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慢性粒细胞白血病细胞中Skp2的表达及其临床意义 被引量:5
1
作者 王小中 冯文莉 +4 位作者 涂植光 曾建明 史梅 曹唯希 黄宗干 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第u04期54-56,共3页
目的 研究慢性粒细胞白血病 (CML)细胞中S期激酶相关蛋白 2 (Skp2 )的表达及其与p2 7的关系。方法 用免疫细胞化学染色和逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)分别检测CML细胞中Skp2和p2 7蛋白水平及转录水平的表达。结果 免疫细胞化学染色显... 目的 研究慢性粒细胞白血病 (CML)细胞中S期激酶相关蛋白 2 (Skp2 )的表达及其与p2 7的关系。方法 用免疫细胞化学染色和逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)分别检测CML细胞中Skp2和p2 7蛋白水平及转录水平的表达。结果 免疫细胞化学染色显示 ,CML细胞Skp2蛋白表达增高 (14 .3%± 2 .9% ) ,与正常对照 (8.6 %± 0 .9% )相比有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;CML细胞中Skp2蛋白和p2 7蛋白呈负相关 (r=- 0 .75 ,P =0 .0 0 1)。但RT PCR结果显示 ,Skp2蛋白过度表达的CML细胞中p2 7mRNA未见明显变化。结论 Skp2在调控p2 7蛋白表达过程中起重要作用 。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 sKP2 s期激酶相关蛋白2 临床意义 基因表达
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肺癌中PI3K/AKT信号通路对Skp2调控机制的研究 被引量:5
2
作者 解智慧 孙秀华 +2 位作者 柯丹 张洪开 于爱鸣 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第8期13-15,共3页
目的探讨肺癌中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/AKT信号通路对S期激酶相关蛋白2(Skp2)的调控机制。方法体外培养4种类型肺癌细胞系H460、LK2、H446和A549,经LY294002处理细胞24 h后实时RT-PCR法检测Skp2基因表达变化;Western blot检测E2F1蛋... 目的探讨肺癌中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/AKT信号通路对S期激酶相关蛋白2(Skp2)的调控机制。方法体外培养4种类型肺癌细胞系H460、LK2、H446和A549,经LY294002处理细胞24 h后实时RT-PCR法检测Skp2基因表达变化;Western blot检测E2F1蛋白表达变化。结果实时RT-PCR显示LY294002作用后4种肺肿瘤细胞系中Skp2基因表达均下降;Western blot结果表明在小细胞肺癌、肺鳞癌、大细胞肺癌中E2F1蛋白表达降低,肺腺癌中E2F1蛋白未表达。结论肺癌中PI3K/AKT通路可在转录水平调节Skp2表达,在小细胞肺癌、肺鳞癌、大细胞肺癌中此种调节可能通过转录因子E2F1发挥作用,而肺腺癌中E2F1不参与此种调节。 展开更多
关键词 肺肿瘤 磷脂酰肌醇-3-激酶 s期激酶相关蛋白2
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CXC趋化因子受体4通过S期激酶相关蛋白2调控乳腺癌细胞周期的机制 被引量:5
3
作者 王海凤 陈天天 +7 位作者 王月月 李钰 张凌宇 丁勇兴 陈素莲 王文锐 杨清玲 陈昌杰 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期357-363,共7页
目的:探讨CXC趋化因子受体4(CXCR4)通过PI3K/Akt和ERK信号通路调控S期激酶相关蛋白2(Skp2)的表达,进而影响乳腺癌细胞周期的机制。方法:利用干扰及过表达技术下调或上调CXCR4的表达后,通过实时定量PCR和蛋白质印迹法检测CXCR4与Skp2调... 目的:探讨CXC趋化因子受体4(CXCR4)通过PI3K/Akt和ERK信号通路调控S期激酶相关蛋白2(Skp2)的表达,进而影响乳腺癌细胞周期的机制。方法:利用干扰及过表达技术下调或上调CXCR4的表达后,通过实时定量PCR和蛋白质印迹法检测CXCR4与Skp2调控的关联性;蛋白质印迹法检测CXCR4干扰及过表达后对信号蛋白及Skp2下游相关基因表达的影响;通过碘化丙啶(PI)染色法检测CXCR4、PI3K/Akt通路抑制剂LY294002及ERK通路抑制剂U0126对乳腺癌细胞周期的影响。结果:干扰CXCR4后,Skp2表达下调;过表达CXCR4后,Skp2表达上调。CXCR4可通过对信号蛋白的调控影响Skp2及Skp2下游相关基因的表达。干扰CXCR4后,G_0/G_1期细胞比例增加,S期细胞比例相应减少,CXCR4与LY294002及U0126联合作用对细胞周期的阻断更加明显。结论:CXCR4能够通过对信号蛋白PI3K/Akt及ERK的调控,影响Skp2及Skp2下游相关基因的表达,阻断CXCR4/Akt/Skp2或CXCR4/ERK/Skp2信号通路后可有效诱导细胞周期阻滞,从而抑制乳腺癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤/病理生理学 受体 CXCR4/生物合成 受体 CXCR4/遗传学 s期激酶相关蛋白质类/代谢 细胞系 肿瘤/代谢 细胞增殖 细胞周期
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FSH对体外培养仔猪睾丸支持细胞skp2表达的影响 被引量:2
4
作者 甘瑞 左敬 +4 位作者 张国升 朱峰伟 孙燕 王鲜忠 张家骅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期765-771,共7页
本研究旨在确定促卵泡素是否可通过cAMP、Ca2+内流和细胞外调节的蛋白激酶(ERK1/2)调节培养条件下未成熟仔猪睾丸支持细胞中S期激酶相关蛋白2(skp2)的表达。以培养的仔猪睾丸支持细胞为实验材料,通过添加各种信号通路的抑制剂,运用Weste... 本研究旨在确定促卵泡素是否可通过cAMP、Ca2+内流和细胞外调节的蛋白激酶(ERK1/2)调节培养条件下未成熟仔猪睾丸支持细胞中S期激酶相关蛋白2(skp2)的表达。以培养的仔猪睾丸支持细胞为实验材料,通过添加各种信号通路的抑制剂,运用Western blot检测skp2、p27kip1蛋白的表达,运用实时荧光定量PCR检测skp2mRNA的表达。结果发现,促卵泡素(50ng.mL-1)以时间依赖的方式促进了skp2蛋白和mRNA的表达(P<0.05),这一作用在30min时达到高峰。FSH(50ng.mL-1)和Forskolin(10μmol.L-1)均促进了skp2蛋白和mRNA的表达(P<0.05),但降低了p27kip1蛋白的水平,而Rp-cAMP、Verapamil和U0126都抑制了FSH的作用,使skp2蛋白和mRNA的表达有所下降,但提高了p27kip1蛋白的表达,但3种抑制剂单独作用时对skp2蛋白、mR-NA以及p27kip1蛋白的表达没有显著影响(P>0.05)。这表明FSH可能主要通过影响cAMP的产生和Ca2+内流,并激活ERK1/2通路调节skp2蛋白的表达,而skp2蛋白的水平与p27kip1蛋白成负相关。 展开更多
关键词 促卵泡素 睾丸支持细胞 s期激酶相关蛋白2 细胞外信号调节的蛋白激酶1/2 P27KIP1
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5-氮杂-2'-脱氧胞苷对胃癌AGS细胞增殖、凋亡的影响及机制探讨 被引量:1
5
作者 袁昌劲 唐求 +1 位作者 王辉 陈锐 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第14期3-5,共3页
目的观察5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对胃癌AGS细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法分别用低、中、高浓度5-Aza-CdR处理AGS,对照组不处理。CCK-8检测AGS细胞增殖状态,流式细胞仪检测AGS细胞周期及凋亡率,MSP检测AGS中DAPK... 目的观察5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对胃癌AGS细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法分别用低、中、高浓度5-Aza-CdR处理AGS,对照组不处理。CCK-8检测AGS细胞增殖状态,流式细胞仪检测AGS细胞周期及凋亡率,MSP检测AGS中DAPK基因启动子甲基化状态,RT-PCR和Western blot法分别检测AGS中的DAPKmRNA及其蛋白。结果低、中、高浓度组AGS细胞增殖速度显著低于对照组(P均<0.05),并呈浓度、时间依赖性(P均<0.05)。5-Aza-CdR使AGS细胞停滞在G0/G1期(P均<0.05),细胞凋亡率增加(P均<0.05)。对照组DAPK基因启动子表现甲基化状态,低、中、高浓度组DAPK基因启动子被逆转成未甲基化状态。低、中、高浓度组AGS细胞DAPK mRNA及蛋白表达量均显著高于对照组(P均<0.05),并呈浓度依赖性。结论 5-Aza-CdR可抑制AGS细胞增殖、促进其凋亡,可能与逆转DAPK基因启动子甲基化状态并使其重新表达有关。 展开更多
关键词 5-氮杂-2'-脱氧胞苷 死亡相关蛋白激酶 甲基化状态 胃癌 胃癌细胞
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前列腺癌组织中SKP2、Kindlin-2的表达变化及意义 被引量:1
6
作者 张正林 蒋银锋 朱喜山 《山东医药》 CAS 2019年第28期33-36,共4页
目的观察前列腺癌组织中S期激酶相关蛋白2(SKP2)和黏着斑蛋白-2(Kindlin-2)的表达变化并探讨其意义。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测90例份前列腺癌组织及40例份良性前列腺增生(BPH)组织中SKP2、Kindlin-2表达,分析癌组织中SKP... 目的观察前列腺癌组织中S期激酶相关蛋白2(SKP2)和黏着斑蛋白-2(Kindlin-2)的表达变化并探讨其意义。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测90例份前列腺癌组织及40例份良性前列腺增生(BPH)组织中SKP2、Kindlin-2表达,分析癌组织中SKP2、Kindlin-2表达与患者临床病理特征的关系及两者间相关性,Kaplan-Meier生存分析比较不同水平SKP2、Kindlin-2患者3年总体生存率(OS)的差异。结果前列腺癌组织中SKP2、Kindlin-2的相对表达量均高于BPH组织(P均<0.05)。前列腺癌组织中SKP2、Kindlin-2表达与患者病理Gleason评分、肿瘤TNM分期有关(P均<0.05)。前列腺癌组织中SKP2与Kindlin-2表达呈正相关(r=0.517,P=0.013)。Kaplan-Meier分析结果显示,前列腺癌组织中SKP2、Kindlin-2高表达患者3年生存率分别低于SKP2、Kindlin-2低表达患者(P均<0.05)。结论前列腺癌组织中SKP2、kindlin-2表达增高,二者联合检测有助于前列腺癌患者的病情评估及预后判断。 展开更多
关键词 前列腺癌 s期激酶相关蛋白2 黏着斑蛋白-2
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碱性成纤维细胞生长因子对人肝癌Bel-7402细胞Skp2和p27^(Kip)表达的影响 被引量:1
7
作者 朱艳凌 孙黎光 +2 位作者 叶丽平 肖建英 张莹 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期144-147,共4页
目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对肝癌Bel-7402细胞Skp2、p27Kip表达的影响,探讨bFGF调控肝癌细胞增殖的信号转导机制。方法:分为对照组、bFGF组、bFGF+Wortmannin组,MTT法分析细胞增殖程度;流式细胞术分析细胞周期;RT-PCR法检... 目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对肝癌Bel-7402细胞Skp2、p27Kip表达的影响,探讨bFGF调控肝癌细胞增殖的信号转导机制。方法:分为对照组、bFGF组、bFGF+Wortmannin组,MTT法分析细胞增殖程度;流式细胞术分析细胞周期;RT-PCR法检测Skp2的mRNA表达;免疫印迹法检测Skp2、p27Kip蛋白的表达。结果:bFGF组细胞增殖比显著增加;bFGF可诱导细胞由G1期进入S期,而且上调Skp2的mRNA和蛋白表达、下调p27Kip蛋白表达;PI3K的抑制剂Wortmannin可部分抑制bFGF的上述作用。结论:bFGF可能通过激活PI3K/PKB途径调节Skp2、p27Kip表达,促进肝癌Bel-7402细胞增殖。 展开更多
关键词 肝癌 BEL-7402细胞 碱性成纤维细胞生长因子 s期激酶相关蛋白2 p27Kip
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miR-142-3p和SKP2在老年结直肠癌患者肿瘤组织中的表达及临床意义 被引量:1
8
作者 张静 赵振伟 +2 位作者 郭学海 王海娟 杨瑞英 《中国现代普通外科进展》 CAS 2021年第12期953-957,963,共6页
目的:检测miR-142-3p和S期激酶相关蛋白2(SKP2)在老年结直肠癌患者肿瘤组织中的表达,探讨二者的关系及临床意义。方法:选择2015年1月至2016年11月在本院就诊并手术治疗的老年结直肠癌患者的肿瘤组织标本60份作为结直肠癌组,相应癌旁组... 目的:检测miR-142-3p和S期激酶相关蛋白2(SKP2)在老年结直肠癌患者肿瘤组织中的表达,探讨二者的关系及临床意义。方法:选择2015年1月至2016年11月在本院就诊并手术治疗的老年结直肠癌患者的肿瘤组织标本60份作为结直肠癌组,相应癌旁组织标本作为对照组。采用qRT-PCR法检测结直肠癌组织与癌旁组织中miR-142-3p和SKP2 mRNA表达水平,免疫组织化学染色检测SKP2蛋白表达水平,Pearson法分析miR-142-3p和SKP2表达的相关性,分析二者与结直肠癌临床病理特征及预后的关系。结果:miR-142-3p在结直肠癌组织中表达水平低于正常结直肠黏膜组织(P<0.05),SKP2在结直肠癌组织中表达水平高于癌旁组织(P<0.05);miR-142-3p和SKP2表达水平与结直肠癌分化程度及淋巴转移有关(P<0.05);miR-142-3p高表达组患者3年生存率显著高于miR-142-3p低表达组,SKP2高表达组患者3年生存率显著低于SKP2低表达组(P<0.05);淋巴结转移、分化程度低、miR-142-3p低表达、SKP2高表达是结直肠癌患者预后不良的独立危险因素(P<0.05);结肠癌组织中miR-142-3p与SKP2 mRNA表达水平呈负相关(P<0.05)。结论:老年结直肠癌患者肿瘤组织中miR-142-3p低表达、SKP2高表达,且二者与患者生存质量有关,可能成为评价结直肠癌预后的标志物。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 miR-142-3p s期激酶相关蛋白2 预后
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SiewertⅡ、Ⅲ型胃食管结合部癌的临床特点及HER2、SKP2表达 被引量:1
9
作者 刘中元 张黎 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第33期25-27,30,共4页
目的:探讨 Siewert Ⅱ、Ⅲ型胃食管结合部癌(AEG)的临床特点及人表皮生长因子受体2(HER2)、细胞S 期激酶相关蛋白2(SKP2)表达变化。方法选取 SiewertⅡ及Ⅲ型 AEG 患者206例,比较二者的临床特点;应用免疫组化方法检测其 HER2、... 目的:探讨 Siewert Ⅱ、Ⅲ型胃食管结合部癌(AEG)的临床特点及人表皮生长因子受体2(HER2)、细胞S 期激酶相关蛋白2(SKP2)表达变化。方法选取 SiewertⅡ及Ⅲ型 AEG 患者206例,比较二者的临床特点;应用免疫组化方法检测其 HER2、SKP2表达情况,分析 SiewertⅡ、Ⅲ型 AEG 患者 HER2、SKP2阳性表达与临床病理参数的关系。结果两型 AEG 患者肿瘤大小、淋巴结转移、肿瘤分化程度和 TNM分期比较有统计学差异(P 均<0.05)。SiewertⅡ型 AEG 患者 HER2、SKP2阳性表达率分别为32.9%、41.2%,SiewertⅢ型 AEG 患者 HER2、SKP2阳性表达率分别为36.3%、55.4%;两组 SKP2阳性表达率差异有统计学意义(P <0.05)。SiewertⅡ或Ⅲ型 AEG 患者中,肿瘤直径<5 cm 与≥5 cm、浸润深度 T1~T2与 T3~T4、高~中分化与低分化、淋巴结转移 N0~N1与 N2~N3之间 HER2阳性表达率有统计学差异(P 均<0.05)。结论 HER2、SKP2异常表达可促进 AEG 的发生发展, HER2、SKP2表达检测对 AEG 早期诊断及疗效判断有重要作用。 展开更多
关键词 食管胃结合部腺癌 人表皮生长因子受体2 细胞s期激酶相关蛋白2
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大鼠系膜细胞增殖时S期激酶相关蛋白2表达的变化及机制 被引量:1
10
作者 刘书馨 常明 +2 位作者 刘焱 王志宏 付瑶 《中国中西医结合肾病杂志》 2009年第7期595-598,共4页
目的:探讨系膜细胞增殖时细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制物p27kip1的降解限速蛋白——S期激酶相关蛋白2(Skp2)表达的变化及其机制。方法:原代培养的大鼠系膜细胞同步后分为无血清组、20%胎牛血清(FCS)刺激组。MTT法检测细胞增殖;实时定... 目的:探讨系膜细胞增殖时细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制物p27kip1的降解限速蛋白——S期激酶相关蛋白2(Skp2)表达的变化及其机制。方法:原代培养的大鼠系膜细胞同步后分为无血清组、20%胎牛血清(FCS)刺激组。MTT法检测细胞增殖;实时定量PCR和Western Blot检测p27kip1和Skp2的mRNA、蛋白表达。结果:p27kip1在静止期系膜细胞高丰度表达,20%FCS刺激诱导细胞增殖后p27kip1蛋白表达显著下调;实时定量PCR研究结果显示p27kip1的mRNA表达水平差异无统计学差异,p27kip1蛋白和mRNA表达不一致。蛋白酶体抑制剂MG-132可显著改善系膜细胞增殖时p27kip1蛋白水平的下降。Skp2表达在静止期系膜细胞几乎检测不出,20%FCS刺激诱导细胞增殖后Skp2表达量显著上调。结论:系膜细胞Skp2表达显著上调导致p27kip1降解增加,可能是p27kip1蛋白水平下降、系膜细胞增殖的重要原因,为进一步阐明疾病状态下系膜细胞增殖的机制提供了新的研究靶点。 展开更多
关键词 系膜细胞 细胞周期调节蛋白 s期激酶相关蛋白2
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非小细胞肺癌中PI3K/Akt信号通路通过Cdh1调控Skp2表达的机制研究
11
作者 孙秀华 张洪开 +1 位作者 李玉 于爱鸣 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第12期30-32,118,共4页
目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中Cdc20同源蛋白1(Cdh1)参与磷脂酰肌醇三羟基激酶(PI3K)/Akt信号通路对S期激酶相关蛋白2(Skp2)表达调控的机制。方法体外培养NSCLC细胞系A549、LK2和H460,LY294002特异性阻断PI3K/Akt信号通路后,Western b... 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中Cdc20同源蛋白1(Cdh1)参与磷脂酰肌醇三羟基激酶(PI3K)/Akt信号通路对S期激酶相关蛋白2(Skp2)表达调控的机制。方法体外培养NSCLC细胞系A549、LK2和H460,LY294002特异性阻断PI3K/Akt信号通路后,Western blot检测Skp2、Cdh1及p-Akt蛋白表达的变化,免疫荧光(IF)检测Cdh1在NSCLC中的定位变化。结果 LY294002处理后,与对照组相比3种细胞中Skp2蛋白表达和Akt磷酸化水平均降低(P<0.01),Cdh1在3种细胞的核内表达均增多。结论 NSCLC中PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002使Skp2蛋白表达下调与Cdh1由细胞质向细胞核转位有关。 展开更多
关键词 肺肿瘤 磷脂酰肌醇三羟基激酶 s期激酶相关蛋白2 Cdc20同源蛋白1
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喉鳞状细胞癌中Skp2和p27蛋白的表达
12
作者 郭剑锋 陈福进 +3 位作者 管志伟 陈艳峰 李秋梨 欧阳电 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 北大核心 2007年第9期519-522,共4页
目的探讨细胞S相激酶相关蛋白(S-phasekinase associated protein 2,Skp2)、p27蛋白与喉鳞状细胞癌(简称喉癌)各临床因素及预后的相关性。方法采用免疫组化SP法检测79例喉癌患者肿瘤组织的Skp2、p27表达。结果喉癌中Skp2高表达率(53.16%... 目的探讨细胞S相激酶相关蛋白(S-phasekinase associated protein 2,Skp2)、p27蛋白与喉鳞状细胞癌(简称喉癌)各临床因素及预后的相关性。方法采用免疫组化SP法检测79例喉癌患者肿瘤组织的Skp2、p27表达。结果喉癌中Skp2高表达率(53.16%)显著高于正常喉组织(0%,P<0.05);喉癌Skp2蛋白低表达组的5年生存率(72.18%)显著高于高表达组(44.17%,P<0.01)。p27蛋白在喉癌和癌旁喉组织中的高表达率分别为30.38%和90%,差异具有显著性(P<0.05);喉癌p27蛋白高表达组的5年生存率(72.98%)显著高于低表达组(51.13%,P<0.01)。将Skp2和p27结合分析,Skp2高表达并p27低表达组的5年生存率最低,与另一组相比具有显著性差异(P=0.001)。结论Skp2蛋白通过降解靶蛋白p27可能在喉癌发生、发展中发挥重要作用。 展开更多
关键词 喉肿瘤 鳞状细胞 s期激酶相关蛋白质类 周期素依赖激酶抑制剂P27 免疫组织化学
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不同程度系膜细胞增殖性肾炎S期激酶相关蛋白2表达变化的研究
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作者 王志宏 刘书馨 +1 位作者 常明 张春环 《中国中西医结合肾病杂志》 2011年第6期497-499,566,共4页
目的:探讨不同程度系膜细胞增殖性肾炎S期激酶相关蛋白2(Skp2)表达的变化。方法:选取经肾穿刺活检证实为系膜细胞增殖性肾炎的病理切片,根据系膜细胞增殖的程度分为轻度、中度、重度3组,每组6例,进行PAS染色、BrdU免疫荧光染色和Skp2的... 目的:探讨不同程度系膜细胞增殖性肾炎S期激酶相关蛋白2(Skp2)表达的变化。方法:选取经肾穿刺活检证实为系膜细胞增殖性肾炎的病理切片,根据系膜细胞增殖的程度分为轻度、中度、重度3组,每组6例,进行PAS染色、BrdU免疫荧光染色和Skp2的免疫组化染色。结果:(1)BrdU间接免疫荧光结果显示在轻度系膜增殖性肾炎,偶见BrdU染色阳性细胞(0~1个/肾小球);在中度系膜增殖性肾炎,BrdU染色阳性细胞为(9.8±1.1)个/肾小球;重度增殖性肾炎为(16.3±2.8)个/肾小球,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。(2)Skp2免疫组化结果显示在肾小球,Skp2主要在系膜细胞的细胞核表达,呈棕黄色颗粒;随着系膜增殖程度的加重,肾小球内Skp2阳性细胞百分数显著增加[轻度(2.22±0.75)%vs中度(7.16±2.38)%vs重度(15.89±4.56)%],各组间差异有统计学意义(P<0.05)。(3)Pearson相关分析结果显示BrdU染色阳性率和肾小球内Skp2阳性细胞百分数高度相关(R=0.81)。结论:在人类系膜增殖性肾炎,随着系膜细胞增殖程度的加重,肾小球内Skp2阳性细胞数的比例显著增加,处于S期的系膜细胞也显著增加,为进一步阐明疾病状态下系膜细胞增殖的机制提供了新的研究靶点。 展开更多
关键词 系膜细胞 s期激酶相关蛋白2 细胞周期
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应用shRNA抑制Skp2表达对喉癌化疗的增敏作用研究
14
作者 路秀英 李晓明 《临床误诊误治》 2014年第9期36-39,共4页
目的探讨shRNA(small hairpin RNA)抑制S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase associated protein 2,Skp2)基因表达对化疗后喉癌Hep-2细胞增殖和凋亡的影响。方法将喉癌细胞分为空质粒对照组、Skp2 shRNA组、Skp2 shRNA加化疗组、空质粒加... 目的探讨shRNA(small hairpin RNA)抑制S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase associated protein 2,Skp2)基因表达对化疗后喉癌Hep-2细胞增殖和凋亡的影响。方法将喉癌细胞分为空质粒对照组、Skp2 shRNA组、Skp2 shRNA加化疗组、空质粒加化疗组及化疗组。应用脂质体将Skp2 shRNA转染到人喉癌Hep-2细胞,6 h后加入顺铂,培养48 h后流式细胞术检测Skp2、p27蛋白表达和细胞凋亡,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖变化,并进行比较。结果 Skp2 shRNA组与空质粒对照组比较,Skp2蛋白表达明显降低,p27蛋白表达明显增高,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。Skp2 shRNA加化疗组与空质粒加化疗组比较,各剂量顺铂(0 mg/L、1 mg/L、2 mg/L、3 mg/L)作用下细胞增殖抑制率均明显增高,差异均有统计学意义(P均<0.01);与空质粒加化疗组(2 mg/L顺铂)比较,Skp2 shRNA加化疗组细胞凋亡率明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 Skp2 shRNA可选择性阻断细胞Skp2基因表达,联合化疗可能为喉癌的综合治疗提供新的途径。 展开更多
关键词 喉肿瘤 鳞状细胞 s期激酶相关蛋白质类 药物疗法
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Skp2和p27^(kip1)蛋白在B细胞性非霍奇金淋巴瘤中的表达、定位及意义 被引量:2
15
作者 陆建明 陆建新 +4 位作者 沈爱国 张冬梅 王燏婵 何松 程纯 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期167-169,共3页
目的探讨B细胞性非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)组织中Skp2和p27kip1蛋白的表达、定位及意义。方法用免疫组织化学方法检测72例B-NHL和14例反应性增生淋巴结组织Skp2、p27kip1蛋白及细胞增殖指标Ki-67的表达情况,结合病理资料进行统计分析;用免... 目的探讨B细胞性非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)组织中Skp2和p27kip1蛋白的表达、定位及意义。方法用免疫组织化学方法检测72例B-NHL和14例反应性增生淋巴结组织Skp2、p27kip1蛋白及细胞增殖指标Ki-67的表达情况,结合病理资料进行统计分析;用免疫荧光双标记技术检测淋巴瘤Raji细胞株Skp2和p27kip1蛋白的定位情况。结果Skp2蛋白在B-NHL组织中的表达高于反应性增生的淋巴结(不含生发中心),在侵袭性B-NHL组织中的表达高于惰性组;p27kip1蛋白在B-NHL组织中的表达低于反应性增生淋巴结(不含生发中心),在侵袭性B-NHL组织中的表达低于惰性组;Skp2蛋白主要在Raji细胞的胞浆中表达,p27kip1蛋白主要表达于胞核。结论在B-NHL组织中,Skp2的高表达和p27kip1的低表达可能与其发生发展有关;Skp2和p27kip1在Raji细胞中的亚细胞定位与其生物学功能一致。 展开更多
关键词 s期激酶相关蛋白2 P27^KIP1 B细胞性非霍奇金淋巴瘤
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吉西他滨对人SKOV3卵巢癌细胞株细胞增殖和Skp2的影响 被引量:1
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作者 齐凤平 潘国强 +1 位作者 徐洪 王相利 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第24期33-35,共3页
目的探讨不同浓度吉西他滨对体外培养人SKOV3卵巢癌细胞株细胞增殖和S期激酶相关蛋白2(Skp2)表达的影响。方法不同浓度(0、10、20、40和60μmol/L)吉西他滨作用于人SKOV3卵巢癌细胞株后72h,通过细胞计数试剂盒CCK-8检测各组卵巢癌细胞... 目的探讨不同浓度吉西他滨对体外培养人SKOV3卵巢癌细胞株细胞增殖和S期激酶相关蛋白2(Skp2)表达的影响。方法不同浓度(0、10、20、40和60μmol/L)吉西他滨作用于人SKOV3卵巢癌细胞株后72h,通过细胞计数试剂盒CCK-8检测各组卵巢癌细胞增殖情况,采用免疫细胞化学染色法和RealTime PCR技术检测各组Skp2蛋白及其mRNA水平。结果不同浓度吉西他滨作用于人SKOV3卵巢癌细胞株72 h后,随着浓度增加细胞增殖明显受限,Skp2蛋白及其mRNA水平降低,并且上述结果与吉西他滨浓度均呈负相关。结论吉西他滨能够抑制SKOV3卵巢癌细胞株的增殖,机制可能与抑制Skp2表达有关。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 吉西他滨 s期激酶相关蛋白质类
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Skp2高表达与骨肉瘤患者新辅助化疗耐药之间的联系 被引量:4
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作者 许多辉 丁路 +2 位作者 余伟 宋正南 白靖平 《中国医药导报》 CAS 2020年第31期35-39,共5页
目的探索Skp2在骨肉瘤新辅助化疗耐药中的作用。方法收集GSE126209,GSE16089和TCGA数据中骨肉瘤和耐药骨肉瘤的基因表达谱。鉴定Skp2对骨肉瘤耐药的机制。收集2018年2月-2019年6月新疆医科大学第三临床医学院收治的OS患者17例,按肿瘤细... 目的探索Skp2在骨肉瘤新辅助化疗耐药中的作用。方法收集GSE126209,GSE16089和TCGA数据中骨肉瘤和耐药骨肉瘤的基因表达谱。鉴定Skp2对骨肉瘤耐药的机制。收集2018年2月-2019年6月新疆医科大学第三临床医学院收治的OS患者17例,按肿瘤细胞坏死率(TCNR)≥90%为非耐药,TCNR<90%为耐药分组,其中,非耐药肿瘤组织11例和耐药肿瘤组织6例;非耐药癌旁组织11例和耐药癌旁组织6例。RT-qPCR和Western-blot检测骨肉瘤癌组织及癌旁组织中的Skp2及相关基因的mRNA和蛋白表达情况。结果Skp2在骨肉瘤组织和甲氨蝶呤耐药细胞中均差异表达上调,Skp2参与细胞周期、FOXO通路等。分子实验结果示耐药骨肉瘤组织中Skp2、AKT的表达显著上升(P<0.05);p27、FOXO1、E-Cadherin在耐药肿瘤组织中的表达显著降低(P<0.05)。Cox分析示Skp2(HR=1.52,95%CI:0.67~3.46,P=0.31)、AKT(HR=1.04,95%CI:0.48~2.28,P=0.93)、p21(HR=1.09,95%CI:0.51~2.34,P=0.83)、p27(HR=1.50,95%CI:0.67~3.38,P=0.32)可能是影响骨肉瘤预后的风险因素。结论Skp2参与骨肉瘤新辅助化疗耐药产生,并与细胞周期和FOXO通路有关。 展开更多
关键词 骨肉瘤 s期激酶相关蛋白2 化疗耐药 细胞周期
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S期激酶相关蛋白2(SKP2)泛素化修饰OGG1对中波紫外线诱导的晶状体上皮细胞氧化损伤作用 被引量:1
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作者 李鹏飞 陈晓娟 +3 位作者 孙诚浩 张文怡 吴安然 管怀进 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2022年第1期15-19,共5页
目的探索E3泛素连接酶S期激酶相关蛋白2(SKP2)介导的碱基切除修复蛋白8-氧代鸟嘌呤-DNA糖基化酶(OGG1)在年龄相关性白内障(ARC)发生过程中的泛素化降解机制。方法采用免疫沉淀实验检测OGG1的泛素化修饰及其与SKP2的结合能力。采用中波... 目的探索E3泛素连接酶S期激酶相关蛋白2(SKP2)介导的碱基切除修复蛋白8-氧代鸟嘌呤-DNA糖基化酶(OGG1)在年龄相关性白内障(ARC)发生过程中的泛素化降解机制。方法采用免疫沉淀实验检测OGG1的泛素化修饰及其与SKP2的结合能力。采用中波紫外线(UVB)照射人晶状体上皮细胞株SRA01/04构建细胞氧化损伤模型。蛋白免疫印迹实验检测细胞氧化损伤模型和过表达模型细胞中SKP2的蛋白表达。通过转染SKP2质粒,增加SKP2的表达并观察细胞中OGG1蛋白的表达变化。结果OGG1蛋白存在泛素化修饰。UbiBrowser软件预测能与OGG1结合的潜在E3泛素连接酶,并通过免疫沉淀实验证明SKP2与OGG1之间存在相互作用。在氧化损伤环境下,SRA01/04细胞中SKP2蛋白表达出现先下降后逐渐升高的趋势,其中UVB照射10 min时SKP2表达下降最为显著。对照组、转染空载质粒组和转染SKP2过表达质粒组SRA01/04细胞中SKP2蛋白的相对表达量分别为1.040±0.007、0.920±0.008和1.330±0.020,与转染空载质粒组相比,转染SKP2过表达质粒组细胞中SKP2蛋白的表达显著上调(P<0.05)。空白对照组、UVB组、UVB+转染空载质粒组和UVB+转染SKP2过表达质粒组细胞中OGG1蛋白的相对表达量分别为1.05±0.01、5.05±0.16、5.20±0.07和3.83±0.10;与UVB+转染空载质粒组相比,UVB+转染SKP2过表达质粒组SRA01/04细胞中OGG1蛋白相对表达水平明显降低,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论E3泛素连接酶SKP2能够促进OGG1发生泛素化降解,导致晶状体上皮细胞内部损伤性DNA的累积,从而导致ARC的发生发展。 展开更多
关键词 年龄相关性白内障 泛素化修饰 8-氧代鸟嘌呤-DNA糖基化酶 s期激酶相关蛋白2 中波紫外线
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LXR异常激活上调p27蛋白致胰岛β细胞周期阻滞 被引量:5
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作者 毛旭华 汤俊明 +3 位作者 乔国洪 冯斯依 韩晓 井昶雯 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2017年第5期386-389,共4页
目的探讨肝X受体(liver X receptors,LXR)激动剂对小鼠胰岛β细胞系MIN6的作用。方法 LXR激动剂T0901317作用于MIN6细胞后,CCK-8法检测细胞活力;流式细胞仪检测细胞周期变化;实时定量RT-PCR法检测S期激酶相关蛋白2(Skp2)和p27 mRNA的表... 目的探讨肝X受体(liver X receptors,LXR)激动剂对小鼠胰岛β细胞系MIN6的作用。方法 LXR激动剂T0901317作用于MIN6细胞后,CCK-8法检测细胞活力;流式细胞仪检测细胞周期变化;实时定量RT-PCR法检测S期激酶相关蛋白2(Skp2)和p27 mRNA的表达水平;western blot检测Skp2和p27蛋白的表达情况。结果与control组相比,1、5和10μmol/L药物处理后的细胞存活率分别为(98.54±0.94)%、(87.03±0.93)%和(75.57±1.85)%,各组间差异有统计学意义(F=301.90,P<0.01)。与control组G1期(35.93±2.25)%和S期(52.87±1.19)%相比,1、5和10μmol/L药物处理组G1期细胞比例分别为(38.45±0.91)%、(45.46±1.34)%和(53.28±1.14)%,差异有统计学意义(F=80.83,P<0.01)。S期细胞比例分别为(48.65±0.85)%、(36.31±1.37)%和(31.45±1.22)%,差异有统计学意义(F=221.30,P<0.01)。10μmol/L T0901317处理组p27蛋白表达水平(2.84±0.14)明显高于control组(2.28±0.10),差异有统计学意义(t=4.54,P<0.05)。但两组间p27 mRNA水平差异无统计学意义(t=0.28,P>0.05)。10μmol/L T0901317下调Skp2 mRNA(0.52±0.02,t=29.22,P<0.01)和蛋白质水平(相对灰度值为0.98±0.12,control组为1.89±0.01,t=10.98,P<0.01)。以对照组(100%)为参照,转染组、药物处理组和干扰组的细胞存活率分别为(100.97±1.08)%、(75.03±1.83)%和(86.67±2.45)%,与对照组比较,转染组间差异无统计学意义(t=1.542,P>0.05),药物处理组细胞活力下降(t=23.58,P<0.01);药物处理组和干扰组间差异亦有统计学意义(t=7.77,P<0.01)。结论 LXR异常激活可导致胰岛β细胞增殖抑制,p27蛋白表达量增加,其机制可能为降解调控p27蛋白的Skp2 mRNA和蛋白质表达水平下降。 展开更多
关键词 2型糖尿病 肝X受体激动剂 P27 s期激酶相关蛋白2 细胞周期阻滞
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5-氮杂-2'-脱氧胞苷对人胃癌细胞株BGC803生长及死亡相关蛋白激酶基因表达的影响
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作者 沈薇 胡金瑶 +1 位作者 高伟 赵慧 《中国医药导报》 CAS 2014年第32期14-16,29,共4页
目的探讨去甲基化药物5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-Cd R)对人胃癌细胞BGC803增殖、凋亡及对死亡相关蛋白激酶(DAPK)m RNA表达水平的影响。方法用不同浓度的5-Aza-Cd R处理BGC803细胞,设立不含5-Aza-Cd R的对照组及3个实验组:5-Aza-Cd ... 目的探讨去甲基化药物5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-Cd R)对人胃癌细胞BGC803增殖、凋亡及对死亡相关蛋白激酶(DAPK)m RNA表达水平的影响。方法用不同浓度的5-Aza-Cd R处理BGC803细胞,设立不含5-Aza-Cd R的对照组及3个实验组:5-Aza-Cd R 1μmol/L组、5-Aza-Cd R 5μmol/L组、5-Aza-Cd R 10μmol/L组。CCK-8检测细胞的增殖情况,AnnexinⅤ/PI双染及流式细胞术检测药物处理后细胞凋亡的情况,RT-PCR检测用药前后DAPK m RNA的表达水平变化。结果实验组BGC803细胞增殖速度显著低于对照组,细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。RT-PCR结果显示,BGC803细胞中DAPK基本无表达,5-Aza-Cd R处理后,细胞中DAPK m RNA表达量显著高于对照组(P<0.05)。结论 5-Aza-Cd R抑制BGC803细胞增殖,并促进细胞凋亡,可能与其诱导DAPK基因表达有关。 展开更多
关键词 5-氮杂-2'-脱氧胞苷 死亡相关蛋白激酶 胃癌 细胞增殖 细胞凋亡
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