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肾癌G250 MN／CAIX重组质粒DNA免疫效应的初步研究被引量：1: 1; 作者李晓飞刘雷 +4 位作者吴荣佩张亚东李乐军徐秀章曹开源《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第B06期7-9,共3页; [目的]观察PCDNA3.0-G250重组质粒在小鼠中诱导产生DNA免疫应答的特点及抑瘤效应。[方法] PCDNA3.0-G250质粒每隔2周肌注射Balb/c小鼠共3次,对照组同法肌注PCDNA3.0质粒。每次免疫10 d后眶后取血,间接免疫荧光法检测血清抗体。6周后取... 展开更多; 关键词肾肿瘤癌肾细胞癌 g250/mn/caix抗原 DNA免疫; 在线阅读下载PDF 职称材料

肾癌G250/MN/CAIX抗原基因在酿酒酵母中的诱导表达及意义被引量：2: 2; 作者刘雷李晓飞 +3 位作者曹开源吴荣佩李乐军张亚东《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期30-34,共5页; 【目的】观察G250抗原基因编码区cDNA全长基因片段在酿酒酵母中诱导表达情况,并初步探讨其作为肿瘤治疗中的意义。【方法】应用基因重组技术将人G250cDNA序列克隆入酿酒酵母穿梭诱导表达载体pYES2/NTC,构建重组酵母真核表达质粒pYES2/NT... 展开更多; 关键词肾细胞癌(RCC) g250/mn/caix(g250)抗原酿酒酵母基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

利用原核表达系统制备肾癌相关抗原G250/MN/CA Ⅸ 被引量：1: 3; 作者姜耀东郑少斌 +3 位作者谭万龙赵善超任非张宝《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期307-309,共3页; 目的利用原核表达系统制备肾癌相关抗原G250/MN/CA Ⅸ。方法采用PCR法从原有质粒中扩增G250/MN/CAⅨ全长编码序列,将获得的编码序列片段插入pET32a(+)表达载体,转化Rosseta大肠杆菌,IPTG诱导蛋白表达,而后进行纯化及Westernblot鉴定。... 展开更多; 关键词肾肿瘤 g250/mn/CA Ⅸ抗原克隆原核表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

肾癌G250抗原基因在sp2/0细胞中的表达及其意义被引量：1: 4; 作者张亚东吴荣佩 +3 位作者刘雷李乐曹开源李晓飞《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期16-19,共4页; 【目的】将G250抗原cDNA片段转染入sp2/0细胞中并获得稳定表达,为G250基因疫苗研究提供实验工具。【方法】用脂质体转染法将鉴定好的重组质粒转染入sp2/0细胞中,经G418筛选得到稳定表达,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、间接免疫荧光... 展开更多; 关键词肾细胞癌(RCC) g250/mn/caix(g250)抗原基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名肾癌G250 MN／CAIX重组质粒DNA免疫效应的初步研究被引量：1: 1; 作者李晓飞刘雷吴荣佩张亚东李乐军徐秀章曹开源; 机构中山大学附属第一医院泌尿外科珠海市人民医院中山大学检验医学系; 出处《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第B06期7-9,共3页; 基金广东省科技攻关资助项目(2003c31201) 广州市科技攻关资助项目(2003Z22E4011); 文摘 [目的]观察PCDNA3.0-G250重组质粒在小鼠中诱导产生DNA免疫应答的特点及抑瘤效应。[方法] PCDNA3.0-G250质粒每隔2周肌注射Balb/c小鼠共3次,对照组同法肌注PCDNA3.0质粒。每次免疫10 d后眶后取血,间接免疫荧光法检测血清抗体。6周后取脾细胞观察体外细胞毒效应。同法免疫Balb/c小鼠,第3次免疫时皮下种植sp2/0- PCDNA3.0-G250细胞,观察肿瘤大小及小鼠生存期。[结果]DNA免疫后可检测到特异性抗体,抗体滴度随免疫次数增加逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.01)。体外CTL杀伤率与对照组差别有统计学意义。体内实验发现治疗组与对照组抑瘤效应无明显差异(P>0.05)。[结论]G250重组质粒DNA免疫能在小鼠巾诱导产生特异性细胞免疫及体液免疫,无明显体内抑瘤效应。; 关键词肾肿瘤癌肾细胞癌 g250/mn/caix抗原 DNA免疫; 分类号 R699 [医药卫生—泌尿科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名肾癌G250/MN/CAIX抗原基因在酿酒酵母中的诱导表达及意义被引量：2: 2; 作者刘雷李晓飞曹开源吴荣佩李乐军张亚东; 机构中山大学附属第一医院泌尿外科中山大学临床检验标准化中心; 出处《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期30-34,共5页; 基金广东省科技攻关项目(2003c31201) 广州市科技攻关项目(2003Z2-E4013); 文摘【目的】观察G250抗原基因编码区cDNA全长基因片段在酿酒酵母中诱导表达情况,并初步探讨其作为肿瘤治疗中的意义。【方法】应用基因重组技术将人G250cDNA序列克隆入酿酒酵母穿梭诱导表达载体pYES2/NTC,构建重组酵母真核表达质粒pYES2/NTC-G250并转化酿酒酵母菌株INVSc1,筛选阳性克隆转化子,经半乳糖诱导表达后进行菌体全蛋白的Westernblot检测。【结果】成功构建pYES2/NTC-G250重组酿酒酵母诱导表达质粒,证实其能够在酿酒酵母中诱导表达,表达量随诱导时间而变化,8～12h达高峰。【结论】人G250基因片段能够在酿酒酵母中表达,为进一步探讨基因重组酿酒酵母G250疫苗抗肿瘤效应及其安全性打下基础。; 关键词肾细胞癌(RCC) g250/mn/caix(g250)抗原酿酒酵母基因表达; Keywords renal cell carcinoma g250/mn/caix （g250） antigen Saccharomyces cerevisiae gene expression; 分类号 R737.1 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名利用原核表达系统制备肾癌相关抗原G250/MN/CA Ⅸ 被引量：1: 3; 作者姜耀东郑少斌谭万龙赵善超任非张宝; 机构南方医科大学南方医院泌尿外科南方医科大学南方医院药材科南方医科大学分子生物研究所; 出处《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期307-309,共3页; 基金广东省医学科研基金(A2004395 B2006102)~~; 文摘目的利用原核表达系统制备肾癌相关抗原G250/MN/CA Ⅸ。方法采用PCR法从原有质粒中扩增G250/MN/CAⅨ全长编码序列,将获得的编码序列片段插入pET32a(+)表达载体,转化Rosseta大肠杆菌,IPTG诱导蛋白表达,而后进行纯化及Westernblot鉴定。结果正确构建pET32a(+)/G250重组质粒,重组质粒转化Rosseta菌后,经IPTG诱导,在58000相对分子质量处有明确的条带。目的蛋白表达占菌体总蛋白的32.7%。89.9%的重组蛋白是可溶性的。Westernblot结果显示纯化后的蛋白可以与G250单克隆抗体M75特异性结合。结论在原核系统中成功进行G250/MN/CA Ⅸ的高效表达,为下一步的单克隆抗体制备和蛋白功能研究奠定了基础。; 关键词肾肿瘤 g250/mn/CA Ⅸ抗原克隆原核表达载体; Keywords kidney neoplasms g250/mn/CA IX antigen clone prokaryotic expression vector; 分类号 R737.11 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名肾癌G250抗原基因在sp2/0细胞中的表达及其意义被引量：1: 4; 作者张亚东吴荣佩刘雷李乐曹开源李晓飞; 机构中山大学附属第一医院泌尿外科中山大学临床检验标准化中心; 出处《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期16-19,共4页; 基金广东省科技攻关项目(2003c31201) 广州市科技攻关项目(2003Z2-E4011); 文摘【目的】将G250抗原cDNA片段转染入sp2/0细胞中并获得稳定表达,为G250基因疫苗研究提供实验工具。【方法】用脂质体转染法将鉴定好的重组质粒转染入sp2/0细胞中,经G418筛选得到稳定表达,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、间接免疫荧光、Western blot检测G250基因在sp2/0细胞中的表达。【结果】转染2周后,筛选出阳性sp2/0细胞克隆,通过RT-PCR证实有G250mRNA转录,间接免疫荧光可以见到阳性细胞,Western blot证实有G250抗原表达。【结论】建立了稳定表达G250抗原的肿瘤细胞模型,为研究基于肾癌G250基因的肿瘤基因疫苗治疗奠定了基础。; 关键词肾细胞癌(RCC) g250/mn/caix(g250)抗原基因表达; Keywords renal cell carcinoma g250/mn/caix antigen gene expression; 分类号 R737.25 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	肾癌G250 MN／CAIX重组质粒DNA免疫效应的初步研究	李晓飞刘雷吴荣佩张亚东李乐军徐秀章曹开源	《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2007	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	肾癌G250/MN/CAIX抗原基因在酿酒酵母中的诱导表达及意义	刘雷李晓飞曹开源吴荣佩李乐军张亚东	《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2009	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	利用原核表达系统制备肾癌相关抗原G250/MN/CA Ⅸ	姜耀东郑少斌谭万龙赵善超任非张宝	《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	肾癌G250抗原基因在sp2/0细胞中的表达及其意义	张亚东吴荣佩刘雷李乐曹开源李晓飞	《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料