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汉麻仁多肽对高尿酸血症斑马鱼的降尿酸作用及其氨基酸序列分析 被引量：1
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作者 魏连会 董艳 +5 位作者 石杰 李国巍 张正海 姬妍茹 杨庆丽 潘静 《中国油脂》 北大核心 2025年第2期57-62,共6页
为促进汉麻仁多肽在功能食品及特医食品领域的应用,利用斑马鱼模型研究汉麻仁多肽的降尿酸作用及可能的机制,分析降尿酸活性肽组分的氨基酸序列。采用10mmol/L尿酸酶活性抑制剂氧嗪酸钾和50μmol/L尿酸合成前体黄嘌呤钠盐饲喂斑马鱼20h... 为促进汉麻仁多肽在功能食品及特医食品领域的应用,利用斑马鱼模型研究汉麻仁多肽的降尿酸作用及可能的机制,分析降尿酸活性肽组分的氨基酸序列。采用10mmol/L尿酸酶活性抑制剂氧嗪酸钾和50μmol/L尿酸合成前体黄嘌呤钠盐饲喂斑马鱼20h,建立斑马鱼高尿酸血症模型。以别嘌呤醇为阳性对照,以不同质量浓度的汉麻仁多肽饲喂斑马鱼,测定斑马鱼的尿酸荧光强度、次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶(HPRT1)和有机阴离子转运蛋白(OAT1)基因的mRNA表达,利用液相色谱-串联质谱技术对降尿酸活性肽组分氨基酸序列进行分析。结果表明:汉麻仁多肽能够通过上调HPRT1和OAT1基因表达,有效降低高尿酸斑马鱼的尿酸水平;汉麻仁多肽活性组分中丰度较高的8个峰对应的肽段分子质量分别为499.23、578.24、628.27、653.29、715.31、918.43、982.41、1128.49Da,其氨基酸序列分别为PGTPE、MPDDV、TTSYTG、TPHWN、NNGDSPL、DDFNPRR、NPHDEFQP、YHSYLCKTD。综上,汉麻仁多肽可作为功能性成分用于降尿酸相关功能食品和保健品的开发。 展开更多
关键词 汉麻仁多肽 斑马鱼 高尿酸血症 降尿酸 氨基酸序列
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神经酰胺代谢酶SGMS2对NDV复制和增殖的影响
2
作者 冯亦亦 代军 +6 位作者 谭磊 孙英杰 宋翠萍 廖瑛 丁铲 仇旭升 刘秀梵 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第2期146-155,共10页
鞘磷脂(SM)和神经酰胺(Cer)是新城疫病毒(NDV)囊膜的主要磷脂成分。鞘磷脂合成酶2(SGMS2)是SM合成调控酶。前期研究发现NDV感染的DF-1中鸡SGMS2基因显著上调,表明该变化与NDV感染有关。本研究通过克隆获得了鸡SGMS2基因,进行生物信息学... 鞘磷脂(SM)和神经酰胺(Cer)是新城疫病毒(NDV)囊膜的主要磷脂成分。鞘磷脂合成酶2(SGMS2)是SM合成调控酶。前期研究发现NDV感染的DF-1中鸡SGMS2基因显著上调,表明该变化与NDV感染有关。本研究通过克隆获得了鸡SGMS2基因,进行生物信息学分析发现:与人和鼠同源性分别为93.0%和92.4%;跨膜区在不同物种间高度保守,高达96.8%。通过qPCR检测细胞和组织中鸡SGMS2 mRNA表达情况,发现均处于恒定状态。NDV感染后,鸡SGMS2表达水平发生剧烈变动,病毒含量高的组织中,其表达量大幅下调。通过qPCR和Western blot检测转染pCMV6-FLAG-ch-SGMS2质粒的DF-1细胞,发现病毒NP的mRNA和蛋白水平显著下降,说明过量表达SGMS2抑制NDV的增殖作用。本研究为揭示鸡SGMS2蛋白功能奠定理论基础,也为阐明鸡SGMS2对NDV增殖的作用提供理论依据。 展开更多
关键词 鸡鞘磷脂合成酶2 基因克隆与表达 氨基酸序列分析 新城疫病毒
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1~30日龄中速型黄羽肉鸡在玉米-杂粕型低蛋白质饲粮下氨基酸限制性顺序和需要量模型的研究
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作者 黄冰 李智行 +4 位作者 向丰禺 谭大雁 范祥奇 张斐然 毛湘冰 《动物营养学报》 北大核心 2025年第6期3713-3727,共15页
本试验旨在采用氨基酸部分扣除法研究饲喂玉米-杂粕型低蛋白质饲粮时1~30日龄中速型黄羽肉鸡的氨基酸限制性顺序和需要量模型。选取1日龄中速型黄羽肉鸡母雏720只,随机分为6组,每组6个重复,每个重复20只鸡。对照组(NP组)饲喂正常蛋白质... 本试验旨在采用氨基酸部分扣除法研究饲喂玉米-杂粕型低蛋白质饲粮时1~30日龄中速型黄羽肉鸡的氨基酸限制性顺序和需要量模型。选取1日龄中速型黄羽肉鸡母雏720只,随机分为6组,每组6个重复,每个重复20只鸡。对照组(NP组)饲喂正常蛋白质饲粮;低蛋白质组(LP组)饲粮蛋白质水平较NP组饲粮降低2%,氨基酸水平与NP组饲粮相同;低蛋白质低赖氨酸组(LP-Lys组)、低蛋白质低蛋氨酸组(LP-Met组)、低蛋白质低苏氨酸组(LP-Thr组)和低蛋白质低异亮氨酸组(LP-Ile组)饲粮分别在LP组饲粮的基础上将赖氨酸(Lys)、蛋氨酸(Met)、苏氨酸(Thr)和异亮氨酸(Ile)的水平降低20%。试验期30 d。结果显示:1)不同蛋白质水平饲粮及低蛋白质氨基酸缺乏饲粮对黄羽肉鸡胴体品质和器官指数均无显著影响(P>0.05)。2)与NP组相比,LP组黄羽肉鸡的生长性能、空肠形态和空肠屏障功能相关基因的表达没有显著变化(P>0.05),血清尿素氮(UN)含量显著降低(P<0.05),血清免疫球蛋白A(IgA)含量及血清和空肠谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著升高(P<0.05)。3)与LP组相比,LP-Lys组、LP-Met组和LP-Thr组黄羽肉鸡平均日增重(ADG)显著降低(P<0.05),血清UN含量显著升高(P<0.05);LP-Lys组和LP-Met组黄羽肉鸡料重比(F/G)显著升高(P<0.05);LPLys组、LP-Met组、LP-Thr组和LP-Ile组黄羽肉鸡血清IgA含量显著降低(P<0.05);LP-Met组和LP-Thr组黄羽肉鸡血清GSH-Px活性显著降低(P<0.05);LP-Thr组黄羽肉鸡空肠隐窝深度显著增加(P<0.05),绒毛高度与隐窝深度比值(V/C)和封闭蛋白-1(Claudin-1)的mRNA相对表达量显著降低(P<0.05);LP-Lys组、LP-Thr组和LP-Ile组黄羽肉鸡空肠GSH-Px活性显著降低(P<0.05)。4)对于玉米-杂粕型低蛋白质饲粮,以F/G为评价指标,氨基酸限制性顺序为Lys>Met>Ile>Thr,Lys、Met、Thr、Ile的适宜比例为100∶37∶60∶60;以血清GSH-Px活性为评价指标,氨基酸限制性顺序为Met>Thr>Lys>Ile,Lys、Met、Thr、Ile的适宜比例为100∶69∶56∶44;以空肠V/C为评价指标,氨基酸限制性顺序为Thr>Ile>Met>Lys,Lys、Met、Thr、Ile的适宜比例为100∶39∶75∶70。综上所述,氨基酸平衡的玉米-杂粕型低蛋白质饲粮对1~30日龄中速型黄羽肉鸡(雌性)的生长性能、胴体品质、抗氧化能力和肠道健康均无负面作用,但当该饲粮中氨基酸缺乏时,会对肉鸡的生长性能、抗氧化能力和肠道健康造成不良影响;Lys、Met、Thr和Ile的限制性顺序和需要量模型因评价指标不同而有所差异。 展开更多
关键词 黄羽肉鸡 低蛋白质饲粮 氨基酸限制性顺序 氨基酸需要量模型
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不同处理方式对牡蛎降糖肽结构序列及消化特性的影响 被引量：1
4
作者 王华 苏小洁 +4 位作者 陈忠琴 曹文红 高加龙 朱国萍 林海生 《食品工业科技》 北大核心 2025年第13期55-64,共10页
本研究旨在探究醇沉和活性炭吸附处理方式对牡蛎降糖肽结构和消化特性的影响。采用醇沉和活性炭吸附处理牡蛎降糖肽,富集其支链氨基酸(Branched chain amino acids,BCAAs),利用氨基酸组成分析仪及超高效液相色谱/四极杆飞行时间质谱(Ult... 本研究旨在探究醇沉和活性炭吸附处理方式对牡蛎降糖肽结构和消化特性的影响。采用醇沉和活性炭吸附处理牡蛎降糖肽,富集其支链氨基酸(Branched chain amino acids,BCAAs),利用氨基酸组成分析仪及超高效液相色谱/四极杆飞行时间质谱(Ultra-Performance Liquid Chromatography/Quadrupole Time-of-Flight-Mass Spectrometry,UPLC-QTOF-MS)分析其氨基酸组成及肽谱序列。通过体外模拟消化模型比较牡蛎降糖肽胃肠消化前后的体外降糖活性(α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶和二肽基肽酶Ⅳ(Dipeptidyl PeptidaseⅣ,DPP-Ⅳ)抑制活性)和肽谱序列特征,探究其消化特性。结果表明,与未经过处理的牡蛎降糖肽相比,醇沉和活性炭吸附处理后牡蛎降糖肽的BCAAs含量(从55.30 mg/g提高至122.87 mg/g)及比例(从15.78%升高至18.77%)显著提高(P<0.05),且其肽链N端位置富含BCAAs,脯氨酸靠近C端,具有降糖肽的典型结构模式。经过胃肠消化后,牡蛎降糖肽对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制活性均显著下降(P<0.05),但其对DPP-Ⅳ的抑制活性较稳定,同时醇沉和活性炭吸附处理提高了牡蛎降糖肽的α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制活性保留率。研究表明,醇沉和活性炭吸附处理可有效提高牡蛎降糖肽中BCAAs含量,使其肽链N端富含BCAAs,此特征有利于提高其消化后的降糖活性保留率,尤其牡蛎降糖肽中DPP-IV抑制肽段具有较好的消化稳定性。 展开更多
关键词 牡蛎降糖肽 醇沉 活性炭吸附 支链氨基酸 结构序列 消化特性
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大豆花叶病毒山西半夏分离物全基因组序列分析
5
作者 崔丽艳 杨佼丽 +4 位作者 柳建丽 侯钥 郭成英 王德富 牛颜冰 《山西农业科学》 2025年第4期109-120,共12页
大豆花叶病毒(SMV)在大豆生产中会造成产量和品质的严重下降,具有传播广泛和致病性强的特点,但宿主范围相对较窄,以豆科植物为主。近年来研究却表明,SMV能够跨科侵染天南星科植物半夏(Pinellia ternata)。为明确侵染山西半夏的大豆花叶... 大豆花叶病毒(SMV)在大豆生产中会造成产量和品质的严重下降,具有传播广泛和致病性强的特点,但宿主范围相对较窄,以豆科植物为主。近年来研究却表明,SMV能够跨科侵染天南星科植物半夏(Pinellia ternata)。为明确侵染山西半夏的大豆花叶病毒分离物(SMV-SXBX)的基因组特征,采用生物信息学软件对侵染山西半夏的SMV-SXBX进行了序列相似性分析、系统进化分析、氨基酸功能位点分析和重组分析。序列相似性分析结果表明,SMV-SXBX与SMV-Hangzhou分离物(GenBank登录号:AJ507388.2)的相似性最高,核苷酸序列相似性为92.09%,氨基酸序列相似性为95.91%;系统进化分析结果显示,SMV-SXBX与SMVHangzhou分离物聚为一簇,亲缘关系最近。在SMV-SXBX基因组中,P1蛋白的序列差异性最大,核苷酸和氨基酸序列差异性分别为34.93%和36.28%。突变与氨基酸功能分析结果表明,SMV-SXBX氨基酸序列中存在多个氨基酸突变位点;重组分析结果表明,SMV-SXBX在3 056—6 895 bp处有重组事件的发生,主要亲本为SMV-HZ1分离物(GenBank登录号:AJ628750.1),次要亲本为SMV-XFQ008分离物(GenBank登录号:KP710873.1)。综上研究结果,明确了SMV-SXBX的基因组特征,其发生的氨基酸突变及基因重组可能是导致大豆花叶病毒跨科侵染半夏的原因之一。 展开更多
关键词 大豆花叶病毒 半夏 全序列分析 系统进化分析 氨基酸功能位点分析 重组分析
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一株鹅源细小病毒的分离鉴定与遗传进化分析
6
作者 彭珊 王超 +2 位作者 朱婉君 张济培 陈济铛 《广东畜牧兽医科技》 2025年第4期94-104,共11页
小鹅瘟是由鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)引发的传染病,20日龄内雏鹅具有高致死性,而青年鹅常表现为隐性感染,易被忽视。2024年11月,广东揭阳某地养鹅场青年鹅群(56日龄)急性发病,为明确病因,针对送检的病死鹅进行剖检并无菌采集肝... 小鹅瘟是由鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)引发的传染病,20日龄内雏鹅具有高致死性,而青年鹅常表现为隐性感染,易被忽视。2024年11月,广东揭阳某地养鹅场青年鹅群(56日龄)急性发病,为明确病因,针对送检的病死鹅进行剖检并无菌采集肝、脾和肠组织样本,通过PCR/RT-PCR方法对常见鹅病毒性传染病病原核酸进行检测。将GPV阳性组织样本研磨处理后接种至鹅胚,随后对PCR阳性尿囊液样本进行全基因组克隆测序,并基于获得的序列数据开展系统发育与分子进化分析。结果显示,送检组织样品中鹅细小病毒核酸呈阳性,鹅圆环病毒(Goose circovirus,GoCV)、鹅星状病毒(Goose astrovirus,GoAstV)、新城疫病毒(Newcastle Disease Virus,NDV)和坦布苏病毒(Tembusu virus,TMUV)核酸均为阴性。阳性病料组织悬液接种鹅胚后,鹅胚死亡且胚体严重出血,鹅胚尿囊液PCR检测为GPV阳性。测序结果显示,毒株基因组全长为5028 bp,由ITR区域和NS、VP基因构成,将该毒株命名为GPV/GD/3121/2024株。相似性分析显示,该分离株与DY16株的NS1和VP1基因相似性最高,分别达到99.4%和95.9%。GPV/GD/3121/2024株与国内近年GPV分离株(DY16株、RC16株和HB-2019株)全基因序列相似性高达97.5%。基于全基因组序列、非结构蛋白NS1和结构蛋白VP1序列的遗传演化分析均显示,分离株与欧洲疫苗株(VG32/1)、中国内地疫苗株(GDaGPV、SYG61v)和中国台湾疫苗株(82-0321V)均同属一个大分支,遗传关系较近。此外,与经典GPV毒株相比,GPV/GD/3121/2024株VP1基因含有3个特有的碱基突变位点,分别为A2496T、G2515C、A2772G,这些突变导致VP1结构蛋白发生V38L、S178T和Y491H氨基酸位点改变。该研究确定了该场青年鹅发病致死系感染GPV所致,并对毒株进行分离鉴定和遗传进化分析,同时简要比较了国内GPV的分子特征,为该病毒的生物学特性研究和科学防控提供了参考信息。 展开更多
关键词 鹅细小病毒 全基因 遗传进化分析 氨基酸序列比对
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非洲猪瘟病毒p30蛋白氨基酸序列分段表达及反应原性分析
7
作者 周俊明 倪艳秀 +5 位作者 范宝超 祝昊丹 朱雪蛟 王丹丹 胡屹屹 李彬 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第10期1875-1881,共7页
为比较非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p30蛋白氨基酸序列中不同片段的反应原性,探究p30蛋白氨基酸序列中可能的抗原优势片段。本研究通过PCR、克隆技术将p30蛋白氨基酸序列中不同片段的编码基因分别插入表达质粒pET32a,... 为比较非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p30蛋白氨基酸序列中不同片段的反应原性,探究p30蛋白氨基酸序列中可能的抗原优势片段。本研究通过PCR、克隆技术将p30蛋白氨基酸序列中不同片段的编码基因分别插入表达质粒pET32a,经IPTG诱导、Ni柱纯化、透析后,获得p30蛋白氨基酸序列中8~101 aa片段(P-1#)、58~101 aa片段(P-2#)、101~158 aa片段(P-3#)、8~194 aa片段(P-4#),用酶联免疫吸附试验(ELISA)分析p30蛋白氨基酸序列中不同片段与p30蛋白免疫兔血清和ASFV阳性猪血清的反应原性。结果显示,上述片段均获得诱导表达及纯化,表达形式有可溶性表达(P-1#、P-3#)和包涵体表达(P-2#、P-4#)。各片段以1.0 mg/L包被时,p30免疫兔血清与p30蛋白氨基酸序列中4种片段均能发生免疫反应,ASFV阳性猪血清与P-4#、P-1#反应较佳,与P-3#反应中等,与P-2#反应最弱。综上,p30蛋白氨基酸序列中不同片段反应原性的差异为认识p30抗原优势区域提供了数据,这将有助于非洲猪瘟血清学诊断抗原的科学筛选。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 p30蛋白 氨基酸序列片段 反应原性
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低氮处理对玉米早期发育胚乳中氨基酸水平和转录组的影响 被引量：5
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作者 潘玉昕 赵涵 宁丽华 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1356-1369,共14页
氮素是影响玉米生长发育、产量和籽粒品质形成所必需的营养元素。为挖掘早期发育的玉米胚乳响应低氮胁迫的关键基因,揭示玉米胚乳抵御低氮胁迫的生理响应及分子机制,本研究在低氮和足氮处理下,对授粉后第6天的自交系B73玉米胚乳进行氨... 氮素是影响玉米生长发育、产量和籽粒品质形成所必需的营养元素。为挖掘早期发育的玉米胚乳响应低氮胁迫的关键基因,揭示玉米胚乳抵御低氮胁迫的生理响应及分子机制,本研究在低氮和足氮处理下,对授粉后第6天的自交系B73玉米胚乳进行氨基酸含量、氨基酸衍生物含量分析和转录组测序。生理测定表明,低氮胁迫下,玉米胚乳中10种氨基酸或氨基酸衍生物含量升高,其中苏氨酸、β-氨基异丁酸、组氨酸、β-丙氨酸、赖氨酸含量升高程度最大,其升高范围介于71.1%~153.1%;而其余21种氨基酸或氨基酸衍生物含量降低,其中鸟氨酸、胱氨酸、天冬酰胺、苯丙氨酸、α-氨基丁酸含量下降程度最大,其下降程度范围介于51.6%~65.8%。转录组测序结果表明,与足氮处理相比,低氮胁迫下玉米胚乳中鉴定到3185个显著上调和2612个显著下调的差异表达基因。进一步检测到参与氮代谢途径和氰基氨基酸代谢途径的差异表达基因分别为12和9个,AP2/ERF-ERF、b ZIP、WRKY差异表达转录因子家族成员分别为20、10和21个。这些候选基因可能是玉米胚乳抵御低氮胁迫响应的重要基因资源,其为玉米胚乳应答低氮胁迫的分子机制及耐低氮玉米新品种培育奠定基础。 展开更多
关键词 玉米 低氮胁迫 氨基酸及其氨基酸衍生物 转录组测序 氮代谢 氰基氨基酸代谢 转录因子
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三角梅品种‘绿叶樱花’4,5-多巴双加氧酶开放阅读框克隆与分析 被引量：1
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作者 李建运 姚国琼 +4 位作者 王飞 朱文 李子涵 孙正海 辛培尧 《中南林业科技大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期153-164,共12页
【目的】多巴双加氧酶(4,5-DOPA dioxygenase extradiol)是甜菜色素生物合成途径的关键酶之一,能催化多巴分解形成甜菜醛氨酸,也是最可能与三角梅最终的花色形成相关的酶蛋白。克隆三角梅多巴双加氧酶基因的开放阅读框(ORF),对其编码的... 【目的】多巴双加氧酶(4,5-DOPA dioxygenase extradiol)是甜菜色素生物合成途径的关键酶之一,能催化多巴分解形成甜菜醛氨酸,也是最可能与三角梅最终的花色形成相关的酶蛋白。克隆三角梅多巴双加氧酶基因的开放阅读框(ORF),对其编码的氨基酸序列进行生物信息学分析,探讨三角梅花色变化机理和甜菜色素代谢途径。【方法】以三角梅品种‘绿叶樱花’的苞片为材料,提取其RNA,并进行逆转录,之后快速转化完成基因的克隆和基因PCR扩增,最后对其编码的氨基酸序列进行保守区预测、信号肽分析、磷酸化位点预测、跨膜信号预测、同源性比对、构建系统进化树以及二、三级结构预测,研究其氨基酸序列的结构和功能。【结果】‘绿叶樱花’的多巴双加氧酶基因ORF序列长801 bp,编码266个氨基酸。ORF序列所编码的氨基酸序列具有cd07363保守结构域,其编码蛋白是一种稳定的酸性亲水蛋白,分子量为29 734.76 kD,等电点为6.26,二级结构包含了11个α螺旋、7个β转角、20个β折叠结构,具有4个磷酸化位点,没有跨膜结构,可能只在细胞质内发挥作用。该序列还与66个序列高度同源,与同科的‘金心双色’、胶果木和梭房叶子花有着相同的进化分支,符合自然进化规律。【结论】‘绿叶樱花’多巴双加氧酶开放阅读框ORF的氨基酸序列属于第三类雌二醇双加氧基因家族,具有该基因家族具有的保守氨基酸序列,表明多巴双加氧酶基因在生成甜菜色素植物中具有独特的保守性,且属于稳定、酸性的亲水蛋白,没有跨膜结构,可能只在细胞质内发挥作用。三角梅中控制花色变化的主要是甜菜色素,研究三角梅甜菜色素合成途径中的关键酶,解析其甜菜色素的合成代谢机制,可为三角梅花色形成机制提供理论参考,有望在今后的工作中,利用转基因手段丰富三角梅花色。 展开更多
关键词 三角梅 多巴双加氧酶 开放阅读框 氨基酸序列 克隆
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青花菜多聚半乳糖醛酸酶基因BoPGX3的克隆及盐胁迫下的表达特征分析
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作者 唐征 昂海燕 +3 位作者 裴徐梨 杨雅蓉 莫丽玲 荆赞革 《蔬菜》 2024年第11期29-35,共7页
多聚半乳糖醛酸酶(PG)可降解细胞壁,从而降低植物抵抗能力。为了解青花菜PG基因响应盐胁迫的分子机制,以青花菜自交系‘WN12-95B’为试验材料,提取青花菜的总RNA并合成cDNA,克隆PG基因,并检测其在盐胁迫下的表达特征。结果表明:青花菜Bo... 多聚半乳糖醛酸酶(PG)可降解细胞壁,从而降低植物抵抗能力。为了解青花菜PG基因响应盐胁迫的分子机制,以青花菜自交系‘WN12-95B’为试验材料,提取青花菜的总RNA并合成cDNA,克隆PG基因,并检测其在盐胁迫下的表达特征。结果表明:青花菜BoPGX3基因序列全长1476 bp,推导编码491个氨基酸,相对分子量为53.44 kD,等电点为5.84。系统进化分析表明,青花菜BoPGX3与羽衣甘蓝、甘蓝、白菜、萝卜和花椰菜的PG基因亲缘关系较近。荧光定量PCR结果显示,BoPGX3基因受盐胁迫诱导表达,处理3 h后相对表达量达到初始表达量的2.9倍,处理12 h时相对表达量下降至初始表达量的1.4倍。综上,青花菜BoPGX3基因参与了盐胁迫的响应,并可能在此过程中发挥着重要的作用。 展开更多
关键词 青花菜 多聚半乳糖醛酸酶 基因克隆 盐胁迫 表达特征 亲水性蛋白 氨基酸序列 非生物胁迫
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黑豆黄嘌呤氧化酶抑制肽的制备及体外降尿酸活性 被引量：2
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作者 孙菁茹 孙铭爽 +3 位作者 吕文庆 曹荣安 刁静静 王长远 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第23期72-80,共9页
以黑豆蛋白为原料,以黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)抑制率和水解度为指标筛选最佳蛋白酶和酶解工艺参数,在此基础上采用膜分离技术对黑豆蛋白酶解产物进行分离,获得不同分级的酶解产物,根据XOD抑制活性确定黑豆蛋白酶解产物的分... 以黑豆蛋白为原料,以黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)抑制率和水解度为指标筛选最佳蛋白酶和酶解工艺参数,在此基础上采用膜分离技术对黑豆蛋白酶解产物进行分离,获得不同分级的酶解产物,根据XOD抑制活性确定黑豆蛋白酶解产物的分子质量范围,并对其氨基酸组成、分子质量分布、肽序列以及活性稳定性进行分析。结果表明,黑豆XOD抑制肽的最佳酶解工艺为:碱性蛋白酶加酶量1.5%、酶解时间4 h、酶解温度50℃、pH 9.0、底物质量分数3%,此条件下黑豆蛋白酶解物的XOD抑制率和水解度分别为73.61%和21.29%。超滤产物中F3组分的XOD抑制活性最高(半抑制浓度为8.76 mg/mL),分子质量≤1500 Da,该组分的疏水性氨基酸和碱性氨基酸占氨基酸总量的56.66%和20.16%;该组分在高温热处理、胃、胰蛋白酶消化作用下均具有良好的稳定性。液相色谱-串联质谱法鉴定出F3组分中有18条肽段,平均分子质量主要集中在500~1400 Da。该系列肽段N-端和C-端疏水性氨基酸分别占44.86%和33.14%,碱性氨基酸分别占33.57%和39.29%。该研究结果可为黑豆蛋白的高值化利用提供一定的基础理论依据。 展开更多
关键词 黑豆蛋白 酶解工艺 黄嘌呤氧化酶抑制肽 氨基酸组成 肽序列
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工业大麻CsIAA1基因克隆及表达分析 被引量：1
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作者 杨晓娟 阳锡涛 +6 位作者 苏雨娟 黄彤 刘婕 高泽昕 栾明宝 潘根 黄思齐 《中国麻业科学》 2024年第4期213-221,228,共10页
研究以工业大麻云麻7号(Y7)为材料,克隆CsIAA1(Auxin-responsive protein IAA1)基因,通过生物信息学分析CsIAA1序列特征,经RT-qPCR研究CsIAA1组织特异性表达模式;结果表明,CsIAA1基因的CDS全长为621 bp,编码了206个氨基酸,含AUX_IAA保... 研究以工业大麻云麻7号(Y7)为材料,克隆CsIAA1(Auxin-responsive protein IAA1)基因,通过生物信息学分析CsIAA1序列特征,经RT-qPCR研究CsIAA1组织特异性表达模式;结果表明,CsIAA1基因的CDS全长为621 bp,编码了206个氨基酸,含AUX_IAA保守结构域,属于不稳定蛋白;系统进化分析可知,工业大麻CsIAA1与糙叶山黄麻、东山麻等亲缘关系较近;通过烟草叶片瞬时表达和共聚焦试验得知,CsIAA1基因定位在细胞核中;通过RT-qPCR分析发现,在外源IAA处理12 h内,CsIAA1在1 h时快速响应生长素的处理,表达量最高;在工业大麻雄蕊不同发育阶段中,发育初期表达量比发育期和盛花期要高,且随着发育的进行呈逐渐下降趋势,推测CsIAA1参与调控工业大麻雄蕊发育;该研究从工业大麻中克隆出生长素响应基因CsIAA1并对其进行生信和表达分析,为后续探究工业大麻性别发育机制奠定了研究基础. 展开更多
关键词 工业大麻 CsIAA1 氨基酸序列 保守结构域 表达量
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史氏鲟鱼精肽的制备、体外抗炎活性评价和结构表征
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作者 刘文博 赵青 +2 位作者 李海蓝 廖涛 鉏晓艳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第21期112-120,共9页
旨在研究史氏鲟(Acipenser schrenckii)鱼精肽(sturgeon milt peptide,SMP)的抗炎潜力及其分子特性。首先对鲟鱼精蛋白进行提取、酶解、纯化得到SMP,评估了其对一氧化氮(NO)和牛血清白蛋白变性的抑制效果。然后利用现代波谱技术测定其... 旨在研究史氏鲟(Acipenser schrenckii)鱼精肽(sturgeon milt peptide,SMP)的抗炎潜力及其分子特性。首先对鲟鱼精蛋白进行提取、酶解、纯化得到SMP,评估了其对一氧化氮(NO)和牛血清白蛋白变性的抑制效果。然后利用现代波谱技术测定其分子质量、二级结构、晶体结构、质子峰分布和氨基酸序列等,并基于此预测氨基酸序列的抗炎活性。结果显示,在10 mg/mL质量浓度下,SMP对NO和牛血清蛋白变性的抑制率分别为45.33%和60.34%,显著高于鲟鱼精蛋白(P<0.05)。SMP中碱性和疏水性氨基酸含量分别占37.45%和36.77%,其中精氨酸占比最高(16.28%)。SMP分子质量集中于206~1040 Da之间,主要呈现不规则的无定形结构,水溶液状态下暴露更多的疏水性基团。SMP中含有较多的短肽,包括MPY、YWH、YPY和VPPL等,这些肽序列具有抗炎特性。综上,SMP具有潜在的抗炎活性,是一种有前途的天然抗炎肽来源,具有进一步开发和应用的潜力。 展开更多
关键词 鲟鱼精肽 抗炎活性 结构表征 氨基酸序列
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菜籽饼超微粉酶解制备抗氧化活性肽 被引量：2
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作者 翟晓娜 胡龙彪 +6 位作者 李媛媛 梁亮 胡雪芳 张志民 班世栋 王萍 裴海生 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第4期284-291,共8页
为探究菜籽饼超微粉直接酶解制备抗氧化肽技术,该研究以菜籽饼超微粉为原料,利用碱性蛋白酶、风味蛋白酶对其进行酶解,通过测定2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)自由基清除能力、1,1-二苯基-2-苦基肼自由基清除能力和总抗... 为探究菜籽饼超微粉直接酶解制备抗氧化肽技术,该研究以菜籽饼超微粉为原料,利用碱性蛋白酶、风味蛋白酶对其进行酶解,通过测定2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)自由基清除能力、1,1-二苯基-2-苦基肼自由基清除能力和总抗氧化能力表征酶解产物体抗氧化活性,使用膜分离、Sephadex G-15凝胶层析对酶解产物进行分离纯化,利用高效液相色谱-串联质谱联用技术分析鉴定抗氧化活性组分的氨基酸序列。结果表明,风味蛋白酶酶解产物的肽含量较高,并以分子量小于1 kDa肽段为主,碱性蛋白酶解产物以5~10 kDa肽段为主,但同等浓度下(1 mg/mL)的碱性蛋白酶酶解产物抗氧化活性较高;膜分离后,同种酶解产物中低分子量(<1 kDa)组分具有更好的ABTS自由基清除能力和总抗氧化活性;通过凝胶层析分离纯化得到的高抗氧化活性组分J3经氨基酸序列鉴定,结合PeptideRanker生物活性预测筛选得到5个肽段,肽段的N-端均为苯丙氨酸且肽段中疏水性氨基酸的含量占比达50%以上。该结果可为深入开发菜籽饼蛋白资源提供理论参考。 展开更多
关键词 酶 膜 菜籽饼 风味蛋白酶 碱性蛋白酶 膜分离 氨基酸序列 抗氧化活性
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尖吻蝮蛇血凝酶N末端序列测定及其止血活性分析 被引量：33
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作者 郑颖 沈居仁 +3 位作者 张富强 邱薇 冯子良 范泉水 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期365-367,共3页
目的:测定尖吻蝮蛇血凝酶N末端氨基酸序列,并对其止血活性进行分析。方法:采用Edm an法测定尖吻蝮蛇血凝酶N末端氨基酸序列,采用毛细管电泳估算其等电点,根据纤维蛋白出现时间和全血凝时间研究其止血活性。结果:尖吻蝮蛇血凝酶N末端氨... 目的:测定尖吻蝮蛇血凝酶N末端氨基酸序列,并对其止血活性进行分析。方法:采用Edm an法测定尖吻蝮蛇血凝酶N末端氨基酸序列,采用毛细管电泳估算其等电点,根据纤维蛋白出现时间和全血凝时间研究其止血活性。结果:尖吻蝮蛇血凝酶N末端氨基酸序列为VIGGNECDTNEEHFL,等电点为6.59,使用后能明显缩短纤维蛋白出现时间和全血凝时间。结论:尖吻蝮蛇血凝酶具有较强的止血活性。 展开更多
关键词 尖吻蝮蛇 血凝酶 氨基酸序列 止血活性
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开食料中赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸和色氨酸对断奶羔羊生长性能、氮利用率和血清指标的影响 被引量：25
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作者 李雪玲 张乃锋 +5 位作者 马涛 陶大勇 柴建民 王玉荣 张帆 刁其玉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期678-689,共12页
本试验旨在利用氨基酸部分扣除法研究开食料中赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸和色氨酸对断奶后羔羊生长性能、氮利用率和血清学指标的影响,以期确立氨基酸限制性顺序和比例。选取100只50日龄、平均体重为11.00kg的健康湖羊断奶公羔羊,随机分成5... 本试验旨在利用氨基酸部分扣除法研究开食料中赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸和色氨酸对断奶后羔羊生长性能、氮利用率和血清学指标的影响,以期确立氨基酸限制性顺序和比例。选取100只50日龄、平均体重为11.00kg的健康湖羊断奶公羔羊,随机分成5组,每组4个重复,每个重复5只羊。采用单因素试验设计,对照组(PC)饲喂氨基酸平衡的开食料,其赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸和色氨酸含量分别为1.16%、0.38%、0.58%和0.16%,4个试验组依次在PC组的基础上分别扣除30%赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸和色氨酸(PD-Lys、PD-Met、PD-Thr和PD-Trp组)。预试期为10d,正试期为60d。分别于羔羊80~90和110~120日龄进行两期氮平衡试验。结果表明:1)PCMet组羔羊120日龄体重、日增重和饲料转化率显著低于PC、PD-Thr和PD-Trp组(P<0.05)。2)80~90日龄PD-Lys和PD-Met组尿N排放量显著高于PC组(P<0.05),PD-Met组N沉积量、N沉积率和N表观生物学价值显著低于PC组(P<0.05),110~120日龄PD-Met组N沉积量、N沉积率、N表观消化率和N表观生物学价值显著低于PC组(P<0.05)。3)以最大NR为衡量指标时,80~90和110~120日龄两阶段的限制性氨基酸顺序为:Met>Lys>Thr>Trp和Met>Lys>Trp>Thr。获得最大NR时Lys、Met、Thr和Trp 4种氨基酸模型分别为100∶37∶45∶12和100∶41∶39∶12。4)90日龄PD-Met组葡萄糖显著高于PC组(P<0.05),120日龄PD-Met组总蛋白、球蛋白和胆固醇显著低于PC组(P<0.05)。综上所述,60~120日龄断奶羔羊开食料中赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸和色氨酸的适宜比例为100∶(37~41)∶(39~45)∶12,限制性氨基酸顺序分别为Met>Lys>Thr>Trp(80~90d)和Met>Lys>Trp>Thr(110~120d)。 展开更多
关键词 湖羊 早期羔羊 氨基酸 模型 限制性顺序
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抗氧化肽的构效关系研究进展 被引量：55
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作者 张晖 唐文婷 +2 位作者 王立 钱海峰 齐希光 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期673-679,共7页
综述了不同来源抗氧化肽的氨基酸组成、序列、可能的活性位点和抗氧化机制,以及目前主要的抗氧化肽构效关系研究方法。
关键词 抗氧化肽 氨基酸组成 序列 活性位点 构效关系
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ACE抑制肽构效关系研究进展 被引量：35
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作者 王晓丹 薛璐 +3 位作者 胡志和 张琦 李艳军 夏磊 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第5期305-310,共6页
血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制肽是一类从食源性蛋白质中分离得到的具有降高血压活性的多肽。由于其降血压效果好,而且没有降压药物的毒副作用从而引起了广泛关注。近年来,ACE抑制肽的构效关系研究成为研究... 血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制肽是一类从食源性蛋白质中分离得到的具有降高血压活性的多肽。由于其降血压效果好,而且没有降压药物的毒副作用从而引起了广泛关注。近年来,ACE抑制肽的构效关系研究成为研究重点。结构生物信息学研究表明,ACE抑制肽的ACE抑制能力不仅与其分子质量有关,而且与其氨基酸序列以及其立体空间构象之间存在高度相关性。ACE抑制肽的抑制类型与ACE抑制活性、构效关系也存在一定相关性。对ACE抑制肽构效关系进行深入研究将有助于指导开发高活性的功能性食品及降血压药物。 展开更多
关键词 ACE抑制肽 构效关系 氨基酸序列
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伪狂犬病毒上海株糖蛋白G (gG)基因的克隆及序列分析 被引量：7
19
作者 黄伟坚 姜焱 +3 位作者 陈德胜 芦银华 张雪莲 陈溥言 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期107-110,共4页
应用PCR方法从PRVSH (上海株 )病毒培养物扩增了gG基因 ,克隆入 pcDNA3质粒 ,并进行了序列测定。结果表明 ,扩增的 gG基因片段长 1719bp ,包含一个 14 91bp的开放阅读框 (ORF) ,在起始密码子上游有TATAAAA盒 ,在终止密码子下游有AATAAA... 应用PCR方法从PRVSH (上海株 )病毒培养物扩增了gG基因 ,克隆入 pcDNA3质粒 ,并进行了序列测定。结果表明 ,扩增的 gG基因片段长 1719bp ,包含一个 14 91bp的开放阅读框 (ORF) ,在起始密码子上游有TATAAAA盒 ,在终止密码子下游有AATAAA的 poly (A)尾 ,编码由 4 96个氨基酸组成的蛋白质。与Rice株相应的gG片段相比 ,核苷酸序列同源性达 97 1%。但推导的氨基酸序列同源性仅有 87 6 % ,主要是在编码区内插入和缺失核苷酸 ,出现了突变和移码 ,导致氨基酸序列同源性降低。gG具有膜蛋白的结构特点。 展开更多
关键词 伪狂犬病毒 上海株 糖蛋白G 序列分析 gG基因 PCR扩增 核苷酸序列 氨基酸序列 基因克隆
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中药决明子蛋白质的提取分离及部分一级结构的测定 被引量：15
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作者 李续娥 杨水云 赵文明 《西安交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第7期764-767,共4页
决明子 (CassiaobtusifoliaL)的蛋白质含量比较丰富 ,其中含有人体必需的各种氨基酸 .通过十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS -PAGE)分析的结果表明 ,决明子非还原态蛋白质主要是由相对分子质量 (Mr)为 4 2、4 0和 38kd的蛋白质... 决明子 (CassiaobtusifoliaL)的蛋白质含量比较丰富 ,其中含有人体必需的各种氨基酸 .通过十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS -PAGE)分析的结果表明 ,决明子非还原态蛋白质主要是由相对分子质量 (Mr)为 4 2、4 0和 38kd的蛋白质组成 ,还原态主要由Mr 为 2 4和 16.5kd的两条肽链组成 .采用硫酸铵盐析分级法提取蛋白质的结果表明 ,当硫酸铵饱和度为 4 0 %～ 55%时 ,所提取的蛋白质 (P55)得率最高 .对由P55分离纯化所得的主要组分PS 的N端部分进行测序及同源分析 ,结果显示该序列与人体载脂蛋白B有一些相关性 ,并提示决明子蛋白质或有可能通过参与体内脂质的代谢而起到降脂的作用 . 展开更多
关键词 中药 决明子 蛋白质 分离提取 一级结构 同源性 测定
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