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谷氨酸脱氢酶(GDH)活力测定及其在海洋生态系统中的应用 被引量:5
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作者 汤鸿 李少菁 王桂忠 《海洋通报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期87-92,共6页
本文介绍了海洋生物中催化氧化脱氨作用的谷氨酸脱氢酶(GDH)活力测定方法,CDH活力的影响因子,以及GDH活力测定在海洋生态研究中的应用。
关键词 谷氨酸脱氢 酶活力 排氨 海洋生态系统
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猪链球菌rGDH蛋白原核表达载体的构建及免疫原性分析 被引量:2
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作者 李书光 张娜 +4 位作者 程立坤 苗立中 刘吉山 杨立芳 沈志强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第10期2594-2599,共6页
谷氨酸脱氢酶(GDH)在猪链球菌35个血清型中都存在,是一种具有免疫原性的保护性抗原。本试验PCR扩增出GDH基因,酶切定向插入pET-32a中构建表达载体pET-32a-GDH,将其转化E.coli BL21(DE3)表达菌中,培养并诱导表达rGDH蛋白,产物纯化后免疫... 谷氨酸脱氢酶(GDH)在猪链球菌35个血清型中都存在,是一种具有免疫原性的保护性抗原。本试验PCR扩增出GDH基因,酶切定向插入pET-32a中构建表达载体pET-32a-GDH,将其转化E.coli BL21(DE3)表达菌中,培养并诱导表达rGDH蛋白,产物纯化后免疫新西兰白兔,免疫攻毒保护试验检验该蛋白的免疫原性。PCR试验获得约1 300bp的GDH基因,双酶切pET-32a-GDH表达载体获得5.4和1.3kb的片段,IPTG诱导表达获得融合蛋白,免疫保护结果达到70%。结果表明,本试验成功构建表达猪链球菌GDH蛋白的原核表达载体pET-32a-GDH,rGDH蛋白以蜂胶为佐剂免疫模型动物后,免疫保护率达到70%,为猪链球菌亚单位疫苗的研制提供了技术支持。 展开更多
关键词 猪链球菌 谷氨酸脱氢酶(gdh) 原核表达 免疫原性
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ICL、ICDH、ODH和GDH酶与L-谷氨酸的合成 被引量:1
3
作者 余秉琦 朱劼 +3 位作者 何玉财 蔡志强 王利群 杨林松 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第30期16725-16727,16730,共4页
通过对对数生长期细胞的异柠檬酸裂解酶(ICL)、异柠檬酸脱氢酶(ICDH)、α-酮戊二酸脱氢酶(ODH)和谷氨酸脱氢酶(GDH)的分析以及对细胞L-谷氨酸产生量和发酵残糖的综合分析,发现由于乙醛酸循环关键酶ICL的缺失,L-谷氨酸产生量大幅下降,说... 通过对对数生长期细胞的异柠檬酸裂解酶(ICL)、异柠檬酸脱氢酶(ICDH)、α-酮戊二酸脱氢酶(ODH)和谷氨酸脱氢酶(GDH)的分析以及对细胞L-谷氨酸产生量和发酵残糖的综合分析,发现由于乙醛酸循环关键酶ICL的缺失,L-谷氨酸产生量大幅下降,说明乙醛酸循环是谷氨酸棒杆菌中的主要回补途径,L-谷氨酸合成需要乙醛酸循环。在保证乙醛酸循环回补功能的前提下,提高ICDH活性,减弱ODH活性,有利于L-谷氨酸的合成。 展开更多
关键词 谷氨酸 异柠檬酸裂解酶 异柠檬酸脱氢酶 α-酮戊二酸脱氢酶 谷氨酸脱氢酶
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溶氧浓度对谷氨酸发酵关键酶的影响 被引量:10
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作者 郜培 陆静波 +2 位作者 段作营 毛忠贵 史仲平 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期72-75,共4页
谷氨酸发酵中,不同溶氧条件对产物谷氨酸和主要副产物乳酸的生成积累影响很大。文中研究了不同溶氧条件下和几种非正常条件下的谷氨酸发酵中主要关键酶(谷氨酸脱氢酶和乳酸脱氢酶)的变化规律,为谷氨酸发酵的进一步优化和控制提供了基础... 谷氨酸发酵中,不同溶氧条件对产物谷氨酸和主要副产物乳酸的生成积累影响很大。文中研究了不同溶氧条件下和几种非正常条件下的谷氨酸发酵中主要关键酶(谷氨酸脱氢酶和乳酸脱氢酶)的变化规律,为谷氨酸发酵的进一步优化和控制提供了基础数据。 展开更多
关键词 谷氨酸脱氢酶(gdh) 乳酸脱氢酶(LDH) 溶氧水平 谷氨酸发酵
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鸭肝谷氨酸脱氢酶的纯化与酶学性质研究 被引量:5
5
作者 朱鸿 李想韵 +4 位作者 王松 付伟丽 唐靓婷 诰赵伟 唐云明 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第19期231-235,共5页
目的:获得鸭肝谷氨酸脱氢酶纯品并对其酶学性质进行研究。方法:采用丙酮脱脂、重金属离子沉淀、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析和SephacrylS-200凝胶层析方法,分离纯化鸭肝谷氨酸脱氢酶,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯... 目的:获得鸭肝谷氨酸脱氢酶纯品并对其酶学性质进行研究。方法:采用丙酮脱脂、重金属离子沉淀、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析和SephacrylS-200凝胶层析方法,分离纯化鸭肝谷氨酸脱氢酶,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定和酶相对分子质量测定。结果:从鸭肝中分离纯化获得电泳纯的谷氨酸脱氢酶,纯化倍数为60.93倍,酶活力回收率为11.02%,比活力达24.37U/mg。酶相对分子质量为371.41,亚基相对分子质量为61.60。推测该酶由6个相同亚基构成。该酶对NADH的Km为53.19μmol/L,最适pH值为10.0,最适反应温度为35℃。该酶在pH8.0左右较稳定;在40℃以下酶活力保持稳定。Zn2+、Li+和Cu2+对该酶具有显著的抑制作用。结论:分离纯化获得谷氨酸脱氢酶,该酶具有较高应用价值。 展开更多
关键词 鸭肝 谷氨酸脱氢酶 分离纯化 性质
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谷氨酸生产菌S_(9114)中依赖于NADPH谷氨酸脱氢酶的纯化及性质 被引量:3
6
作者 王燕 宋香 +2 位作者 杨平平 段作营 毛忠贵 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期5-9,共5页
利用DEAE 纤维素离交柱层析、疏水柱层析和凝胶过滤层析等从谷氨酸棒杆菌S9114 中分离纯化出依赖于NADPH的谷氨酸脱氢酶 (GOH NADPH )。经HPLC测定 ,该酶的分子量为 188ku ;经SDS -PAGE电泳测得该酶的亚基分子量为 3 2ku。提示该谷氨酸... 利用DEAE 纤维素离交柱层析、疏水柱层析和凝胶过滤层析等从谷氨酸棒杆菌S9114 中分离纯化出依赖于NADPH的谷氨酸脱氢酶 (GOH NADPH )。经HPLC测定 ,该酶的分子量为 188ku ;经SDS -PAGE电泳测得该酶的亚基分子量为 3 2ku。提示该谷氨酸脱氢酶由 6个亚基组成。该酶对NADPH具有高度专一性 ,在pH 7 5、3 7℃下 ,以α 酮戊二酸、NH4Cl和NADPH为底物时的米氏常数Km 分别为 9 2 2mmol/L、5 2 7mmol/L和 2 3 1× 10 -3mmol/L。最适反应pH为 7 5 ,最适反应温度为 42℃ ,并对热比较稳定。此外 ,KCl对GDH NADPH的活性具有激活作用。 展开更多
关键词 谷氨酸生产菌 谷氨酸脱氢酶 NADPH 谷氨酸棒杆菌 分离纯化 发酵生产
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盘基网柄菌(Dictyosteliumdiscoideum)KAX-3和AK127细胞形态发生和同工酶的比较研究 被引量:3
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作者 侯连生 马宁莎 +2 位作者 王玥 韩轶 付卓敏 《华东师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期103-110,共8页
比较了盘基网柄菌(Dictyostelium discoideum)野生型细胞KAx-3和突变型细胞AK127在多细胞发育过程中的形态发生.两者有明显的区别;突变细胞的发育只能停留在细胞疏松聚集阶段,而野生型细胞能顺利完成整个发育过程.利用SDS-PAGE电泳比较... 比较了盘基网柄菌(Dictyostelium discoideum)野生型细胞KAx-3和突变型细胞AK127在多细胞发育过程中的形态发生.两者有明显的区别;突变细胞的发育只能停留在细胞疏松聚集阶段,而野生型细胞能顺利完成整个发育过程.利用SDS-PAGE电泳比较分析了两者在重要发育阶段的三种同工酶:酯酶(EST)、苹果酸脱氢酶(MDH)和谷氨酸脱氢酶(GDH).结果发现:AK127细胞发育阶段含有两种酯酶成分α和β,而KAX-3细胞中只有一种酯酶α;而且AK127细胞中苹果酸脱氢酶(MDH)含量在发育后14 h和16 h均高于KAX-3细胞;谷氨酸脱氢酶(GDH)同工酶在发育后14 h时相对含量高于KAX-3细胞,而在发育后16 h含量却低于KAX-3细胞.这些数据显示了两种类型细胞的同工酶有明显的差异;表明突变细胞基因的表达发生了一定的改变,由此说明了gp150分子在盘基网柄菌细胞发育中有重要作用. 展开更多
关键词 盘基网柄菌 发育 形态发生 SDS-PAGE 谷氨酸脱氢酶(gdh) 苹果酸脱氢酶(MDH) 酯酶(EST)
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He-Ne激光对小麦幼苗增强UV-B辐射损伤的修复研究 被引量:10
8
作者 郝金花 马晓丽 韩榕 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期62-67,共6页
分别采用5mW·mm-2He-Ne激光辐照和增强UV-B辐射(10.08kJ·m-2·d-1)及其二者组合对晋麦8号小麦幼苗进行处理,5d后测定各处理幼苗叶片可溶性蛋白、硝酸还原酶和谷氨酸脱氢酶活性的变化以分析He-Ne激光对小麦幼苗受增强UV-B... 分别采用5mW·mm-2He-Ne激光辐照和增强UV-B辐射(10.08kJ·m-2·d-1)及其二者组合对晋麦8号小麦幼苗进行处理,5d后测定各处理幼苗叶片可溶性蛋白、硝酸还原酶和谷氨酸脱氢酶活性的变化以分析He-Ne激光对小麦幼苗受增强UV-B损伤的修复作用.结果显示:He-Ne激光辐照可使UV-B辐射后小麦幼苗叶片的可溶性蛋白含量增加,谷氨酸脱氢酶活性增强,而使硝酸还原酶活性先升高后降低.表明小麦幼苗叶片可溶性蛋白、谷氨酸脱氢酶、硝酸还原酶的变化同小麦幼苗损伤修复的能力相关,一定剂量的He-Ne激光辐照可部分修复增强UV-B对小麦幼苗氮代谢水平的辐射损伤. 展开更多
关键词 HE-NE激光 紫外线B 可溶性蛋白 硝酸还原酶 谷氨酸脱氢酶
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辣椒细胞质雄性不育系的3种同工酶分析 被引量:6
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作者 戴亮芳 罗向东 +1 位作者 王述彬 陈劲枫 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1772-1776,共5页
以辣椒细胞质雄性不育系21A及其同核异质保持系21B为试验材料,比较分析两系雄配子发育过程中酯酶(EST)、谷氨酸脱氢酶(GDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)同工酶的表达特征.结果表明:幼叶和花蕾的EST同工酶酶谱在谱带数目和酶带强弱上存在时空表... 以辣椒细胞质雄性不育系21A及其同核异质保持系21B为试验材料,比较分析两系雄配子发育过程中酯酶(EST)、谷氨酸脱氢酶(GDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)同工酶的表达特征.结果表明:幼叶和花蕾的EST同工酶酶谱在谱带数目和酶带强弱上存在时空表达差异,并且随着雄配子发育的进行,保持系21B从中花蕾至特大花蕾比不育系21A多1条清晰的谱带(EST3e),其差异表达发生在细胞学上观察到的败育时期之前;在GDH同工酶中,保持系21B从大花蕾至特大花蕾比不育系多6条谱带(GDH1和GDH1/2),酶谱差异表达时期与细胞学上观察到的败育时期一致;而在MDH同工酶中,不育系21A和保持系21B的幼叶和各级花蕾的酶谱在谱带数目和谱带强弱上均没有明显差异. 展开更多
关键词 辣椒细胞质雄性不育 酯酶(EST) 谷氨酸脱氢酶(gdh) 苹果酸脱氢酶(MDH)
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瘤胃微生物体外利用赖氨酸对有关酶和尿素氮的影响 被引量:3
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作者 李吕木 胡良卫 +1 位作者 刁欢 凌俊 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2007年第12期43-47,共5页
为了测定体外培养条件下瘤胃微生物的赖氨酸消化率及赖氨酸降解过程中谷氨酸脱氢酶(GDH)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)和尿素氮(UN)的变化及其相关关系,经瘤胃瘘管取成年山羊瘤胃液混匀后分装至12个血清... 为了测定体外培养条件下瘤胃微生物的赖氨酸消化率及赖氨酸降解过程中谷氨酸脱氢酶(GDH)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)和尿素氮(UN)的变化及其相关关系,经瘤胃瘘管取成年山羊瘤胃液混匀后分装至12个血清瓶中,每瓶40 mL,同时每瓶加入淀粉20 mg;血清瓶随机均分为2组,其中一组每瓶再注入8 mL0.25 mmol/L的L-赖氨酸作为赖氨酸组,另一组每瓶再注入等体积的去离子水作为对照,一并放入39℃培养箱培养16 h,并于培养的0,8和16 h取培养液测定GDH、γ-GT、GOT、GPT、UN和游离氨基酸。结果表明,底物中添加赖氨酸时,培养液中UN浓度可保持稳定,否则培养16 h后的UN浓度极显著升高;GDH活性在赖氨酸的降解代谢过程中随培养时间的延长而增加;培养时间的长短显著影响GDH、γ-GT活性及UN的含量(P≤0.05)。在不添加赖氨酸的条件下,培养16 h的γ-GT与16 h的GPT和UN均呈极显著正相关(R=0.95;R=0.92)。当底物中添加赖氨酸时,培养0 h的GDH与培养8 h的γ-GT显著相关(R=0.88);而培养8 h的γ-GT又与8 h的UN显著相关(R=0.86);培养0,8和16 h的赖氨酸浓度与培养0 h的GDH呈负相关,与培养8 h的GDH呈极显著负相关(R=-0.94)。对照组培养8和16 h的赖氨酸消化率分别为31.64%和63.59%,赖氨酸组培养8和16h的赖氨酸消化率则分别为49.24%和74.55%,均极显著高于对照组培养8 h的消化率。提示在氮源缺乏的条件下,瘤胃微生物可能通过γ-GT、GPT和GOT的共同作用增加尿素氮的积累以维持生长,瘤胃微生物的赖氨酸降解本质上属于酶解。 展开更多
关键词 成年山羊 瘤胃微生物 谷氨酸脱氢酶(gdh) y-谷氨酰转肽酶(y-GT) 谷草转氨酶(GOT) 谷丙转氨酶(GPT) 尿素氮(UN) 赖氨酸 消化率
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大豆氮代谢酶作用机理及锰水平对其影响研究进展 被引量:7
11
作者 祁倩倩 罗奥 +3 位作者 刘志生 崔洪秋 鲁巍 张玉先 《黑龙江八一农垦大学学报》 2008年第6期12-15,共4页
锰是植物生长所必需的微量元素,对作物的生长发育、产量和品质都有明显影响,其在植物氮代谢中所起的关键作用是产生这些影响的生理学原因之一。前人对这一领域的研究有些获得了长足进展,但也存在诸多空白。本文对锰对大豆氮代谢过程中... 锰是植物生长所必需的微量元素,对作物的生长发育、产量和品质都有明显影响,其在植物氮代谢中所起的关键作用是产生这些影响的生理学原因之一。前人对这一领域的研究有些获得了长足进展,但也存在诸多空白。本文对锰对大豆氮代谢过程中主要相关酶(硝酸还原酶NR、谷氨酰胺合成酶GS、谷氨酸脱氢酶GDH)的作用机理及锰水平对其活性影响的最新研究进展进行了综述。 展开更多
关键词 大豆 氮代谢 硝酸还原酶(NR) 谷氨酰胺合成酶(GS) 谷氨酸脱氢酶(gdh)
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