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蝎毒对MCF-7/ADM细胞GST-π表达的研究 被引量:5
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作者 于丽君 孔力 《中医药学刊》 2003年第7期1107-1109,共3页
目的 :从细胞浆表达水平 ,探讨蝎毒对人乳腺癌细胞株MCF - 7/ADM细胞的GST -π表达的影响。方法 :应用免疫细胞化学和免疫电镜技术 ,检测GST -π的表达 ,并经图象分析系统半定量 ,统计学分析处理。实验组为 :A组 :MCF - 7/ADM +蝎毒 (10... 目的 :从细胞浆表达水平 ,探讨蝎毒对人乳腺癌细胞株MCF - 7/ADM细胞的GST -π表达的影响。方法 :应用免疫细胞化学和免疫电镜技术 ,检测GST -π的表达 ,并经图象分析系统半定量 ,统计学分析处理。实验组为 :A组 :MCF - 7/ADM +蝎毒 (10 0mg·L-1) +ADM(2 0mg·L-1) +16 4 0 ;B组 :MCF - 7/ADM +蝎毒 (2 0 0mg·L-1) +ADM (2 0mg·L-1) +16 4 0 ;C组 :MCF - 7/s +ADM(2 0mg·L-1) +16 4 0 ;对照组为 :MCF - 7/ADM +ADM(2 0mg·L-1+16 4 0 ;以结肠癌冰冻切片为阳性对照。以PBS代替一抗的染色结果为阴性对照。结果 :敏感株MCF - 7/s细胞GST -π低表达 ,加入蝎毒的A组、B组与对照组间差异显著 ,P <0 .0 1,同时A组与B组的比较也存在统计学差异 ,P <0 .0 1。实验还测得 :敏感株MCF - 7/s的细胞质平均灰度为 137.9± 3.4 78,与B组比较 ,P <0 .0 1。免疫电镜结果显示 ,敏感株MCF - 7/s细胞中极少数细胞质内有少量胶体金颗粒 ,对照组MCF -7/ADM细胞胞质内有较多胶体金颗粒 ,实验组B组胶体金颗粒数多于A组胶体金颗粒 ,但A组、B组细胞胞质内胶体金颗粒均少于对照组MCF - 7/ADM。结论 :蝎毒可以部分降低耐药细胞株MCF - 7/ADM细胞胞质内GST -π的表达 ,使MCF - 7/ADM细胞的降解能力下降 。 展开更多
关键词 蝎毒 mcf-7/adm GST-π免疫细胞化学
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Hiwi基因靶向沉默对乳腺癌MCF-7/ADM细胞化疗敏感性的影响
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作者 任爱华 王大伟 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期743-746,共4页
目的:探讨耐阿霉素乳腺癌MCF-7/ADM细胞应用Hiwi基因靶向沉默技术后对阿霉素敏感性的变化,阐明Hiwi基因在乳腺癌MCF-7/ADM细胞耐药机制中的作用。方法:MCF-7/ADM细胞分为对照组、Hiwi siRNA1组和Hiwi siRNA2组,分别转染Hiwi control、Hi... 目的:探讨耐阿霉素乳腺癌MCF-7/ADM细胞应用Hiwi基因靶向沉默技术后对阿霉素敏感性的变化,阐明Hiwi基因在乳腺癌MCF-7/ADM细胞耐药机制中的作用。方法:MCF-7/ADM细胞分为对照组、Hiwi siRNA1组和Hiwi siRNA2组,分别转染Hiwi control、Hiwi siRNA1和Hiwi siRNA2 3种不同载体,应用实时定量PCR和Western blotting法检测Hiwi基因mRNA和蛋白表达水平,判断转染效率。转染后各组乳腺癌MCF-7/ADM细胞加入不同浓度阿霉素(0、0.1、0.5和1.0mg·L^(-1)),0mg·L^(-1)阿霉素组为对照组,采用MTT法检测各组MCF-7/ADM细胞的存活率,即耐药敏感性。结果:与对照组比较,转染后Hiwi siRNA1和Hiwi siRNA2组细胞中Hiwi基因mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.01)。与对照组比较,经不同浓度阿霉素作用后,Hiwi siRNA1组和Hiwi siRNA2组细胞存活率明显降低(P<0.01),阿霉素浓度为1.0mg·L^(-1)时,2组细胞存活率分别为(48.15±6.28)%和(41.73±6.17)%,对阿霉素的敏感性明显增强。结论:Hiwi基因在MCF-7/ADM细胞中具有高效的靶向沉默,Hiwi基因沉默后的MCF-7/ADM细胞对阿霉素恢复敏感性。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 Hiwi基因 靶向沉默 mcf-7/adm细胞 敏感性
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塞来昔布对乳腺癌阿霉素耐药细胞株MCF-7/ADM的增殖抑制作用 被引量:1
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作者 哈森高娃 王杨 楚小慧 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期559-562,F0003,共5页
目的:通过研究选择性环氯化酶2(COX-2)抑制剂塞来昔布联合阿霉素(ADM)对乳腺癌MCF-7/ADM细胞株生长的作用,探讨塞来昔布的抗肿瘤作用。方法:MCF-7/ADM细胞加入不同浓度等倍稀释的ADM(0.05、0.10、0.20、0.40、0.80和1.60mg.L-1)为对照组... 目的:通过研究选择性环氯化酶2(COX-2)抑制剂塞来昔布联合阿霉素(ADM)对乳腺癌MCF-7/ADM细胞株生长的作用,探讨塞来昔布的抗肿瘤作用。方法:MCF-7/ADM细胞加入不同浓度等倍稀释的ADM(0.05、0.10、0.20、0.40、0.80和1.60mg.L-1)为对照组,MCF-7/ADM细胞加入无细胞的完全培养基为阴性对照组,在对照组的基础上联合应用10、20μmol.L-1塞来昔布为实验组,各组细胞于24、48、72h后采用CCK-8检测细胞生长抑制率。MCF-7/ADM细胞单加0.05mg.L-1 ADM及联合塞来昔布(10、20μmol.L-1)处理后3h收集细胞,采用流式细胞术检测细胞内ADM水平。结果:不同浓度ADM单药及联合塞来昔布(10和20μmol.L-1)作用于MCF-7/ADM 24、48和72h后细胞生长受到抑制,实验组不同时间细胞生长抑制率均高于对照组(P<0.05),且20μmol.L-1塞来昔布实验组细胞生长抑制率高于10μmol.L-1塞来昔布实验组,差异具有统计学意义(P<0.05)。对照组24、48和72h的细胞未见明显变化,但实验组细胞作用48和72h后出现细胞改变及死亡,呈塞来昔布剂量依赖性。与对照组比较,塞来昔布实验组(10和20μmol.L-1)细胞内ADM浓度升高(P<0.05);20μmol.L-1塞来昔布实验组细胞内ADM浓度高于10μmol.L-1塞来昔布实验组(P<0.05)。结论:选择性COX-2抑制剂塞来昔布联合ADM可有效逆转乳腺癌ADM细胞株耐药。 展开更多
关键词 塞来昔布 乳腺肿瘤 乳腺癌细胞 mcf-7/adm 阿霉素
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Effect of Guizhi Fuling capsule and its extracts on human breast cancer cells proliferation
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作者 Zi-ru YU Li LI +3 位作者 Jin-hua WANG Zhen-zhong WANG Wei XIAO Guan-hua DU 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1013-1014,共2页
OBJECTIVE To evaluate the effect of Guizhi Fuling Capsule active pharmaceutical ingredient(API)and its fractions on human breast cancer cells proliferation by high-throughput screening assay.METHODS The crude fraction... OBJECTIVE To evaluate the effect of Guizhi Fuling Capsule active pharmaceutical ingredient(API)and its fractions on human breast cancer cells proliferation by high-throughput screening assay.METHODS The crude fractions were obtained from the extraction and elution of the API of Guizhi Fuling Capsule,and 929 standard fractions were obtained by the optimal separation conditions.Sulforhodamine B(SRB)method was used to evaluate the effects of the Guizhi Fuling capsule API and929 kinds of fractions on the proliferation of human breast cancer cells MCF-7 and MDA-MB-231.RESULTS The Guizhi Fuling capsule API had a strong ability to inhibit the proliferation of MCF-7 cells at high concentration and the ability to inhibit MDA-MB-231 cells' proliferate at low concentration following 72 h treatment;some samples of 929 fractions(5μg·mL^(-1))was found to have a breast cancer cell growth inhibition rate above 50%,without toxicity on HUVECs proliferation.CONCLUSION The API of Guizhi Fuling capsule had significant cytotoxicity effects on these two human breast cancer cells,with significant concentration-and time-dependent manner. 展开更多
关键词 high throughput screening Guizhi Fuling capsule breast cancer mcf-7 cell MDA-MB-231 cell sulforhodamine B
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华蟾素对耐阿霉素人乳腺癌细胞内阿霉素蓄积的影响 被引量:3
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作者 王玲 刘世坤 +2 位作者 周于禄 裴奇 阳宁 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2007年第5期548-551,共4页
目的:测定华蟾素(cinobufacine,Cino)对耐阿霉素人乳腺癌细胞MCF-7/ADM内阿霉素(ADM)积累的影响,以探索Cino逆转MCF-7/ADM多药耐药(MDR)的可能机制。方法:MTT法检测CinoMDR的逆转作用,HPLC法检测Cino作用MCF-7/ADM后细胞内ADM的浓度的... 目的:测定华蟾素(cinobufacine,Cino)对耐阿霉素人乳腺癌细胞MCF-7/ADM内阿霉素(ADM)积累的影响,以探索Cino逆转MCF-7/ADM多药耐药(MDR)的可能机制。方法:MTT法检测CinoMDR的逆转作用,HPLC法检测Cino作用MCF-7/ADM后细胞内ADM的浓度的变化。结果:Cino15mg/L能增加MCF-7/ADM细胞对ADM的敏感性,使ADM的半数抑制浓度(IC50)由38.14mg/L降至12.93mg/L,显著增加MCF-7/ADM株细胞内ADM的浓度。结论:Cino能明显增加MCF-7/ADM株细胞内ADM的含量,部分逆转MCF-7/ADM的MDR。 展开更多
关键词 华蟾素 阿霉素 多药耐药 耐阿霉素人乳腺癌细胞
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蝎毒逆转人乳腺癌细胞株耐药性研究 被引量:5
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作者 于丽君 孔力 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期239-241,共3页
目的 :探讨东亚钳蝎毒 (buthus martensii kirsch,BMK)是否能够逆转人乳腺癌细胞的多药耐药性(MDR)。方法 :采用 MTT法对蝎毒和阿霉素 (ADM)合用时肿瘤细胞的半数抑制率 (IC50 )进行检测。荧光分光光度法检测蝎毒对细胞内 ADM浓度的影... 目的 :探讨东亚钳蝎毒 (buthus martensii kirsch,BMK)是否能够逆转人乳腺癌细胞的多药耐药性(MDR)。方法 :采用 MTT法对蝎毒和阿霉素 (ADM)合用时肿瘤细胞的半数抑制率 (IC50 )进行检测。荧光分光光度法检测蝎毒对细胞内 ADM浓度的影响。结果 :蝎毒不同组别 (1 0 0~ 35 0 m g.L- 1 )能分别提高 MCF- 7/ ADM细胞株对阿霉素的敏感性 (P<0 .0 5 ;P<0 .0 1 )。蝎毒不同组别 (1 0 0~ 2 0 0 mg.L- 1 )能使 MCF- 7/ ADM细胞内 ADM的浓度升高。结论 展开更多
关键词 蝎毒 阿霉素 乳腺癌细胞株 多药耐药性
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三羟异黄酮对人乳腺癌耐药细胞mdr-1、HER2/neu表达的影响
7
作者 王耕 黄韬 +2 位作者 薛家鹏 王明华 惠震 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期589-592,610,共5页
目的研究三羟异黄酮(Genistein,GEN)对体外培养人乳腺癌MCF-7/ADM耐药细胞中mdr-1、HER2/neu基因及蛋白表达的影响,探讨其逆转多药耐药机制。方法采用MTT法检测GEN作用MCF-7/ADM细胞后的细胞增殖抑制率(IR)和半数抑制浓度(IC50);RT-PCR... 目的研究三羟异黄酮(Genistein,GEN)对体外培养人乳腺癌MCF-7/ADM耐药细胞中mdr-1、HER2/neu基因及蛋白表达的影响,探讨其逆转多药耐药机制。方法采用MTT法检测GEN作用MCF-7/ADM细胞后的细胞增殖抑制率(IR)和半数抑制浓度(IC50);RT-PCR法检测MCF-7/ADM细胞经不同浓度阿霉素(ADM)、GEN及GEN联合ADM处理后,其mdr-1、HER2/neu mRNA表达的变化;Western blot检测其对c-erbB2蛋白及P-糖蛋白(P-gp)的影响。结果 GEN对MCF-7/ADM细胞生长抑制作用明显,其抑制效应呈时间-剂量依赖性,特别是GEN浓度增加到60μg/mL时,对细胞抑制作用急剧升高(P<0.01)。MCF-7/ADM细胞中有mdr-1、HER2/neu过量表达,经GEN单独及联合ADM作用后,HER2/neu mRNA表达明显下调,c-erbB2蛋白出现一致性的表达下调,但对mdr-1mRNA及P-gp无影响。结论人乳腺癌MCF-7/ADM细胞耐药性与耐药基因及原癌基因的高表达相关,GEN能下调MCF-7/ADM细胞HER-2/neu基因及蛋白表达,可能是其逆转MCF-7/ADM细胞多药耐药性的机制之一,但对由P-gp介导的多药耐药无效。 展开更多
关键词 三羟异黄酮 乳腺癌 mcf-7/adm 基因 mdr-1 基因 HER2/neu
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抑制自噬对乳腺癌阿霉素耐药的逆转作用 被引量:6
8
作者 陈平 吴正升 +2 位作者 吴强 闫红 汪树静 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期528-532,共5页
目的探讨自噬在乳腺癌阿霉素耐药过程中发挥的作用。方法采用大剂量阿霉素间歇诱导MCF-7细胞;应用MTT法检测阿霉素耐药细胞株MCF-7/ADM的耐药指数;通过qRT-PCR、Western blot及细胞免疫荧光法检测自噬表达;选用自噬抑制剂3-Methyladenin... 目的探讨自噬在乳腺癌阿霉素耐药过程中发挥的作用。方法采用大剂量阿霉素间歇诱导MCF-7细胞;应用MTT法检测阿霉素耐药细胞株MCF-7/ADM的耐药指数;通过qRT-PCR、Western blot及细胞免疫荧光法检测自噬表达;选用自噬抑制剂3-Methyladenine(3-MA)抑制细胞自噬,并检测MCF-7/ADM细胞株耐药性的逆转情况。结果乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM成功建立,MCF-7/ADM细胞对ADM有明显的耐药性,阿霉素抑制MCF-7和MCF-7/ADM细胞存活的IC50值分别为1.0 971μg/ml和175.8 921μg/ml,耐药倍数为160(P<0.01),且MCF-7/ADM细胞自噬表达升高,加入3-MA的实验组细胞耐药逆转倍数为1.16,差异有统计学意义(P<0.05)。结论抑制自噬可部分逆转MCF-7/ADM细胞耐药。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 阿霉素耐药 mcf-7/adm 自噬 3-Methyladenine
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人乳腺癌细胞及其耐药细胞转录因子表达的差异 被引量:4
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作者 陈淑娴 朱瑞宇 +1 位作者 付强 金坚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1257-1262,共6页
目的研究阿霉素在不同药敏性肿瘤细胞中转录因子水平的差异,为肿瘤细胞多药耐药机制的研究提供参考。方法通过细胞活力检测野生型乳腺癌细胞(MCF7/W)和对阿霉素耐药的乳腺癌细胞(MCF7/ADM)的药敏性差异;荧光显微镜镜检阿霉素荧光分布;... 目的研究阿霉素在不同药敏性肿瘤细胞中转录因子水平的差异,为肿瘤细胞多药耐药机制的研究提供参考。方法通过细胞活力检测野生型乳腺癌细胞(MCF7/W)和对阿霉素耐药的乳腺癌细胞(MCF7/ADM)的药敏性差异;荧光显微镜镜检阿霉素荧光分布;有机溶剂萃取法进行全细胞阿霉素吸收分析;细胞膜和核膜分离检测阿霉素的亚细胞定位;通过转录因子膜分析MCF7/W和MCF7/ADM细胞中转录因子表达差异。结果两株细胞的耐药IC50相差近10 000倍左右;利用镜检和定量分析,发现阿霉素在MCF7/W细胞中主要定位于胞核,而在MCF7/ADM细胞中则蓄积较少且主要定位于胞质;转录因子差异分析发现膜上总345个转录因子中,与野生型细胞相比,耐药细胞的106个转录因子表达上调,32个表达下调。结论阿霉素在耐药细胞与野生型细胞中转录因子表达的差异,可能是干扰阿霉素入核,阻止其功能发挥的基础。 展开更多
关键词 mcf-7/adm 阿霉素 IC50 转录因子 耐药细胞 亚细胞定位
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