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采用高效液相色谱-质谱考察家福捕鸟蛛粗毒中多肽和蛋白质的多样性
被引量：
3
1
作者
胡朝暾
肖震
+3 位作者
周熙
陈佳
陈波
刘中华
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第6期628-633,共6页
家福捕鸟蛛（Selenocosmia jiafu）是一种生活在中国广西、云南等边远山区、中等个体、产毒量较大和毒性较强的蜘蛛新种。为了对家福捕鸟蛛粗毒成分进行初步探索,采用反相高效液相色谱、基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱和十二烷基...
家福捕鸟蛛（Selenocosmia jiafu）是一种生活在中国广西、云南等边远山区、中等个体、产毒量较大和毒性较强的蜘蛛新种。为了对家福捕鸟蛛粗毒成分进行初步探索,采用反相高效液相色谱、基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法对粗毒多肽和蛋白质的多样性进行了分析。结果表明：家福捕鸟蛛粗毒经色谱分离后得到40多个色谱峰,经质谱鉴定得到238个多肽,且多肽的相对分子质量呈现出双峰分布,其中62.5%的多肽的相对分子质量分布在3 000-4 500之间,33.2%的多肽的相对分子质量分布在1 000-3 000之间。这种相对分子质量的分布模式不同于其他已经报道的蜘蛛粗毒中多肽的分布模式。电泳分析结果表明：除了相对分子质量在10 000以下的多肽分子,粗毒在50、72和90 kD附近有3条明显的条带,粗毒电泳条带经液相色谱-电喷雾四极杆飞行时间质谱鉴定,主要是一些血蓝蛋白、钾离子通道蛋白、钙蛋白酶等。说明家福捕鸟蛛粗毒中多肽和蛋白质种类丰富。
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关键词
反相高效液相色谱
基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱
十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳
多肽
蛋白质
蜘蛛粗毒
家福捕鸟蛛
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职称材料
家福捕鸟蛛毒腺cDNA文库构建及其毒素-16序列和活性分析
被引量：
2
2
作者
卓城洁
袁萌
+4 位作者
伍文攀
邓娟华
喻振国
向小亮
胡朝暾
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2018年第1期11-19,共9页
家福捕鸟蛛(Selenocosmia jiafu)是一种生活在广西、云南等地的蜘蛛新种。为了阐明其毒素的分子多样性和筛选河豚毒素不敏感型(Tetrodotoxin-resistant,TTX-R)钠通道抑制剂,利用SMART法构建了毒腺全长cDNA文库,并进行DNA测序和表达序列...
家福捕鸟蛛(Selenocosmia jiafu)是一种生活在广西、云南等地的蜘蛛新种。为了阐明其毒素的分子多样性和筛选河豚毒素不敏感型(Tetrodotoxin-resistant,TTX-R)钠通道抑制剂,利用SMART法构建了毒腺全长cDNA文库,并进行DNA测序和表达序列标签(Expressed sequence tags,ESTs)聚类分析。结果表明家福捕鸟蛛毒腺双链cDNA条带分布在300~3 000 bp。经测序得到752个高质量的EST序列,去冗余后得到257个唯一序列,其中毒素序列438条。家福捕鸟蛛毒素-16(Jiafu toxin-16,JF-16)是从家福捕鸟蛛粗毒中分离得到的1种分子量为3 954.616的哺乳类神经毒素,其全序列为H_2N-ECTKLLGGCTKSSECCPHLGCRRKWPYHCGWDGTF-COOH。研究结果揭示JF-16的全长cDNA为518 bp,编码87个氨基酸。全细胞膜片钳试验结果表明JF-16对大鼠背根神经节(Rat dorsal root ganglion,DRG)细胞TTX-R钠通道具有抑制作用。说明JF-16是一种潜在的具有镇痛活性的蜘蛛毒素。本研究有利于开展家福捕鸟蛛毒腺转录组研究和JF-16潜在镇痛活性分析。
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关键词
家福捕鸟蛛
蜘蛛毒腺
CDNA文库
家福捕鸟蛛毒素-16
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职称材料
题名
采用高效液相色谱-质谱考察家福捕鸟蛛粗毒中多肽和蛋白质的多样性
被引量：
3
1
作者
胡朝暾
肖震
周熙
陈佳
陈波
刘中华
机构
怀化学院生命科学系
湖南师范大学
出处
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第6期628-633,共6页
基金
国家“973”计划项目(2010CB529800)
湖南省教育厅青年基金项目(13B087)
文摘
家福捕鸟蛛（Selenocosmia jiafu）是一种生活在中国广西、云南等边远山区、中等个体、产毒量较大和毒性较强的蜘蛛新种。为了对家福捕鸟蛛粗毒成分进行初步探索,采用反相高效液相色谱、基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法对粗毒多肽和蛋白质的多样性进行了分析。结果表明：家福捕鸟蛛粗毒经色谱分离后得到40多个色谱峰,经质谱鉴定得到238个多肽,且多肽的相对分子质量呈现出双峰分布,其中62.5%的多肽的相对分子质量分布在3 000-4 500之间,33.2%的多肽的相对分子质量分布在1 000-3 000之间。这种相对分子质量的分布模式不同于其他已经报道的蜘蛛粗毒中多肽的分布模式。电泳分析结果表明：除了相对分子质量在10 000以下的多肽分子,粗毒在50、72和90 kD附近有3条明显的条带,粗毒电泳条带经液相色谱-电喷雾四极杆飞行时间质谱鉴定,主要是一些血蓝蛋白、钾离子通道蛋白、钙蛋白酶等。说明家福捕鸟蛛粗毒中多肽和蛋白质种类丰富。
关键词
反相高效液相色谱
基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱
十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳
多肽
蛋白质
蜘蛛粗毒
家福捕鸟蛛
Keywords
rever
s
ed-pha
s
e high performance liquid chromatography （RP-HPLC）
matrixa
s
s
i
s
ted la
s
er-de
s
orption/ionization time-of-flight ma
s
s
s
pectrometry （MALDI-TOF-M
s
）
s
odium dodecyl
s
ulfate-polyacrylamide gel electrophore
s
i
s
（
s
D
s
-PAGE）
peptide
s
protein
s
s
pidervenom
selenocosmia jiafu （ s. jiafu ）
分类号
O658 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
家福捕鸟蛛毒腺cDNA文库构建及其毒素-16序列和活性分析
被引量：
2
2
作者
卓城洁
袁萌
伍文攀
邓娟华
喻振国
向小亮
胡朝暾
机构
怀化学院生物与食品工程学院/民族药用植物资源研究与利用湖南省重点实验室
出处
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2018年第1期11-19,共9页
基金
湖南省教育厅青年基金项目(13B087)
文摘
家福捕鸟蛛(Selenocosmia jiafu)是一种生活在广西、云南等地的蜘蛛新种。为了阐明其毒素的分子多样性和筛选河豚毒素不敏感型(Tetrodotoxin-resistant,TTX-R)钠通道抑制剂,利用SMART法构建了毒腺全长cDNA文库,并进行DNA测序和表达序列标签(Expressed sequence tags,ESTs)聚类分析。结果表明家福捕鸟蛛毒腺双链cDNA条带分布在300~3 000 bp。经测序得到752个高质量的EST序列,去冗余后得到257个唯一序列,其中毒素序列438条。家福捕鸟蛛毒素-16(Jiafu toxin-16,JF-16)是从家福捕鸟蛛粗毒中分离得到的1种分子量为3 954.616的哺乳类神经毒素,其全序列为H_2N-ECTKLLGGCTKSSECCPHLGCRRKWPYHCGWDGTF-COOH。研究结果揭示JF-16的全长cDNA为518 bp,编码87个氨基酸。全细胞膜片钳试验结果表明JF-16对大鼠背根神经节(Rat dorsal root ganglion,DRG)细胞TTX-R钠通道具有抑制作用。说明JF-16是一种潜在的具有镇痛活性的蜘蛛毒素。本研究有利于开展家福捕鸟蛛毒腺转录组研究和JF-16潜在镇痛活性分析。
关键词
家福捕鸟蛛
蜘蛛毒腺
CDNA文库
家福捕鸟蛛毒素-16
Keywords
selenocosmia
jiafu
s
pider venom gland
cDNA library
jiafu
toxin-16
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
采用高效液相色谱-质谱考察家福捕鸟蛛粗毒中多肽和蛋白质的多样性
胡朝暾
肖震
周熙
陈佳
陈波
刘中华
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2015
3
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职称材料
2
家福捕鸟蛛毒腺cDNA文库构建及其毒素-16序列和活性分析
卓城洁
袁萌
伍文攀
邓娟华
喻振国
向小亮
胡朝暾
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2018
2
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