肺癌组织中Akt2、p-Akt蛋白的表达 被引量：7

1

作者 刘红 张茂林 +3 位作者 王静 邢丽华 苗丽君 程哲 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第4期674-677,共4页

目的:观察肺癌组织中Akt2、p-Akt的表达。方法:对原发性非小细胞肺癌组织80例和肺良性病变组织35例行HE染色及Akt2、p-Akt免疫组织化学染色。结果:肺癌组织中Akt2蛋白阳性率为91.3%(73/80),p-Akt蛋白阳性率为78.8%(63/80);肺良性病变组... 目的:观察肺癌组织中Akt2、p-Akt的表达。方法:对原发性非小细胞肺癌组织80例和肺良性病变组织35例行HE染色及Akt2、p-Akt免疫组织化学染色。结果:肺癌组织中Akt2蛋白阳性率为91.3%(73/80),p-Akt蛋白阳性率为78.8%(63/80);肺良性病变组织中Akt2蛋白阳性率为5.7%(2/35),p-Akt未表达。肺癌组织中Akt2、p-Akt蛋白阳性率高于肺良性病变组织(P<0.05)。Akt2、p-Akt蛋白阳性率与患者年龄、性别、组织学类型、TNM分期无关(P>0.05)。Akt2蛋白的表达与肺癌组织淋巴结转移有关(P<0.05);p-Akt蛋白与肺腺癌组织分化程度有关(P<0.05)。结论:Akt2及p-Akt蛋白的表达可能与肺癌的发生有关。 展开更多

关键词 akt2 p-akt 肺肿瘤 非小细胞肺癌

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补肾活血中药对大鼠慢性高眼压模型视网膜神经节细胞PI3K/Akt信号转导通路p-Akt表达的影响 被引量：11

2

作者 汪伟 李翔 +4 位作者 王桃 柯欣怡 刘红佶 贾正品 牟琳 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2015年第9期816-820,共5页

目的观察补肾活血中药对大鼠慢性高眼压(elevated intraocular pressure,EIOP)模型视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGC)PI3K/Akt信号转导通路p-Akt表达的影响。方法 30只SD大鼠随机分成3组:对照组、模型组和给药组,模型组和... 目的观察补肾活血中药对大鼠慢性高眼压(elevated intraocular pressure,EIOP)模型视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGC)PI3K/Akt信号转导通路p-Akt表达的影响。方法 30只SD大鼠随机分成3组:对照组、模型组和给药组,模型组和给药组建立EIOP模型。给药组造模后每天予复方丹参片和杞菊地黄丸的混悬液灌胃,每天1次,连续8周,对照组、模型组每天予生理盐水灌胃。记录造模前、造模后即刻、造模后8周的眼压;光镜下观察各组视网膜厚度和RGC数量,电镜下观察视网膜超微结构,免疫组织化学法检测视网膜内p-Akt的表达。结果造模后8周眼压与造模后即刻相比,给药组有降低趋势,差异有统计学意义(P<0.01)。造模后8周,给药组与模型组RGC数量均低于对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.05);对照组视网膜厚度与给药组相比,差异无统计学意义(P>0.05),而对照组与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.01);给药组RGC数量及视网膜厚度均高于模型组,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。电镜下RGC超微结构显示,模型组损伤明显,给药组较模型组有所改善。视网膜p-Akt表达免疫组织化学结果分析显示,给药组p-Akt阳性染色总面积、平均光密度、积分光密度值与模型组相比,差异均有统计学意义(均为P<0.01),给药组黑度(139.97±11.79)虽高于模型组(137.95±6.13),但差异无统计学意义(P>0.05)。结论补肾活血中药用于SD大鼠慢性EIOP模型,能降低眼压,提高RGC数量及改善超微结构,增加视网膜厚度,上调PI3K/Akt信号转导通路中pAkt的表达。 展开更多

关键词 补肾活血中药 视网膜神经节细胞 PI3K/akt信号通路 p-akt 青光眼 大鼠慢性高眼压模型

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骨痹通消颗粒调控PI3K/AKT/FoxO1信号通路对人骨髓间充质干细胞骨脂分化的影响

3

作者 朱彩玉 李胜 +3 位作者 王壮壮 顾一帆 朱磊 周正新 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2024年第9期2466-2475,共10页

目的探讨骨痹通消颗粒对激素性股骨头坏死(SANFH)的保护作用。方法收集接受髋关节置换术的SANFH、股骨颈骨折(FNF)患者股骨头和骨髓组织进行研究。检测骨组织内磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、叉头框蛋白1(FoxO1)和胆固醇调... 目的探讨骨痹通消颗粒对激素性股骨头坏死(SANFH)的保护作用。方法收集接受髋关节置换术的SANFH、股骨颈骨折(FNF)患者股骨头和骨髓组织进行研究。检测骨组织内磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、叉头框蛋白1(FoxO1)和胆固醇调节原件结合蛋白(SREBP)表达水平。分离、培养人骨髓间充质干细胞(hBMSCs),CCK-8法检测骨痹通消颗粒含药血清对hBMSCs增殖的影响,油红O及茜素红染色观察细胞成脂和成骨分化情况,RT-qPCR、Western blot法分析过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、CCATT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、Runt相关转录因子2(Runx2)、碱性磷酸酶(ALP)mRNA和通路蛋白表达情况。结果Western blot结果表明,SANFH患者股骨头组织中PI3K、AKT和SREBP蛋白表达较正常组明显升高,FoxO1表达则明显降低(P<0.05);不同体积分数骨痹通消颗粒含药血清均能促进hBMSCs增殖,其中以5%组作用48 h时最为明显;与模型组比,5%含药血清作用后可明显减少胞质中的脂滴着色进而增加钙盐沉积处的橙红色矿化结节,同时下调细胞中PPARγ、C/EBPαmRNA和上调Runx2、ALP mRNA表达水平(P<0.05)。此外,含药血清干预后,还可显著提高细胞中FoxO1蛋白表达,降低AKT、p-FoxO1和SREBP等蛋白表达(P<0.05)。结论骨痹通消颗粒干预后hBMSCs成脂分化减少、成骨分化增多,可有效改善糖皮质激素环境下的脂质沉积,其机制可能与调控PI3K/AKT/FoxO1信号通路有关。 展开更多

关键词 激素性股骨头坏死 骨痹通消颗粒 骨脂分化 磷酸化 PI3K/akt/FoxO1信号通路

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紫草素通过PI3K/Akt通路促进人乳腺癌MCF-7细胞自噬 被引量：51

4

作者 陈菊英 刘朝纯 +3 位作者 曾智 黄文东 杨永飞 朱邦豪 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期194-198,共5页

目的研究紫草素(Shikonin)对人乳腺癌MCF-7细胞自噬的影响及其作用机制。方法 CCK-8法检测紫草素处理人乳腺癌MCF-7细胞24、48 h细胞的存活率,Western blot方法检测紫草素处理24 h和48 h时LC3、p62、PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt蛋白水平... 目的研究紫草素(Shikonin)对人乳腺癌MCF-7细胞自噬的影响及其作用机制。方法 CCK-8法检测紫草素处理人乳腺癌MCF-7细胞24、48 h细胞的存活率,Western blot方法检测紫草素处理24 h和48 h时LC3、p62、PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt蛋白水平。结果 1μmol.L-1紫草素处理细胞48 h以及2.5、5μmol.L-1紫草素处理MCF-7细胞24 h和48 h时,MCF-7细胞的活力受到明显抑制,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值增加,p62表达减少,总PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt均减少。结论紫草素促进乳腺癌MCF-7细胞自噬,其作用机制可能与PI3K/Akt通路受到抑制有关。 展开更多

关键词 紫草素 MCF-7细胞 自噬 LC3 P62 PI3K akt p-PI3K p-akt

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淋巴细胞微粒刺激AKT/Foxo1阻滞气道上皮细胞周期的研究 被引量：8

5

作者 焦燕 邱倩 +2 位作者 杨再兴 但小苹 熊玮 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第24期2498-2502,共5页

目的研究淋巴细胞微粒(lymphocyte microparticles,LMPs)作用于气道上皮细胞引起周期阻滞在G1期的机制通路。方法将人类正常气道上皮细胞培养到对数生长期时,20μg/ml的LMPs按照不同的时间0、4、8、16、20、24 h刺激气道上皮细胞,用RT-... 目的研究淋巴细胞微粒(lymphocyte microparticles,LMPs)作用于气道上皮细胞引起周期阻滞在G1期的机制通路。方法将人类正常气道上皮细胞培养到对数生长期时,20μg/ml的LMPs按照不同的时间0、4、8、16、20、24 h刺激气道上皮细胞,用RT-PCR方法检测P21、P27在mRNA水平的表达情况。20μg/ml的LMPs按照不同的时间0、4、8、16、24 h刺激气道上皮细胞,用Western blot方法检测P21、P27、Foxo1、p-Foxo1、AKT、p-AKT的蛋白表达情况。用免疫细胞化学技术检测Foxo1的核定位情况。结果与0 h对比,20μg/ml的LMPs作用于气道上皮细胞能使P21、P27的mRNA、蛋白水平显著升高(P<0.01),Foxo1蛋白水平无明显变化(P>0.05),p-Foxo1的蛋白水平表达减弱(P<0.01),AKT蛋白水平无明显变化(P>0.05),p-AKT蛋白水平表达减弱(P<0.01)。结论 LMPs作用于气道上皮细胞上调P21、P27蛋白的表达引起周期阻滞G1期,可能是通过AKT/Foxo1信号通路调节。 展开更多

关键词 细胞周期阻滞 淋巴细胞微粒 FOXO1 akt P21 P27 p-Foxo1 p-akt

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有氧运动对肥胖大鼠海马组织tau蛋白磷酸化水平及PI3K/Akt信号通路的影响 被引量：7

6

作者 房国梁 田野 +6 位作者 赵杰修 李良 杨星雅 李鹏飞 于涛 何子红 Wen Yuemeng 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期375-382,共8页

目的:探讨有氧运动对肥胖大鼠海马组织tau蛋白磷酸化水平及其调控通路PI3K/Akt的影响,为揭示运动改善肥胖导致的神经系统功能紊乱提供一定的理论依据。方法:3周龄雄性SD大鼠随机分为高脂饮食组和正常饮食组,分别以高脂饲料和普通饲料饲... 目的:探讨有氧运动对肥胖大鼠海马组织tau蛋白磷酸化水平及其调控通路PI3K/Akt的影响,为揭示运动改善肥胖导致的神经系统功能紊乱提供一定的理论依据。方法:3周龄雄性SD大鼠随机分为高脂饮食组和正常饮食组,分别以高脂饲料和普通饲料饲养12周。随后高脂饮食组大鼠随机分为高脂安静组(HF-Sed组)和高脂运动组(HF-Ex组)。正常饮食组大鼠随机分为正常安静组(ND-Sed组)和正常运动组(ND-Ex组)。HF-Ex组和ND-Ex组大鼠进行为期8周的跑台训练。训练结束后48小时,分离两侧海马组织。通过Western blot检测各组大鼠海马组织中tau、GSK3β、PI3K和Akt蛋白含量及其磷酸化水平。结果:经过12周的饲养后,高脂饮食组大鼠中有55%符合肥胖大鼠建模成功条件。经过8周跑台训练后,HF-Sed组tau蛋白的磷酸化水平显著高于ND-Sed组;而HF-Ex组tau蛋白的磷酸化水平却显著低于HF-Sed组。另外,HF-Sed组GSK3βSer9位点的磷酸化水平显著低于ND-Sed组,Tyr216位点的磷酸化水平显著高于ND-Sed组,说明HF-Sed组GSK3β激酶活性高于ND-Sed组;而经过8周跑台训练,HF-Ex组GSK3βSer9位点的磷酸化水平显著高于HF-Sed组,Tyr216位点的磷酸化水平显著低于HF-Sed组,说明HF-Ex组GSK3β激酶活性受到抑制。此外HF-Sed组PI3K p110、p85亚基蛋白含量和AktThr308、Ser473位点的磷酸化水平显著低于ND-Sed组,说明HF-Sed组PI3K/Akt通路活性受到抑制;而HF-Ex组PI3K p110、p85亚基蛋白含量和Akt Thr308、Ser473位点的磷酸化水平显著高于HF-Sed组,说明HF-Ex组该通路活性增强。结论:肥胖能够诱导大鼠海马组织tau蛋白磷酸化水平上升,而有氧运动通过提高肥胖大鼠海马组织PI3K/Akt信号通路活性,抑制GSK3β的激酶活性,从而降低了tau蛋白的磷酸化水平,对于延缓脑内神经纤维缠结的形成,防治肥胖导致的神经系统退行性疾病有积极作用。 展开更多

关键词 有氧运动 肥胖 海马 TAU GSK3Β PI3K akt 磷酸化

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槲皮素通过调控PI3K/Akt信号通路对血管内皮祖细胞发挥保护作用 被引量：46

7

作者 孙军 温昌明 +1 位作者 张保朝 暴向阳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期85-90,共6页

目的探讨槲皮素(quercetin,Que)对氧化应激情况下血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的保护作用及其作用机制。方法分离并诱导分化人脐血EPCs,随机分为对照组;过氧化氢(H_2O_2)组:加入500μmol·L^(-1)的H_2O_2,建... 目的探讨槲皮素(quercetin,Que)对氧化应激情况下血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的保护作用及其作用机制。方法分离并诱导分化人脐血EPCs,随机分为对照组;过氧化氢(H_2O_2)组:加入500μmol·L^(-1)的H_2O_2,建立氧化应激损伤EPCs模型;Que干预组:先分别加入浓度为60、90μmol·L^(-1)的Que预处理30 min后,再加500μmol·L^(-1) H_2O_2共同培养,培养12、24、48 h后,WST-1法观察EPCs增殖情况;Western blot检测Akt、磷酸化Akt的表达水平;实时荧光RT-PCR法检测PI3K、Akt3 mRNA的表达水平。结果与空白对照组对比,经过H_2O_2处理的EPCs增殖能力明显降低,且EPCs的Akt蛋白表达明显下降,PI3K、AKT3 mRNA明显下降(P<0.01,P<0.05)。加入60、90μmol·L^(-1) Que处理12、24、48 h后,损伤的EPCs细胞增殖能力明显增加,与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。同时明显升高EPCs磷酸化Akt的蛋白表达(P<0.05),以及PI3K、AKT3 mRNA表达(P<0.01)。结论槲皮素对H_2O_2诱导血管EPCs氧化应激损伤起到修复作用,其作用机制可能是通过激活PI3K/Akt信号通路,减少氧化应激对脑血管病灶的影响,促进脑血管EPCs增殖和分化。 展开更多

关键词 槲皮素 内皮祖细胞 氧化应激 脑缺血 磷脂酰肌醇-3激酶 磷酸化akt

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抗阻运动对大鼠大脑皮质和海马组织PI3K/Akt信号通路的影响 被引量：4

8

作者 房国梁 田野 +6 位作者 赵杰修 何子红 李鹏飞 于涛 李良 温悦萌 杨星雅 《中国运动医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第10期901-907,912,共8页

目的:探讨抗阻运动对大鼠大脑皮质和海马组织PI3K/Akt信号通路及下游底物的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为安静对照组(SG组)和抗阻运动组(RG组)。抗阻运动组大鼠进行为期8周的爬梯训练。最后一次训练结束后48小时,分离大脑皮质和海马组... 目的:探讨抗阻运动对大鼠大脑皮质和海马组织PI3K/Akt信号通路及下游底物的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为安静对照组(SG组)和抗阻运动组(RG组)。抗阻运动组大鼠进行为期8周的爬梯训练。最后一次训练结束后48小时,分离大脑皮质和海马组织。通过荧光定量PCR和Western blot检测各组大鼠大脑皮质和海马组织中PI3K、Akt、GSK3β以及tau蛋白mRNA和蛋白含量及其磷酸化水平。结果:经过8周抗阻运动,抗阻运动组大鼠大脑皮质和海马组织PI3K p110和p85亚基mRNA和蛋白含量显著高于安静对照组;Akt和GSK3βmRNA和总蛋白含量与安静对照组并无显著性差异,但Akt Thr308和Ser473以及GSK3βSer9位点的磷酸化水平显著高于安静对照组,GSK3βTyr216位点的磷酸化水平显著低于安静对照组;tau蛋白mRNA和总蛋白水平与安静对照组也无显著性差异,而其Ser202、Thr231和Ser396位点的磷酸化水平却显著低于安静对照组。结论:抗阻运动能够提高大鼠大脑皮质和海马组织PI3K mRNA和蛋白含量,增强其磷脂酰肌醇激酶活性;提高Akt Thr308和Ser473位点的磷酸化水平,激活Akt;活化的Akt磷酸化GSK3βSer9位点,抑制GSK3β的活性;最终导致tau蛋白多个位点的磷酸化水平降低。因此,抗阻运动能够提高大鼠大脑皮质和海马组织PI3K/Akt信号通路活性,并对下游底物产生积极影响。 展开更多

关键词 抗阻运动 PI3K akt GSK3Β TAU 磷酸化

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Apelin通过Akt/eNOS机制促进肺血管内皮细胞一氧化氮释放 被引量：4

9

作者 吴德华 姜桢 +1 位作者 缪长虹 陈瑞珍 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期57-60,共4页

目的探讨Apelin对肺血管内皮细胞释放一氧化氮(NO)的影响及其机制。方法培养新生鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)。(1)以1×105个/孔密度接种至24孔板,80%融合后,无血清培养24 h。分为2组:Apelin组,加入Apelin至终浓度为10-8mol/L;对照... 目的探讨Apelin对肺血管内皮细胞释放一氧化氮(NO)的影响及其机制。方法培养新生鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)。(1)以1×105个/孔密度接种至24孔板,80%融合后,无血清培养24 h。分为2组:Apelin组,加入Apelin至终浓度为10-8mol/L;对照组,加入等量无血清DMEM培养液。每组设立4个复孔。继续培养,并分别在0 min、2 min、5 min、15 min、30 min时间点取培养液测NO浓度。(2)以5×105个/孔密度接种至6孔板,80%融合后,无血清培养24 h。分为3组:Apelin组,加入Apelin至终浓度为10-8mol/L。Apelin+Akt抑制剂(Akt inhibitor)组,加入Apelin前用5μmol/L浓度的Akt抑制剂预处理30 min。对照组加入等量DMEM培液。每组设立3复孔。继续培养5 min后立即提取总蛋白,用于Western blot检测磷酸化Akt和磷酸化内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达。结果与0 min时间点比较,培养液中NO浓度分别在2 min、5 min、15 min时间点增加(P<0.01或P<0.05),其中在5 min时间点达到高峰。与对照组比较,Apelin组磷酸化Akt和磷酸化eNOS表达增加(P<0.01),与Apelin组比较,Apelin+Akt inhibitor组磷酸化eNOS表达降低(P<0.01)。结论Apelin促进PMVECs释放NO,Akt/eNOS磷酸化参与Apelin促进NO释放机制。 展开更多

关键词 APELIN 内皮 肺 一氧化氮 内皮源性一氧化氮合酶 akt 磷酸化 akt抑制剂

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慢性应激对大鼠海马Akt/FKHRL1信号通路活性的影响 被引量：2

10

作者 朱婉儿 胡长春 +3 位作者 谢文婷 吴丽霞 陈芝芸 梅垣宏行 《心理学报》 CSSCI CSCD 北大核心 2007年第4期656-661,共6页

探讨慢性应激对大鼠海马Akt/FKHRL1信号通路活性的影响,及其应激源特异性。将24只雄性SD大鼠随机分为心理应激组、束缚应激组和正常对照组(n=8)。用Western-blotting方法测定28天应激后海马Akt、FKHRL1蛋白含量及其磷酸化水平。结果表明... 探讨慢性应激对大鼠海马Akt/FKHRL1信号通路活性的影响,及其应激源特异性。将24只雄性SD大鼠随机分为心理应激组、束缚应激组和正常对照组(n=8)。用Western-blotting方法测定28天应激后海马Akt、FKHRL1蛋白含量及其磷酸化水平。结果表明,应激后三组大鼠海马磷酸化Akt、FKHRL1含量差异有统计学意义(p<0.01;p<0.001),束缚应激组低于正常对照组(p<0.01)。提示慢性应激能导致海马磷酸化Akt、FKHRL1表达水平降低,但其影响程度与应激源特异性有关。 展开更多

关键词 应激 海马 akt FKHRL1 磷酸化.

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环孢素A对肝细胞中磷酸化AKT蛋白表达的影响 被引量：2

11

作者 杨柳 刘晓军 +3 位作者 王宏宇 曹永 马永华 徐春 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第6期18-22,共5页

目的观察环孢素A(cyclosporin A,Cs A)对肝细胞磷酸化AKT(phosphorylated AKT,P-AKT)表达的影响,探讨Cs A导致胰岛素抵抗的机制。方法本研究分两部分:(1)体外研究:用不同浓度Cs A(0.1μmol/L、1μmol/L、5μmol/L)作用于人肝细胞(HL770... 目的观察环孢素A(cyclosporin A,Cs A)对肝细胞磷酸化AKT(phosphorylated AKT,P-AKT)表达的影响,探讨Cs A导致胰岛素抵抗的机制。方法本研究分两部分:(1)体外研究:用不同浓度Cs A(0.1μmol/L、1μmol/L、5μmol/L)作用于人肝细胞(HL7702细胞)48 h,用Western blot方法检测P-AKT蛋白的表达水平。(2)体内研究(动物实验):建立环孢素A诱发的大鼠糖尿病模型,用免疫组化方法分析P-AKT蛋白在糖尿病大鼠肝细胞中的表达水平。结果 (1)各浓度(0.1μmol/L、1μmol/L、5μmol/L)Cs A组与对照组相比,HL7702肝细胞中的PAKT蛋白的表达呈现逐渐下降趋势,差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01、P<0.01)。(2)环孢素A引起大鼠血糖升高,在服用环孢素A的第5个月,大鼠平均血糖为9.28 mmol/L,说明环孢素A诱导的糖尿病大鼠模型建立成功,糖尿病大鼠肝细胞中P-AKT蛋白的表达明显低于服药前和正常对照组(P<0.05)。结论服用治疗剂量的环孢素A导致大鼠血糖升高,环孢素A抑制大鼠肝细胞中P-AKT的表达,环孢素A抑制人肝细胞HL7702中P-AKT的表达,提示影响PI3K/AKT信号通路可能是环孢素A导致胰岛素抵抗的机制之一。 展开更多

关键词 环孢素A 胰岛素抵抗 移植后糖尿病 akt p-akt

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Akt通过磷酸化p27诱导胆管癌细胞生长 被引量：2

12

作者 王锋 胡启立 +7 位作者 李健 赵严 刘华 汤茂春 夏小俊 孟宏波 宋振顺 徐晓蓉 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期268-273,共6页

目的探讨Akt和p27蛋白控制胆管癌细胞生长的分子机制。方法利用突变载体、突变失活载体以及位点突变基因的转染技术,流式细胞仪检测PI3K、转染各类载体对胆管癌细胞周期的影响,免疫印迹、免疫荧光检测PI3K抑制剂、转染各类载体对P27蛋... 目的探讨Akt和p27蛋白控制胆管癌细胞生长的分子机制。方法利用突变载体、突变失活载体以及位点突变基因的转染技术,流式细胞仪检测PI3K、转染各类载体对胆管癌细胞周期的影响,免疫印迹、免疫荧光检测PI3K抑制剂、转染各类载体对P27蛋白表达及分布的影响。结果 PI3K抑制剂LY294002引起胆管癌细胞株G1期细胞周期阻滞,并引起p27蛋白入核;Akt能通过诱导p27蛋白出细胞核而解除LY294002的G1期细胞周期阻滞;Akt通过磷酸化野生型p27蛋白第157位苏氨酸逆转细胞周期阻滞。结论 Akt通过磷酸化p27第157位苏氨酸来诱导p27细胞内重定位于细胞质,促进胆管癌细胞的生长。 展开更多

关键词 胆管癌 P27 akt 磷酸化 细胞周期

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食管鳞癌组织中磷酸化表皮生长因子受体和Akt蛋白的表达 被引量：10

13

作者 卢红 王建军 周芳 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2015年第1期5-8,共4页

目的:探讨磷酸化表皮生长因子受体(p-EGFR)及其下游信号磷酸化蛋白激酶Akt(p-Akt)在食管鳞癌组织中的表达及其相关性。方法:采用免疫组化法检测50例食管鳞癌组织和50例相应癌旁正常食管黏膜组织中p-EGFR和p-Akt蛋白的表达,并分析二者与... 目的:探讨磷酸化表皮生长因子受体(p-EGFR)及其下游信号磷酸化蛋白激酶Akt(p-Akt)在食管鳞癌组织中的表达及其相关性。方法:采用免疫组化法检测50例食管鳞癌组织和50例相应癌旁正常食管黏膜组织中p-EGFR和p-Akt蛋白的表达,并分析二者与食管鳞癌患者临床病理特征的关系以及二者在食管鳞癌组织中表达的相关性。结果:食管癌组织中p-EGFR和p-Akt蛋白表达水平均高于癌旁正常食管黏膜组织(χ2配对=9.818和33.390,P<0.05)。p-EGFR和p-Akt蛋白的表达与食管鳞癌的分化程度(χ2=18.083和11.049,P<0.05)、淋巴结转移(χ2=7.284和5.817,P<0.05)有关,与患者的性别、肿瘤直径及TNM分期无关(P>0.05)。此外,p-EGFR和p-Akt蛋白在食管鳞癌中的表达呈正关联(rP=0.501,P<0.001)。结论:p-EGFR和p-Akt蛋白的高表达可能与食管鳞癌的恶性程度密切相关。 展开更多

关键词 食管鳞癌 表皮生长因子受体 akt 磷酸化

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PI3K/Akt通路在缺氧活化钙敏感受体介导的A549细胞转移中的作用 被引量：4

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作者 李光伟 王珺 +5 位作者 肖薇 金莉 李波 赵宇 张宁宁 汪娜 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期776-781,共6页

目的探讨PI3K/Akt信号通路在缺氧活化钙敏感受体(calcium sensing receptor,Ca SR)介导的A549及A549/DDP细胞转移中的作用。方法将处于对数生长期的A549及A549/DDP细胞随机分为对照组、缺氧组、缺氧+Gd Cl_3(Ca SR激动剂)组、缺氧+NPS21... 目的探讨PI3K/Akt信号通路在缺氧活化钙敏感受体(calcium sensing receptor,Ca SR)介导的A549及A549/DDP细胞转移中的作用。方法将处于对数生长期的A549及A549/DDP细胞随机分为对照组、缺氧组、缺氧+Gd Cl_3(Ca SR激动剂)组、缺氧+NPS2143(Ca SR抑制剂)组、缺氧+LY294002(PI3K通路抑制剂)+Gd Cl_3组。应用Western blot分析不同处理情况下,Ca SR、MMP-2及p-Akt蛋白在A549、A549/DDP细胞的表达水平;采用细胞划痕及Transwell小室方法,检测不同处理因素对细胞迁移和侵袭能力的影响;应用ELISA法,分析不同处理因素对A549及A549/DDP细胞分泌MMP-2蛋白的影响。结果与对照组比较,缺氧能够增强A549及A549/DDP细胞Ca SR的表达,增强细胞迁移能力,提高细胞及培养液中MMP-2蛋白表达水平、促进Akt蛋白的磷酸化,NPS2143能减弱缺氧的作用,Gd Cl_3放大缺氧的作用,而LY294002抑制缺氧和Gd Cl_3的上述作用。结论缺氧活化Ca SR促进A549及A549/DDP细胞转移,其机制可能涉及PI3K/Akt通路。 展开更多

关键词 钙敏感受体 A549细胞 缺氧 转移 磷脂酰肌醇-3激酶 磷酸化akt

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Ser473-Akt磷酸化介导阿托伐他汀保护大鼠脑缺血再灌注损伤 被引量：2

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作者 陶希 卢伟 +5 位作者 胡治平 宋涛 邓景贵 蔡华安 王淑玲 刘佳 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2016年第6期655-659,共5页

目的探讨Akt之Ser473位点(Ser473-Akt)磷酸化在阿托伐他汀保护大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用。方法 40只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分成正常组(n=10)、假手术组(n=10)、缺血再灌注(I/R)组(n=10)和干预组(n=10)。采用线栓法制作大鼠脑缺... 目的探讨Akt之Ser473位点(Ser473-Akt)磷酸化在阿托伐他汀保护大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用。方法 40只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分成正常组(n=10)、假手术组(n=10)、缺血再灌注(I/R)组(n=10)和干预组(n=10)。采用线栓法制作大鼠脑缺血2 h再灌注72 h模型。正常组和假手术组不做任何处理,I/R组仅生理盐水灌胃,干预组在再灌注后大鼠苏醒时、24 h、48 h分别予生理盐水配制的阿托伐他汀10 mg/kg灌胃。72 h时处死所有大鼠,留取脑标本分别行HE染色及TUNEL染色,Western blotting检测脑前额叶皮质Akt及其Ser473-Akt表达。结果缺血再灌注72 h后,干预组神经细胞形态学变化较I/R组减轻;干预组凋亡阳性细胞数显著少于I/R组(t=-6.014,P<0.001);I/R组前额叶皮质Ser473-Akt较正常组和假手术组显著增加(t>20.327,P<0.001),而干预组明显高于I/R组(t=3.649,P=0.007)。结论 Ser473-Akt磷酸化在阿托伐他汀的神经细胞保护中起重要作用,通过抑制凋亡减轻大鼠脑缺血再灌注损伤。 展开更多

关键词 脑缺血/再灌注 Ser473-akt 磷酸化 阿托伐他汀 细胞凋亡 大鼠

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抑制Sema 4D表达介导的成骨前体细胞AKT磷酸化水平上调在乳腺癌骨转移中的作用 被引量：2

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作者 王振 赵永强 +3 位作者 刘继军 金毅 陈骁 郑稼 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期23-28,共6页

目的探讨抑制Sema 4D介导的成骨前体细胞AKT磷酸化水平上调在乳腺癌骨转移中的作用。方法通过siRNA技术构建稳定的Sema 4D低表达人乳腺癌MCF-7细胞株,采用实时荧光定量PCR检测细胞Sema 4D mRNA表达,MTT法检测各组细胞增殖能力,Transwel... 目的探讨抑制Sema 4D介导的成骨前体细胞AKT磷酸化水平上调在乳腺癌骨转移中的作用。方法通过siRNA技术构建稳定的Sema 4D低表达人乳腺癌MCF-7细胞株,采用实时荧光定量PCR检测细胞Sema 4D mRNA表达,MTT法检测各组细胞增殖能力,Transwell法检测各组细胞侵袭能力;采用Transwell小室建立成骨细胞和乳腺癌细胞的共培养体系,茜素红染色实验检测骨矿化能力,Western blot检测AKT、p-AKT蛋白表达。结果 MCF-7细胞Sema 4D mRNA相对表达量显著高于Hs578Bst细胞(P<0.05)。Sema 4D siRNA转染后,Sema 4D siRNA组Sema 4D mRNA相对表达量显著低于Control组和NC组(均P<0.05),Control组和NC组Sema 4D mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Sema 4D siRNA组细胞增殖率显著低于NC组和Control组(均P<0.05),Sema 4D siRNA组细胞侵袭率亦显著低于NC组和Control组(均P<0.05)。MCF-7+OM组和Sema 4D siRNA+OM组骨结节面积显著低于Control+OM组(均P<0.05),Sema 4D siRNA+OM组骨结节面积显著高于MCF-7+OM组(均P<0.05)。Control+OM组、MCF-7+OM组、Sema 4D siRNA+OM组AKT蛋白表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05);MCF-7+OM组和Sema 4D siRNA+OM组p-AKT蛋白表达水平显著低于Control+OM组(均P<0.05),Sema4D siRNA+OM组p-AKT蛋白表达水平显著高于MCF-7+OM组(P<0.05)。结论人乳腺癌细胞系MCF-7 Sema4D表达显著上调,并与细胞增殖、侵袭等生物学行为有关;下调Sema 4D表达,能够提高AKT磷酸化水平,减弱对成骨细胞分化的抑制作用。 展开更多

关键词 乳腺癌 骨转移 信号素4D 成骨分化 akt磷酸化

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大运动量和减量训练对大鼠骨骼肌Akt及其下游信号磷酸化水平的影响 被引量：4

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作者 马铁 郑媛 曾凡星 《沈阳体育学院学报》 CSSCI 北大核心 2013年第6期77-81,共5页

目的:研究与骨骼肌蛋白合成相关的信号Akt及其下游信号GSK3β、mTOR磷酸化水平在大运动量和减量训练过程中的变化特点。方法:SD雄性大鼠72只,随机分为12组,安静对照组6组(C1-C6),运动组6组(E1-E6),每组6只。建立3周大运动量和2减量训练... 目的:研究与骨骼肌蛋白合成相关的信号Akt及其下游信号GSK3β、mTOR磷酸化水平在大运动量和减量训练过程中的变化特点。方法:SD雄性大鼠72只,随机分为12组,安静对照组6组(C1-C6),运动组6组(E1-E6),每组6只。建立3周大运动量和2减量训练跑台运动模型,在训练期间定期随机选取对照组和运动组,测试大鼠体重、腓肠肌湿重;采用脲酶UV法测试血尿素(BUN);采用Western Blot法测试骨骼肌Akt(Ser 473)、mTOR(Ser 2448)和GSK3β(Ser 9)磷酸化水平。结果:1)大运动量训练期间,与同期对照组相比,E1组体重显著降低、BUN显著升高(P<0.01);E2组体重显著降低(P<0.05),mTOR磷酸化水平显著降低(P<0.01);E3组体重显著降低、腓肠肌湿重显著降低,BUN显著升高(P<0.05),Akt磷酸化水平显著降低(P<0.05),mTOR磷酸化水平显著降低(P<0.01)。2)减量训练期间,与同期对照组相比,E4组腓肠肌湿重显著降低(P<0.05),BUN显著升高(P<0.01);E5组腓肠肌湿重显著降低(P<0.05),BUN显著升高(P<0.01),mTOR磷酸化水平显著升高(P<0.05);E6组各指标无显著差异。结论:大运动量和减量训练影响骨骼肌蛋白的合成能力,主要由Akt/mTOR信号通路调节。 展开更多

关键词 大运动量和减量训练 akt磷酸化水平 骨骼肌蛋白合成

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PI3K/Akt信号通路与卵巢癌耐药关系的研究 被引量：5

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作者 齐亚飞 吕庆杰 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期657-660,663,共5页

目的研究磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和磷酸化Ak(tp-Akt)蛋白在卵巢上皮癌中的表达情况及其与卵巢癌化疗原发耐药的关系。方法采用免疫组织化学方法检测PI3K和p-Akt蛋白在40例原发性上皮性卵巢癌组织中的表达情况;应用MTT比色分析法检测卵巢... 目的研究磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和磷酸化Ak(tp-Akt)蛋白在卵巢上皮癌中的表达情况及其与卵巢癌化疗原发耐药的关系。方法采用免疫组织化学方法检测PI3K和p-Akt蛋白在40例原发性上皮性卵巢癌组织中的表达情况;应用MTT比色分析法检测卵巢癌细胞对紫杉醇(PTX)、表阿霉素(EADM)、顺铂(CDDP)和卡铂(CBP)4种临床常用化疗药物的敏感性。结果65例卵巢癌标本进行体外药敏试验,25例失败,可评价标本为40例。卵巢癌组织中PI3K蛋白的阳性率为60%(24/40),p-Akt蛋白的阳性率为65%(26/40),二者呈正相关(r=0.578,P<0.01)。PI3K蛋白表达阳性组和阴性组相比,化疗药物的平均抑制率均下降,耐药率均升高,其中CDDP的平均抑制率差异显著(z=-3.567,P<0.01)。p-Akt蛋白表达阳性组和阴性组相比,化疗药物的平均抑制率均下降,耐药率均升高,其中CDDP、CBP两种药物的平均抑制率差异均显著(z=-2.201和z=-2.298;P<0.05和P<0.05)。结论在卵巢上皮癌组织中,铂类药物的原发性耐药可能与PI3K/Akt信号通路异常活化有关。 展开更多

关键词 磷脂酰肌醇3激酶 磷酸化akt 卵巢癌 化疗耐药

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PTEN及其突变体对胃癌细胞AKT磷酸化的影响 被引量：2

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作者 钟海兰 王桂良 文剑波 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第14期2259-2262,共4页

目的研究第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensinhomolog deleted on chromosome 10,PTEN)及其磷酸酶区域突变后对胃癌细胞AKT磷酸化的影响。方法分别转染野生型PTEN(wild-type PTEN,wt PTEN)质粒、脂质磷... 目的研究第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensinhomolog deleted on chromosome 10,PTEN)及其磷酸酶区域突变后对胃癌细胞AKT磷酸化的影响。方法分别转染野生型PTEN(wild-type PTEN,wt PTEN)质粒、脂质磷酸酶和蛋白磷酸酶活性均突变的PTEN-C124S质粒、仅脂质磷酸酶活性突变的PTEN-G129E质粒至AGS细胞和BGC-823细胞。血清饥饿过夜后予各组细胞加入胰岛素或者重组人表皮生长因子(recombinant human epidermal growth factor,rh EGF)刺激,最后Western blot法检测AKT磷酸化水平。结果胰岛素和rh EGF均能刺激细胞引起AKT磷酸化,过表达PTEN基因能抑制胰岛素或rh EGF刺激引起的AKT磷酸化(P<0.05),转入功能性突变体PTEN-C124S或PTEN-G129E对AKT磷酸化无抑制作用(P>0.05)。结论 PTEN在胃癌细胞中能抑制胰岛素或rh EGF刺激引起的AKT磷酸化,其磷酸酶结构域N端第124或129位氨基酸发生点突变后无抑制作用。 展开更多

关键词 胃肿瘤 PTEN akt磷酸化 胰岛素 RHEGF

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非小细胞肺癌中磷酸化Akt蛋白表达研究 被引量：1

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作者 周足力 杨帆 +3 位作者 姜冠潮 黄宇清 付静 王俊 《中国肺癌杂志》 CAS 2007年第5期376-380,共5页

背景与目的表皮生长因子受体(EGFR)信号传导通路下游分子Akt的激活在肺癌进展的过程中有重要作用,但磷酸化Akt蛋白的表达是否与EGFR表达存在相关性以及是否能提示患者的预后目前尚无定论。本研究旨在评价国人非小细胞肺癌组织中磷酸化Ak... 背景与目的表皮生长因子受体(EGFR)信号传导通路下游分子Akt的激活在肺癌进展的过程中有重要作用,但磷酸化Akt蛋白的表达是否与EGFR表达存在相关性以及是否能提示患者的预后目前尚无定论。本研究旨在评价国人非小细胞肺癌组织中磷酸化Akt蛋白表达的意义。方法应用组织微阵列和免疫组织化学技术检测167例NSCLC手术标本中磷酸化Akt蛋白的表达。结果磷酸化Akt蛋白在NSCLC中的阳性表达率为52.1%(87/167),阳性表达率与性别、发病年龄、吸烟情况、病理类型、分化程度、病理分期及预后之间的相关性无统计学显著意义(P>0.05),并且磷酸化Akt与表皮生长因子受体蛋白表达之间的相关性亦无统计学意义(P=0.122)。结论国人非小细胞肺癌组织中磷酸化Akt阳性表达与患者临床病理特征无明显相关性,并且磷酸化Akt蛋白对患者预后无提示意义。 展开更多

关键词 磷酸化akt 表皮生长因子受体 非小细胞肺癌 预后

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