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整体原位杂交法研究斑马鱼(Danio rerio)胚胎发育过程中胸苷酸合成酶(TS)的表达 被引量:1
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作者 牛荣丽 梁丽英 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期81-85,共5页
收集不同发育时期的斑马鱼胚胎,制备DIG标记的TS反义RNA探针,采用整体原位杂交方法研究胸苷酸合成酶(TS)基因在斑马鱼胚胎发育各期的时空表达状况。结果表明,在所取样的各个阶段,TS基因均有转录,但其部位不同,中囊胚过渡前后mRNA显现的... 收集不同发育时期的斑马鱼胚胎,制备DIG标记的TS反义RNA探针,采用整体原位杂交方法研究胸苷酸合成酶(TS)基因在斑马鱼胚胎发育各期的时空表达状况。结果表明,在所取样的各个阶段,TS基因均有转录,但其部位不同,中囊胚过渡前后mRNA显现的部位仅存在于受精卵的动物极,10hpf时存在于整个胚胎的外围,至24hpf后集中到头部及其躯干部。112hpf在心脏部位强表达,其余部位表达相对较弱。 展开更多
关键词 胸苷酸合成酶(ts) 斑马鱼 反义RNA探针 整体原位杂交
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5-FU耐药免疫组化技术与MTT法敏感性比较 被引量:2
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作者 陈新 施作霖 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期431-434,共4页
目的:探讨结肠癌对5-氟脲嘧啶(5-FU)产生耐药的机理,从细胞培养水平进一步论证胸苷酸合成酶(TS)对5-FU化疗产生耐药的影响,揭示不同TS蛋白表达水平的结肠癌患者对5-FU治疗的敏感性。方法:应用MTT法对体外培养的30例结肠癌细胞进行5-FU... 目的:探讨结肠癌对5-氟脲嘧啶(5-FU)产生耐药的机理,从细胞培养水平进一步论证胸苷酸合成酶(TS)对5-FU化疗产生耐药的影响,揭示不同TS蛋白表达水平的结肠癌患者对5-FU治疗的敏感性。方法:应用MTT法对体外培养的30例结肠癌细胞进行5-FU药敏试验,再应用SP免疫组化法对30例结肠癌进行TS检测,然后将两个试验结果进行比较;另采用SP法检测60例结肠癌组织切片及其正常对照组切片中TS蛋白的表达情况。结果:TS高表达组体外培养的结肠癌细胞对5-FU的敏感性明显低于TS低表达组。正常结肠粘膜组织中的TS表达水平高于结肠癌组织,结肠癌组织中TS表达水平与5-FU化疗患者的预后呈负相关,与患者的性别、有无淋巴结转移及癌组织的分化程度无关。结论:TS蛋白表达程度的高低对临床结肠癌患者化疗药物的选择有一定的指导意义;结肠癌组织中TS蛋白的表达水平可作为患者对5-FU为主的化疗疗效及预后的判断指标。 展开更多
关键词 结肠癌 MTT 免疫组织化学 胸苷酸合成酶 5-氟脲嘧啶 细胞培养
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斑马鱼胸腺苷酸合成酶基因的克隆与表达 被引量:1
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作者 杜长青 牛荣丽 +1 位作者 张培军 林秀坤 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期420-424,共5页
用RT-PCR和RACE方法,从斑马鱼胚胎中克隆出胸腺苷酸合成酶(TS)的cDNA全长序列,分析表明,它的编码框序列含有954个核苷酸,编码一个分子量为36kD的318个氨基酸的蛋白序列。将斑马鱼TS的cDNA序列连接到pET-28表达载体上,构建了一个... 用RT-PCR和RACE方法,从斑马鱼胚胎中克隆出胸腺苷酸合成酶(TS)的cDNA全长序列,分析表明,它的编码框序列含有954个核苷酸,编码一个分子量为36kD的318个氨基酸的蛋白序列。将斑马鱼TS的cDNA序列连接到pET-28表达载体上,构建了一个表达载体pET-28/Z-TS,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行了IPTG诱导表达,纯化的TS蛋白在28℃表现出比较高的生物活性,与人的TS蛋白的Km值比较接近。 展开更多
关键词 斑马鱼 胸腺苷酸合成酶 克隆表达 催化活性
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冠心病患者胸腺苷合成酶多态性的探讨
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作者 顾园园 沈晓丽 +3 位作者 浦晓东 陈诗泉 潘棱 林立芳 《中国心血管杂志》 2005年第5期343-346,353,共5页
目的研究胸腺苷合成酶(TS)5’-非翻译区(UTR)28bp串联重复序列多态性、3-’UTR1494bp位6bp插入或缺失多态性与血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平及冠心病之间的关系。方法用多聚酶链式反应(PCR)方法检测122例冠心病患者(冠状动脉造影显示至少... 目的研究胸腺苷合成酶(TS)5’-非翻译区(UTR)28bp串联重复序列多态性、3-’UTR1494bp位6bp插入或缺失多态性与血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平及冠心病之间的关系。方法用多聚酶链式反应(PCR)方法检测122例冠心病患者(冠状动脉造影显示至少有一支血管狭窄≥50%)与56例对照组(冠状动脉造影未发现任何可辨认斑块或狭窄)的TS 5-’UTR 28bp串联重复序列多态性;用聚合酶链反应-限制性片段多态性(PCR-RFLP)分析3-’UTR1494bp位6bp插入或缺失多态性;用荧光衍生后高压液相色谱分离法检测血浆总Hcy水平。结果(1)冠心病组的血浆Hcy水平(12.99±4.76)μmol/L高于对照组(10.95±4.75)μmol/L(P=0.009)。(2)TS5-’UTR 28bp串联重复序列有三种基因型(3R/3R,3R/2R,2R/2R),这三种基因型频率在冠心病组和对照组之间的分布有差异(P=0.029);TS28各基因型个体的Hcy水平在冠心病组高于对照组(P=0.03)。3R/3R、3R/2R基因型个体的Hcy水平均高于2R/2R型个体(分别为P<0.001和P=0.011),但3R/3R基因型个体与3R/2R基因型个体的Hcy水平间的差异没有统计学意义(P=0.979)。(3)TS3-’UTR6bp插入或缺失多态性有三种基因型(+6bp/+6bp,+6bp/-6bp,-6bp/-6bp),这三种基因型频率在冠心病组和对照组之间的分布差异无显著性(P>0.05)。TS6各基因型个体的Hcy水平在冠心病组高于对照组(P=0.006)。冠心病组TS6 bp各基因型个体间Hcy水平的的差异均没有统计学意义(P均>0.05)。结论(1)高Hcy血症与冠心病有关系。(2)TS基因5-’UTR28bp串联重复序列多态性可能是冠心病发病中的一个遗传因素。3 R与冠心病组个体的Hcy水平有关系。 展开更多
关键词 冠心病 同型半胱氨酸 胸腺苷合成酶 基因 多态性 冠心病患者 酶多态性 合成酶 串联重复序列多态性 血浆同型半胱氨酸
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