LAIR-1通过阻断JAK2 V617F突变的人HEL细胞JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制其增殖并促进其凋亡 被引量：2

1

作者 樊翠 张娅薇 +3 位作者 杨蕊 吴肖婕 周嘉迪 薛江楠 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期207-214,共8页

目的研究人白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)对Janus激酶2(JAK2)V617F突变的人急性髓系白血病HEL细胞JAK/信号转导子与转录激活子(STAT)和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路的调节作用,以... 目的研究人白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)对Janus激酶2(JAK2)V617F突变的人急性髓系白血病HEL细胞JAK/信号转导子与转录激活子(STAT)和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路的调节作用,以及对细胞增殖和凋亡的影响。方法采用反转录PCR和基因测序鉴定JAK2 V617F突变;应用免疫共沉淀和Western blot法鉴定LAIR-1募集的蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)种类;采用CCK-8法检测HEL细胞的增殖;采用异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测HEL细胞的凋亡率;采用Western blot法检测JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR通路蛋白酪氨酸磷酸化水平及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、Bcl2相关X蛋白(BAX)和B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)的蛋白表达。结果在JAK2 V617F突变的HEL细胞中,LAIR-1与其配体胶原蛋白结合后可募集含Src同源域2磷酸酶2(SHP-2);LAIR-1可以下调HEL细胞JAK2、STAT1、STAT3、STAT5、AKT和mTOR的蛋白酪氨酸磷酸化水平,并能够显著抑制cyclin D1和Bcl2的表达,而对BAX的表达水平未见显著影响;LAIR-1能够明显抑制HEL细胞的增殖,促进HEL细胞凋亡。结论在JAK2 V617F突变的人白血病HEL细胞中,LAIR-1可通过募集SHP-2抑制JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR信号通路的活化,进而抑制HEL细胞的增殖,促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 骨髓增殖性肿瘤 白细胞相关免疫球蛋白样受体1(lair-1) JAK2 V617F突变 Janus激酶(JAK) 信号转导子与转录激活子(STAT) 磷脂酰肌醇3激酶(PI3K) 蛋白激酶B(AKT)

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肿瘤患者外周血中抑制性受体LAIR-1表达升高 被引量：8

2

作者 薛江楠 王春艳 +2 位作者 张晓姝 曹奇志 宿振国 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期373-374,377,共3页

目的:研究LAIR-1在肿瘤患者中的表达,探讨其在抗肿瘤免疫应答中的作用。方法:应用夹心ELISA检测肿瘤患者血清中可溶型sLAIR-1的水平;应用免疫荧光染色和流式细胞术分析,观察LAIR-1在患者PBMC中NK细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞和B细胞上的... 目的:研究LAIR-1在肿瘤患者中的表达,探讨其在抗肿瘤免疫应答中的作用。方法:应用夹心ELISA检测肿瘤患者血清中可溶型sLAIR-1的水平;应用免疫荧光染色和流式细胞术分析,观察LAIR-1在患者PBMC中NK细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞和B细胞上的表达。结果:肿瘤患者血清sLAIR-1水平为(4.6±3.2)μg/L,明显高于正常人血清sLAIR-1水平(3.9±3.0)μg/L,P<0.05。NK细胞,CD4+T细胞及CD8+T细胞表达LAIR-1水平上调。肺癌患者CD4/CD8比值明显低于正常人,B细胞百分率明显高于正常人。NK细胞、CD4+T细胞CD8+T细胞中LAIR-1的表达阳性率高于对照组。结论:在肿瘤患者LAIR-1分子表达水平高于正常人。肿瘤患者抑制性受体LAIR-1表达水平的上调可能与肿瘤的免疫逃逸有关。 展开更多

关键词 lair-1 CD305 抑制性受体 肿瘤

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人LAIR-1/CD305基因启动子的生物信息学分析 被引量：6

3

作者 杨树德 曹奇志 +2 位作者 冯小英 张晓姝 薛江楠 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期826-828,共3页

目的：研究人LAIR-1／CD305启动子及其5′上游调控序列。方法：通过检索NCBI中的人类基因组数据库，获得LAIR-1的转录本序列及翻译起始位点上游2500bp的序列。利用Promoter 2．0等软件预测LAIR-1的启动子序列，然后利用MatInspector等... 目的：研究人LAIR-1／CD305启动子及其5′上游调控序列。方法：通过检索NCBI中的人类基因组数据库，获得LAIR-1的转录本序列及翻译起始位点上游2500bp的序列。利用Promoter 2．0等软件预测LAIR-1的启动子序列，然后利用MatInspector等软件对启动子序列的转录因子结合位点和启动子功能模块进行预测。结果：LAIR-1基因的核心启动子区位于翻译起始密码子上游的600～200bp区域内。在转录调控区发现了一些重要的转录因子结合位点，并预测到13种启动子功能模块。结论：LAIR-1基因的表达可能受到多种转录因子和5′端上游调控序列的调控。 展开更多

关键词 生物信息学 lair-1 启动子 转录因子

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LAIR-1/LAIR-2(CD305/CD306)推定配体分布的研究 被引量：3

4

作者 许晓光 王春燕 +4 位作者 谢鑫 薛江楠 欧阳为明 菅金龙 金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期553-556,560,共5页

目的:研究LAIR-1(CD305)及LAIR-2(CD306)推定配体在多种细胞系上的分布,为鉴定LAIR-1/LAIR-2推定配体提供了实验依据。方法:建立稳定表达LAIR-1-Fc和LAIR-2-Fc融合蛋白的细胞系。以纯化的融合蛋白进行活细胞免疫荧光染色,用流式细胞仪检... 目的:研究LAIR-1(CD305)及LAIR-2(CD306)推定配体在多种细胞系上的分布,为鉴定LAIR-1/LAIR-2推定配体提供了实验依据。方法:建立稳定表达LAIR-1-Fc和LAIR-2-Fc融合蛋白的细胞系。以纯化的融合蛋白进行活细胞免疫荧光染色,用流式细胞仪检测LAIR-1及LAIR-2推定配体在多种细胞系膜表面的表达,并比较LAIR-1和LAIR-2推定配体的分布及可能结合的位点。结果:LAIR-1推定配体及LAIR-2推定配体均在人羊膜来源的上皮细胞系WISH上高表达,在人黑色素瘤细胞系C32、人胚肾上皮细胞系293T及人脐静脉内皮细胞系ECV304上有一定程度的表达。LAIR-1-Fc和LAIR-2-Fc融合蛋白与推定配体的结合,可分别被可同时识别LAIR-2和LAIR-1的单克隆抗体(mAb)FMU-LAIR-2.2和FMU-LAIR-2.1阻断。结论:LAIR-1推定配体及LAIR-2推定配体的分布基本一致,主要表达于WISH、C32、293T和ECV304细胞系。LAIR-1和LAIR-2可能拥有共同的配体。 展开更多

关键词 lair-1 lair-2 推定配体 融合蛋白 单克隆抗体 CD305 CD306

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9.1C3/LAIR-1的真核表达、纯化及单克隆抗体的制备和鉴定 被引量：3

5

作者 薛江楠 欧阳为明 +6 位作者 贾卫 张新海 谢鑫 曹云新 宁双飞 李琦 金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期614-616,共3页

目的　表达并纯化 9.1C3/LAIR 1胞膜外区与人的IgG1Fc段的融合蛋白 ,制备针对 9.1C3/LAIR 1胞膜外区的单克隆抗体 (mAb)。方法　构建真核表达载体 pIg/ 3C 9.1C3/LAIR 1,表达并纯化 9.1C3/LAIR 1 Fc融合蛋白。以 9.1C3/LAIR 1 Fc融合蛋... 目的　表达并纯化 9.1C3/LAIR 1胞膜外区与人的IgG1Fc段的融合蛋白 ,制备针对 9.1C3/LAIR 1胞膜外区的单克隆抗体 (mAb)。方法　构建真核表达载体 pIg/ 3C 9.1C3/LAIR 1,表达并纯化 9.1C3/LAIR 1 Fc融合蛋白。以 9.1C3/LAIR 1 Fc融合蛋白免疫BALB/c小鼠 ,制备。以间接免疫荧光染色和流式细胞术鉴定mAb的特异性 ,以竞争结合实验鉴定mAb识别LAIR 1的表位。结果表达并纯化了 9.1C3/LAIR 1 hIgFc融合蛋白 ,以其免疫BALB/c小鼠 ,获得 1株针对 9.1C3/LAIR 1胞膜外区的mAb 4H7。4H7对HL 6 0细胞和经 9.1C3/LAIR 1cDNA转染的COS7细胞上的表位识别 ,与已报道的抗 9.1C3mAb体不同。结论　成功地构建了 9.1C3/LAIR 1胞膜外区基因的真核表达载体 ,并表达纯化了 9.1C3/LAIR 1 hIgFc融合蛋白。获得一株针对 9.1C3/LAIR 1胞膜外区的mAb ,为进一步研究9.1C3/LAIR 展开更多

关键词 9.1C3/lair-1 真核表达 纯化 单克隆抗体 鉴定

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可溶型LAIR-1分子在冠心病患者血清中的ELISA检测 被引量：2

6

作者 薛江楠 洪燕 +2 位作者 韩卫宁 欧阳为明 金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期475-476,共2页

关键词 lair-1 夹心ELISA 冠心病

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4个品种猪血清中sLAIR-1表达量的ELISA检测 被引量：2

7

作者 潘斌 杨辉 +5 位作者 郭亚芬 范晶 兰干球 蒋钦杨 朱祁明 王爱德 《南方农业学报》 CAS CSCD 2011年第1期102-104,共3页

【目的】进一步证实利用广西巴马小型猪建立异种器官移植供体模型的可行性。【方法】利用夹心ELISA方法分别检测广西巴马小型猪、长白猪、大约克猪及杜洛克猪血清中可溶型白细胞相关免疫球蛋白样受体1(sLAIR-1)含量,筛选出血清中sLAIR-... 【目的】进一步证实利用广西巴马小型猪建立异种器官移植供体模型的可行性。【方法】利用夹心ELISA方法分别检测广西巴马小型猪、长白猪、大约克猪及杜洛克猪血清中可溶型白细胞相关免疫球蛋白样受体1(sLAIR-1)含量,筛选出血清中sLAIR-1表达量最低的猪品种,为异种移植提供一定参考指标。【结果】所检测的4个不同品种猪血清中sLAIR-1的表达量分别为:广西巴马小型猪(2.39±0.20μmol/L)<大约克猪(3.51±0.28μmol/L)<长白猪(3.59±0.28μmol/L)<杜洛克猪(3.62±0.31μmol/L),且广西巴马小型猪血清中sLAIR-1的表达量显著低于长白猪、大约克猪、杜洛克猪3个品种(P<0.01)。【结论】广西巴马小型猪在异种移植中具有良好的先天优势,可能会成为异种移植的理想动物模型。 展开更多

关键词 猪 slair-1 ELISA检测 异种移植 排斥反应

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四环素调控的小鼠LAIR-1/CD305转基因小鼠的初步建立 被引量：1

8

作者 方亮 缪军 +5 位作者 韩卫宁 张圆 张瑞中 张新海 庄然 金伯泉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期199-201,207,共4页

目的建立四环素调控的小鼠LAIR-1/CD305转基因小鼠,为进一步研究mLAIR-1分子的体内功能奠定基础。方法构建pBI-5-mLAIR-1载体,显微注入B6D1F1受精卵,PCR检测新生小鼠基因组DNA中LAIR-1与荧光素酶(Lucifer-ase)基因。将mLAIR-1和荧光素... 目的建立四环素调控的小鼠LAIR-1/CD305转基因小鼠,为进一步研究mLAIR-1分子的体内功能奠定基础。方法构建pBI-5-mLAIR-1载体,显微注入B6D1F1受精卵,PCR检测新生小鼠基因组DNA中LAIR-1与荧光素酶(Lucifer-ase)基因。将mLAIR-1和荧光素酶双阳性小鼠耳成纤维细胞转染含rtTA的pUHD17.1质粒,用含盐酸强力霉素(Dox)的培养基进行培养,检测细胞裂解液中荧光素酶活性。将荧光素酶表达依赖Dox小鼠与C57BL/6交配,采用PCR对子代鼠进行检测。结果共获得9只首建鼠,其目的基因表达高度依赖Dox,并得到其中5只首建鼠的F1代小鼠。结论获得了四环素调控的小鼠LAIR-1转基因小鼠,可用于该分子体内功能的研究。 展开更多

关键词 小鼠lair-1 转基因小鼠 四环素调控表达系统

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LAIR-1/LAIR-2(CD305/CD306)与配体结合亲和力的比较

9

作者 许晓光 王春艳 +5 位作者 谢鑫 张圆 韩卫宁 蔡明 石炳毅 金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期891-893,共3页

目的:LAIR-1/LAIR-2(CD305/306)与配体结合亲和力的比较。方法:应用不同浓度混合的LAIR-1和LAIR-2融合蛋白,同时或先后与配体表达细胞孵育后,用特异性LAIR-1或LAIR-2单克隆抗体(mAb)进行免疫荧光染色和流式细胞术(FCM)分析,比较LAIR-1和... 目的:LAIR-1/LAIR-2(CD305/306)与配体结合亲和力的比较。方法:应用不同浓度混合的LAIR-1和LAIR-2融合蛋白,同时或先后与配体表达细胞孵育后,用特异性LAIR-1或LAIR-2单克隆抗体(mAb)进行免疫荧光染色和流式细胞术(FCM)分析,比较LAIR-1和LAIR-2融合蛋白与细胞结合的百分率的变化及相互竞争情况。结果:LAIR-1和LAIR-2膜型配体的分布较广泛,人和小鼠LAIR受体与配体的结合具有相互交叉的特点。LAIR-2能够明显阻断LAIR-1与其膜型配体的结合,而LAIR-1对LAIR-2与其配体的结合无影响。结论:LAIR-1和LAIR-2可能结合相同的膜型配体,但LAIR-2结合配体的亲和力明显高于LAIR-1结合的亲和力。此结果为深入探讨LAIR家族免疫调节的分子机制提供重要的实验依据。 展开更多

关键词 lair-1 lair-2 CD305 CD306 配体 亲和力

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叉头盒O1(FoxO1)调节RAW264.7巨噬细胞白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)启动子转录活性

10

作者 王嵩 张圆 +2 位作者 衣鑫 庄然 丁勇 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1091-1096,共6页

目的研究叉头盒O1(FoxO1)对RAW264.7巨噬细胞白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)启动子转录活性的调控作用。方法采用100 ng/m L脂多糖(LPS)刺激RAW264.7巨噬细胞6、12、24 h,流式细胞术观察RAW264.7细胞活化过程中LAIR-1、CD11b以及... 目的研究叉头盒O1(FoxO1)对RAW264.7巨噬细胞白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)启动子转录活性的调控作用。方法采用100 ng/m L脂多糖(LPS)刺激RAW264.7巨噬细胞6、12、24 h,流式细胞术观察RAW264.7细胞活化过程中LAIR-1、CD11b以及细胞吞噬功能的变化。软件预测FoxO1与LAIR-1启动子之间存在结合位点。构建FoxO1fl/fl/Lys M-Cre小鼠,观察FoxO1敲除后,RAW264.7巨噬细胞LAIR-1的水平变化。构建LAIR-1基因启动子荧光素酶报告基因载体,转染FoxO1观察对其转录活性的影响。结果 LPS刺激后RAW264.7细胞活化,CD11b表达升高,吞噬能力增强,LAIR-1水平下调。成功构建了髓系细胞FoxO1基因敲除小鼠FoxO1fl/fl/Lys M-Cre,该小鼠LAIR-1 mRNA水平显著降低。软件预测发现在LAIR-1基因启动子区域存在潜在的FoxO1转录因子结合位点,荧光素酶报告基因证实FoxO1可激活LAIR-1启动子转录活性。结论 FoxO1可激活巨噬细胞LAIR-1启动子转录活性。 展开更多

关键词 叉头盒O1(FoxO1) 白细胞相关免疫球蛋白样受体1(lair-1) 巨噬细胞 小鼠 启动子 转录

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广西巴马小型猪LAIR-1基因cDNA克隆及序列分析 被引量：4

11

作者 黄云 张名嫒 +3 位作者 黎江 蒋钦杨 兰干球 郭亚芬 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期692-696,共5页

【目的】了解广西巴马小型猪白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)基因的序列特征及基本结构,为以广西巴马小型猪作为人类器官模型及器官移植手术后的排斥反应研究奠定基础。【方法】根据GenBank上已登录的人和家鼠LAIR-1基因序列的保... 【目的】了解广西巴马小型猪白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)基因的序列特征及基本结构,为以广西巴马小型猪作为人类器官模型及器官移植手术后的排斥反应研究奠定基础。【方法】根据GenBank上已登录的人和家鼠LAIR-1基因序列的保守区域,用Oligo设计合成1对引物,并以广西巴马小型猪总RNA为模板,对LAIR-1基因进行RT-PCR扩增,经PCR和双酶切鉴定后,进行测序及同源性比对分析。【结果】从广西巴马小型猪的外周血淋巴细胞中克隆获得LAIR-1基因cDNA序列,全长867bp;与人、家鼠和挪威鼠的同源性分别为79.3%、50.9%和49.9%。【结论】广西巴马小型猪LAIR-1基因cDNA序列与人类的亲缘关系最近,进一步验证了广西巴马小型猪作为人类器官模型研究的可行性。 展开更多

关键词 广西巴马小型猪 lair-1基因 CDNA 克隆 序列分析

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LAIR-1与TGF-β在口腔扁平苔藓患者外周血中表达的相关性研究 被引量：4

12

作者 张立荟 李言君 +3 位作者 于平 付爱丽 薛江楠 刘玉三 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期760-763,共4页

目的:研究LAIR-1和TGF-β在口腔扁平苔藓(OLP)患者外周血中的表达情况,探讨LAIR-1和TGF-β对OLP患者免疫功能的影响。方法:采用流式细胞术检测LAIR-1在OLP患者(n=22)和健康人(n=22)外周血Treg上的表达水平,ELISA检测外周血TGF-β的水平... 目的:研究LAIR-1和TGF-β在口腔扁平苔藓(OLP)患者外周血中的表达情况,探讨LAIR-1和TGF-β对OLP患者免疫功能的影响。方法:采用流式细胞术检测LAIR-1在OLP患者(n=22)和健康人(n=22)外周血Treg上的表达水平,ELISA检测外周血TGF-β的水平。结果:OLP患者外周血CD4+Foxp3+Treg上LAIR-1阳性率高于健康人,TGF-β的水平亦高于健康人,LAIR-1在CD4+Foxp3+Treg上的表达水平和TGF-β的水平呈正相关(r=0.43,P<0.05)。结论:LAIR-1和TGF-β在OLP患者外周血中表达上调,提示LAIR-1和TGF-β可能参与了OLP的发病。 展开更多

关键词 口腔扁平苔藓 调节性T细胞 lair-1 TGF-Β 流式细胞术 ELISA

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白细胞相关免疫球蛋白样受体-1在破骨细胞发育中的作用 被引量：2

13

作者 张圆 丁勇 +2 位作者 庄然 张春梅 金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期372-374,378,共4页

目的研究白细胞相关免疫球蛋白样受体-1(LAIR-1)在破骨细胞(OC)发育过程中的表达规律及影响。方法 PCR检测小鼠LAIR-1(mLAIR-1)分子在体外诱导OC生成过程中mRNA水平的变化;重酒石酸盐抗性酸性磷酸酶(TRAP)染色观察OC的数量;Corning Oste... 目的研究白细胞相关免疫球蛋白样受体-1(LAIR-1)在破骨细胞(OC)发育过程中的表达规律及影响。方法 PCR检测小鼠LAIR-1(mLAIR-1)分子在体外诱导OC生成过程中mRNA水平的变化;重酒石酸盐抗性酸性磷酸酶(TRAP)染色观察OC的数量;Corning Osteo Assay surface检测OC骨吸收陷窝的形成;ELISA检测类风湿性关节炎(RA)患者血清可溶型LAIR-1(sLAIR-1)与疾病的炎症状态和活动度是否相关。结果 PCR结果显示在OC形成过程中,LAIR-1 mRNA显著降低;TRAP染色和骨吸收陷窝实验均显示加入mLAIR-1单克隆抗体后,OC数量明显减少。RA病人类风湿因子高低水平组之间的血清sLAIR-1水平存在显著差异。结论 LAIR-1分子可能参与了OC的发育过程,并且与RA疾病的炎症状态有一定关系。 展开更多

关键词 破骨细胞 lair-1 发育 类风湿性关节炎

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雌二醇下调系统性红斑狼疮合并妊娠患者B淋巴细胞表面部分抑制性受体的水平 被引量：2

14

作者 方揆 徐英英 陈细玲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1541-1543,共3页

目的观察血清雌二醇对系统性红斑狼疮(SLE)合并妊娠患者B淋巴细胞表面抑制性受体CD72、CD32b、白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)表达的影响。方法提取40例SLE合并妊娠患者和10例健康妊娠妇女的B淋巴细胞,采集妊娠第5、6、7周外周血... 目的观察血清雌二醇对系统性红斑狼疮(SLE)合并妊娠患者B淋巴细胞表面抑制性受体CD72、CD32b、白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)表达的影响。方法提取40例SLE合并妊娠患者和10例健康妊娠妇女的B淋巴细胞,采集妊娠第5、6、7周外周血中雌二醇刺激B细胞进行培养。ELISA检测B淋巴细胞表面抑制性受体CD72、CD32b、LAIR-1表达水平。结果正常妊娠女性在孕5、6、7周时雌二醇浓度逐渐增加,而CD72、CD32b、LAIR-1无明显变化;分离SLE妊娠妇女B淋巴细胞,经(500、1000、1500)U/L雌二醇体外刺激后,B细胞CD72、CD32b、LAIR-1随着雌二醇剂量的增加逐渐降低,且低于正常妊娠妇女对照组。结论雌二醇可下调SLE合并妊娠患者B淋巴细胞CD72、CD32b、LAIR-1的表达。 展开更多

关键词 雌二醇 系统性红斑狼疮 妊娠 CD72 CD32b 白细胞相关免疫球蛋白样受体1(lair-1)

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