个核细胞中的表达及其与IL-10等细胞因子表达的关系。方法:12只DBA/1J小鼠随机分成造模组和阴性对照组。造模组小鼠采用鸡Ⅱ型胶原诱导,在诱导后的第27天出现关节红肿时处死所有小鼠。用ELISA测定小鼠外周血的TNF-α,HE染色观察小鼠关节的炎症变化,Real-time PCR检测脾脏单个核细胞表达IL-10、IL-17A、IL-1β及TLR8的水平。结果:HE染色结果显示,造模组小鼠关节部位与阴性对照组相比出现明显的炎症细胞浸润;造模组小鼠的外周血血清TNF-α水平较阴性对照组明显升高(P<0.01);模型小鼠脾脏单个核细胞表达IL-10、IL-17A、TLR8和IL-1β的水平也明显高于阴性对照组(P<0.01或P<0.05)。相关性分析表明,TLR8的表达与IL-10的表达呈负相关(r=0.945;P<0.01),而与IL-17A、IL-1β无明显相关性(P>0.05)。结论:TLR8在鸡Ⅱ型胶原诱导的关节炎模型小鼠脾脏单个核细胞中的表达水平明显升高。尽管IL-10的表达水平也高于对照组,但其与TLR8的表达呈现明显负相关。 展开更多

关键词 TLR8 鸡Ⅱ型胶原 类风湿性关节炎 小鼠

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乌苏里貉TLR8基因的分子克隆、序列分析及组织表达分析

7

作者 仝明薇 易立 +5 位作者 程悦宁 曹智刚 王建科 赵航 林鹏 程世鹏 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期413-415,共3页

为了解乌苏里貉TLR8基因特点及其在不同组织中的表达水平,本研究利用RT-PCR和RACE技术克隆其c DNA全长序列,应用生物学软件分析该基因及预测其编码蛋白的特征,并对该基因在乌苏里貉不同组织中的表达水平进行检测。结果显示该基因全长3 1... 为了解乌苏里貉TLR8基因特点及其在不同组织中的表达水平,本研究利用RT-PCR和RACE技术克隆其c DNA全长序列,应用生物学软件分析该基因及预测其编码蛋白的特征,并对该基因在乌苏里貉不同组织中的表达水平进行检测。结果显示该基因全长3 191 bp,ORF全长3 117 bp,编码1 038 aa,含有Toll-like受体家族典型的结构域特征。同源性分析显示乌苏里貉TLR8基因核苷酸序列与犬同源性最高,达99.3%,与其他食肉目哺乳动物也具有较高的同源性,在89.2%-92.9%。组织表达分析显示TLR8基因在乌苏里貉各组织中广泛表达但表达量存在差异。本研究结果为进一步研究乌苏里貉抗病毒免疫及育种相关研究奠定了基础。 展开更多

关键词 TLR8 组织表达 乌苏里貉 序列分析

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TLR4信号促进前列腺癌PC3细胞VEGF/IL-8分泌及相关信号机制 被引量：2

8

作者 郭栋 刘秋燕 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期697-701,共5页

目的研究TLR4在人前列腺癌PC3细胞中的表达意义及相关胞内信号机制。方法利用TLR4特异性配体脂多糖(LPS)刺激人前列腺癌PC3细胞,分别于LPS刺激0、2、6、12、24、48h后收集细胞和上清,通过RT-PCR和蛋白质印迹方法检测TLR4在基因和蛋白水... 目的研究TLR4在人前列腺癌PC3细胞中的表达意义及相关胞内信号机制。方法利用TLR4特异性配体脂多糖(LPS)刺激人前列腺癌PC3细胞,分别于LPS刺激0、2、6、12、24、48h后收集细胞和上清,通过RT-PCR和蛋白质印迹方法检测TLR4在基因和蛋白水平的表达变化,通过RT-PCR方法检测胞内TGF-β、VEGF、IL-8、COX-2和MMP3的mRNA表达变化和ELISA方法检测上清VEGF、IL-8蛋白的表达变化;为了进一步研究相关信号通路,分别采用MAPK和NF-κB信号通路抑制剂预处理PC3细胞,然后利用同等浓度的LPS刺激,分别于4h和24h后收集上清,通过RT-PCR和ELISA方法重复上述细胞因子的检测。结果在LPS刺激后,人前列腺癌PC3细胞的TLR4功能性表达上调,引起胞内TGF-β、VEGF、IL-8、COX-2和MMP3的mRNA表达升高和上清中VEGF、IL-8的分泌增多(P<0.05);进一步研究表明胞内p38MAPK和NF-κB信号通路参与了此过程。结论 TLR4信号通过p38MAPK和NF-κB信号通路促进VEGF和IL-8的分泌。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 toll样受体4 血管内皮生长因子受体 白细胞介素8 信号转导

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TLR7、TLR8在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义 被引量：4

9

作者 马海丽 刘建 逯清丽 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期286-289,共4页

目的探讨Toll样受体7,8(Toll like receptor 7,8,TLR7,8)在非小细胞肺癌中的表达及其与非小细胞肺癌临床病理特征之间的关系,为进一步研究TLR在肺癌治疗中的应用提供理论依据。方法采用免疫组化SP法检测43例非小细胞肺癌组织和20例癌旁... 目的探讨Toll样受体7,8(Toll like receptor 7,8,TLR7,8)在非小细胞肺癌中的表达及其与非小细胞肺癌临床病理特征之间的关系,为进一步研究TLR在肺癌治疗中的应用提供理论依据。方法采用免疫组化SP法检测43例非小细胞肺癌组织和20例癌旁正常肺组织中TLR7、TLR8蛋白的表达水平,分析TLR7、TLR8的表达与非小细胞肺癌临床病理特征之间的关系。结果①TLR7主要在核周表达,TLR8在细胞质中表达,呈弥散表达。②TLR7在43例非小细胞肺癌阳性表达率为48.8%,高于癌旁正常肺组织的15.0%(P<0.05);TLR8在43例非小细胞肺癌组织阳性表达率为69.8%,高于癌旁正常肺组织的20.0%(P<0.05)。③TLR7表达与年龄、吸烟、肺癌淋巴结转移、TNM分期、分化程度无相关性,与性别、病理类型有关。TLR8表达与吸烟有关。TLR7表达和TLR8表达无相关性。结论 TLR7、TLR8在非小细胞肺癌组织中的表达均高于正常肺组织。TLR7、TLR 8可能参与了肺癌的发病机制, 展开更多

关键词 toll样受体7 toll样受体8 非小细胞肺癌

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TLR8基因多态性与中国东北地区汉族肺结核病的关联性分析 被引量：1

10

作者 李彤 张娟 +5 位作者 张桂珍 徐江涛 张萍 蒋俊 孙秀华 杜珍武 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期584-587,共4页

目的:探讨Toll样受体8(TLR8)基因的4个位点单核苷酸多态性(SNP)与我国东北地区汉族人群结核病的关联性,分析其基因型频数分布在肺结核病与其他肺病间的差异。方法:采用病例-对照的研究方法。选择中国东北地区368例汉族肺结核病患者(病例... 目的:探讨Toll样受体8(TLR8)基因的4个位点单核苷酸多态性(SNP)与我国东北地区汉族人群结核病的关联性,分析其基因型频数分布在肺结核病与其他肺病间的差异。方法:采用病例-对照的研究方法。选择中国东北地区368例汉族肺结核病患者(病例组)和355例汉族其他肺病患者(对照组)为研究对象。应用连接酶特异检测技术检测2组患者TLR8基因4个位点rs3764880、rs3761624、rs3788935和rs3764879的基因型,比较2组患者等位基因频数分布差异,计算其危险系数(OR),并比较不同性别患者组间基因型频数分布的差异。结果 :TLR8基因rs3764880、rs3761624、rs3788935和rs3764879位点等位基因型频数在2组间分布差异无统计学意义(P>0.05);不同性别的2组患者TLR8基因4个位点等位基因频数分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论:TLR8基因位点rs3764880、rs3761624、rs3788935和rs3764879的SNP在我国东北地区汉族肺结核患者与其他肺病患者中的分布相同,提示上述TLR8基因4个位点的SNP与结核病的发生无关联性。 展开更多

关键词 TLR8基因 单核苷酸多态性 肺结核

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Toll样受体4介导牙龈卟啉单胞菌感染血管内皮细胞过程中的炎性作用 被引量：1

11

作者 赵志鹏 王一松 +1 位作者 平国玲 张力平 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2011年第5期442-445,共4页

目的探讨Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)在牙龈卟啉单胞菌感染血管内皮细胞过程中所发挥的作用。方法用牙龈卟啉单胞菌分别感染正常EAhy926细胞和TLR4基因敲减的EAhy926细胞后,用RT-PCR和ELISA方法观察2种细胞产生白细胞介素6(... 目的探讨Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)在牙龈卟啉单胞菌感染血管内皮细胞过程中所发挥的作用。方法用牙龈卟啉单胞菌分别感染正常EAhy926细胞和TLR4基因敲减的EAhy926细胞后,用RT-PCR和ELISA方法观察2种细胞产生白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素8(IL-8)的能力,用单核细胞黏附实验检测内皮细胞黏附单核细胞的作用。结果牙龈卟啉单胞菌能诱导2种细胞过度表达IL-6和IL-8,促进U937细胞的黏附(P<0.05);敲减了TLR4基因的EAhy926细胞受到牙龈卟啉单胞菌感染后,IL-6和IL8的产生以及单核细胞黏附作用明显低于正常的EAhy926细胞(P<0.05)。结论 TLR4在牙龈卟啉单胞菌引起EAhy926细胞炎性反应过程中具有重要作用。 展开更多

关键词 toll样受体4 内皮细胞 白细胞介素6 白细胞介素8 牙龈卟啉单胞菌 细胞黏附

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内毒素作用中的蛋白质和信号通路 被引量：12

12

作者 秦玉新 张庆柱 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1336-1339,共4页

综述内毒素作用中有关的蛋白及其传导通路。脂多糖结合蛋白 (LBP)可以结合内毒素并把它传递给受体 ,如CD14和CD11/CD18。Toll样受体 (TLRs)的功能与信号向胞内传递有密切的关系 ,清道夫受体则与肝脏清除内毒素的功能有关。胞内信号转导... 综述内毒素作用中有关的蛋白及其传导通路。脂多糖结合蛋白 (LBP)可以结合内毒素并把它传递给受体 ,如CD14和CD11/CD18。Toll样受体 (TLRs)的功能与信号向胞内传递有密切的关系 ,清道夫受体则与肝脏清除内毒素的功能有关。胞内信号转导涉及多种途径 。 展开更多

关键词 内毒素 ToⅡ样受体 LBP CDL4 CD11/CDl8 信号转导

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全基因转录组测序分析双氢青蒿素改善脂多糖诱导小鼠急性肺损伤机制 被引量：1

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作者 杨鲁霞 张孝昌 +5 位作者 李擎宇 魏振桥 黄曼琼 焦园园 邢雅玲 王升启 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2023年第12期914-922,共9页

目的基于全基因转录组测序技术分析双氢青蒿素(DHA)改善脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤(ALI)的作用及机制。方法ip给予LPS 10 mg·kg-1诱导ALI小鼠模型。模型成功后,ip给予DHA 20 mg·kg-1(模型+DHA组),同时设正常对照组,每组1... 目的基于全基因转录组测序技术分析双氢青蒿素(DHA)改善脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤(ALI)的作用及机制。方法ip给予LPS 10 mg·kg-1诱导ALI小鼠模型。模型成功后,ip给予DHA 20 mg·kg-1(模型+DHA组),同时设正常对照组,每组10只。给药24 h后,取肺测定小鼠肺湿/干重比(W/D);制备并计数肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞数;苏木精-伊红染色法观察小鼠肺组织病理改变;酶联免疫吸附法(ELISA)检测BALF中白细胞介素1β(IL-1β),IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)分泌水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肺组织中IL-1β,IL-6和TNF-αmRNA表达水平。全基因转录组测序,结合生物信息分析筛选小鼠肺组织差异表达基因,进行GO和KEGG通路富集分析,并进行RT-qPCR验证。结果与模型组相比,模型+DHA组小鼠肺W/D值显著降低(P<0.01),病理损伤显著减轻,BALF中各类炎症细胞显著降低(P<0.01);肺组织中IL-1β,IL-6和TNF-αmRNA表达均显著降低(P<0.05)。全基因转录组测序及生物信息分析发现,ALI模型小鼠肺组织内免疫相关的胎盘特异蛋白8(Plac8)、Toll样受体7基因(TLR7)显著上调(P<0.01),给予DHA干预后则均显著下调(P<0.05,P<0.01)。RT-qPCR验证结果显示,模型+DHA组ALI小鼠肺组织中Plac8和TLR7基因表达变化趋势与转录组测序结果一致。GO和KEGG通路富集分析显示,Plac8和TLR7基因的作用主要与细胞因子生成调控、T/B细胞活化及其信号转导、趋化因子信号转导、NF-κB信号转导等相关,即与机体对外界应激而产生的炎症反应和免疫应答相关。结论DHA可减轻LPS诱导的ALI小鼠肺水肿,改善肺部炎症,减轻ALI,其作用机制可能与其降低TLR7和Plac8 mRNA表达、负调控其参与的信号转导通路,进而调控炎症相关细胞因子分泌和免疫细胞活化等免疫反应有关。 展开更多

关键词 双氢青蒿素 急性肺损伤 免疫调节 炎症 转录组测序 胎盘特异蛋白8 toll样受体7

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姜黄素对视网膜缺血-再灌注损伤大鼠视网膜IL-1β表达的影响

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作者 张宁 尹伊 +4 位作者 徐莹 肖培伦 李晓双 王晓莉 赵岩松 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2023年第3期178-184,共7页

目的 观察姜黄素(CUR)对视网膜缺血-再灌注损伤(RIRI)大鼠视网膜白细胞介素-1β(IL-1β)表达的影响,从Toll样受体4/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(TLR4/Caspase-8)通路探讨其机制,为CUR治疗RIRI的临床应用提供科学的理论依据。方法 SPF级健... 目的 观察姜黄素(CUR)对视网膜缺血-再灌注损伤(RIRI)大鼠视网膜白细胞介素-1β(IL-1β)表达的影响,从Toll样受体4/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(TLR4/Caspase-8)通路探讨其机制,为CUR治疗RIRI的临床应用提供科学的理论依据。方法 SPF级健康无眼疾雄性SD大鼠102只,随机分为Sham组(n=10)、RIRI组(n=35)、RIRI+TLR4抑制剂(TAK-242)组(n=11)、RIRI+CUR组(n=35)及RIRI+CUR+TAK-242组(n=11),其中,Sham组、RIRI组及RIRI+CUR组根据建模后时间不同分为建模后6 h、12 h、24 h、72 h及7 d组。采用前房高眼压灌注法建立RIRI模型为RIRI组,Sham组不做特殊处理,RIRI+TAK-242组、RIRI+CUR组、RIRI+CUR+TAK-242组分别于建模前腹腔注射相应药物。免疫组织化学染色检测建模后各时间点各组大鼠视网膜中IL-1β^(+)、TLR4^(+)Caspase-8^(+)细胞数;建模后12 h, Western blot检测各组大鼠视网膜TLR4、Caspase-8及IL-1β蛋白的表达,HE染色观察各组大鼠视网膜形态学变化。结果 免疫组织化学染色结果显示,建模后6 h、12 h、24 h、72 h及7 d,与Sham组相比,RIRI+CUR组IL-1β^(+)、TLR4^(+)细胞数均显著增加;与RIRI组相比,RIRI+CUR组各时间点IL-1β^(+)、TLR4^(+)细胞数均显著降低;与Sham组相比,RIRI组各时间点IL-1β^(+)、TLR4^(+)细胞数均显著增加;以上差异均统计学意义(均为P<0.05)。建模后12 h:与Sham组相比,RIRI组、RIRI+TAK-242组、RIRI+CUR组、RIRI+CUR+TAK-242组IL-1β^(+)、TLR4^(+)、Caspase-8^(+)细胞数以及IL-1β、TLR4及Caspase-8蛋白均显著增加;与RIRI组相比,RIRI+TAK-242组、RIRI+CUR组、RIRI+CUR+TAK-242组IL-1β^(+)、TLR4^(+)、Caspase-8^(+)细胞数以及IL-1β、TLR4、Caspase-8蛋白均显著降低;与RIRI+CUR+TAK-242组相比,RIRI+TAK-242组、RIRI+CUR组IL-1β^(+)、TLR4^(+)、Caspase-8^(+)细胞数以及IL-1β、TLR4、Caspase-8蛋白均显著增加;以上差异均有统计学意义(均为P<0.05)。建模后12 h, RIRI+TAK-242组与RIRI+CUR组IL-1β^(+)、TLR4^(+)、Caspase-8^(+)细胞数以及IL-1β、TLR4、Caspase-8蛋白比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。建模后12 h:与Sham组相比,RIRI组、RIRI+TAK-242组、RIRI+CUR组、RIRI+CUR+TAK-242组大鼠视网膜内层细胞水肿,视网膜内层厚度增加,视网膜神经节细胞(RGCs)数显著减少;与RIRI组相比,RIRI+TAK-242组、RIRI+CUR组、RIRI+CUR+TAK-242组大鼠视网膜细胞形态排列较整齐,视网膜内层厚度变薄,RGCs数减少;与RIRI+CUR及RIRI+TAK-242组相比,RIRI+CUR+TAK-242组大鼠视网膜水肿减轻,视网膜内层厚度显著变薄,RGCs数量减少;以上差异均有统计学意义(均为P<0.05)。RIRI+TAK-242组与RIRI+CUR组大鼠视网膜内层厚度及RGCs数比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论 CUR可下调RIRI大鼠视网膜IL-1β的表达,进而减轻大鼠RIRI,发挥神经保护作用,其机制可能与CUR调控TLR4/Caspase-8信号通路有关。 展开更多

关键词 视网膜缺血-再灌注 姜黄素 白细胞介素-1Β TLR4/Caspase-8通路 大鼠

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