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牙鲆mstn基因SNPs位点多态性与生长性状的关联分析
1
作者 李兵部 王桂兴 +9 位作者 张晓彦 刘玉峰 何忠伟 曹巍 任建功 任玉芹 张祎桐 伞利择 王玉芬 侯吉伦 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期119-128,共10页
为研究牙鲆(Paralichthys olivaceus)肌肉生长抑制基因(mstn)多态性,开发其分子辅助育种新标记,采用重测序方法对120尾牙鲆(3个双克隆杂交家系:60尾;3个雌核发育家系:60尾)的mstn基因进行单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism... 为研究牙鲆(Paralichthys olivaceus)肌肉生长抑制基因(mstn)多态性,开发其分子辅助育种新标记,采用重测序方法对120尾牙鲆(3个双克隆杂交家系:60尾;3个雌核发育家系:60尾)的mstn基因进行单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)位点筛选,并对不同基因型个体的生长性状进行多重比较及SNP标记验证。结果显示,共检测到7个SNPs位点,均为颠换型突变;外显子区3个(Exonl 1:G2063A;Exonl 3:C3883T,C4009A),为同义突变;内含子区3个(Intron 1:A2444T;Intron 2:T3816C,A3832C);3'端非编码区1个(3'UTR:C4564A)。SNPs与生长性状关联分析结果表明,A3832C和C4564A标记位点与牙鲆体质量、体长、体高等生长性状显著相关(P<0.05),其中A3832C位点AA基因型和C4564A位点AC基因型在生长上表现出优势,A3832C位点CC和C4564A位点AA、CC基因型在生长上表现出劣势,其他5个SNPs位点对牙鲆生长性状影响不显著(P>0.05)。将A3832C和C4564A标记位点在牙鲆生长快速群体(F:60尾)和生长缓慢群体(S:60尾)中验证,验证结果与多重比对结果一致,表明2个SNPs位点具有较高的稳定性。综上所述,研究筛选出了牙鲆mstn基因中与生长性状显著相关的A3832C和C4564A两个标记位点,为牙鲆分子辅助育种提供了理论参考。 展开更多
关键词 牙鲆 肌肉生长抑制基因 单核苷酸多态性 生长性状
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MSTN基因内含子2多态性与山羊体重性状相关研究 被引量：17
2
作者 刘铮铸 李祥龙 +2 位作者 巩元芳 靳晓敏 冯敏山 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期745-748,共4页
以波尔山羊以及波尔山羊与唐山奶山羊的杂交后代共计102只山羊为材料,根据山羊MSTN基因序列(GenBank登录号:DQ167575)设计一对引物,用PCR-RFLP法进行多态性分析。对该片段测序发现共有2处突变。对突变位点产生的不同基因型与体重进行分... 以波尔山羊以及波尔山羊与唐山奶山羊的杂交后代共计102只山羊为材料,根据山羊MSTN基因序列(GenBank登录号:DQ167575)设计一对引物,用PCR-RFLP法进行多态性分析。对该片段测序发现共有2处突变。对突变位点产生的不同基因型与体重进行分析表明:AA型个体的断乳重显著高于BB型和AB型(P<0 05)。CC型个体的初生重显著高于CD型(P<0 05)。由此初步推断MSTN基因可能是影响山羊体重性状的主基因或与主基因相连锁,可以用该位点对山羊体重性状进行标记辅助选择。 展开更多
关键词 山羊 mstn 遗传多态性 RFLP 体重
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干扰MSTN对绵羊成肌细胞增殖分化及相关基因表达的影响 被引量：16
3
作者 王红娜 孙洪新 +3 位作者 张英杰 刘月琴 谷振慧 史秀芬 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期46-54,共9页
旨在探讨MSTN基因对绵羊成肌细胞增殖和分化的作用及相关机制,进一步揭示MSTN在绵羊成肌细胞中的生物学功能。本研究利用重组腺病毒介导shRNA干扰绵羊成肌细胞内源性MSTN基因表达,通过CCK-8法检测成肌细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞... 旨在探讨MSTN基因对绵羊成肌细胞增殖和分化的作用及相关机制,进一步揭示MSTN在绵羊成肌细胞中的生物学功能。本研究利用重组腺病毒介导shRNA干扰绵羊成肌细胞内源性MSTN基因表达,通过CCK-8法检测成肌细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期变化,qRT-PCR检测p21基因表达。成肌细胞诱导分化后利用免疫细胞化学技术检测肌管的形成情况,统计细胞融合率,qRT-PCR检测诱导48、72、96h后MyoD、MyoG、Myf5、Myf6和HACD1基因的表达量变化。结果发现,干扰MSTN后成肌细胞的增殖受到抑制,细胞周期停滞在G0/G1期,并且p21的表达呈上升趋势。在对成肌细胞分化作用的研究中,发现干扰组与阴性对照组相比,诱导48h4个生肌调节因子的表达量均呈下降趋势,MyoG基因表达显著下调(P<0.05);诱导72h干扰组成肌细胞融合率极显著高于阴性对照组(P<0.01),Myf5和Myf6基因表达量极显著降低(P<0.01),MyoD基因表达量升高不显著(P>0.05),MyoG基因表达量极显著增加(P<0.01),诱导96h,Myf5基因表达量显著降低(P<0.05),MyoD基因表达量降低不显著(P>0.05),MyoG基因表达量极显著降低(P<0.01),Myf6基因表达量升高不显著(P>0.05)。另外诱导72h,HACD1基因的表达量在干扰组中显著高于阴性对照组(P<0.05),诱导48和96h无显著变化。研究表明,干扰MSTN表达对成肌细胞的增殖有抑制作用,对分化有促进作用,HACD1基因与成肌细胞融合相关。 展开更多
关键词 绵羊 mstn 成肌细胞 增殖 分化
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鸡、鹌鹑及其杂交禽胚胎肌肉发育过程中MSTN和p21基因的表达规律 被引量：10
4
作者 梁耀伟 赵宗胜 +3 位作者 陈丹盈 赵松华 张慧 班谦 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期997-1002,共6页
旨在研究MSTN和p21基因在鸡、鹌鹑和杂交禽胚胎肌肉发育过程中的表达规律,比较这2个基因在杂交禽与亲本鸡和鹌鹑中的差异表达,探讨MSTN和p21基因与肌肉发育的关系。通过人工受精获得鸡(♂)与鹌鹑(♀)杂交禽蛋,与鸡蛋、鹌鹑蛋按照鸡标准... 旨在研究MSTN和p21基因在鸡、鹌鹑和杂交禽胚胎肌肉发育过程中的表达规律,比较这2个基因在杂交禽与亲本鸡和鹌鹑中的差异表达,探讨MSTN和p21基因与肌肉发育的关系。通过人工受精获得鸡(♂)与鹌鹑(♀)杂交禽蛋,与鸡蛋、鹌鹑蛋按照鸡标准孵化条件同批入孵,采集第7～17天活胚胸肌组织,应用实时荧光定量PCR技术检测MSTN和p21基因在3个物种中每一天mRNA的相对表达量。MSTN和p21基因在胚胎肌肉发育的第7～17天均有表达,这2个基因mRNA的表达在鸡胚中第9天到达第1次峰值,在鹌鹑中第7天到达第1次峰值,后都随胚胎的发育表达水平上升,并维持相对稳定的高水平表达。杂交禽的表达规律与鸡一致,也在第9天达到峰值,而p21mRNA表达极显著高于鸡和鹌鹑(P<0.01)。MSTN mRNA表达规律与成肌细胞退出细胞周期的时间规律一致;在胚胎肌肉发育过程中,MSTN基因特异性上调p21的表达。 展开更多
关键词 鸡 鹌鹑 杂交禽 肌肉发育 mstn基因 P21基因 实时荧光定量PCR
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加州鲈肌肉生长抑制素(MSTN)cDNA的克隆和序列分析 被引量：14
5
作者 李胜杰 白俊杰 +2 位作者 叶星 劳海华 简清 《海洋渔业》 CSCD 2007年第1期13-19,共7页
肌肉生长抑制素是抑制肌肉生长和发育的生长调控因子。对运用RT—PCR和RACE技术从加州鲈成鱼肌肉总RNA中扩增得到的MSTNcDNA全序列进行了序列分析。结果表明，加州鲈MSTNcDNA全长为1626bp，其开放阅读框为1134bp，共编码377个氨基酸，... 肌肉生长抑制素是抑制肌肉生长和发育的生长调控因子。对运用RT—PCR和RACE技术从加州鲈成鱼肌肉总RNA中扩增得到的MSTNcDNA全序列进行了序列分析。结果表明，加州鲈MSTNcDNA全长为1626bp，其开放阅读框为1134bp，共编码377个氨基酸，前面的22个氨基酸为信号肽，中间有四个氨基酸（RARR）为蛋白水解加工位点；该基因总共有13个半胱氨酸残基，后面9个在蛋白水解加工位点之后的c端生物活性区，与其它脊椎动物比较，它们的位置完全一致，对该基因的结构和功能非常重要。与GenBank中已知的条纹狼鲈、金鲷、斑马鱼、虹鳟、斑点叉尾鲴、人、猪、鸡、鸽MSTN的ORF相比较，核苷酸序列同源性为63％-94．4％，氨基酸同源性为61．4％-96％，特别是在C端生物活性区氨基酸同源性为88．1％-100％，高度的保守性反映了该基因受到了高度的进化限制以及功能的重要性。加州鲈MSTN基因的克隆为研究该基因打靶和鱼类肌肉发育调控机理奠定了基础。 展开更多
关键词 加州鲈 mstn 克隆 序列分析
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猪MSTN基因的多态性和生长性状关联分析 被引量：24
6
作者 刘晓琴 马喜山 +5 位作者 唐中林 周荣 杨述林 敖红 牟玉莲 李奎 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1063-1069,共7页
基于肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因结构及功能研究报道,将其作为猪生长发育性状的候选基因进行多态性检测与关联分析,旨在为猪分子遗传标记提供依据。本研究以长白猪、大白猪、杜长大、通城猪、莱芜猪、五指山猪6个不同猪种基因组... 基于肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因结构及功能研究报道,将其作为猪生长发育性状的候选基因进行多态性检测与关联分析,旨在为猪分子遗传标记提供依据。本研究以长白猪、大白猪、杜长大、通城猪、莱芜猪、五指山猪6个不同猪种基因组DNA为模板,通过克隆测序鉴定MSTN基因启动子区、第1内含子区、第2内含子区、第1外显子区、第2外显子区及3′UTR区SNPs位点;以长白猪和杜长大2个试验猪群为材料,利用基质辅助激光解吸飞行时间质谱法对MSTN基因进行SNP分型。建立最小二乘法分析模型,利用SAS软件分析数据。结果表明:在6个猪种76个个体中,共筛选出16个SNPs,其中有4个位于启动子区,5个位于第1内含子,7个位于第2内含子,在外显子1、外显子2和3′UTR区域并未检测到SNP位点。对MSTN基因的4个SNPs位点(P1、P3、P4、P5;其中P1、P3、P4位于启动子区,P5位于内含子1区)的生长性状关联分析显示,P4和P5 2个位点的多态性与猪生长性状显著相关(P<0.05)。P4和P5 2个位点具有作为分子标记辅助猪育种的潜在应用价值。 展开更多
关键词 猪 mstn 多态性 生长性状 关联分析
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山羊MSTN基因多态性与主要经济性状的关联分析 被引量：9
7
作者 闵令江 丰艳妮 +1 位作者 李兰 李美玉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1515-1524,共10页
为研究山羊生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因的多态性及其与主要经济性状的关系,以山羊为材料,利用PCR-RFLP和PCR-SSCP技术检测了MSTN基因的多态性,分析了其群体遗传结构,并探讨了基因多态性与多个体重、体尺及屠体性状的关系。结果表明,... 为研究山羊生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因的多态性及其与主要经济性状的关系,以山羊为材料,利用PCR-RFLP和PCR-SSCP技术检测了MSTN基因的多态性,分析了其群体遗传结构,并探讨了基因多态性与多个体重、体尺及屠体性状的关系。结果表明,MSTN基因5′调控区-662bp处C→T转换导致7个群体有TaqⅠ多态,表现CC、CT、TT 3种基因型。波尔山羊CC基因型频率比3个地方品种的CC频率要高,而TT型相反。波尔山羊的等位基因C频率较T高,而地方品种T比C高。除纯种波尔山羊外,其他5个群体均处于Hardy-Weinberg非平衡状态(P<0.01);SSCP检测外显子3后发现,7个群体均存在NN、NM、MM 3种基因型,均没有CTNN和CT-NM型个体,并且在波尔山羊中也没TT-NN和TT-NM型,F1也没有TT-NM型,3个地方品种中也未检测到TT-MM型个体。MSTN基因的5′调控区对断奶重、净肉重有极显著影响(P<0.01),CC型极显著或显著大于TT型;该位点与后躯肉重也有关(P<0.01),但基因型间差异均不显著(P>0.05)。以上3个指标上均发现有CC>CT>TT的规律。同时该位点对肝重也有显著影响(P<0.05),CT型显著大于TT型(P<0.05)。MSTN基因的外显子3对净肉重、后躯肉重和肝重有极显著效应(P<0.01),MM极显著或显著地大于NN型,并且在数值上表现为MM>NM>NN;5′调控区和外显子3的交互作用对断奶重、后躯肉重和肝重有显著影响(P<0.05),CC-MM型比其他组合基因型表现更重的断奶重、后躯肉重和肝重。以上结果表明:MSTN基因的5′调控区和外显子3的不同分子特征,可用于山羊相应肉用性状的分子标记辅助选择,加速育种进程。 展开更多
关键词 山羊 mstn基因 体重性状 体尺性状 屠体性状
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天祝白牦牛MSTN基因编码区克隆及生物信息学分析 被引量：14
8
作者 张丽 刘丽霞 +1 位作者 李强子 陈红 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期618-624,共7页
为探讨天祝白牦牛MSTN基因的分子结构特征,通过PCR扩增和测序技术以及生物信息学分析工具对天祝白牦牛MSTN基因进行克隆、测序及相关生物信息学分析。结果表明,天祝白牦牛MSTN基因编码区序列全长1 128 bp,编码375个氨基酸残基;天祝白牦... 为探讨天祝白牦牛MSTN基因的分子结构特征,通过PCR扩增和测序技术以及生物信息学分析工具对天祝白牦牛MSTN基因进行克隆、测序及相关生物信息学分析。结果表明,天祝白牦牛MSTN基因编码区序列全长1 128 bp,编码375个氨基酸残基;天祝白牦牛MSTN基因编码蛋白分子量42.55 ku,理论等电点为6.14;生物信息学预测发现,天祝白牦牛MSTN蛋白是不稳定的亲水蛋白,mRNA二级结构的最小自由能为-1 135.16 k J·mol^(-1),蛋白质二、三级结构均是以无规卷曲和延伸链为主的混合型蛋白。天祝白牦牛MSTN基因的成功克隆为进一步研究牦牛MSTN的遗传特性和生理机制奠定了基础。 展开更多
关键词 天祝白牦牛 mstn基因 克隆 生物信息学
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籽鹅和莱茵鹅MSTN和MyoG基因表达及其与屠宰性状的相关分析 被引量：9
9
作者 赵秀华 李满雨 +2 位作者 刘国君 许珊珊 孙金艳 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第3期738-745,共8页
本研究旨在探讨肌肉生成抑制素(myostatin,MSTN)和肌细胞生成素(myogenin,MyoG)基因对鹅骨骼肌生长发育的影响。试验以莱茵鹅和籽鹅为研究对象,采用实时荧光定量PCR方法测定MSTN、MyoG基因在籽鹅和莱茵鹅胸肌、腿肌中的差异表达情况,运... 本研究旨在探讨肌肉生成抑制素(myostatin,MSTN)和肌细胞生成素(myogenin,MyoG)基因对鹅骨骼肌生长发育的影响。试验以莱茵鹅和籽鹅为研究对象,采用实时荧光定量PCR方法测定MSTN、MyoG基因在籽鹅和莱茵鹅胸肌、腿肌中的差异表达情况,运用统计软件对基因表达情况与屠宰性状间的相关性进行分析。结果显示,莱茵鹅胸肌重和胸肌率极显著高于籽鹅(P<0.01),籽鹅胸肌MSTN、MyoG mRNA表达量极显著高于莱茵鹅(P<0.01);在腿肌中,籽鹅MSTN mRNA表达量极显著低于莱茵鹅(P<0.01),籽鹅与莱茵鹅MyoG mRNA表达量间无显著差异(P>0.05)。同一品种MSTN mRNA表达水平也存在差异,在籽鹅胸肌和腿肌中表达量存在极显著差异(P<0.01);在莱茵鹅胸肌和腿肌中表达量存在显著差异(P<0.05)。就MyoG mRNA而言,在籽鹅和莱茵鹅胸肌和腿肌中表达量存在极显著差异(P<0.01)。MSTN基因表达与屠宰性能相关性分析表明,胸肌中MSTN mRNA表达量与活重、胸肌重和胸肌率呈极显著负相关(P<0.01);胸肌和腿肌中MyoG mRNA表达量与活重呈极显著正相关(P<0.01)。说明MSTN和MyoG基因可能对肌肉生长分别起正负调控作用。 展开更多
关键词 鹅 mstn基因 MYOG基因 mRNA表达 屠宰性能
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绵羊CLPG和MSTN基因多态性及其与生长性状的关联分析 被引量：10
10
作者 胡师金 张淑珍 +6 位作者 袁泽湖 轩俊丽 马晓萌 张莉 赵福平 魏彩虹 杜立新 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第5期1285-1293,共9页
试验旨在探究CLPG(Callipyge)与MSTN(Myostatin)基因作为绵羊生长性状候选基因的可能性,调查与绵羊生长性状相关的分子遗传标记。本试验以133只澳洲白羊×杜泊羊×湖羊杂交绵羊为研究对象,利用PCR产物直接测序及PCR-RFLP技术检... 试验旨在探究CLPG(Callipyge)与MSTN(Myostatin)基因作为绵羊生长性状候选基因的可能性,调查与绵羊生长性状相关的分子遗传标记。本试验以133只澳洲白羊×杜泊羊×湖羊杂交绵羊为研究对象,利用PCR产物直接测序及PCR-RFLP技术检测CLPG与MSTN基因的单核苷酸多态性,然后通过SPSS 22.0软件GLM统计模型分析多态位点不同基因型及聚合基因型与绵羊生长性状的关联性。测序结果表明,CLPG基因STS序列232bp处检测到C→T突变位点C1,MSTN基因3′UTR区检测到G→A突变位点M1。PCR-RFLP分析显示,C1位点表现为2种基因型:CC和CT;M1位点表现为2种基因型:GG和GA。关联分析表明,C1位点与绵羊背膘厚和眼肌面积显著或极显著相关(P<0.05;P<0.01),M1位点与绵羊体重、管围、背膘厚和眼肌面积显著或极显著相关(P<0.05;P<0.01)。聚合基因型对体重、背膘厚和眼肌面积影响极显著(P<0.01)。研究揭示CLPG与MSTN基因多态性及其聚合基因型对绵羊生长性状具有显著影响,C1和M1位点可以考虑作为绵羊生长性状的有效遗传标记。 展开更多
关键词 CLPG基因 mstn基因 多态性 生长性状 关联分析
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靶向绵羊MSTN基因的锌指核酸酶腺病毒表达载体的构建及活性验证 被引量：5
11
作者 张存芳 王令 +4 位作者 任刚 张婷婷 王瑞 严国勇 张智英 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1192-1199,共8页
旨在构建并包装打靶绵羊MSTN基因的位点特异性锌指核酸酶腺病毒表达载体,以借助腺病毒的高转染效率和非整合性以及锌指核酸酶的高效性和特异性实现对绵羊MSTN基因的敲除。本研究利用PCR扩增T2A序列和锌指核酸酶异源二聚体序列,测序鉴定... 旨在构建并包装打靶绵羊MSTN基因的位点特异性锌指核酸酶腺病毒表达载体,以借助腺病毒的高转染效率和非整合性以及锌指核酸酶的高效性和特异性实现对绵羊MSTN基因的敲除。本研究利用PCR扩增T2A序列和锌指核酸酶异源二聚体序列,测序鉴定后依次克隆至pAdTrack-CMV,得到pAdTrack-ZFNL-T2A-ZFNR穿梭载体,将之与腺病毒骨架载体pAdEasy-1共转染至BJ5183菌株进行同源重组,以构建pAdEasy-ZFNL-T2A-ZFNR表达载体。然后用上述表达载体转染HEK293细胞进行重组腺病毒的包装,将PCR鉴定阳性的病毒进行扩增并测定病毒滴度。侵染绵羊胎儿成纤维细胞检测重组腺病毒对靶细胞的侵染能力,并用Western blot方法检测绵羊胎儿成纤维细胞中ZFN的表达,进而在细胞水平验证ZFN的活性。结果,包装得到的锌指核酸酶重组腺病毒能够高效侵染绵羊胎儿成纤维细胞并表达ZFN,腺病毒介导的ZFN可识别并切割绵羊MSTN基因。本研究成功获得靶向识别并切割绵羊MSTN基因的锌指核酸酶重组腺病毒。 展开更多
关键词 锌指核酸酶 mstn基因 腺病毒 基因敲除
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腺病毒介导shRNA干扰绵羊MSTN基因效果及对生肌调节因子和干扰素反应基因表达的影响 被引量：6
12
作者 王红娜 孙洪新 +3 位作者 张英杰 刘月琴 谷振慧 王苏瑶 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1833-1842,共10页
旨在进一步揭示MSTN在绵羊成肌细胞中的调控机制,制备可有效失活MSTN基因的工具,为通过RNA干扰技术提高绵羊产肉量提供方法和理论依据。本研究以绵羊成肌细胞为试验材料,构建特异靶向绵羊MSTN基因的shRNA干扰质粒载体,将干扰效果好的质... 旨在进一步揭示MSTN在绵羊成肌细胞中的调控机制,制备可有效失活MSTN基因的工具,为通过RNA干扰技术提高绵羊产肉量提供方法和理论依据。本研究以绵羊成肌细胞为试验材料,构建特异靶向绵羊MSTN基因的shRNA干扰质粒载体,将干扰效果好的质粒进一步包装为重组腺病毒,转染细胞后采用qRT-PCR和Western blot检测MSTN基因以及生肌调节因子和干扰素反应基因的表达。结果表明,质粒ShR218和ShR511干扰MSTN基因效率分别达到35%和48%,双元干扰质粒ShR3+4干扰效率最高达到85%。成功包装shRNA重组腺病毒载体Sh511和Sh3+4,病毒滴度达到1×10~8 pfu·mL^(-1),对成肌细胞的感染效率达到90%以上。Sh511和Sh3+4对MSTN基因mRNA的表达抑制分别达到53%和76%,对蛋白表达抑制分别达到55%和64%。MSTN基因沉默后,伴随着Myf5、MyoD、MyoG、Myf6基因mRNA水平的极显著性下调(P<0.01),但只引起MyoG蛋白水平极显著升高(P<0.01),未引起Myf5、MyoD、Myf6蛋白水平的显著变化;腺病毒感染成肌细胞未引起OAS1基因mRNA水平的显著变化,但引起IFNGR1基因mRNA水平的极显著升高(P<0.01),对二者蛋白水平均无显著影响。本研究成功构建靶向MSTN基因的shRNA腺病毒载体,能有效抑制成肌细胞MSTN的mRNA和蛋白表达,并影响生肌调节因子Myf5、MyoD、MyoG、Myf6基因和干扰素受体基因IFNGR1表达。 展开更多
关键词 绵羊 mstn 成肌细胞 RNA干扰
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太湖鹅与皖西白鹅胸肌IGF-I和MSTN的表达及其与屠宰性状相关性分析 被引量：3
13
作者 汤青萍 宋迟 +3 位作者 胡艳 章双杰 赵东伟 邹剑敏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期204-210,共7页
本研究旨在探讨IGF-I、MSTN对鹅骨骼肌生长的影响。以太湖鹅和皖西白鹅为研究素材,采用多重荧光竞争性PCR和酶联免疫方法,测定鹅70日龄胸肌中IGF-I、MSTN的mRNA和蛋白表达情况,并与屠宰性能做相关性分析。结果证实,70日龄时太湖鹅体重... 本研究旨在探讨IGF-I、MSTN对鹅骨骼肌生长的影响。以太湖鹅和皖西白鹅为研究素材,采用多重荧光竞争性PCR和酶联免疫方法,测定鹅70日龄胸肌中IGF-I、MSTN的mRNA和蛋白表达情况,并与屠宰性能做相关性分析。结果证实,70日龄时太湖鹅体重、胸肌重极显著小于皖西白鹅,但是胸肌率没有差异,并且品种间在体重和胸肌重上存在性别差异;胸肌IGF-I和MSTN的mRNA、蛋白表达均无品种差异,并且在品种间也不存在性别差异;同一品种的公母鹅相比较,太湖鹅公鹅胸肌IGF-I mRNA表达显著高于母鹅;除了胸肌IGF-I的含量与MSTN的mRNA表达和蛋白含量呈显著正相关,胸肌IGF-I、MSTN的mRNA表达和蛋白含量相互之间均无显著相关性,鹅胸肌IGF-I mRNA表达量和胸肌率、胸肌重、体重呈显著负相关,皖西白鹅胸肌中MSTN的表达与体重呈强的负相关。结果提示,70日龄时鹅胸肌生长正负调节基因IGF-I与MSTN的表达无品种特异性,二者表达水平处于一个动态平衡之中,特别参与了70日龄皖西白鹅的生长调控。 展开更多
关键词 鹅 肌肉 IGF-I mstn 屠宰
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IGF-和MSTN基因在大骨鸡孵化前后的表达 被引量：13
14
作者 胡兰 胡锐 +3 位作者 郭东新 王娜 李桂玲 颜丙峰 《中国畜牧兽医》 CAS 2004年第4期26-28,共3页
以大骨鸡为试材 ,采用 RT- PCR法研究胚胎孵化前后肌生成抑素 (Myostatin,MSTN)基因和胰岛素样生长因子 (Insulinlike Growth Factor,IGF- )基因表达的规律性。结果表明 ,MSTN m RNA和 IGF- m RNA在孵化前后呈现基本相同的变化规律 ,... 以大骨鸡为试材 ,采用 RT- PCR法研究胚胎孵化前后肌生成抑素 (Myostatin,MSTN)基因和胰岛素样生长因子 (Insulinlike Growth Factor,IGF- )基因表达的规律性。结果表明 ,MSTN m RNA和 IGF- m RNA在孵化前后呈现基本相同的变化规律 ,这 2个基因在胚胎期的表达水平均高于孵化后 ,在孵化时表达水平均较低 ,与胚胎 14 d相比分别降低了 4 5 %和 38% ,孵化后 1周时处于更低水平 ,在第 2周时表达水平有所提高 ,约提高 30 % ,而在 4～ 6周的变化有一定区别 ,在此期间MSTN m RNA水平呈降低趋势 ,IGF- m RNA水平基本保持不变。 展开更多
关键词 IGF-I mstn 基因 大骨鸡 孵化 表达 RT-PCR 肌生成抑素 胰岛素样生长因子
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关岭黄牛MSTN启动子真核报告载体的构建与启动活性研究 被引量：3
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作者 刘敏 许厚强 +2 位作者 陈伟 陈祥 李飞 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第17期133-136,共4页
采用PCR技术扩增牛MSTN基因启子,亚克隆至荧光素酶表达载体pGL3-Basic中,构建重组报告载体pGL3-BasicMSTN-promoter。将重组报告载体pGL3-Basic-MSTN-promoter与内参质粒pRL-TK用脂质体法瞬时共转染小鼠成肌细胞系C2C12和小鼠胚胎成纤... 采用PCR技术扩增牛MSTN基因启子,亚克隆至荧光素酶表达载体pGL3-Basic中,构建重组报告载体pGL3-BasicMSTN-promoter。将重组报告载体pGL3-Basic-MSTN-promoter与内参质粒pRL-TK用脂质体法瞬时共转染小鼠成肌细胞系C2C12和小鼠胚胎成纤维细胞3T3-L1,通过双荧光素酶活性检测其启动子活性。测序结果表明,成功构建了牛MSTN基因真核报告载体pGL3-Basic-MSTN-promoter,瞬时转染试验表明,pGL3-Basic-MSTN-promoter在C2C12细胞和3T3-L1细胞中的启动子活性分别为pGL3-Basic空载体的14.53倍、5.02倍。研究结果为进一步研究MSTN基因的表达调控机制奠定了基础。 展开更多
关键词 mstn基因 启动子 荧光素酶 C2C12 3T3-L1
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中国4个牛种MSTN基因外显子2多态性分析与其系统发生关系研究 被引量：3
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作者 常春芳 冀德君 +4 位作者 常洪 耿荣庆 李永红 马国龙 陈宏宇 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第14期5790-5791,5793,共3页
[目的]解决牛亚科动物近缘物种的分类归属问题,了解牛亚科各种群遗传多样性。[方法]采用酚-氯仿抽提法从4个中国牛种中提取基因组DNA,对MSTN基因进行PCR扩增和测序,构建系统发育树,探讨4个牛种间MSTN基因外显子2的系统发生关系。[结果]M... [目的]解决牛亚科动物近缘物种的分类归属问题,了解牛亚科各种群遗传多样性。[方法]采用酚-氯仿抽提法从4个中国牛种中提取基因组DNA,对MSTN基因进行PCR扩增和测序,构建系统发育树,探讨4个牛种间MSTN基因外显子2的系统发生关系。[结果]MSTN基因外显子2编码区为372 bp。蒙古牛、牦牛和独龙牛的MSTN基因外显子2具有丰富的多态性。在所测66个样本中存在3个核苷酸多态位点,定义了6种单倍型。雷琼牛、蒙古牛、独龙牛与巴州牦牛享有共同的单倍型。巴州牦牛独自聚成一支,而雷琼牛与一部分独龙牛、大部分蒙古牛和引用瘤牛聚成一支。[结论]蒙古牛、雷琼牛、独龙牛种间存在着基因交流。牦牛与普通牛、瘤牛的分化较明显,比瘤牛与普通牛的亲缘关系要远。 展开更多
关键词 mstn基因 多态性 单倍型 系统发生关系
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牛MSTN启动子与MEF2C转录因子相互作用的研究 被引量：2
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作者 杨涛 许厚强 +3 位作者 陈伟 周迪 王圆圆 朱晓锋 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1567-1575,共9页
旨在解析牛MSTN启动子与MEF2C之间的相互调控作用,进一步探讨MSTN基因在肉牛肌肉生长发育方面的调控机制。首先,通过PCR扩增关岭牛MSTN启动子序列2 267 bp和MEF2C基因CDS区1 425 bp。其次,构建pGL3-Basic-MSTN和pcDNA3.1(+)-MEF2C双荧... 旨在解析牛MSTN启动子与MEF2C之间的相互调控作用,进一步探讨MSTN基因在肉牛肌肉生长发育方面的调控机制。首先,通过PCR扩增关岭牛MSTN启动子序列2 267 bp和MEF2C基因CDS区1 425 bp。其次,构建pGL3-Basic-MSTN和pcDNA3.1(+)-MEF2C双荧光素酶报告载体,采用脂质体法共转染至小鼠C2C12成肌细胞,24 h后检测其双荧光素酶活性。最后,通过PCR扩增MSTN启动子核心片段MSTN-P1,重新构建以MSTN-P1片段替代(CMV)区的重组表达载体pEGFP-N3-MSTN-P1-MEF2C,将其分别转染至小鼠C2C12成肌细胞和大鼠下颌腺上皮细胞,24 h后观察绿色荧光蛋白发光情况,48 h后提取细胞总RNA,利用qRT-PCR检测MEF2C基因在不同细胞中的表达情况。结果显示,在小鼠C2C12成肌细胞中,共转染pcDNA3.1(+)-MEF2C试验组较pGL3-Basic-MSTN试验组能显著增强MSTN启动子的活性(P<0.05),较pGL3-Basic对照组能极显著增强MSTN启动子的活性(P<0.01);MSTN启动子核心片段MSTN-P1能驱动MEF2C基因在小鼠C2C12成肌细胞中的表达量极显著上调(P<0.01),且能驱动MEF2C基因在大鼠下颌腺上皮细胞中的表达量显著上调(P<0.05)。结果表明,在转录水平,MSTN启动子与MEF2C可能同时参与了牛肌肉生长和分化的调控。 展开更多
关键词 牛 mstn启动子 MEF2C转录因子 互作
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一种新的番鸭MSTN基因转录本的克隆及真核表达 被引量：4
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作者 郝文博 杨晓宇 +2 位作者 李新华 谷文峰 胡兰 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期377-382,共6页
利用RT-PCR扩增MSTN cDNA全序列,然后进行克隆、测序;将重组质粒pEGFP-N1-MSTN-2通过脂质体瞬时转染番鸭成纤维细胞,用RT-PCR和SDS-PAGE检测其蛋白表达.结果表明,番鸭体内存在2种MSTN基因转录本,MSTN-1(EU336991)和MSTN-2(EU336992),大... 利用RT-PCR扩增MSTN cDNA全序列,然后进行克隆、测序;将重组质粒pEGFP-N1-MSTN-2通过脂质体瞬时转染番鸭成纤维细胞,用RT-PCR和SDS-PAGE检测其蛋白表达.结果表明,番鸭体内存在2种MSTN基因转录本,MSTN-1(EU336991)和MSTN-2(EU336992),大小分别为1128 bp和754 bp,同源性为94%;且MSTN-2是一个全新的MSTN转录本,含有1个开放阅读框,可编码124个氨基酸.将pEGFP-N1-MSTN-2转染番鸭成纤维细胞48 h后,在荧光显微镜下可观察到绿色荧光蛋白表达,蛋白大小约为14 kDa.这对于进一步研究MSTN基因功能及作用机理具有重要意义. 展开更多
关键词 mstn-2 克隆 真核表达
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应用CRISPR/Cas9编辑广东小耳花猪MSTN基因 被引量：2
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作者 王敏 黄翔 +5 位作者 石翾 刘小凤 曾检华 刘小红 陈瑶生 何祖勇 《广东农业科学》 CAS 2017年第2期141-148,共8页
MSTN基因是肌肉生长抑制基因,破坏MSTN基因的表达成为提高畜禽肌肉产量的有效途径。通过应用CRISRP/Cas9编辑技术对广东小耳花猪MSTN基因的外显子区域进行编辑,破坏MSTN基因的读码框来抑制其表达,从而提高广东小耳花猪的肌肉产量。共设... MSTN基因是肌肉生长抑制基因,破坏MSTN基因的表达成为提高畜禽肌肉产量的有效途径。通过应用CRISRP/Cas9编辑技术对广东小耳花猪MSTN基因的外显子区域进行编辑,破坏MSTN基因的读码框来抑制其表达,从而提高广东小耳花猪的肌肉产量。共设计了6条靶向MSTN基因3个不同外显子的gRNA,经过T7E1酶切检测和TA克隆分析,发现其中3条gRNA能够发生有效切割,其中切割效率最高的达28.3%,最低为17.0%。gRNA1-1和gRNA3-3突变的广东小耳花猪PEF细胞系,突变效率均在50%以上,其中三号外显子上突变位点的突变率达到61.5%。试验结果为后续进行体细胞核移植,生产MSTN基因编辑的广东小耳花猪奠定了基础。 展开更多
关键词 mstn CIRSPR/Cas9 广东小耳花猪 基因编辑
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3个绵羊群体MSTN基因编码区PCR-SSCP分析 被引量：3
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作者 任有蛇 白元生 +3 位作者 杨子森 师周戈 刘晓妮 张春香 《中国草食动物科学》 CAS 2014年第3期5-8,共4页
采用PCR-SSCP技术分析了3个不同绵羊品种(杜泊绵羊、小尾寒羊、晋中绵羊)肌肉生长抑制素(MSTN)基因的单核苷酸多态性。根据3个绵羊品种MSTN基因Exon1(P1)、Exon2(P2和P3)和Exon3(P4和P5)序列设计5对PCR-SSCP引物并扩增,经SSCP分析,P1位... 采用PCR-SSCP技术分析了3个不同绵羊品种(杜泊绵羊、小尾寒羊、晋中绵羊)肌肉生长抑制素(MSTN)基因的单核苷酸多态性。根据3个绵羊品种MSTN基因Exon1(P1)、Exon2(P2和P3)和Exon3(P4和P5)序列设计5对PCR-SSCP引物并扩增,经SSCP分析,P1位点检测到A和B两个等位基因,AA、AB、BB三种基因型;且在晋中绵羊上处于Hardy-Weinberg平衡状态,而在小尾寒羊和杜泊绵羊上极显著偏离Hardy-Weinberg平衡状态。P2和P5位点没有检测到多态位点。P3位点检测到A和B两个等位基因,AA、BB两种基因型;且在3个绵羊品种上极显著偏离HardyWeinberg平衡状态。P4位点检测到A、B和C三个等位基因,AA、AB、AC三种基因型;且在小尾寒羊上处于Hardy-Weinberg平衡状态,在晋中绵羊上处于Hardy-Weinberg不平衡状态,在杜泊绵羊上极显著偏离Hardy-Weinberg平衡状态。 展开更多
关键词 mstn PCR-SSCP 等位基因 多态性
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