NHE1抑制剂EIPA在肝癌细胞中的作用及机制

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作者 金海 刘倩 +2 位作者 李婧 赵思宇 朱加兴 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第3期427-432,共6页

目的:研究Na^(+)/H^(+)交换体1(Na^(+)/H^(+)exchanger 1, NHE1)抑制剂乙基异丙基阿米洛利(ethylisopropylamiloride, EIPA)对肝细胞癌细胞增殖、迁移、侵袭、细胞周期和凋亡的影响,初步探讨其作用机制。方法:体外培养人肝癌Huh7细胞,... 目的:研究Na^(+)/H^(+)交换体1(Na^(+)/H^(+)exchanger 1, NHE1)抑制剂乙基异丙基阿米洛利(ethylisopropylamiloride, EIPA)对肝细胞癌细胞增殖、迁移、侵袭、细胞周期和凋亡的影响,初步探讨其作用机制。方法:体外培养人肝癌Huh7细胞,用不同浓度的EIPA作用于细胞。RT-qPCR及Western blot法检测Huh7细胞NHE1的mRNA及蛋白表达;kFluor488-EdU法检测Huh7细胞增殖能力;Transwell法检测Huh7细胞迁移和侵袭能力;流式细胞术检测Huh7细胞周期和凋亡的变化;PTI高速离子成像系统检测Huh7细胞内pH的改变。结果:EIPA显著抑制NHE1的mRNA及蛋白表达(P<0.01);显著抑制Huh7细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.05或P<0.01),促进Huh7细胞凋亡(P<0.01),使细胞发生明显的S期阻滞(P<0.01);显著降低Huh7细胞内pH(P<0.01)。结论:NHE1抑制剂EIPA通过抑制NHE1表达及功能调控细胞内pH,进而影响肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭、细胞周期及凋亡。NHE1可以作为肝癌治疗的潜在靶点。 展开更多

关键词 na^(+)/h^(+)交换体1 乙基异丙基阿米洛利 肝细胞癌 肿瘤酸性微环境

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Na^+/H^+交换泵1激活与心肌肥大 被引量：1

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作者 陈长勋 金若敏 沈云辉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期121-124,共4页

钠氢交换泵 1介导缺血及再灌流引起的心肌损伤。近期的研究提示钠氢交换泵 1也介导长期不良刺激引起的心肌肥大和心衰。钠氢交换泵 1可能是引起心肌肥大的多种因素信息传导下游区的共同媒介 ,比如血管紧张素Ⅱ ,肾上腺α1、β1受体兴奋... 钠氢交换泵 1介导缺血及再灌流引起的心肌损伤。近期的研究提示钠氢交换泵 1也介导长期不良刺激引起的心肌肥大和心衰。钠氢交换泵 1可能是引起心肌肥大的多种因素信息传导下游区的共同媒介 ,比如血管紧张素Ⅱ ,肾上腺α1、β1受体兴奋等。抑制钠氢交换泵 1可能会成为防治心衰的一种新方法。 展开更多

关键词 钠氢交换泵1 心肌肥大 血管紧张素Ⅱ 肾上腺α1受体 肾上腺β1受体.

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取代苯甲酰胍与曲美他嗪偶联物的合成及对Na^+/H^+交换器-1的抑制活性 被引量：1

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作者 杜萍 张迪 +3 位作者 张国敏 任淑娟 龚国清 徐云根 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期22-28,共7页

为了寻找对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用的药物,并探索不同基团修饰对苯甲酰胍与曲美他嗪偶联物活性的影响,将苯甲酰胍的4位通过亚甲基与曲美他嗪进行偶联,并在苯环的3位引入不同的取代苯甲酰胺基,设计合成了12个未见文献报道的目标... 为了寻找对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用的药物,并探索不同基团修饰对苯甲酰胍与曲美他嗪偶联物活性的影响,将苯甲酰胍的4位通过亚甲基与曲美他嗪进行偶联,并在苯环的3位引入不同的取代苯甲酰胺基,设计合成了12个未见文献报道的目标化合物。其结构经过IR,1H NMR和MS确证。体外血小板肿胀模型(PSA)试验结果表明,化合物9b和9c抑制Na+/H+交换器-1(NHE1)的IC50分别为2.55和2.80 nmol/L,其活性是卡立泊来德(IC50=12.1 nmol/L)的4.7和4.3倍。 展开更多

关键词 苯甲酰胍衍生物 缺血再灌注损伤 合成 NhE1抑制活性

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常压氧对缺血再灌注大鼠大脑皮层1型Na^+/H^+交换蛋白的影响 被引量：1

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作者 李萌萌 王鹏 +5 位作者 张振香 张留超 何雄文 牛美兰 焦佳伟 李玲 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期435-441,共7页

目的:研究常压氧(NBO)对缺血再灌注大鼠脑组织1型Na^+/H^+交换蛋白(NHE1)水平的影响。方法:采用线栓法构建大脑中动脉缺血(MCAO)大鼠模型,术后2 h进行神经功能评分。MCAO模型构建成功者进行再灌注,随机分为MCAO组和NBO组,NBO组于再灌注... 目的:研究常压氧(NBO)对缺血再灌注大鼠脑组织1型Na^+/H^+交换蛋白(NHE1)水平的影响。方法:采用线栓法构建大脑中动脉缺血(MCAO)大鼠模型,术后2 h进行神经功能评分。MCAO模型构建成功者进行再灌注,随机分为MCAO组和NBO组,NBO组于再灌注后给予常压氧治疗。各组大鼠分别在NBO治疗后0、2、4、6、12、24 h处死,取脑皮层组织进行HE染色后观察脑组织形态结构的改变,并采用免疫荧光法及Western Blot法检测脑组织NHE1蛋白和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的蛋白表达水平。结果:与假手术组相比,模型组神经功能评分显著增高(P<0.05);HE染色结果显示MCAO组和NBO组大鼠缺血2 h时大脑皮层组织均无明显病理结构改变,随着再灌注时间的延长,MCAO组大鼠大脑皮层组织病理改变逐渐增加,NBO组大鼠的脑组织病理改变明显减轻;免疫荧光检查和Western Blot检测结果显示MCAO组和NBO组在起始2 h内,大脑皮层组织NHE1和HIF-1α蛋白表达水平没有明显变化,随着再灌注时间的延长,MCAO组NHE1蛋白和HIF-1α蛋白表达水平逐渐增加,NBO组NHE1蛋白和HIF-1α蛋白表达水平稍有增加,但是其表达水平明显低于MCAO组(P<0.05)。结论:常压氧疗法可以下调缺血再灌注后大脑皮层组织NHE1蛋白和HIF-1α蛋白的表达,减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,促进大鼠神经功能恢复,具有脑损伤保护作用。 展开更多

关键词 常压氧 脑缺血再灌注损伤 1型na^+/h^+交换蛋白 大鼠

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Na^(+)/H^(+)交换体1在肾脏疾病中的作用

5

作者 陈安南 丁小强 宋娜娜 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期721-729,共9页

细胞内稳态的维持是细胞正常生命活动的前提。分布广泛的钠氢交换体1(Na^(+)/H^(+)exchanger 1,NHE1)是调节细胞内pH和细胞体积的重要机制,还能进一步影响细胞周期、细胞增殖和物质代谢等一系列生理过程。作为NHE家族中发现最早,研究甚... 细胞内稳态的维持是细胞正常生命活动的前提。分布广泛的钠氢交换体1(Na^(+)/H^(+)exchanger 1,NHE1)是调节细胞内pH和细胞体积的重要机制,还能进一步影响细胞周期、细胞增殖和物质代谢等一系列生理过程。作为NHE家族中发现最早,研究甚广的亚型,NHE1还是一种重要的结构蛋白,锚定于细胞骨架并定位在特定质膜区域,通过独立于离子转运的机制影响细胞粘附、迁移,生存和凋亡,成为众多信号通路的交汇点。NHE1相关的研究主要集中在各种肿瘤和心血管疾病,在肾脏疾病中的作用尚不明确。目前肾脏疾病大多缺乏有效的治疗药物,尽管众多研究试图从现有治疗药物中探索促进再生或抑制凋亡等肾脏保护的新机制,但鲜有新药能登上KIDGO指南的推荐药物之列。 展开更多

关键词 钠氢交换体1 肾脏疾病 急性肾损伤

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DNA损伤时钠氢交换蛋白1在K562和HL-60细胞中的表达和对细胞凋亡的影响

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作者 李华文 王立洪 +7 位作者 王建 常国强 金薇娜 蔺亚妮 高伟 王若君 马丽 庞天翔 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第4期857-860,共4页

本研究主要探讨在依托泊苷引起的DNA损伤下,BCR-ABL阳性细胞系K562中钠氢交换蛋白-1(NHE1)的表达变化情况,并初步探讨其在何种水平被调控。采用实时定量PCR技术检测NHE1在mRNA水平的表达;Western blot检测依托泊苷对细胞NHE1在蛋白水平... 本研究主要探讨在依托泊苷引起的DNA损伤下,BCR-ABL阳性细胞系K562中钠氢交换蛋白-1(NHE1)的表达变化情况,并初步探讨其在何种水平被调控。采用实时定量PCR技术检测NHE1在mRNA水平的表达;Western blot检测依托泊苷对细胞NHE1在蛋白水平的影响;流式细胞术测定细胞凋亡情况;构建NHE1启动子区荧光素酶报告载体,并测定不同依托泊苷浓度作用下的荧光素酶活性。结果表明:DNA损伤引起HL-60细胞NHE1在mRNA和蛋白水平升高(p<0.05),在K562细胞中未发现明显变化(p>0.05);依托泊苷对HL-60细胞有明显的促凋亡作用,阻止细胞内pH值的升高可以降低依托泊苷的促凋亡作用,依托泊苷对K562细胞凋亡率无明显影响;K562细胞在DNA损伤时,NHE1启动子区构建的荧光素酶表达载体活性升高。结论:依托泊苷造成的DNA损伤,促进HL-60细胞凋亡,并且依赖pHi的改变;在K562细胞中NHE1表达没有改变,但其转录活性升高。 展开更多

关键词 NhE1 Dna损伤 K562 hL-60 细胞凋亡

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乳腺癌组织中NHERF1、PTEN和ERα蛋白的表达及其临床意义 被引量：5

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作者 李阳 李洋 +3 位作者 程杉 葛志成 司杨 贺俊崎 《首都医科大学学报》 CAS 2012年第6期788-792,共5页

目的在乳腺癌及癌旁组织中研究钠氢交换子调节因子1(Na+/H+exchanger regulatory factor 1,NHERF1)、PTEN和雌激素受体亚型ERα的免疫组织化学表达情况及其与乳腺癌临床病理分型的关系。方法采用免疫组织化学(SP)法评价乳腺癌组织及癌... 目的在乳腺癌及癌旁组织中研究钠氢交换子调节因子1(Na+/H+exchanger regulatory factor 1,NHERF1)、PTEN和雌激素受体亚型ERα的免疫组织化学表达情况及其与乳腺癌临床病理分型的关系。方法采用免疫组织化学(SP)法评价乳腺癌组织及癌旁组织中NHERF、PTEN和雌激素受体亚型ERα蛋白表达情况,对其进行比较研究。结果乳腺癌组织中NHERF1和PTEN均呈现弱阳性表达或者不表达,而在癌旁组织中两者均有表达,而且在癌旁组织与癌组织中的表达量的差异有统计学意义(P<0.01)。而ERα的表达量在乳腺癌组织中明显高于癌旁组织(P<0.01)。结论乳腺癌组织中PTEN蛋白的表达水平可能与乳腺癌组织中NHERF1的表达有很大的相关性,雌激素受体在乳腺癌的发生发展过程中起了很重要的作用。 展开更多

关键词 乳腺癌 钠氢交换子调节因子1 PTEN 雌激素受体 免疫组织化学

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NHE-1特异性抑制剂DMA逆转HL-60/ADM细胞多药耐药的实验研究 被引量：3

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作者 常城 孔佩艳 +6 位作者 陈幸华 彭贤贵 刘林 刘红 曾东风 梁雪 王庆余 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期328-331,共4页

目的探讨钠/氢交换器-1(Na+/H+exchanger-1,NHE-1)特异性抑制剂二甲基氨氯吡咪(dimethyl amilo-ride,DMA)是否能在体外逆转耐药细胞株HL-60/ADM的多药耐药及其可能机制。方法以阿霉素诱导产生多药耐药(multidrug resistance,MDR)的HL-60... 目的探讨钠/氢交换器-1(Na+/H+exchanger-1,NHE-1)特异性抑制剂二甲基氨氯吡咪(dimethyl amilo-ride,DMA)是否能在体外逆转耐药细胞株HL-60/ADM的多药耐药及其可能机制。方法以阿霉素诱导产生多药耐药(multidrug resistance,MDR)的HL-60/ADM细胞株为研究对象,用MTT法检测化疗药物敏感性,流式细胞仪检测细胞内柔红霉素积累量,RT-PCR法检测mrp、bcl-2、bax mRNA表达,免疫细胞化学法检测细胞膜多药耐药相关蛋白(MRP)表达,TUNEL法检测原位细胞凋亡。结果与50μmol/L DMA共同培养24h后,HL-60/ADM细胞对ADM、MIT、VCR、HAR4种化疗药物的IC50值分别由(839.5±45.2)、(321.2±28.9)、(70.5±15.5)、(65.2±20.7)ng/ml降低至(180.5±38.9)、(76.4±12.0)、(30.2±7.5)、(31.7±7.2)ng/ml;分别与50、100μmol/LDMA共培养24h后,HL-60/ADM细胞内DNR积累量荧光强度由作用前的33.56升高到48.74和70.10,细胞内mrp mRNA表达量、MRP蛋白表达量及bcl-2mRNA表达量明显降低,bax mRNA表达量明显升高;与100μmol/L DMA共同培养24h后,5μg/ml ADM作用下的HL-60/ADM细胞凋亡率明显增高。结论DMA可逆转HL-60/ADM细胞的MDR,其机制可能与下调MRP表达及促进bcl-2/bax凋亡途径有关。 展开更多

关键词 二甲基氨氯吡咪 钠/氢交换蛋白-1 hL-60/ADM 多药耐药 逆转

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生姜对大鼠脑缺血再灌注脑组织NHE1和HIF-1α蛋白水平的影响 被引量：4

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作者 张留超 牛美兰 +4 位作者 王鹏 张振香 李萌萌 焦佳伟 何雄文 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2020年第5期41-44,I0017,I0018,共6页

目的研究生姜压榨汁对脑缺血再灌注大鼠脑组织缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF1α)蛋白和Na^+/H^+交换蛋白1型(Na^+/H^+exchanger protein 1,NHE1)表达水平的影响。方法通过线栓法构建大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,... 目的研究生姜压榨汁对脑缺血再灌注大鼠脑组织缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF1α)蛋白和Na^+/H^+交换蛋白1型(Na^+/H^+exchanger protein 1,NHE1)表达水平的影响。方法通过线栓法构建大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,造模成功的大鼠随机分为模型组(MCAO)、生姜压榨汁高(H)、中(M)和低(L)剂量组,另设假手术组(CLT)为对照,各组大鼠经灌胃给药5 d,神经功能评分后,病理组织检查大脑病变情况,干湿重法测大脑含水量,免疫荧光法检测NHE1蛋白在脑组织中的表达,Western Blot法研究HIF-1α蛋白和NHE1蛋白水平。结果与CTL组比较,MCAO组大鼠出现明显的神经功能障碍,病理检测结果显示脑组织出现明显的梗死灶,脑组织含水量明显升高,NHE1蛋白和HIF-1α蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与MCAO组相比,生姜H、M剂量组能明显改善MCAO大鼠神经病学症状,显著缩小脑梗死面积,降低脑组织含水量,并降低NHE1蛋白和HIF-1α蛋白表达水平(P<0.05)。结论生姜对脑缺血再灌注大鼠脑组织可能发挥保护作用。 展开更多

关键词 缺血性脑卒中 生姜 na^+/h^+交换蛋白1型 缺氧诱导因子1Α

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过表达NHE1通过上调钙蛋白酶活性降低RAW264.7细胞ABCA1蛋白表达 被引量：4

10

作者 莫显刚 王兰 +5 位作者 郭静 洪伟 龙世棋 张莉 向凝 杨涓 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期12-16,共5页

目的探讨过表达钠氢交换体1(NHE1)对RAW264.7细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白表达的影响。方法采用Ad NHE1腺病毒感染RAW264.7细胞,Western blot法检测NHE1-EGFP融合蛋白的表达,激光共聚焦显微镜技术检测NHE1-EGFP融合蛋白细... 目的探讨过表达钠氢交换体1(NHE1)对RAW264.7细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白表达的影响。方法采用Ad NHE1腺病毒感染RAW264.7细胞,Western blot法检测NHE1-EGFP融合蛋白的表达,激光共聚焦显微镜技术检测NHE1-EGFP融合蛋白细胞内定位,酸负载p H回复检测NHE1活性,Western blot法检测NHE1-EGFP融合蛋白对RAW264.7细胞ABCA1蛋白水平及钙蛋白酶(calpain)活性的影响,加入calpain抑制剂N-乙酰基-L-亮氨酰-L-亮氨酰-L-正亮氨酸(ALLN),Western blot法检测肝脏X受体激动剂TO-901317诱导ABCA1蛋白表达水平的影响。结果 Ad NHE1腺病毒感染RAW264.7细胞后,高表达NHE1-EGFP融合蛋白,定位在细胞质及细胞膜。NHE1-EGFP融合蛋白可降低ABCA1蛋白的表达水平并提高calpain活性,而calpain抑制剂ALLN能阻断ABCA1蛋白表达水平降低。结论 NHE1过表达通过上调calpain活性而降低ABCA1蛋白表达水平。 展开更多

关键词 钠氢交换体1(NhE1) 钙蛋白酶(calpain) RAW264.7细胞 三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1) TO-901317

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NHE-1反义基因对胃癌细胞的酸化作用及其意义 被引量：2

11

作者 滕小春 刘海峰 +3 位作者 房殿春 杨仕明 王国安 陈刚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期240-242,共3页

目的探讨Na+-H+交换泵-1(Na+-H+exchanger1,NHE-1)反义基因转染对人胃癌细胞内pH值(intracellu-larpH,pHi)的调节作用及其在肿瘤基因治疗中的价值。方法构建人NHE-1基因反义真核表达载体,采用脂质体法将其转染至SGC-7901胃癌细胞中,采... 目的探讨Na+-H+交换泵-1(Na+-H+exchanger1,NHE-1)反义基因转染对人胃癌细胞内pH值(intracellu-larpH,pHi)的调节作用及其在肿瘤基因治疗中的价值。方法构建人NHE-1基因反义真核表达载体,采用脂质体法将其转染至SGC-7901胃癌细胞中,采用荧光探针检测转染前后细胞内pH值的变化以及对细胞增殖和凋亡的影响。结果转染反义基因的细胞pHi明显降低,增殖能力降低,细胞凋亡率增加。结论NHE-1基因的表达在肿瘤细胞pHi及增殖和凋亡调节中起重要作用。 展开更多

关键词 NhE1基因 真核表达载体 反义基因治疗 胃癌

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Cariporide对宫颈癌HeLa细胞体外转移及MT1-MMP表达的影响 被引量：1

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作者 蔺亚妮 王建 +5 位作者 常国强 金薇娜 王立洪 李华文 李庆华 庞天翔 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第17期1028-1031,共4页

目的:通过体外实验研究钠氢交换蛋白1(NHE1)特异性抑制剂Cariporide对人宫颈癌HeLa细胞体外转移能力的影响,并初步探讨其作用机制。方法:用Cariporide处理HeLa细胞,采用细胞-基质粘附实验、细胞划痕实验和Transwell侵袭实验分别检测Cari... 目的:通过体外实验研究钠氢交换蛋白1(NHE1)特异性抑制剂Cariporide对人宫颈癌HeLa细胞体外转移能力的影响,并初步探讨其作用机制。方法:用Cariporide处理HeLa细胞,采用细胞-基质粘附实验、细胞划痕实验和Transwell侵袭实验分别检测Cariporide对HeLa细胞的粘附、迁移和侵袭能力的影响:Real-time RT-PCR、Western blot法分别检测Cariporide对HeLa细胞膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)mRNA及蛋白表达的影响结果:细胞-基质粘附实验结果显示,与对照组相比,Cariporide处理过的HeLa细胞体外粘附率降低25%,差异具有统计学意义(P<0.05);细胞划痕实验和Transwell侵袭实验结果显示,Cariporide处理后,HeLa细胞损伤愈合的速度和穿过滤膜的细胞数量均明显少于对照组;Real-time RT-PCR及Western blot结果表明Cariporide可显著降低MT1-MMPmRNA和蛋白水平的表达量(P均<0.05)。结论:Catiporide可有效抑制人宫颈癌HeLa细胞的体外转移能力,其作用机制可能与降低MT1-MMP的表达有关。 展开更多

关键词 钠氢交换蛋白1 膜型基质金属蛋白酶1 粘附 迁移 侵袭

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人肺癌细胞转录因子——C/EBP和HMG样蛋白的EMSA检测

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作者 吴国明 钱桂生 +3 位作者 周玉国 黄桂君 姚伟 陆俊羽 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1173-1175,共3页

目的　检测人肺癌细胞中是否存在与Na+ H+ 交换蛋白 1(NHE 1)基因转录相关的重要转录因子———C EBP和HMG样蛋白。方法　采用电泳迁移率改变分析法 (EMSA)检测人肺癌细胞株核蛋白中C EBP和HMG样蛋白的表达及其水平。结果　EMSA检测到... 目的　检测人肺癌细胞中是否存在与Na+ H+ 交换蛋白 1(NHE 1)基因转录相关的重要转录因子———C EBP和HMG样蛋白。方法　采用电泳迁移率改变分析法 (EMSA)检测人肺癌细胞株核蛋白中C EBP和HMG样蛋白的表达及其水平。结果　EMSA检测到A5 49细胞和转染NHE 1反义载体的A5 49细胞均有转录因子C EBP和HMG样蛋白的表达 ,且后者表达水平高于前者 ;采用 5 0倍未标记的片段能完全抑制相应转录因子与32 P标记的相同片段的结合。结论　A5 49细胞核蛋白中存在能与C EBP结合序列和Poly(dA∶dT)区结合的转录因子 ,即C EBP和HMG样蛋白 ,后者的表达水平高于前者。特异性竞争抑制试验表明外源性特异DNA片段能抑制相同片段与转录因子的结合。 展开更多

关键词 肺癌 转录因子 hMG样蛋白 na^+/h^+交换蛋白-1 转录调控 电泳迁移率改变分析 C/EBP样蛋白

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卡立泊来德对缺血-再灌注大鼠肺组织钠氢交换蛋白-1表达及炎症损伤的影响

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作者 李茜 朱姝颖 +1 位作者 郑剑桥 刘斌 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期606-609,共4页

目的探讨缺血-再灌注(IR)对肺钠氢交换蛋白-1(NHE-1)表达的影响,及卡立泊来德(cariporide)预处理能否通过抑制NHE-1表达减轻肺组织的炎症损伤。方法 20枚离体灌注的大鼠肺随机分为四组:对照组(C组)、IR组、NHE-1激活剂LiCl预处理组(LiCl... 目的探讨缺血-再灌注(IR)对肺钠氢交换蛋白-1(NHE-1)表达的影响,及卡立泊来德(cariporide)预处理能否通过抑制NHE-1表达减轻肺组织的炎症损伤。方法 20枚离体灌注的大鼠肺随机分为四组:对照组(C组)、IR组、NHE-1激活剂LiCl预处理组(LiCl组)和cariporide预处理+缺血-再灌注组(CIR组)。再灌注结束后,免疫组化检测肺组织中NHE-1蛋白表达,HE染色观察肺组织病理学改变并行病理评分。结果与C组和CIR组比较,IR组和LiCl组NHE-1表达明显增加(P<0.05),CIR组和C组差异无统计学意义。IR组和LiCl组肺组织病理切片均观察到明显炎症损伤,病理评分明显高于C组和CIR组(P<0.05),CIR组病理评分和C组差异无统计学意义。结论离体的IR大鼠肺组织,NHE-1表达增加,选择性NHE-1抑制剂cariporide能减轻IR导致的肺组织炎症损伤。 展开更多

关键词 钠氢交换蛋白-1 缺血-再灌注 肺炎症损伤

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抑制钠氢交换蛋白1促进低氧诱导的K562细胞分化 被引量：1

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作者 金薇娜 王建 +6 位作者 常国强 蔺亚妮 王立洪 李华文 高伟 李庆华 庞天翔 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第3期661-665,共5页

本研究主要探讨低氧微环境对慢性髓系白血病细胞系K562分化的影响及钠氢交换蛋白1(NHE1)在该过程中的作用。利用低氧模拟物CoCl2或于低氧(2%O2、5%CO2和93%N2)环境中培养K562细胞,应用激光共聚焦显微镜测定细胞内pH值(intracellular pH,... 本研究主要探讨低氧微环境对慢性髓系白血病细胞系K562分化的影响及钠氢交换蛋白1(NHE1)在该过程中的作用。利用低氧模拟物CoCl2或于低氧(2%O2、5%CO2和93%N2)环境中培养K562细胞,应用激光共聚焦显微镜测定细胞内pH值(intracellular pH,pHi),瑞氏染色观察细胞形态,实时定量RT-PCR检测基因表达,Western blot技术检测MAPK磷酸化水平的改变。结果表明:与对照组相比,低氧培养的K562细胞表现出成熟相关的形态学改变,并伴随CCAAT/增强子结合蛋白(C/EBPα)的mRNA水平上调;特异性NHE1抑制剂Cariporide预处理能够促进低氧诱导的K562细胞分化,Cariporide处理后K562细胞的P38和ERK5蛋白激酶磷酸化水平显著增强。结论 :低氧及低氧模拟物能够诱导K562细胞系分化,抑制NHE1活性协同促进低氧诱导的K562细胞分化,其机制可能是通过增强细胞内MAPK蛋白激酶磷酸化水平促进分化。 展开更多

关键词 钠氢交换蛋白1 低氧诱导分化 K562细胞 CoCl2

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京海黄鸡钠氢离子交换泵1基因实时荧光定量PCR标准曲线的建立

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作者 陈学森 王金玉 +3 位作者 张跟喜 张涛 唐莹 施会强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第2期39-42,共4页

为阐明钠氢离子交换泵1(Na+/H+exchanger 1,NHE1)基因在京海黄鸡组织表达和生理功能,依据GenBank登录的NHE1基因的核苷酸序列(登录号:DQ256198)设计特异性引物,经RT-PCR技术从京海黄鸡组织样中扩增和克隆了上述因子的204bp核苷酸片段。... 为阐明钠氢离子交换泵1(Na+/H+exchanger 1,NHE1)基因在京海黄鸡组织表达和生理功能,依据GenBank登录的NHE1基因的核苷酸序列(登录号:DQ256198)设计特异性引物,经RT-PCR技术从京海黄鸡组织样中扩增和克隆了上述因子的204bp核苷酸片段。测序鉴定后,将重组质粒10倍系列稀释后作为标准模板,通过实时荧光定量PCR方法,建立了它们各自的标准曲线及直线回归方程,得到了相关系数R2=0.9903、回归方程为y=-3.4643x+35.9000的标准曲线,成功构建了NHE1基因的标准质粒和标准曲线,为京海黄鸡组织中NHE1mRNA水平的定量检测提供了必要的技术手段。 展开更多

关键词 钠氢离子交换泵1 京海黄鸡 重组质粒 表达 实时荧光定量PCR

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抑制钠氢交换蛋白下调IL-8表达和促进p38磷酸化 被引量：3

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作者 高伟 张玉娟 +8 位作者 张海瑞 金薇娜 常国强 张洪菊 马丽 蔺亚妮 李庆华 茹永新 庞天翔 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期45-48,共4页

我们前期的研究证明,抑制钠氢交换蛋白1(NHE1)可以减少VEGF表达从而抑制K562细胞诱导的血管生成。本研究探讨抑制NHE1后其他可能的血管生成因子变化及相关机制。用NHE1特异性抑制剂卡立泊来德10μmol/L处理K562细胞;蛋白芯片筛选NHE1抑... 我们前期的研究证明,抑制钠氢交换蛋白1(NHE1)可以减少VEGF表达从而抑制K562细胞诱导的血管生成。本研究探讨抑制NHE1后其他可能的血管生成因子变化及相关机制。用NHE1特异性抑制剂卡立泊来德10μmol/L处理K562细胞;蛋白芯片筛选NHE1抑制后血管生成因子的表达变化,实时定量PCR验证卡立泊来德处理后白介素-8(IL-8)的表达水平;构建K562稳定干扰NHE1细胞株,实时定量PCR验证干扰NHE1后IL-8的表达变化,Western blot检测卡立泊来德处理后细胞内p38磷酸化水平;p38抑制剂SB203580处理K562细胞,实时定量检测IL-8表达变化。蛋白芯片筛选结果显示,卡立泊来德处理后K562细胞中IL-8表达显著下调;实时定量结果进一步验证了这种抑制效应;卡立泊来德处理后p38磷酸化水平显著上调;卡立泊来德处理后加入SB203580抑制p38,IL-8表达可以部分恢复。结论:抑制NHE1可能通过促进p38磷酸化,下调促血管生成因子IL-8的表达。 展开更多

关键词 钠氢交换蛋白1 卡立泊来德 K562细胞 血管生成因子 白介素-8 p38 白血病

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大鼠双侧输尿管梗阻后肾脏钠通道的改变

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作者 王贵宪 文建国 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2004年第6期947-950,共4页

目的 :探讨泌尿系梗阻后肾脏功能的改变机制。方法 :2 0只大鼠随机分为实验组 (n =10 )及对照组 (n =10 )。实验组双侧输尿管梗阻 2 4h后解除梗阻 ,对照组手术同实验组 ,但不结扎。所有大鼠于术前 3d及术后 4d测量饮水量、食量、体重及... 目的 :探讨泌尿系梗阻后肾脏功能的改变机制。方法 :2 0只大鼠随机分为实验组 (n =10 )及对照组 (n =10 )。实验组双侧输尿管梗阻 2 4h后解除梗阻 ,对照组手术同实验组 ,但不结扎。所有大鼠于术前 3d及术后 4d测量饮水量、食量、体重及尿量 ;术后 4d抽取动脉血化验 ,同时取出双侧肾脏 ;右肾全肾快速放入液氮冰冻备份 ,左肾分离出内髓 (IM)、外髓内带 (ISOM)、外髓外带加肾皮质 (OSOM +C) ,免疫杂交法检测 3型钠氢交换通道 (NHE3)、钠钾ATP酶 (Na -K -ATPase)和钠 -钾 - 2氯协同转运通道蛋白 (BSC - 1)。结果 :实验组输尿管梗阻 2 4h后引起肾脏水钠排泄异常 ,机体水电解质紊乱 ;肾脏不同部位NHE3、Na-K -ATPase及BSC - 1表达均较对照组降低 (P均<0 .0 1)。结论 :NHE3、Na-K -ATPase及BSC - 1水平降低可能是泌尿系梗阻后肾小管性钠回吸收障碍。 展开更多

关键词 双侧输尿管梗阻 3型钠氢交换通道 钠钾ATP酶 钠-钾-2氯协同转运通道蛋白 大鼠

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