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人肝中硒蛋白K相互作用蛋白的筛选与验证 被引量:2
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作者 梁雪莹 刘琼 +3 位作者 陈平 霍克克 胡田勇 倪嘉缵 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2012年第2期313-320,共8页
以硒蛋白K(SelK)突变体为"诱饵",采用酵母双杂交系统对人肝cDNA文库进行筛选,得到一个与SelK相互作用的蛋白──环腺苷酸应答元件结合蛋白3(CREB3).将SelK与CREB3共同转染酵母细胞,验证了SelK与CREB3的相互作用;并采用受体漂... 以硒蛋白K(SelK)突变体为"诱饵",采用酵母双杂交系统对人肝cDNA文库进行筛选,得到一个与SelK相互作用的蛋白──环腺苷酸应答元件结合蛋白3(CREB3).将SelK与CREB3共同转染酵母细胞,验证了SelK与CREB3的相互作用;并采用受体漂白、敏化发射和荧光寿命3种荧光共振能量转移方法进一步验证了二者间的相互作用,发现其不受SelK中硒代半胱氨酸(Sec)的影响.推测SelK可能通过其Sec之前的区域与CREB3发生作用,参与CREB3介导的内质网相关降解过程,影响相关癌症的转移和发展. 展开更多
关键词 硒蛋白K 环腺苷酸应答元件结合蛋白3 酵母双杂交 荧光共振能量转移 蛋白质相互作用
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交通相关PM_(2.5)对人外周血淋巴细胞凋亡的影响 被引量:1
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作者 田家瑜 郭丽丽 +2 位作者 邱勇 乔果果 张志红 《科学技术与工程》 北大核心 2021年第12期4856-4861,共6页
为探讨交通相关PM_(2.5)对人外周血淋巴细胞凋亡的诱导作用及可能机制,为交通相关PM_(2.5)的免疫毒性提供实验依据,采用0、50、100、200μg/mL PM_(2.5)对人外周血淋巴细胞进行24 h和48 h染毒,FITC-AnnexinV/PI染色,流式细胞仪检测淋巴... 为探讨交通相关PM_(2.5)对人外周血淋巴细胞凋亡的诱导作用及可能机制,为交通相关PM_(2.5)的免疫毒性提供实验依据,采用0、50、100、200μg/mL PM_(2.5)对人外周血淋巴细胞进行24 h和48 h染毒,FITC-AnnexinV/PI染色,流式细胞仪检测淋巴细胞早期凋亡和坏死;采用0、20、80、320μg/mL PM_(2.5)浓度分别染毒人外周血淋巴细胞24、48、72 h,Western blot法测定细胞内含半胱氨酸的天冬氨酸特异蛋白水解酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3,Caspase-3)和cAMP反应元件结合蛋白(cAMP-response element binding protein,CREB)蛋白表达水平,ELISA法检测细胞内环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)含量。结果表明,50、100、200μg/mL PM_(2.5)染毒细胞24 h和48 h后,淋巴细胞早期凋亡和坏死均高于生理盐水组,差异有统计学意义(P<0.01),且具有一定的剂量-效应关系;20、80、320μg/mL PM_(2.5)染毒细胞24、48、72 h后,各剂量组Caspase-3蛋白表达水平均高于对照组,除80μg/mL PM_(2.5)染毒72 h外,差异均具有统计学意义(P<0.01)。320μg/mL PM_(2.5)染毒细胞24、48、72 h后,细胞内cAMP含量均比生理盐水组升高(P<0.05)。PM_(2.5)染毒72 h后,CREB表达水平随PM_(2.5)浓度的升高而降低(P<0.01)。可见,交通相关PM_(2.5)可诱导人外周血淋巴细胞产生凋亡,且细胞内cAMP和CREB参与了凋亡的调控。 展开更多
关键词 交通相关PM_(2.5) 淋巴细胞 凋亡 CASPASE-3 环磷酸腺苷 环磷腺苷反应元件结合蛋白
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