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中缅边境恶性疟原虫Pfcrt基因76位点突变研究 被引量:2
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作者 邓艳 王珊珊 +1 位作者 董莹 王剑 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1137-1140,共4页
目的检测分析中缅边境恶性疟原虫氯喹抗性基因(pfcrt)及其76位点氨基酸的突变情况。方法采用巢式PCR方法扩增含76位点的pfcrt基因,并对扩增产物进行限制性内切酶及测序分析。结果对恶性疟现症病人血样作pfcrt基因的巢式PCR扩增,目的基... 目的检测分析中缅边境恶性疟原虫氯喹抗性基因(pfcrt)及其76位点氨基酸的突变情况。方法采用巢式PCR方法扩增含76位点的pfcrt基因,并对扩增产物进行限制性内切酶及测序分析。结果对恶性疟现症病人血样作pfcrt基因的巢式PCR扩增,目的基因片段(145bp)检出率为74.05%(117/158),对PCR扩增阳性的产物进行RELP分析,检查突变型酶切片段,突变率为95.73%(112/117)。结论恶性疟原虫pfcrt基因可以作为一个分子标记用于监测中缅边境地区恶性疟原虫的氯喹抗性。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 氯喹抗性转运蛋白基因(pfcrt)突变型 抗性
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抗恶性疟SERA噬菌体抗体库的构建及单链抗体的筛选与鉴定(英文)
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作者 徐伟文 李文全 +2 位作者 李明 毕惠祥 Toshihiro Horii 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期58-62,共5页
目的 研制用于疟疾简便、快速诊断试剂盒的试剂。方法 利用噬菌体抗体库技术,构建抗恶性疟原虫丝氨酸重复抗原(SERA)的噬菌体抗体库。经3轮“吸附-洗脱-扩增”的富集反应后,从中筛选抗SERA的阳性克隆株,并进行可溶性诱... 目的 研制用于疟疾简便、快速诊断试剂盒的试剂。方法 利用噬菌体抗体库技术,构建抗恶性疟原虫丝氨酸重复抗原(SERA)的噬菌体抗体库。经3轮“吸附-洗脱-扩增”的富集反应后,从中筛选抗SERA的阳性克隆株,并进行可溶性诱导表达,最后用ELISA和Western blot等进行鉴定。结果 成功地构建了中等库容的噬菌体抗体库,并从中筛选到9株抗SERA的阳性克隆株,表达的单链抗体的相对分子质量大小约为31kDa,能与 SE47'抗原起特异性结合反应。结论 成功地构建了抗SE47'的噬菌体抗体库,从中筛选制备的单链抗体为研制疟疾快速诊断试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 噬菌体抗体库 单链抗体 丝氨酸重复抗原 SERA 恶性疟
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恶性疟原虫子孢子CS抗原融合基因的克隆
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作者 李杰之 马清钧 +2 位作者 曹诚 石成华 张京生 《生物化学杂志》 CSCD 1993年第4期429-433,共5页
利用381-A型DNA合成仪,参照恶性疟原虫子孢子CS抗原决定簇相应氨基酸的核苷酸序列,设计了CS-Ⅰ和CS-Ⅱ两个片段。以噬菌体M13mp18质粒作为载体,将两片段进行磷酸化、退火、连接和克隆,经过原位杂交,序列分析,获得了(NANP)_(10)重复串联... 利用381-A型DNA合成仪,参照恶性疟原虫子孢子CS抗原决定簇相应氨基酸的核苷酸序列,设计了CS-Ⅰ和CS-Ⅱ两个片段。以噬菌体M13mp18质粒作为载体,将两片段进行磷酸化、退火、连接和克隆,经过原位杂交,序列分析,获得了(NANP)_(10)重复串联基因的重组质粒M13mp18-CS。再以酶切,从重组质粒中回收(NANP)_(10)次的片段,将其片段基因与CT-B基因融合,最后将融合基因CT-B-CS插入载体PMC055中,成功地得到含有(NANP)_(10)与CT-B基因融合的重组质粒pMC055-CS。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 子孢子 抗原 生物工程
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应用(Dig)-DNA探针进行恶性疟流行病学调查
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作者 张兆松 王荣芝 陈淑贞 《南京医学院学报》 CSCD 1993年第1期40-41,共2页
重组的恶性疟原虫DNA片段用洋地黄毒苷配基标记后作为探针(pPF_(14)-F-Dig),以斑点杂交试验对海南省恶性疟流行区人群的274份血样进行检测,并同时作厚薄血片镜检。结果显示,274例样本中血片镜检阳性1例,带虫率为0.36%;pPF_(14)-F-Dig ... 重组的恶性疟原虫DNA片段用洋地黄毒苷配基标记后作为探针(pPF_(14)-F-Dig),以斑点杂交试验对海南省恶性疟流行区人群的274份血样进行检测,并同时作厚薄血片镜检。结果显示,274例样本中血片镜检阳性1例,带虫率为0.36%;pPF_(14)-F-Dig 探针检出阳性15例(其中1例为镜检阳性者),阳性率为5.47%;pPF_(14)-F-Dig 与镜检的阳性符合率为1/1,阴性符合率为94.87%。每张硝酸纤维素膜可查96份样本,故该探针具有用于大规模流行病学调查的价值。 展开更多
关键词 DNA探针 斑点杂交试验 疟疾
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