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NF-κB“decoy”寡核苷酸对LPS诱导巨噬细胞IL-10表达的影响 被引量:3
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作者 王建 邓小明 +1 位作者 李金宝 马胜忠 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期565-568,共4页
目的 :探讨NF -κB“decoy”寡核苷酸 (ODNs)对脂多糖 (LPS)诱导小鼠巨噬细胞株J774 .1表达IL - 10的影响。方法 :通过体外细胞培养技术 ,观察转染NF -κB“decoy”ODNs对LPS刺激巨噬细胞产生IL - 10及其表达的影响。结果 :在LPS刺激的... 目的 :探讨NF -κB“decoy”寡核苷酸 (ODNs)对脂多糖 (LPS)诱导小鼠巨噬细胞株J774 .1表达IL - 10的影响。方法 :通过体外细胞培养技术 ,观察转染NF -κB“decoy”ODNs对LPS刺激巨噬细胞产生IL - 10及其表达的影响。结果 :在LPS刺激的巨噬细胞中转染NF -κB“decoy”ODNs对抗炎介质IL - 10的合成表达无影响。结论 :NF-κB“decoy”ODNs不抑制抗炎介质IL - 10的表达 ,可能由于NF -κB在IL - 10转录机制中不占主导地位。 展开更多
关键词 巨噬细胞 核因子nf-κbdecoy 寡核苷酸 白细胞介素-10
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阳离子脂质体介导NF-κB“decoy”ODNs转染巨噬细胞条件的优化 被引量:1
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作者 王建 李金宝 +1 位作者 任绪义 邓小明 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期856-858,F004,共4页
目的 :观察 NF- κB“decoy”ODNs在阳离子脂质体 lipofectin介导下转染小鼠巨噬细胞 J774 .1的优化参数以及在细胞内的分布。 方法 :改变 ODN与 lipofectin比率、转染时间 ;用流式细胞仪检测细胞内的相对荧光强度和摄取率评价转染效率 ... 目的 :观察 NF- κB“decoy”ODNs在阳离子脂质体 lipofectin介导下转染小鼠巨噬细胞 J774 .1的优化参数以及在细胞内的分布。 方法 :改变 ODN与 lipofectin比率、转染时间 ;用流式细胞仪检测细胞内的相对荧光强度和摄取率评价转染效率 ;荧光显微镜观察细胞内荧光分布 ;测定细胞上清乳酸脱氢酶 (L DH)观察细胞损伤情况。 结果 :lipofectin介导转染显著提高 J774 .1细胞对 NF- κB“decoy”ODNs的摄取 ;在 2 4孔培养板中 ,NF- κB“decoy”ODNs与 lipofectin比率 (W/ W)为 1∶ 5、转染 6 h时 ,转染效率最佳而细胞毒性相对较低 ;lipofectin介导转染 6 h后 ,细胞内荧光物质主要聚集于细胞核和部分细胞质中 ,而直接转染时荧光物质多分布于细胞质。结论 :lipofectin可增加 NF-κB“decoy”ODNs的细胞摄入并改变其细胞内分布 ;NF-κB“decoy”ODNs与 lipofectin比率 (W/ W)为 1∶ 5、转染 6 h时可获得最佳转染效率。 展开更多
关键词 阳离子脂质体 nf-κbdecoy”ODNS 基因转染 巨噬细胞
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NF-κB“decoy”寡核苷酸对LPS诱导巨噬细胞TNF-α和IL-6表达的影响
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作者 王建 邓小明 +2 位作者 任绪义 李金宝 曹金妹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1558-1559,共2页
关键词 nf-κb decoy 寡核苷酸 LPS 巨噬细胞 Tnf-α IL-6 酶联免疫吸附法
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NF-κB靶向性哑铃形“圈套”ODNs抑制大脑皮质神经元氧糖剥夺/复氧后TNF-α的表达 被引量:3
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作者 何兰英 罗勇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期318-321,共4页
目的设计合成靶向哑铃形寡核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODNs)圈套,检测其对大鼠大脑皮质神经元氧糖剥夺/复氧(OGD/R)后TNF-α表达的抑制效应。方法原代大脑皮质神经元体外培养,建立氧糖剥夺/复氧模型,以正常组、OGD4h/R6h组、NF-κB d... 目的设计合成靶向哑铃形寡核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODNs)圈套,检测其对大鼠大脑皮质神经元氧糖剥夺/复氧(OGD/R)后TNF-α表达的抑制效应。方法原代大脑皮质神经元体外培养,建立氧糖剥夺/复氧模型,以正常组、OGD4h/R6h组、NF-κB decoy ODNs组、无关decoy ODNs组、脂质体组为实验组,采用Western blot检测NF-κB p65蛋白表达,分别采用免疫细胞化学和逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测TNF-α蛋白和mRNA表达。结果Westernblot检测显示NF-κB decoy ODNs组NF-κB P65蛋白表达明显低于OGD4h/R6h组、脂质体组、无关decoy ODNs组(P<0.05),与OGD4h/R6h组、脂质体组、无关decoy组相比NF-κB decoy ODNs组TNF-α蛋白和mRNA表达明显降低(P<0.05);而脂质体组、无关decoy ODNs组对NF-κB P65蛋白、TNF-α蛋白和mRNA表达未见抑制(P>0.05)。结论靶向性NF-κB的哑铃形圈套ODNs可有效抑制大脑皮质神经元OGD/R后炎症因子TNF-αmRNA及蛋白的表达。 展开更多
关键词 nf-κb decoy ODNs 大脑皮质神经元 氧糖剥夺/复氧 肿瘤坏死因子-Α
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