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c-erbB2反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞放射敏感性的影响 被引量：3
1
作者 任庆兰 吴永忠 +1 位作者 刘渝 李少林 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2003年第4期421-423,共3页
目的 :探讨癌基因c -erbB2的反义寡苷酸对人卵巢癌细胞放射敏感性的影响。方法 :设立c -erbB2正义寡核苷酸组和非处理组作对照 ,用RT -PCR检测卵巢癌细胞处理前后c -erbB2表达水平的变化。用MTT法及平板克隆形成试验检测人卵巢癌细胞株S... 目的 :探讨癌基因c -erbB2的反义寡苷酸对人卵巢癌细胞放射敏感性的影响。方法 :设立c -erbB2正义寡核苷酸组和非处理组作对照 ,用RT -PCR检测卵巢癌细胞处理前后c -erbB2表达水平的变化。用MTT法及平板克隆形成试验检测人卵巢癌细胞株SKOV3在脂质体c-erbB2反义寡核苷酸作用前后受60 Coγ射线不同剂量照射后的细胞存活分数和集落形成率。结果 :c -erbB2反义寡核苷酸能抑制c-erbB2癌基因的表达 ,经脂质体介导的c-erbB2反义寡核苷酸作用的卵巢癌细胞经γ射线照射后其存活分数和集落形成率较转染正义寡核苷酸组及单纯照射组明显下降 (P <0 .0 1) ,而转染c -erbB2正义寡核苷酸组的存活分数和集落形成率与单纯照射组相比无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论 :c -erbB2反义寡核苷酸通过抑制c -erbB2的表达降低人卵巢癌细胞株SKOV3放射抗拒性。该作用可能与c-erbB2反义寡核苷酸抑制了引起细胞辐射抗拒的细胞信号转导途径有关。 展开更多
关键词 卵巢癌细胞株 脂质体 c—erbB2反义寡核苷酸 放射敏感性
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姜黄素对人卵巢癌细胞株skov_3生长的影响 被引量：4
2
作者 龚萍 李红霞 张素梅 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期40-43,共4页
目的探讨姜黄素对人卵巢癌细胞株skov3体外生长的的影响。方法采用MTT法测定姜黄素不同浓度及不同时间对人卵巢癌细胞株skov3生长的抑制作用,计算细胞生长抑制率;光镜和电镜下观测细胞形态学及超微结构的改变;流式细胞仪检测细胞的凋亡... 目的探讨姜黄素对人卵巢癌细胞株skov3体外生长的的影响。方法采用MTT法测定姜黄素不同浓度及不同时间对人卵巢癌细胞株skov3生长的抑制作用,计算细胞生长抑制率;光镜和电镜下观测细胞形态学及超微结构的改变;流式细胞仪检测细胞的凋亡率。结果姜黄素具有诱导人卵巢癌细胞株skov3细胞凋亡的作用,呈剂量和时间依赖性。部分细胞出现凋亡形态学改变。结论姜黄素通过抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡等机制,能显著地抑制卵巢癌细胞sk-ov3的体外生长。 展开更多
关键词 姜黄素 人卵巢癌细胞株 细胞周期 凋亡
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三氧化二砷诱导人卵巢癌细胞凋亡及对线粒体的影响 被引量：4
3
作者 宁燕 米粲 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期425-427,共3页
目的研究三氧化二砷(As2O3)诱导人卵巢癌细胞凋亡中是否发生线粒体系统和Bcl-2蛋白表达的改变,探讨As2O3诱导凋亡的可能引发机制。方法采用光镜、电镜和流式细胞术等技术,观察细胞凋亡、线粒体超微结构改变及检测线粒体跨膜电位(Δψm)... 目的研究三氧化二砷(As2O3)诱导人卵巢癌细胞凋亡中是否发生线粒体系统和Bcl-2蛋白表达的改变,探讨As2O3诱导凋亡的可能引发机制。方法采用光镜、电镜和流式细胞术等技术,观察细胞凋亡、线粒体超微结构改变及检测线粒体跨膜电位(Δψm)。结果As2O3可诱导卵巢癌细胞凋亡,具有剂量依赖性和细胞株类型差异性;不同浓度As2O3均可诱导SKOV3、3AO细胞Δψm的降低,且随浓度升高,下降愈明显;电镜观察到As2O3作用SKOV3、3AO72h后,线粒体明显肿胀,内嵴消失,基质电子密度降低。免疫荧光染色显示As2O3能抑制SKOV3、3AO细胞的Bcl-2蛋白表达。结论线粒体Δψm的下降和Bcl-2蛋白表达的抑制,是As2O3诱导细胞凋亡的重要环节。 展开更多
关键词 三氧化二砷 人卵巢癌细胞 细胞凋亡 线粒体 BCL-2
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三氧化二砷诱导人卵巢癌细胞凋亡对端粒酶活性的影响 被引量：4
4
作者 宁燕 米粲 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期62-64,共3页
目的探讨As2O3诱导细胞凋亡时对其端粒酶活性的影响及其作用机制。方法采用光镜、电镜,PCR-ELISA,RT-PCR等技术,检测细胞凋亡,端粒酶活性及其催化亚单位的表达。结果As2O3可诱导卵巢癌细胞凋亡,但存在作用浓度,细胞株类型差异性;端粒酶... 目的探讨As2O3诱导细胞凋亡时对其端粒酶活性的影响及其作用机制。方法采用光镜、电镜,PCR-ELISA,RT-PCR等技术,检测细胞凋亡,端粒酶活性及其催化亚单位的表达。结果As2O3可诱导卵巢癌细胞凋亡,但存在作用浓度,细胞株类型差异性;端粒酶活性随药物作用时间和浓度的增加而明显减弱,同时伴随hTERT mRNA表达水平的下降。结论端粒酶活性和hTERT mRNA表达在As2O3诱导SKOV3、3AO细胞凋亡过程中共同发挥作用,两者有密切关系,是诱导细胞凋亡的分子机制之一。 展开更多
关键词 三氧化二砷 人卵巢癌细胞 细胞凋亡 端粒酶活性
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接合物蛋白Crk与CrkL在卵巢癌细胞株MCAS细胞增殖中的不同作用 被引量：1
5
作者 李文燕 高一萌 +3 位作者 张瑜 王瑾 车亚玲 令狐华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1185-1188,共4页
目的探讨接合物蛋白Crk和CrkL在卵巢癌细胞株MCAS细胞增殖中的不同作用。方法采用免疫共沉淀法检测上皮性卵巢癌细胞株MACS中Crk和CrkL蛋白与已知的与肿瘤增殖相关的上下游结合蛋白的内源性结合;用可调节性siRNA敲低MACS细胞中内源性的... 目的探讨接合物蛋白Crk和CrkL在卵巢癌细胞株MCAS细胞增殖中的不同作用。方法采用免疫共沉淀法检测上皮性卵巢癌细胞株MACS中Crk和CrkL蛋白与已知的与肿瘤增殖相关的上下游结合蛋白的内源性结合;用可调节性siRNA敲低MACS细胞中内源性的Crk及CrkL,观察二者对细胞生长及存活能力的影响。结果免疫共沉淀显示卵巢癌细胞株MACS中,Crk与影响细胞生长增殖的上游蛋白p130Cas及下游蛋白Sos的结合明显强于CrkL,尽管Crk与CrkL表现出部分相同的免疫原性。免疫印迹显示在加入Dox后即Crk或CrkL表达沉默被启动。Crki/CrkLi细胞中加入Dox后Crk与CrkL表达明显降低[Dox+:Crk(0.021±0.001),CrkL(0.676±0.005);Dox-:Crk(0.544±0.003),CrkL(1.282±0.007),P<0.05]。对可调节性siRNA构建之可控性Crki/CrkLi细胞的连续动态观察发现,Crki细胞表现出细胞增殖力受限仍保存生存活力,而CrkLi细胞则表现出逐渐脱壁至死亡。结论 Crk及CrkL在卵巢癌细胞MCAS的恶性增殖中扮演着不同的作用,Crk蛋白的过度表达可能直接影响着卵巢癌细胞恶性增殖,而CrkL则可能更多地参与了细胞基本生存相关的生物行为。 展开更多
关键词 CRK CrkL 接合物蛋白 卵巢癌细胞株MCAS
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糖皮质激素对人卵巢癌细胞系HO-8910细胞周期的影响 被引量：1
6
作者 夏冰 陈玉霞 +1 位作者 陈光椿 卢建 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期499-501,共3页
目的:观察糖皮质激素对人卵巢癌细胞HO-8910细胞周期的影响,并初步探讨其作用机制。方法:将1×10-7mol/L地塞米松(dexamethasone,Dex)和1×10-6mol/L糖皮质激素受体阻断剂RU486分别单用或合用处理HO-8910细胞,采用流式细胞术测... 目的:观察糖皮质激素对人卵巢癌细胞HO-8910细胞周期的影响,并初步探讨其作用机制。方法:将1×10-7mol/L地塞米松(dexamethasone,Dex)和1×10-6mol/L糖皮质激素受体阻断剂RU486分别单用或合用处理HO-8910细胞,采用流式细胞术测定细胞周期,核素掺入半定量RT-PCR检测细胞周期蛋白激酶抑制剂p21/WAF1的表达水平。结果:Dex诱导HO-8910细胞发生G0/G1期停滞,并使p21/WAF1 mRNA表达上调;RU486可逆转Dex引起的p21/WAF1表达的变化。结论:p21/WAF1的表达上调可能参与糖皮质激素引起的HO-8910细胞G0/G1期停滞作用。 展开更多
关键词 糖皮质激素 人卵巢癌细胞系 HO-8910 细胞周期
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二氢黄腐酚通过调控HK2表达对人卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP的耐药性影响 被引量：2
7
作者 王慧 王静 +5 位作者 闫冬娟 茹晓楠 马春星 王思思 陈江平 康燕华 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2022年第8期806-812,共7页
目的 目前二氢黄腐酚通过调控HK2表达对人卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP的耐药性影响及其机制研究较少。文中旨在研究黄腐酚衍生物二氢黄腐酚(DXN)对人卵巢癌顺铂耐药(DDP)细胞株SKOV3/DDP耐药影响和机制。方法 SKOV3/DDP细胞分成对照... 目的 目前二氢黄腐酚通过调控HK2表达对人卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP的耐药性影响及其机制研究较少。文中旨在研究黄腐酚衍生物二氢黄腐酚(DXN)对人卵巢癌顺铂耐药(DDP)细胞株SKOV3/DDP耐药影响和机制。方法 SKOV3/DDP细胞分成对照组、DXN组(4μmol/L DXN)、DDP组(4 mg/L DDP)、DXN+DDP组(4μmol/L DXN+4 mg/L DDP)、DXN+DDP+Vector组(转染空载质粒+4μmol/L DXN+4 mg/L DDP)、DXN+DDP+HK2组(转染HK2过表达载体+4μmol/L DXN+4 mg/L DDP)、si-NC组(转染siRNA control)、si-HK2组(转染HK siRNA)。MTT方法检测其增殖,计算IC50及其逆转倍数,Western blot检测HK2蛋白表达,测定葡萄糖摄取、乳酸产量。结果 DDP单独处理的IC50为16.17mg/L,联合DXN处理的IC50为9.72 mg/L,逆转倍数为1.66。与对照组和DDP组比较,DXN+DDP组的DDPSKOV3/DDP细胞HK2蛋白表达量、葡萄糖相对摄取量、乳酸相对生成量明显降低(P<0.05)。si-NC组、si-HK2组细胞与DDP处理后,IC50分别为17.92、11.17 mg/L,逆转倍数为1.60。与si-NC组比较,si-HK2组SKOV3/DDP细胞HK2蛋白表达量、葡萄糖相对摄取量、乳酸相对生成量明显降低(P<0.05)。与对照组和DXN+DDP+Vector组比较,DXN+DDP+HK2组SKOV3/DDP细胞中HK2蛋白表达量、葡萄糖相对摄取量、乳酸相对生成量明显升高(P<0.05)。计算DXN(0μmol/L)、DXN(4μmol/L)+Vector、DXN(4μmol/L)+HK2细胞与DDP处理后IC50分别为16.59、9.66、13.10 mg/L,DXN对SKOV3/DDP细胞DDP耐药的逆转倍数为1.72,过表达HK2和DXN联合处理对SKOV3/DDP细胞DDP耐药的逆转倍数为1.27。结论 DXN通过抑制HK2进而抑制有氧糖酵解逆转SKOV3/DDP耐药,为研究DXN在卵巢癌耐药中的作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 二氢黄腐酚 人卵巢癌顺铂耐药细胞株 己糖激酶2 糖酵解
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地塞米松对人卵巢癌HO-8910细胞ERK和p38活性的快速作用
8
作者 夏冰 卢建 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期1374-1376,共3页
目的 :观察人工合成糖皮质激素地塞米松 (Dex)对人卵巢癌细胞系HO - 891 0中丝裂原激活的蛋白激酶 (MAPK)家族成员ERK1 /2和p38活性的影响。方法 :Westernblot测定ERK和p38活性。结果 :1 0 - 7mol/LDex在 5min内即可引起ERK1和ERK2活性... 目的 :观察人工合成糖皮质激素地塞米松 (Dex)对人卵巢癌细胞系HO - 891 0中丝裂原激活的蛋白激酶 (MAPK)家族成员ERK1 /2和p38活性的影响。方法 :Westernblot测定ERK和p38活性。结果 :1 0 - 7mol/LDex在 5min内即可引起ERK1和ERK2活性下降 ,30min作用最明显 ,分别比对照降低 41 %和 54 % (均P <0 .0 1 ) ;之后回升 ,4h后活性达对照水平 ;该作用具有激素浓度 (1 0 - 1 0 - 1 0 - 6 mol/L)依赖性。Dex还可在 5min内增加p38活性 ,1 5min作用最显著 ,比对照增加 84% (P <0 .0 1 ) ,1h后达对照水平。这些作用不能被糖皮质激素受体 (GR)拮抗剂RU486所阻断。结论 :Dex能够以GR非依赖性方式 ,快速抑制HO - 891 0细胞ERK1 /2活性和促进p38活性 。 展开更多
关键词 地塞米松 卵巢癌 HO-8910细胞 ERK p38活性 细胞增殖
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人磷脂磷酸水解酶3基因真核表达载体的构建及其对卵巢癌细胞生长的抑制作用
9
作者 李留霞 乔玉环 +6 位作者 王淼 郭瑞霞 赵国强 张孝艳 周蔚 张建好 赵先兰 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第1期69-74,共6页
目的:构建人磷脂磷酸水解酶3(hLPP3)基因的真核表达载体pLenExpress-hLPP3并转染卵巢癌细胞系SKOV3细胞,初步观察重组表达载体对卵巢癌细胞的转染效率、目的基因表达情况及对卵巢癌细胞生长的影响。方法:采用RT-PCR法从正常胎盘组织中提... 目的:构建人磷脂磷酸水解酶3(hLPP3)基因的真核表达载体pLenExpress-hLPP3并转染卵巢癌细胞系SKOV3细胞,初步观察重组表达载体对卵巢癌细胞的转染效率、目的基因表达情况及对卵巢癌细胞生长的影响。方法:采用RT-PCR法从正常胎盘组织中提取hLPP3基因,先克隆入克隆载体pGEM-T easy质粒得到pGEM-T-hLPP3,再用BamHⅠ和XhoⅠ进行双酶切,切下的hLPP3基因亚克隆入真核表达载体pLenExpress,得到pLenEx-press-hLPP3重组质粒,采用脂质体转染法转染卵巢癌细胞系SKOV3细胞。实验分为3组:A组为实验组(转染表达hLPP3基因重组质粒)、B组为空质粒对照(转染空表达质粒)、C组为无转染对照。荧光显微镜观察细胞转染效率,实时荧光定量PCR法检测hLPP3 mRNA的表达,化学法测定转染前后细胞上清液中溶血磷脂酸(LPA)含量的变化,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况。结果:重组表达质粒经限制性酶切鉴定得到与hLPP3基因长度一致(936bp)的酶切产物,测序分析证实,目的基因序列与GenBank上登录的hLPP3基因(BC009196)序列完全一致。荧光显微镜下见A、B2组SKOV3细胞内有大量绿色荧光信号,转染率分别为67%和69%,C组细胞中无荧光信号。实时荧光定量PCR测定显示A组细胞中hLPP3 mRNA的相对表达量较B、C组明显增加(A、B、C组分别为0.5109±0.0584、0.1499±0.0255、0.1433±0.0181,P<0.05)。A组卵巢癌细胞上清液中的LPA含量较B、C组明显下降[A、B、C组分别为(2.37±0.76)μmol/L、(6.71±2.03)μmol/L、(6.84±1.49)μmol/L,P<0.05];流式细胞仪检测显示A组卵巢癌细胞凋亡率明显增加[A、B、C组分别为(30.50±2.12)%、(1.26±0.43)%、(0.10±0.03)%,P<0.05],细胞周期无明显变化。结论:成功构建了表达目的基因hLPP3的重组真核表达载体pLenEx-press-hLPP3,并能高效转染卵巢癌细胞系SKOV3细胞,使细胞中hLPP3基因表达水平明显升高。增强hLPP3基因表达可以降低细胞外LPA水平,诱导细胞凋亡,抑制卵巢癌细胞的生长。 展开更多
关键词 人磷脂磷酸水解酶3 卵巢癌细胞系 真核表达载体 转染
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固体脂质纳米姜黄素联合顺铂对卵巢癌SKOV3的增殖及Bax/Bcl-2蛋白表达的实验研究 被引量：3
10
作者 邓舒婷 甘霖 +2 位作者 周琦 徐建业 李少林 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期650-653,共4页
目的:研究固体脂质纳米姜黄素(Curcumin-loaded solid lipid nanoparticles,SLN-Cur)与顺铂(Cisplatin,DDP)联用对人卵巢癌SKOV3细胞株生长的影响及促凋亡作用。方法:姜黄素(Curcumin,Cur)制备成SLN-Cur新型给药系统,分别检测DDP、Cur、... 目的:研究固体脂质纳米姜黄素(Curcumin-loaded solid lipid nanoparticles,SLN-Cur)与顺铂(Cisplatin,DDP)联用对人卵巢癌SKOV3细胞株生长的影响及促凋亡作用。方法:姜黄素(Curcumin,Cur)制备成SLN-Cur新型给药系统,分别检测DDP、Cur、SLN-Cur、DDP+Cur、DDP+SLN-Cur对人卵巢癌SKOV3细胞株凋亡形态学变化及超微结构变化,细胞凋亡率及凋亡相关基因蛋白的表达。结果:SLN-Cur可抑制SKOV3细胞生长,抑制率与药物浓度及作用时间成依赖关系,24 h IC50=40.14μmol/L,DDP与SLN-Cur联合诱导细胞凋亡作用增强,具有显著协同作用;Bcl-2表达减弱,Bax表达增强。结论:SLN-Cur合用DDP对SKOV3细胞株具有较好的抑制增殖及促凋亡作用,通过下调Bcl-2表达及上调Bax表达而诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 固体脂质纳米粒 姜黄素 顺铂 人卵巢癌SKOV3细胞株 细胞凋亡
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