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FMOC-Cl柱前衍生HPLC-MS/MS测定白芨中16种氨基酸成分
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作者 刘诗菡 金文芳 +3 位作者 杨玉玉 邵千山 李春晓 范宝磊 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期675-682,共8页
基于9-芴甲氧羰酰氯(FMOC-Cl)柱前衍生,建立了白芨中16种氨基酸成分的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)分析方法。样品经提取、FMOC-Cl衍生后,样品溶液经Shim-pack VP-ODS色谱柱(300 mm×2.0 mm,5μm)分离,以乙腈-水溶液为流动相... 基于9-芴甲氧羰酰氯(FMOC-Cl)柱前衍生,建立了白芨中16种氨基酸成分的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)分析方法。样品经提取、FMOC-Cl衍生后,样品溶液经Shim-pack VP-ODS色谱柱(300 mm×2.0 mm,5μm)分离,以乙腈-水溶液为流动相进行梯度洗脱分离。采用电喷雾电离负离子多反应监测模式检测。实验结果表明,16种氨基酸在一定浓度范围内线性关系良好(相关系数R 2>0.999),实际样品加标回收率在91.5%~105.6%之间,相对标准偏差均小于5%。通过多元统计分析,产地相近的白芨中氨基酸含量具有相似性,并且确定了8种核心指标。该方法简便、准确、灵敏,适用于白芨中16种氨基酸的快速定性、定量分析,测定结果可为白芨的质量评价以及后期的开发利用提供技术支持。 展开更多
关键词 氨基酸 白芨 FMOC-Cl衍生 高效液相色谱-串联质谱 多元统计分析
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采用HPLC法柱前衍生检测乳粉中的牛磺酸 被引量:7
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作者 张志国 刘宁 +2 位作者 贾云虹 谢焱 李琦 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期100-103,共4页
建立了用 2 ,4 二硝基氟苯作为柱前衍生试剂 ,采用高效液相色谱仪 ,紫外检测器成功检测出乳粉中牛磺酸含量的方法。色谱柱为C 1 8柱 ,在室温条件下采用磷酸盐缓冲溶液作为流动相 ,测得的标准曲线的相关系数为 0 .9999,回收率为在 96.2 ... 建立了用 2 ,4 二硝基氟苯作为柱前衍生试剂 ,采用高效液相色谱仪 ,紫外检测器成功检测出乳粉中牛磺酸含量的方法。色谱柱为C 1 8柱 ,在室温条件下采用磷酸盐缓冲溶液作为流动相 ,测得的标准曲线的相关系数为 0 .9999,回收率为在 96.2 5 %~ 1 0 3 .2 %之间 ,方法的变异系数为 2 79% 。 展开更多
关键词 牛磺酸 hplc 法能 乳粉 柱前衍生 高效液相色谱仪 标准曲线 氟苯 硝基 磷酸盐缓冲溶液
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OPA柱前自动衍生-紫外检测米胚芽中的γ-氨基丁酸的HPLC法研究 被引量:36
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作者 张晖 吴胜芳 姚惠源 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期50-52,共3页
研究了OPA柱前自动衍生 紫外检测米胚芽中的γ 氨基丁酸的HPLC法 ,在最适的条件下 ,γ 氨基丁酸的线性范围为 10~ 2 5 0mg/L ,r =0 9999,RSD小于 1 2 % ,回收率为98 7%~ 10 1 2 %。通过富集 ,米胚芽中的GABA含量由 0 3 0 1mg/g提高... 研究了OPA柱前自动衍生 紫外检测米胚芽中的γ 氨基丁酸的HPLC法 ,在最适的条件下 ,γ 氨基丁酸的线性范围为 10~ 2 5 0mg/L ,r =0 9999,RSD小于 1 2 % ,回收率为98 7%~ 10 1 2 %。通过富集 ,米胚芽中的GABA含量由 0 3 0 1mg/g提高到 4 3 9mg/g。 展开更多
关键词 OPA柱前自动衍生 米胚芽 Γ-氨基丁酸 hplc 测定
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应用HPLC测定生物制品中甲醛含量的研究 被引量:8
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作者 辛暨华 邱野 +4 位作者 薛海卿 司杨乐 槐丽萍 蔡岩 李晶 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第5期104-106,共3页
研究了直接用于液相色谱测定甲醛与2,4-二硝基苯肼的反应条件,使反应在菌疫苗类生物制品自身的pH范围内即弱酸性条件下,无需酸碱度调节,反应产物甲醛衍生物不需要有机溶剂萃取,避免损失,可直接用于液相色谱分析.在检出限及精确度方面更... 研究了直接用于液相色谱测定甲醛与2,4-二硝基苯肼的反应条件,使反应在菌疫苗类生物制品自身的pH范围内即弱酸性条件下,无需酸碱度调节,反应产物甲醛衍生物不需要有机溶剂萃取,避免损失,可直接用于液相色谱分析.在检出限及精确度方面更是优越于分光光度法.将样品用2,4-二硝基苯肼溶液衍生后,经C18化学键合硅胶为固定相,以乙睛:水(60:40,体积比)为流动相.紫外检测波长 360 nm进行测定.方法的平均回收率为95.4%(n=5),两种生物制品 6 次独立测定的相对标准偏差分别为重组乙型肝炎疫苗(CHO)RSD=0.92%,吸附白喉破伤风联合疫苗RSD=3.92%.甲醛(0.6~3.0 μg/mL)范围内,浓度与吸收面积值呈良好的线性关系.结果显示,该研究方法的色谱条件能准确定量、灵敏、准确、重复性好,优于药典的分光光度法,可用于实际检测分析. 展开更多
关键词 甲醛 甲醛衍生物 2 4-二硝基苯肼(DNPH) 高压液相色谱法
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柱前衍生HPLC法分析蔓菁多糖中单糖的组成 被引量:11
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作者 邝婷婷 王宇 +2 位作者 王张 杨永东 张艺 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期2121-2125,共5页
目的建立柱前衍生HPLC法测定藏药蔓菁多糖中单糖的组成。方法以2 mol/L硫酸水解蔓菁多糖,水解产物加入1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮进行衍生化,采用反相高效液相色谱法,测定蔓菁多糖中单糖的衍生物。Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 m... 目的建立柱前衍生HPLC法测定藏药蔓菁多糖中单糖的组成。方法以2 mol/L硫酸水解蔓菁多糖,水解产物加入1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮进行衍生化,采用反相高效液相色谱法,测定蔓菁多糖中单糖的衍生物。Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈为A流动相,0.1 mol/L磷酸盐(KH2PO4-Na OH,p H 6.8)缓冲液为B流动相,梯度洗脱;检测波长250 nm。结果蔓菁多糖由半乳糖、D-甘露糖、鼠李糖、阿拉伯糖、D-无水葡萄糖、D-葡萄糖醛酸、D-半乳糖醛酸7种单糖组成,其摩尔比为1∶0.26∶0.54∶1.06∶0.84∶0.05∶4.17。结论柱前衍生HPLC法表明蔓菁多糖主要由半乳糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖构成。 展开更多
关键词 藏药 蔓菁多糖 柱前衍生化 单糖
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HPLC法测定发芽糙米中γ-氨基丁酸含量 被引量:29
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作者 房克敏 李再贵 +1 位作者 袁汉成 孟颖 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第4期208-211,共4页
建立一种发芽糙米中γ-氨基丁酸含量的高效液相色谱测定法。采用AQC(6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基氨基甲酸酯)为柱前衍生试剂,色谱柱为WatersAccQ·Tag氨基酸分析柱,梯度洗脱,紫外检测波长248.0nm。γ-氨基丁酸的线性范围在0.10... 建立一种发芽糙米中γ-氨基丁酸含量的高效液相色谱测定法。采用AQC(6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基氨基甲酸酯)为柱前衍生试剂,色谱柱为WatersAccQ·Tag氨基酸分析柱,梯度洗脱,紫外检测波长248.0nm。γ-氨基丁酸的线性范围在0.10~1.0μmol/ml,线性关系良好,线性方程为Y=3.0×106X-7877.6,r=0.9999,回收率为99.0%~100.5%。该方法易于操作、稳定、灵敏、准确。用该方法测定了16种发芽糙米,结果显示其发芽后的含量均显著高于未发芽糙米中的γ-氨基丁酸含量。 展开更多
关键词 Γ-氨基丁酸 AccQ·Tag衍生 hplc 发芽糙米
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龙牙百合花氨基酸含量的柱前衍生OPA-HPLC法测定 被引量:7
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作者 陈立德 刘新桃 +2 位作者 蒋盛岩 危兆安 张咋如 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第18期10832-10833,10836,共3页
[目的]测定龙牙百合花中的氨基酸含量。[方法]以邻苯二甲醛(OPA)与9-芴基羰酰氯(FMOC-Cl)作衍生剂,利用VWD检测器可变波长检测程序,采用柱前衍生OPA-HPLC法测定邵阳龙牙百合花中的17种氨基酸含量。[结果]邵阳龙牙百合花中含有苏氨酸、... [目的]测定龙牙百合花中的氨基酸含量。[方法]以邻苯二甲醛(OPA)与9-芴基羰酰氯(FMOC-Cl)作衍生剂,利用VWD检测器可变波长检测程序,采用柱前衍生OPA-HPLC法测定邵阳龙牙百合花中的17种氨基酸含量。[结果]邵阳龙牙百合花中含有苏氨酸、丝氨酸、脯氨酸、蛋氨酸、谷氨酸、甘氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、天门冬氨酸、丙氨酸、组氨酸、半胱氨酸、异亮氨酸等17种氨基酸。其中必需氨基酸的含量为49.7 mg/g,占氨基酸总量的31.20%;儿童必需氨基酸的含量为30.6 mg/g,占氨基酸总量的19.20%;含量最高的是谷氨酸(28.7 mg/g,占氨基酸总量的18.03%);其次是精氨酸(27.5 mg/g,占氨基酸总量的17.30%)。[结论]该方法操作简便,灵敏度高,结果准确,可靠。龙牙百合花中氨基酸的种类齐全,含量丰富,具有很高的开发利用价值。 展开更多
关键词 柱前衍生法 邻苯二甲醛衍生高效液相色谱法 百合花 氨基酸
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HPLC法测定喙尾琵琶甲药材中氨基酸的含量 被引量:3
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作者 肖培云 杨永寿 +1 位作者 施贵荣 李龙星 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第23期14162-14163,14169,共3页
[目的]建立HPLC法测定喙尾琵琶甲中氨基酸含量的方法。[方法]用盐酸水解、邻苯二甲醛和β-巯基乙醇柱前衍生,0.55%磷酸二氢钠缓冲液(pH7.80)-甲醇-乙腈为流动相,柱温35℃,检测波长338 nm,梯度洗脱后测定喙尾琵琵甲药材中氨基酸的含量。... [目的]建立HPLC法测定喙尾琵琶甲中氨基酸含量的方法。[方法]用盐酸水解、邻苯二甲醛和β-巯基乙醇柱前衍生,0.55%磷酸二氢钠缓冲液(pH7.80)-甲醇-乙腈为流动相,柱温35℃,检测波长338 nm,梯度洗脱后测定喙尾琵琵甲药材中氨基酸的含量。[结果]各氨基酸衍生物在40 m in内均能得到良好地分离,r为0.997 0~1.000 0(n=6),平均回收率为90.16%~104.1%,RSD为1.89%~5.92%。[结论]该方法简便、准确、重现性好,可作为喙尾琵琶甲中氨基酸含量的测定方法。 展开更多
关键词 喙尾琵琶甲 氨基酸 柱前衍生化 高效液相色谱
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RP-HPLC在线衍生法测定红景天中痕量铅的研究 被引量:2
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作者 刘思曼 边清泉 +2 位作者 唐英 张进 李方 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期588-590,共3页
A new RP-HPLC method for the determination of lead in Rhodiola species was established on a Shim-pack Vp-ODS column(150 mm×4.6 mm I.D.,5μm) at UV 255 nm.The column temperature is 300C.Bis(Salicyladehyde)o-ph... A new RP-HPLC method for the determination of lead in Rhodiola species was established on a Shim-pack Vp-ODS column(150 mm×4.6 mm I.D.,5μm) at UV 255 nm.The column temperature is 300C.Bis(Salicyladehyde)o-phenydnediiminato was used as a on line derivate agent and MeOH-H2O-derivate agent(65:33.5:1.5,v/v) was made use of mobile phase.The method was applied for the determination of lead and the lineal range of lead is 0.1352-0.6759ng(r=0.9989).The average recovery is 99.2% with RSD being 2.9%(n=5). 展开更多
关键词 RP-hplc 在线衍生 双水杨醛邻苯二胺 铅(Ⅱ)络合物 红景天
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衍生化条件的优化及不同产地青蒿中青蒿素含量的柱前衍生化-HPLC法测定 被引量:4
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作者 张伟 秦民坚 王国凯 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 2011年第1期88-90,共3页
Derivation conditions of pre-column derivation-HPLC method used for determinating artemisinin content were compared and selected,and artemisinin content in above-ground part of Artemisia annua L.from seventeen locatio... Derivation conditions of pre-column derivation-HPLC method used for determinating artemisinin content were compared and selected,and artemisinin content in above-ground part of Artemisia annua L.from seventeen locations was compared by optimal pre-column derivation-HPLC method.The optimal derivation condition is selected via comparing of 0.2% NaOH solution addition(3,4,5,6 and 7 mL),derivation temperature(30 ℃,35 ℃,40 ℃,45 ℃ and 50 ℃) and derivation time(0,2,5,10,20,40 and 60 min) during derivation process.The optimal derivation condition is adding 5 mL 0.2% NaOH solution,then insulating in 40 ℃ water bath for 10 min.Differences of artemisinin content in A.annua from seventeen locations are obvious,the general trend is that artemisinin content decreases gradually with location from south to north,in which artemisinin content in A.annua from Youyang of Chongqing is the highest with a value of 7.08 mg·g-1.The method is simple and accurate with good reproducibility,and can be used to determinate artemisinin content in medicinal material of A.annua. 展开更多
关键词 青蒿 青蒿素 柱前衍生化-hplc 优化 产地
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柱前衍生HPLC法测定鸡脂酶解物中游离脂肪酸含量 被引量:3
11
作者 滕迪克 袁芳 +1 位作者 高彦祥 罗昌荣 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第3期133-136,共4页
建立以2,4-二溴苯乙酮为衍生化试剂,18-冠-6醚为相转移催化剂,同时测定鸡脂酶解物中四种游离脂肪酸的柱前衍生高效液相色谱法。利用Zorbax SB—C18柱(250min×4.6min i.d.,5μm),检测波长254nm,乙腈和水为流动相进行梯... 建立以2,4-二溴苯乙酮为衍生化试剂,18-冠-6醚为相转移催化剂,同时测定鸡脂酶解物中四种游离脂肪酸的柱前衍生高效液相色谱法。利用Zorbax SB—C18柱(250min×4.6min i.d.,5μm),检测波长254nm,乙腈和水为流动相进行梯度洗脱,柱温25℃,体积流量1.6mL/min,外标法定量分析。结果表明:以2,4-二溴苯乙酮为衍生化试剂测定的肉豆蔻酸(15.6~78.1mg/L)、亚油酸(27.2~136.0mg/L)、油酸(73.4-367.2mg/L)和硬脂酸(31.7~158.4mg/L)在测定范围内呈现良好相关性,相关系数在0.9993~0.9998之间。柱前衍生HPLC法简便准确,可用于水解鸡脂中游离脂肪酸含量定量分析。 展开更多
关键词 游离脂肪酸 hplc 柱前衍生法 酶水解 鸡脂
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HPLC法同时测定环孢素A和其衍生物的含量 被引量:2
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作者 薛彬 张晴 +2 位作者 郑占伟 祝仕清 孟雅娟 《化学与生物工程》 CAS 2016年第3期68-70,共3页
采用Diamonsil-C18色谱柱,柱温60℃下,以磷酸水-乙腈为流动相,流速1.0mL·min-1,检测波长210nm,建立了同时测定发酵液中环孢素A和其衍生物的高效液相色谱(HPLC)检测方法。结果表明,在10-2 000μg·mL-1浓度范围内,环孢素A和... 采用Diamonsil-C18色谱柱,柱温60℃下,以磷酸水-乙腈为流动相,流速1.0mL·min-1,检测波长210nm,建立了同时测定发酵液中环孢素A和其衍生物的高效液相色谱(HPLC)检测方法。结果表明,在10-2 000μg·mL-1浓度范围内,环孢素A和其衍生物的峰面积与浓度呈良好的线性关系,相关系数分别为1.0000和0.9999;按标准加入法计算回收率,环孢素A和其衍生物平均回收率分别为100.07%和100.06%;精密度实验的RSD值分别为0.97%和1.14%。该方法具有分析时间短、操作简便、结果准确、重现性好等特点。 展开更多
关键词 环孢素A 环孢素A衍生物 液相色谱法 发酵液
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甘露聚糖肽HPLC法指纹图谱的建立 被引量:1
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作者 毛瑞娟 毛跟年 +1 位作者 李楠 邵静可 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第3期36-40,共5页
采用HPLC法建立甘露聚糖肽口服液中氨基酸指纹图谱。色谱条件为Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相:A相为乙腈-水(4∶1),B相为0.1mol/L醋酸钠-乙腈(93∶7,pH6.4);梯度洗脱;流速1.0mL/min;检测波长254nm。以异硫氰酸苯酯为... 采用HPLC法建立甘露聚糖肽口服液中氨基酸指纹图谱。色谱条件为Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相:A相为乙腈-水(4∶1),B相为0.1mol/L醋酸钠-乙腈(93∶7,pH6.4);梯度洗脱;流速1.0mL/min;检测波长254nm。以异硫氰酸苯酯为衍生化试剂,对来自3个厂家共10批次产品进行色谱分析,建立甘露聚糖肽口服液指纹图谱。精密度、重现性、稳定性试验RSD均不大于3%。未水解甘露聚糖肽口服液指纹图谱共有11个峰,水解后指纹图谱共有11个峰,样品相似度均在0.90以上。研究结果表明,本方法稳定、准确,可为控制甘露聚糖肽口服液的质量提供参考。 展开更多
关键词 甘露聚糖肽口服液 高效液相色谱 衍生化 指纹图谱
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柱前衍生RP-HPLC法测定狗尾草种子氨基酸含量 被引量:2
14
作者 赵岩 唐国胜 +4 位作者 侯莹莹 郜玉钢 王士杰 蔡恩博 张连学 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2015年第9期185-190,共6页
【目的】采用柱前衍生反相高效液相色谱(RP—HPLC)法检测狗尾草种子中游离氨基酸和水解氨基酸含量,为阐明其应用价值提供支撑。[方法】制备狗尾草种子的水解氨基酸样品溶液和游离氨基酸样品溶液,以异硫氰酸苯酯和三乙胺进行柱前衍... 【目的】采用柱前衍生反相高效液相色谱(RP—HPLC)法检测狗尾草种子中游离氨基酸和水解氨基酸含量,为阐明其应用价值提供支撑。[方法】制备狗尾草种子的水解氨基酸样品溶液和游离氨基酸样品溶液,以异硫氰酸苯酯和三乙胺进行柱前衍生,建立RP—HPLC法,检测方法的精密性、稳定性、重复性。利用RP—HPLC法,采用梯度洗脱方法,检测狗尾草种子中游离氨基酸和水解氨基酸含量。【结果】21种氨基酸的检测浓度线性范围为0.0019~2.7000#mol/mL,相关系数R2均≥0.9990。21种游离氨基酸的平均加样回收率在87.50%~100.20%,相对标准偏差(RSD)在0.82%~2.46%;水解氨基酸的平均加样回收率在91.10%~100.21%,RSD在0.52%~2.08%。必需氨基酸和半必需氨基酸在狗尾草21种游离氨基酸和水解氨基酸中均含有,但水解后色氨酸、天冬酰胺、组胺酰胺遭到了破坏,含量较低。【结论】建立的氨基酸测定方法稳定、快速、精密度高、线性范围宽,适合狗尾草种子中游离氨基酸和水解氨基酸的含量测定。狗尾草种子中含有丰富的游离和水解氨基酸。 展开更多
关键词 狗尾草种子 氨基酸 反相高效液相色谱法 柱前衍生化
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免疫亲和柱-HPLC在食醋AFB_1含量测定中的应用研究 被引量:2
15
作者 孙林超 黄亚东 《中国酿造》 CAS 北大核心 2008年第10X期81-83,共3页
将免疫亲和柱与HPLC相结合,对食醋中AFB1的含量进行分析,建立免疫亲和柱、柱后衍生、高效液相色谱结合荧光检测器测定食醋中AFB1含量的方法。流动相为甲醇-水(65+35),Agilent-Cl8柱(4.6mm×300mm,5μm),流量为0.8mL/min,激发波长为3... 将免疫亲和柱与HPLC相结合,对食醋中AFB1的含量进行分析,建立免疫亲和柱、柱后衍生、高效液相色谱结合荧光检测器测定食醋中AFB1含量的方法。流动相为甲醇-水(65+35),Agilent-Cl8柱(4.6mm×300mm,5μm),流量为0.8mL/min,激发波长为365nm,发射波长为440nm。实验表明:当AFB1的含量在10ng/mL^50ng/mL时,AFB1的浓度与峰面积呈线性关系,加标回收率为89.36%~99.19%,最低检出限为0.1μg/kg,相对标准偏差为1.19%~5.25%。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1(AFB1) 免疫亲和柱 hplc 柱后衍生 食醋
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固相萃取-高效液相色谱法测定植物源性产品中的熊果苷
16
作者 陈敏 张巧艳 +2 位作者 王夏君 王顺利 郑蔚然 《浙江农业学报》 北大核心 2025年第8期1776-1784,共9页
建立了测定植物源性产品(水果与中草药)中熊果苷的固相萃取-高效液相色谱法,分别采用水与甲醇对高含水量样品和低含水量样品进行提取,通过HLB固相萃取小柱净化,利用高效液相色谱进行测定。结果表明:在0.000 5~0.05 mg·mL^(-1)范围... 建立了测定植物源性产品(水果与中草药)中熊果苷的固相萃取-高效液相色谱法,分别采用水与甲醇对高含水量样品和低含水量样品进行提取,通过HLB固相萃取小柱净化,利用高效液相色谱进行测定。结果表明:在0.000 5~0.05 mg·mL^(-1)范围内,熊果苷质量浓度与色谱峰峰面积具有良好的线性关系,相关系数为0.999 8,3个不同加标水平下熊果苷的回收率为81.33%~97.01%,相对标准偏差为1.39%~3.65%(n=6)。将建立的方法应用于植物源性产品检测,发现梨的熊果苷含量较高,蓝莓、覆盆子及白及次之。该方法实用性强、结果准确、适用范围广,可作为植物源性产品中熊果苷的检测方法,为植物源性产品的品质评估提供科学参考。 展开更多
关键词 熊果苷 植物源产品 固相萃取 高效液相色谱法
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HPLC-荧光法测定醛糖还原酶的活性 被引量:1
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作者 陈修平 石京山 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1472-1475,共4页
目的建立一种基于NADP+衍生物荧光的高灵敏度的体外测定醛糖还原酶(aldose reductase,AR)活性的HPLC方法。方法从大鼠的肾脏中分离纯化AR,以DL-甘油醛为底物,加入NADPH启动酶促反应。以C18柱分离NADP+衍生物,流动相为乙腈∶水(75∶25),... 目的建立一种基于NADP+衍生物荧光的高灵敏度的体外测定醛糖还原酶(aldose reductase,AR)活性的HPLC方法。方法从大鼠的肾脏中分离纯化AR,以DL-甘油醛为底物,加入NADPH启动酶促反应。以C18柱分离NADP+衍生物,流动相为乙腈∶水(75∶25),流速1.0 ml.min-1,柱温25℃,荧光检测激发波长370 nm,发射波长465 nm。测定NADP+衍生物的稳定性以及NADPH、DL-甘油醛、pH、温度对AR活性的影响。结果 NADP+衍生物稳定性好,保留时间为(1.4±0.01)min,附近无干扰峰,其浓度与荧光强度线性关系良好(r=0.9994),最低检测限为25 pmol。日内和日间精密度均小于10%。结论本方法操作简单、灵敏度高、特异性强,可用于体外AR的活性的测定。 展开更多
关键词 醛糖还原酶 hplc NADP+衍生物 荧光 大鼠 肾脏
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若干苄基异喹啉类化合物的HPLC保留因子与抑制钙调素活性的关系 被引量:1
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作者 黄文龙 彭司勋 +1 位作者 陈少林 胡卓逸 《生物化学杂志》 CSCD 1993年第5期620-625,共6页
苄基异喹啉类化合物具有较强的拮抗钙调素(Calmodulin,Cam)的活性,测定这类化合物HPLC参数LogK′作为疏水参数与抑制钙调素的活性进行相关分析,结果表明活性随化合物亲脂性的增大而升高,二者较符合抛物线关系。
关键词 高效液相色谱 调钙蛋白 苄基异喹啉
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柱前衍生RP-HPLC法测定犀牛角中氨基酸的含量 被引量:4
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作者 朱伟伟 《安徽农业科学》 CAS 2012年第17期9278-9279,共2页
[目的]建立柱前衍生法测定犀牛角中氨基酸含量的方法。[方法]犀牛角以酸水解法制备水解氨基酸样品溶液,采用柱前衍生-液相色谱法(RP-HPLC)法测定氨基酸含量。色谱条件为:色谱柱为Waters Nova-Pak C18柱(150 mm×3.9 mm,5μm),以乙腈... [目的]建立柱前衍生法测定犀牛角中氨基酸含量的方法。[方法]犀牛角以酸水解法制备水解氨基酸样品溶液,采用柱前衍生-液相色谱法(RP-HPLC)法测定氨基酸含量。色谱条件为:色谱柱为Waters Nova-Pak C18柱(150 mm×3.9 mm,5μm),以乙腈-缓冲盐为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,紫外检测器检测波长为248 nm,柱温为37℃。[结果]17种氨基酸在0.003 4~0.191mg/ml范围内有良好的线性关系(r>0.999 4),平均回收率(n=6)为97.8%。[结论]犀牛角中含有大量的氨基酸,其总氨基酸含量高达41.3%。该方法对研究犀牛角的药用价值与寻找犀牛角药用替代物有积极意义。 展开更多
关键词 柱前衍生-液相色谱法 犀牛角 氨基酸
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HPLC-MS法测定大鼠血浆中广藿香酮衍生物PPCl浓度及其药动学研究
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作者 张岚 彭成 +4 位作者 程芳 陈婕妤 潘媛 韩波 张若琪 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 2019年第5期632-635,共4页
目的建立大鼠血浆中广藿香酮衍生物(PPCl)浓度的HPLC-MS分析方法,并研究该药在大鼠体内的药动学特征。方法采用乙酸乙酯萃取大鼠血浆中的药物和内标(大黄素),以Infinity Lab Poroshell 120 EC-C18(3mm×100mm,2.7μm)为色谱柱;以乙... 目的建立大鼠血浆中广藿香酮衍生物(PPCl)浓度的HPLC-MS分析方法,并研究该药在大鼠体内的药动学特征。方法采用乙酸乙酯萃取大鼠血浆中的药物和内标(大黄素),以Infinity Lab Poroshell 120 EC-C18(3mm×100mm,2.7μm)为色谱柱;以乙腈-水(5mmol/L醋酸铵)为流动相梯度洗脱,流速为0.3mL/min;质谱采用ESI离子源和负离子多重反应离子监测方式测定大鼠血浆中PPCl的浓度。结果大鼠血浆中的PPCl在33.26~30800ng/mL线性范围内线性关系良好(r=0.997);批内、批间精密度和准确度符合生物样品的检测要求;提取回收率和基质效应的平均值分别为99.83%和94.40%;大鼠灌胃给予10mg/kg的PPCl,药物的t1/2为(14.57±1.93)h,Cmax为(19.29±6.47)μg/mL,AUC0-t为(434.40±140.09)μg/(mL·h),结论本实验建立的测定大鼠血浆中PPCl的HPLC-MS法,操作简单,灵敏度高,专属性强,无内源性及其他杂质干扰,适用于大鼠血浆中PPCl浓度的测定及其药动学研究。 展开更多
关键词 广藿香酮衍生物 药动学 hplc-MS法
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