截形苜蓿液泡膜H^＋ -PPase基因克隆与序列分析 被引量：10

1

作者 王建武 沈裕虎 +1 位作者 王沛 王海庆 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期435-442,共8页

采用EST电子克隆技术,以拟南芥AVP1基因cDNA序列为信息探针,在GenBank中对豆科模式植物截形苜蓿(Medicago truncatula)的同源EST序列进行查询比较和拼接,获得了1个完整的cDNA序列跨叠群(con-tig),并通过RT-PCR成功获得了该cDNA序列,将... 采用EST电子克隆技术,以拟南芥AVP1基因cDNA序列为信息探针,在GenBank中对豆科模式植物截形苜蓿(Medicago truncatula)的同源EST序列进行查询比较和拼接,获得了1个完整的cDNA序列跨叠群(con-tig),并通过RT-PCR成功获得了该cDNA序列,将其命名为MtVP1.该序列包含1个2 298 bp的最大读码框,编码765个氨基酸.MtVP1编码的氨基酸序列与来自绿豆、拟南芥等高等植物的Ⅰ类液泡膜H+-PPase的氨基酸序列的一致性高达84%~93%,疏水性分析和结构预测表明MtVP1编码蛋白是一个典型的膜蛋白,含有13个跨膜区,含有3个在液泡膜H+-PPase中高度保守的区域(CS1、CS2和CS3).从结构分析结果推测MtVP1与AVP1在功能上具有相似性. 展开更多

关键词 液泡膜H+-ppase 截形苜蓿 电子克隆

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小拟南芥液泡膜H^+-PPase基因OpVP1的克隆、序列分析及表达 被引量：8

2

作者 徐芳 赵云霞 +3 位作者 魏艳玲 李超 孙黎 黄先忠 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2013年第1期77-82,共6页

植物液泡膜质子转运无机焦磷酸酶(V-PPase)酸化植物液泡并为液泡的次级转运系统提供能量,在植物耐盐性起着重要的作用。为了克隆小拟南芥液泡膜H+-PPase基因,采用RT-PCR结合RACE的方法从小拟南芥叶片的cDNA中克隆了1个液泡膜H+-PPase基... 植物液泡膜质子转运无机焦磷酸酶(V-PPase)酸化植物液泡并为液泡的次级转运系统提供能量,在植物耐盐性起着重要的作用。为了克隆小拟南芥液泡膜H+-PPase基因,采用RT-PCR结合RACE的方法从小拟南芥叶片的cDNA中克隆了1个液泡膜H+-PPase基因,命名为OpVP1。OpVP1基因的cDNA全长为2698bp,开放阅读框(ORF)为2313bp,编码770个氨基酸。OpVP1蛋白与琴叶拟南芥、拟南芥相似性最高,分别为98.6%、98.4%。系统进化分析表明OpVP1基因属于Ⅰ型液泡膜质子焦磷酸酶基因。OpVP1蛋白的分子量是80745.9Da,等电点pI为5.13,含有14个跨膜螺旋结构。三维结构分析表明OpVP1蛋白是由2个单体组成的二聚体蛋白。qRT-PCR表明OpVP1基因在角果中表达高于根、茎、叶和花中的表达。 展开更多

关键词 焦磷酸酶 H+-ppase 小拟南芥 OpVP1 克隆

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刚毛柽柳液泡膜H^(+)-PPase基因的克隆与胁迫下的表达分析 被引量：4

3

作者 张春蕊 贾园园 +3 位作者 王艳敏 王玉成 杨传平 王超 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期881-887,共7页

通过对刚毛柽柳转录组分析,鉴定获得1个液泡膜H^(+)-PPase基因的cDNA序列,命名为ThVP1。该cDNA序列全长3022bp,开放阅读框为2298bp,编码765个氨基酸,编码蛋白相对分子质量80.37kD,理论等电点5.25。ThVP1编码蛋白的疏水性较强,含有13个... 通过对刚毛柽柳转录组分析,鉴定获得1个液泡膜H^(+)-PPase基因的cDNA序列,命名为ThVP1。该cDNA序列全长3022bp,开放阅读框为2298bp,编码765个氨基酸,编码蛋白相对分子质量80.37kD,理论等电点5.25。ThVP1编码蛋白的疏水性较强,含有13个跨膜区。氨基酸多序列比对结果显示,ThVP1具有典型的液泡膜H^(+)-PPase家族3个高度保守片段(CS1、CS2和CS3),与大豆VP1氨基酸序列一致性最高,为93%。系统进化分析表明,ThVP1属于I型液泡膜H^(+)-PPase基因。实时荧光定量RT-PCR分析显示,NaCl和PEG胁迫下,ThVP1在柽柳根和叶中均呈现明显上调表达,表达量最高达到对照的20.9倍,暗示ThVP1可能在刚毛柽柳抗旱耐盐过程中发挥重要作用。 展开更多

关键词 刚毛柽柳 液泡膜H^(+)-ppase 胁迫响应 基因表达

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红麻液泡膜质子泵H^+-PPase(Hcvp1)基因的克隆、序列分析和表达 被引量：3

4

作者 李辉 李德芳 +3 位作者 陈安国 唐慧娟 李建军 黄思齐 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2017年第1期9-14,共6页

为了阐明红麻耐盐机理,以耐盐性较强的中红麻16号为材料,从红麻耐盐转录组测序结果中获得了1个与AVP1基因高度相似的Unigene,根据该片段的序列设计引物,直接进行PCR扩增,经Sanger测序获得该基因全长c DNA序列。对该基因序列进行生物信... 为了阐明红麻耐盐机理,以耐盐性较强的中红麻16号为材料,从红麻耐盐转录组测序结果中获得了1个与AVP1基因高度相似的Unigene,根据该片段的序列设计引物,直接进行PCR扩增,经Sanger测序获得该基因全长c DNA序列。对该基因序列进行生物信息学分析表明:该基因全长2 298 bp,开放阅读框为2 298 bp,编码765个氨基酸,其编码蛋白质的分子量和等电点分别为80.2 k Da和5.25,与雷蒙德氏棉、甜橙、毛果杨、烟草和大豆的H+-PPase基因核苷酸序列的相似性分别为90%,85%,85%,83%,83%,蛋白质序列的相似性分别为96%,93%,91%,93%,94%,说明该基因与AVP1为同源基因,命名为Hcvp1。qRT-PCR分析表明,该基因的表达量随着Na Cl浓度的增加而增加。这将为Hcvp1基因的功能验证和红麻耐盐机理的研究奠定坚实的基础。 展开更多

关键词 红麻 H^+-ppase基因 耐盐

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海滨雀稗液泡膜H^+-PPase(PvVP1)5′端的克隆和序列分析 被引量：2

5

作者 宋辉 南志标 +2 位作者 蔡小宁 钟小仙 顾洪如 《草业学报》 CSCD 北大核心 2014年第5期168-174,共7页

根据已公布液泡膜H+-PPase基因家族同源序列保守区设计简并引物,克隆出海滨雀稗中PvVP1基因的中间序列,然后用快速扩增cDNA末端(rapid amplification of cDNA end,RACE)方法,从海滨雀稗中克隆到PvVP15′cDNA序列。该序列ORF长1605bp,编... 根据已公布液泡膜H+-PPase基因家族同源序列保守区设计简并引物,克隆出海滨雀稗中PvVP1基因的中间序列,然后用快速扩增cDNA末端(rapid amplification of cDNA end,RACE)方法,从海滨雀稗中克隆到PvVP15′cDNA序列。该序列ORF长1605bp,编码535个氨基酸,其编码序列、氨基酸序列与玉米相应基因的同源性分别为93%和99%。 展开更多

关键词 海滨雀稗 液泡膜H^+-ppase RACE 耐盐

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多浆旱生植物霸王液泡膜H^+-PPase基因片段的克隆及序列分析 被引量：3

6

作者 席杰军 伍国强 +1 位作者 包爱科 王锁民 《草业学报》 CSCD 北大核心 2011年第1期119-124,共6页

根据其他植物H+-PPase基因的保守序列设计一对简并性引物,以霸王叶片总RNA为模板,采用RT-PCR的方法扩增出H+-PPase基因片段并克隆到PUCm-T载体。阳性克隆经PCR鉴定后进行测序,序列分析结果表明,克隆到3个同源的序列片段(898bp),编码299... 根据其他植物H+-PPase基因的保守序列设计一对简并性引物,以霸王叶片总RNA为模板,采用RT-PCR的方法扩增出H+-PPase基因片段并克隆到PUCm-T载体。阳性克隆经PCR鉴定后进行测序,序列分析结果表明,克隆到3个同源的序列片段(898bp),编码299个氨基酸;所得序列与GenBank中注册的高等植物H+-PPase基因核苷酸序列的同源性均在69%以上、氨基酸序列的同源性达78%以上。 展开更多

关键词 霸王 H+-ppase基因 克隆 序列分析

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植物“液泡膜”H^+ -PPase的功能与应用 被引量：2

7

作者 孙艳香 冯雪 +2 位作者 贾永红 张一名 赵学良 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期591-596,共6页

H+-PPase是一类将焦磷酸水解与质子转运相耦联的焦磷酸酶。在植物中,主要定位在液泡膜,少量定位于细胞质膜,除具有酸化液泡、有助于有毒离子的液泡区室化功能外,还有调控质膜H+-ATPase介导的根际酸化,促进氮、磷吸收的功能。本文就植物&... H+-PPase是一类将焦磷酸水解与质子转运相耦联的焦磷酸酶。在植物中,主要定位在液泡膜,少量定位于细胞质膜,除具有酸化液泡、有助于有毒离子的液泡区室化功能外,还有调控质膜H+-ATPase介导的根际酸化,促进氮、磷吸收的功能。本文就植物"液泡膜"H+-PPase的定位、结构与性质、调控与作用机制及其在基因工程中的利用等方面展开论述,旨在使研究者系统地了解"液泡膜"H+-PPase的研究进展,为未来通过调控H+-PPase的表达来改进植物的生长发育、抗盐耐旱能力、氮、磷肥的利用效率等生产应用提供参考。 展开更多

关键词 H+-ppase 质子泵 抗盐耐旱 肥料利用率

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灵武长枣果实质膜和液泡膜H^+-ATPase和H^+-PPase活性与果实糖分积累 被引量：1

8

作者 章英才 曹金霞 景红霞 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期641-647,共7页

以不同发育时期灵武长枣(Ziziphus jujuba cv.Lingwuchangzao)的果实为材料,通过测定与分析果肉组织中细胞质膜、液泡膜H+-ATPase和H+-PPase活性、果实糖分含量变化,研究了灵武长枣果实质膜、液泡膜H+-ATPase和H+-PPase活性与糖积累特... 以不同发育时期灵武长枣(Ziziphus jujuba cv.Lingwuchangzao)的果实为材料,通过测定与分析果肉组织中细胞质膜、液泡膜H+-ATPase和H+-PPase活性、果实糖分含量变化,研究了灵武长枣果实质膜、液泡膜H+-ATPase和H+-PPase活性与糖积累特性的关系。结果表明:(1)果实第二次快速生长期之前主要积累葡萄糖和果糖,之后果实迅速积累蔗糖,葡萄糖和果糖含量则逐渐下降,成熟期果实主要积累蔗糖。(2)在果实发育的缓慢生长期S1,质膜H+-ATPase活性最低;第一次快速生长期,质膜H+-ATPase活性最高;缓慢生长期S2,其活性降低;第二次快速生长期,质膜H+-ATPase活性升至次高;完熟期,质膜H+-ATPase活性下降幅度较大。(3)在果实发育过程中,液泡膜H+-ATPase和H+-PPase活性的变化趋势相似。缓慢生长期S1,液泡膜H+-ATPase和H+-PPase活性较低;从缓慢生长期S1至第一次快速生长期缓慢下降至最低;从第一次快速生长期开始,液泡膜H+-ATPase和H+-PPase活性呈现为逐渐增高的变化趋势;除第二次快速生长期以外,液泡膜H+-PPase活性始终高于H+-ATPase。由此推测,质膜H+-ATPase和液泡膜H+-ATPase、H+-PPase对灵武长枣果实糖分的跨膜次级转运起到重要的调控作用。 展开更多

关键词 灵武长枣 质膜 液泡膜 糖积累

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过表达截形苜蓿液泡膜H^+-PPase基因促进拟南芥的生长和根围酸化

9

作者 王建武 相微微 《山西农业科学》 2016年第7期907-909,917,共4页

在前期研究工作中,中国科学研究院西北高原生物研究所分子实验室已从豆科模式植物截形苜蓿(Medicago truncatula)中克隆到一种液泡膜焦磷酸酶(V-H^+-PPase)基因Mt VP1,并进行了序列分析。在前期工作的基础上,构建植物表达载体pBI121-Mt ... 在前期研究工作中,中国科学研究院西北高原生物研究所分子实验室已从豆科模式植物截形苜蓿(Medicago truncatula)中克隆到一种液泡膜焦磷酸酶(V-H^+-PPase)基因Mt VP1,并进行了序列分析。在前期工作的基础上,构建植物表达载体pBI121-Mt VP1,把Mt VP1基因转入到拟南芥中,观察转基因拟南芥的表型变化。结果表明,过表达Mt VP1能使转基因株系的根系更发达,主根数增多1~2条,地上部生物量增大,并且促进了转基因株系的根围酸化能力;但幼苗耐盐性试验表明,转基因株系与对照没有明显差异。 展开更多

关键词 液泡膜H+-ppase 根发育 根围酸化 耐盐性

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陆地棉H^(+)-PPase基因家族全基因组鉴定及表达分析

10

作者 朱心慧 王冬梅 +4 位作者 曹孜怡 冯群 鲍晴 汪保华 方辉 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1363-1373,共11页

【目的】鉴定陆地棉跨膜质子泵焦磷酸酶(H^(+)-PPase)基因家族成员,并分析其表达模式,为探究该家族基因的功能和调控机制及优质纤维棉育种提供理论依据。【方法】从Pfam数据库获取H^(+)-PPase基因家族(PF03030)的隐马尔可夫模型文件,从... 【目的】鉴定陆地棉跨膜质子泵焦磷酸酶(H^(+)-PPase)基因家族成员,并分析其表达模式,为探究该家族基因的功能和调控机制及优质纤维棉育种提供理论依据。【方法】从Pfam数据库获取H^(+)-PPase基因家族(PF03030)的隐马尔可夫模型文件,从陆地棉基因组中筛选包含H^(+)-PPase家族保守结构域的成员,运用生物信息学方法对其理化性质、进化关系、基因定位、共线性关系、基因结构、顺式作用元件和表达模式进行分析,并利用实时荧光定量PCR检测10个在棉纤维发育中表达的侯选基因表达情况。【结果】从陆地棉全基因组水平上鉴定出20个H^(+)-PPase基因家族成员(GhH_PPase1~GhH_PPase20),分布在12条染色体上,基因长度为2531~11810 bp,编码的氨基酸残基数为575~803个,蛋白分子量为60087.76~85197.58 Da,均为疏水性的酸性蛋白,可分为亚族Ⅰ(4个)、亚族Ⅳ(4个)和亚族Ⅴ(12个)三大分支。片段复制事件是陆地棉H^(+)-PPase基因家族扩张的主要驱动力,位于染色体A05和D05上的H_PPase1、H_PPase2、H_PPase11和H_PPase12可能是进化过程中种间传播的主要基因,且陆地棉基因与单双子叶植物的共线性均较低,可能经历了独立的进化事件。有14个GhH_PPases蛋白含有10个保守基序,且排列顺序完全相同;其余6个基因的保守基序差异较明显,可能具有不同的功能。20个GhH_PPases基因启动子区域存在大量光响应元件、胁迫响应元件和激素反应元件。陆地棉H^(+)-PPase基因家族成员的表达具有时空特异性,且相对于其他亚家族,亚族Ⅴ的较多基因在棉花纤维发育过程中发挥更重要的作用。【结论】陆地棉H^(+)-PPase基因家族发生了一定程度的功能分化,多种响应元件协同参与生长发育和逆境应答,部分基因在陆地棉纤维伸长期和次生壁加厚期发挥重要的调控作用。 展开更多

关键词 陆地棉 H^(+)-ppase基因家族 全基因组分析 纤维发育 表达分析

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植物中液泡膜H^+-PPase的研究进展

11

作者 李想 《现代农业科技》 2013年第23期105-105,107,共2页

液泡膜H+-PPase是一种广泛存在于很多生物体内的H+转运酶,主要介绍近年来该酶在植物抗逆性以及植物生长的调节作用上的研究进展。

关键词 液泡膜H+-ppase 植物抗逆性 植物生长激素 糖异生

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铝胁迫对小麦根呼吸作用和一些线粒体结合酶活性影响 被引量：24

12

作者 何龙飞 刘友良 +1 位作者 沈振国 王爱勤 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期857-861,共5页

比较了耐铝性不同的两品种小麦 Altas66和 Scout66根呼吸速率、线粒体 H+ - ATP酶、Ca2 + - ATP酶和焦磷酸酶活性变化。铝处理后 ,两品种小麦根呼吸速率均下降 ,随处理铝浓度增加而加剧 ,但对照和处理条件下 ,Altas 66根呼吸速率均高于 ... 比较了耐铝性不同的两品种小麦 Altas66和 Scout66根呼吸速率、线粒体 H+ - ATP酶、Ca2 + - ATP酶和焦磷酸酶活性变化。铝处理后 ,两品种小麦根呼吸速率均下降 ,随处理铝浓度增加而加剧 ,但对照和处理条件下 ,Altas 66根呼吸速率均高于 Scout 66。两品种小麦根线粒体膜上都存在H+ - ATP酶、Ca2 + - ATP酶和 H+ - PP酶 ,离体和活体铝处理后 ,这些酶活性受到抑制 ,在活体处理和Scout66中更为明显。 展开更多

关键词 铝胁迫 线粒体 呼吸速率 H^+-ATP酶 CA^2+-ATP酶 H^+-PP酶 小麦 活性 结合酶

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陆地棉耐盐相关基因(GhVP)的克隆及分析 被引量：10

13

作者 宋丽艳 叶武威 +3 位作者 赵云雷 王俊娟 樊保香 王德龙 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2010年第3期285-288,共4页

液泡膜质子转运无机焦磷酸酶(V-PPase)酸化植物液泡并为液泡的次级转运系统提供能量。本研究根据棉花耐盐抑制消减(SSH)文库中的一个EST序列设计特异性引物,利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术首次克隆了陆地棉焦磷酸酶基因,将其命名为GhV... 液泡膜质子转运无机焦磷酸酶(V-PPase)酸化植物液泡并为液泡的次级转运系统提供能量。本研究根据棉花耐盐抑制消减(SSH)文库中的一个EST序列设计特异性引物,利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术首次克隆了陆地棉焦磷酸酶基因,将其命名为GhVP。生物信息学分析显示,该基因包含一个2301 bp的完整开放读码框,编码766个氨基酸的多肽,与拟南芥和烟草的同源性分别达90%和93%。RT-PCR结果显示,GhVP的表达丰度随着盐处理时期的增加而变化,盐处理6 h表达量最高,随后开始下降,这一结果与Thellungiellahalophila中的研究相似,该研究将有助于了解非盐生植物的耐盐特性。 展开更多

关键词 H+-ppase 陆地棉 RACE RT-PCR

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披碱草(Elymus dahuricus)焦磷酸化酶基因EdHP1的克隆及功能鉴定 被引量：5

14

作者 董建辉 陈明 +3 位作者 徐兆师 张晓科 李连城 马有志 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期364-370,386,共8页

为了从抗逆性优良的牧草中挖掘新的耐盐、抗旱基因,进而为作物分子育种提供优良的基因资源,采用RACE(Rapid-Amplification of cDNA Ends)方法,克隆了披碱草的焦磷酸化酶基因EdHP1,其全长序列包含2 310 bp,编码770个氨基酸,含有14个跨膜... 为了从抗逆性优良的牧草中挖掘新的耐盐、抗旱基因,进而为作物分子育种提供优良的基因资源,采用RACE(Rapid-Amplification of cDNA Ends)方法,克隆了披碱草的焦磷酸化酶基因EdHP1,其全长序列包含2 310 bp,编码770个氨基酸,含有14个跨膜区,是一个典型的膜蛋白,同时包含三个保守区(CS1、CS2和CS3)。氨基酸同源性比较发现,EdHP1与来自大麦等10种高等植物的焦磷酸化酶基因的同源性大于86%。EdHP1基因的表达受干旱、高盐和低温等非生物胁迫的诱导。功能分析证明,EdHP1基因能够显著提高转基因烟草对干旱、高盐胁迫的抗性,可用于作物的抗逆遗传改良。 展开更多

关键词 披碱草 焦磷酸化酶基因 抗旱性 耐盐性

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梭梭液泡膜焦磷酸酶HaVVP基因克隆及序列分析 被引量：8

15

作者 甘晓燕 巩檑 +1 位作者 石磊 宋玉霞 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期198-203,共6页

以梭梭叶片为材料,根据其他植物液泡膜焦磷酸酶基因的保守序列设计引物,采用同源基因克隆及RACE-PCR方法克隆到1个H+-PPase基因,命名为HaVVP。HaVVP基因编码区长2 734bp,编码767个氨基酸;所得序列与GenBank中注册的高等植物H+-PPase基... 以梭梭叶片为材料,根据其他植物液泡膜焦磷酸酶基因的保守序列设计引物,采用同源基因克隆及RACE-PCR方法克隆到1个H+-PPase基因,命名为HaVVP。HaVVP基因编码区长2 734bp,编码767个氨基酸;所得序列与GenBank中注册的高等植物H+-PPase基因核苷酸序列的同源性均在68%以上、氨基酸序列的同源性达80%以上。 展开更多

关键词 梭梭 H^+-ppase基因 克隆 序列分析

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不结球白菜体内硝酸盐积累与其液泡膜上质子泵的关系 被引量：4

16

作者 狄廷均 朱毅勇 +2 位作者 许征宇 张攀伟 沈其荣 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期70-74,共5页

用蔗糖密度梯度离心法分离了水培不结球白菜品种上海青叶柄与叶片液泡膜,并测定了与硝酸盐运输相关的质子泵的水解活性。结果表明,液泡膜纯度达到35%~40%;在离体条件下,叶片和叶柄中H+-ATPase和H+-PPase的最佳pH值均为8.0左右;叶柄细胞... 用蔗糖密度梯度离心法分离了水培不结球白菜品种上海青叶柄与叶片液泡膜,并测定了与硝酸盐运输相关的质子泵的水解活性。结果表明,液泡膜纯度达到35%~40%;在离体条件下,叶片和叶柄中H+-ATPase和H+-PPase的最佳pH值均为8.0左右;叶柄细胞液泡膜H+-ATPase和H+-PPase的水解活性显著高于叶片,且叶柄液泡膜上H+-ATPase和H+-PPase有较高的Vm ax值。试验表明,硝酸盐在叶柄与叶片中的积累差异与其液泡膜上的质子泵活性大小密切相关。 展开更多

关键词 不结球白菜 液泡膜 硝酸盐积累 H^+-ATPASE活性 H^+-ppase活性

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硅对盐胁迫下黄瓜幼苗根系质膜、液泡膜酶活性的影响 被引量：3

17

作者 姚秋菊 张晓伟 +1 位作者 吕中伟 魏国强 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2008年第6期125-129,共5页

研究硅对盐胁迫下黄瓜幼苗生长及根细胞质膜H+-ATPase、液泡膜H+-ATPase、H+-PPase和Ca2+-ATPase活性的影响。结果表明:盐胁迫严重抑制黄瓜幼苗生长,根细胞质膜H+-ATPase、液泡膜H+-ATPase、H+-PPase和Ca2+-ATPase活性明显降低。硅处理... 研究硅对盐胁迫下黄瓜幼苗生长及根细胞质膜H+-ATPase、液泡膜H+-ATPase、H+-PPase和Ca2+-ATPase活性的影响。结果表明:盐胁迫严重抑制黄瓜幼苗生长,根细胞质膜H+-ATPase、液泡膜H+-ATPase、H+-PPase和Ca2+-ATPase活性明显降低。硅处理明显提高盐胁迫黄瓜根液泡膜H+-ATPase、H+-PPase、Ca2+-ATPase活性,一定程度上维持了液泡膜质子泵活性,有效地防御了细胞质酸化,这可能是硅提高黄瓜耐盐性的一个重要因素。 展开更多

关键词 盐胁迫 黄瓜 硅 质膜H^+-ATPASE 液泡膜H^+-ATPASE 液泡膜H^+-ppase CA^2+-ATPASE

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费尔干猪毛菜液泡膜氢离子焦磷酸酶基因SfVP的克隆、序列分析及表达 被引量：3

18

作者 贺怡 钱雯婕 +4 位作者 袁磊 李榕 谭兰 谢全亮 李鸿彬 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2014年第3期319-324,共6页

植物液泡膜氢离子焦磷酸酶(Vacuolar H+-PPase,VP)能够酸化液泡并为液泡的次级转运系统提供能量,在植物耐盐性方面发挥着着重要作用。本研究采用RT-PCR结合RACE方法,从费尔干猪毛菜中(Salsola ferganica)克隆得到液泡膜质子焦磷酸酶基因... 植物液泡膜氢离子焦磷酸酶(Vacuolar H+-PPase,VP)能够酸化液泡并为液泡的次级转运系统提供能量,在植物耐盐性方面发挥着着重要作用。本研究采用RT-PCR结合RACE方法,从费尔干猪毛菜中(Salsola ferganica)克隆得到液泡膜质子焦磷酸酶基因SfVP,该基因的cDNA全长2738 bp,包含1个2301 bp的完整开放读码框(ORF),编码766个氨基酸的多肽。氨基酸序列分析表明其属于H+-转运无机焦磷酸酶超家族成员,具有典型的H+-PPase结构域,其疏水性较强,含有12个跨膜螺旋结构。SfVP序列比对显示具有H+-PPase的3个保守序列CS1、CS2和CS3,其中CS1中含有保守的底物催化位点,与烟草的NtVP氨基酸序列相似性为95.3%。半定量RT-PCR结果表明,SfVP的转录表达丰度随着600 mmol/L NaCl处理时间的增加而升高,处理12 h后显著增加并一直维持在较高水平。 展开更多

关键词 费尔干猪毛菜 液泡膜氢离子焦磷酸酶 RACE 盐响应表达

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跨膜离子转运蛋白与植物耐盐的分子生物学 被引量：5

19

作者 黄萍 张富春 +1 位作者 王瑜 李金耀 《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第2期1-5,共5页

植物抵御盐害的主要方式是增加Na+的外排、减少Na+的吸入和Na+的区隔化,而Na+的跨膜运输主要由质膜和液泡膜上的离子转运蛋白完成。对质膜和液泡膜跨膜离子转运蛋白包括K+/Na+离子转运蛋白,Na+/H+逆向转运蛋白以及液泡膜H+-PPase的分子... 植物抵御盐害的主要方式是增加Na+的外排、减少Na+的吸入和Na+的区隔化,而Na+的跨膜运输主要由质膜和液泡膜上的离子转运蛋白完成。对质膜和液泡膜跨膜离子转运蛋白包括K+/Na+离子转运蛋白,Na+/H+逆向转运蛋白以及液泡膜H+-PPase的分子生物学研究及应用进展进行了综述。 展开更多

关键词 植物耐盐跨膜离子转运蛋白 K^+/Na^+离子转运蛋白Na^+/H^+逆向转运蛋白 液泡膜H^+-ppase

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怀地黄液泡质子泵焦磷酸水解酶基因的克隆与生物信息学分析 被引量：4

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作者 周延清 张永华 +5 位作者 陈艳梅 张喻 李静云 陈娟娟 白妍妍 魏海方 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2013年第3期107-111,114,共6页

为了克隆地黄功能基因,根据NCBI GenBank核酸数据库中5种已知植物生长素诱导的器官膨大基因(ARGOS)碱基序列的保守区,利用CLUSTAL 2.1和DNAMAN 4.0软件设计简并引物,采用RT-PCR技术扩增出一个cDNA片段,测序表明,获得基因cDNA片段序列长... 为了克隆地黄功能基因,根据NCBI GenBank核酸数据库中5种已知植物生长素诱导的器官膨大基因(ARGOS)碱基序列的保守区,利用CLUSTAL 2.1和DNAMAN 4.0软件设计简并引物,采用RT-PCR技术扩增出一个cDNA片段,测序表明,获得基因cDNA片段序列长度为495bp。经过NCBI数据库BLAST分析,发现它与莲花、蓖麻、烟草、苜蓿、葡萄、碧桃、灰绿藜7种植物的液泡膜质子泵焦磷酸水解酶基因同源性很高,在83%～86%,因此获得的基因是地黄液泡膜质子泵焦磷酸水解酶基因。 展开更多

关键词 怀地黄 液泡质子泵焦磷酸水解酶 基因克隆 cDNA末端快速扩增技术 生物信息学分析

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