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柞蚕免疫相关基因Apdorsal的克隆鉴定与表达分析 被引量:1
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作者 李文利 刘媛 +1 位作者 李凤娟 李亚洁 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期32-37,共6页
ReL/NF—κB蛋白家族是一种重要的转录因子,在机体免疫应答、炎症反应、细胞凋亡与生长发育过程中起着重要调控作用。采用RACE技术克隆了2个柞蚕Rel/NF—κB相关蛋白基因彻dorsalA和Af)dorsalB的全长cDNA序列(GenBank登录号:JF488... ReL/NF—κB蛋白家族是一种重要的转录因子,在机体免疫应答、炎症反应、细胞凋亡与生长发育过程中起着重要调控作用。采用RACE技术克隆了2个柞蚕Rel/NF—κB相关蛋白基因彻dorsalA和Af)dorsalB的全长cDNA序列(GenBank登录号:JF488068,JF488069)。经BLAST比对表明2紊序列编码的蛋白质都含有Rel/NF—κB家族的典型氨基酸序列RHD;系统进化分析显示ApdorsalA蛋白与其它物种的ReL/NF—κB蛋白的序列相似度在32%-78%之间,与家蚕的RelA、烟草天蛾的Dorsal有较近的亲缘关系,说明Apdorsal属于Rel/NF—κB家族的Dorsal类。利用real—timePCR技术检测Apdorsal基因mRNA的组织分布以及经不同微生物诱导处理后的转录变化,结果表明Apdorsal基因mRNA在柞蚕蛹各组织中均有转录;柞蚕蛹脂肪体中的apdorsal基因mRNA经ApNPV诱导处理后的转录水平最高,经毕赤酵母和枯草芽孢杆菌诱导处理后的转录水平次之,经E.coli诱导处理后的转录水平最低,说明柞蚕蛹脂肪体中的Apdorsal可能与对病毒、革兰阳性菌和真菌的免疫有关。 展开更多
关键词 柞蚕 先天免疫 REL NF—κB蛋白家族 基因克隆 表达分析
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转基因番茄防龋疫苗的基础研究 Ⅰ.变形链球菌pac基因唾液粘附区植物表达质粒的构建 被引量:11
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作者 蒋少云 凌均启 《口腔医学纵横》 CSCD 2000年第2期94-96,共3页
目的 :构建变形链球菌表面蛋白基因 (pac)唾液粘附区的植物表达质粒pROP1和pRPB1。方法 :用PCR扩增的含变形链球菌表面蛋白唾液粘附区P1片段 (184- 1946bp)与植物的高效表达质粒pROKCP结合 ,构建pROP1表达质粒 ;且将此质粒与Bar基因 (... 目的 :构建变形链球菌表面蛋白基因 (pac)唾液粘附区的植物表达质粒pROP1和pRPB1。方法 :用PCR扩增的含变形链球菌表面蛋白唾液粘附区P1片段 (184- 1946bp)与植物的高效表达质粒pROKCP结合 ,构建pROP1表达质粒 ;且将此质粒与Bar基因 (抗除草剂基因 )连接 ,构建表达质粒pRPB1,酶切电泳检测。结果 :从pPC41中扩增的P1片段整合到pROKCP的适当部位 ,构成重组质粒pROP1,从pPBar分离出的Bar基因整合到pROP1,构成重组质粒pRPB1。结论 :本实验成功地构建了携带变形链球菌表面蛋白唾液粘附区的植物表达质粒pROP1和pRPB1。 展开更多
关键词 植物表达质粒 唾液粘附区 龋齿 pac蛋白
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阴道毛滴虫黏附蛋白33基因原核表达载体的构建及表达 被引量:1
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作者 杨树国 王雅静 +2 位作者 朱晓燕 帖超男 廖琳 《四川动物》 CSCD 北大核心 2008年第6期1021-1023,共3页
目的构建阴道毛滴虫黏附蛋白33基因原核表达载体并诱导其体外表达。方法pMD-18T-ap33重组质粒和pUC18空质粒经BamH Ⅰ和XbaⅠ限制性内切酶双酶切,将ap33基因亚克隆入pUC18载体并进行筛选和鉴定。重组质粒经IPTG诱导,SDS-PAGE电泳及Weste... 目的构建阴道毛滴虫黏附蛋白33基因原核表达载体并诱导其体外表达。方法pMD-18T-ap33重组质粒和pUC18空质粒经BamH Ⅰ和XbaⅠ限制性内切酶双酶切,将ap33基因亚克隆入pUC18载体并进行筛选和鉴定。重组质粒经IPTG诱导,SDS-PAGE电泳及Western-blot杂交鉴定重组蛋白。结果经双酶切及PCR鉴定,构建的重组质粒为阳性重组子,诱导出的重组蛋白大小约为Mr36000,与理论值基本相符。结论成功构建重组质粒并获得体外表达。 展开更多
关键词 阴道毛滴虫 黏附蛋白33 原核表达载体 基因表达
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