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融合蛋白和密码子优化策略提高真菌漆酶在黑曲霉中的表达
1
作者 张宇鑫 刘雨 +3 位作者 于涛 赵佳东 付欣哲 李杰 《东北农业大学学报》 CSCD 北大核心 2024年第8期151-159,231,共10页
试验通过融合蛋白和密码子优化策略提高2种真菌漆酶,即灵芝(Ganoderma Karst)漆酶和硬毛粗盖孔菌(Funalia trogii)漆酶在黑曲霉中的分泌表达量。通过对重组菌株进行蛋白水平、转录水平、菌体形态学检测,探究融合蛋白和密码子优化策略对... 试验通过融合蛋白和密码子优化策略提高2种真菌漆酶,即灵芝(Ganoderma Karst)漆酶和硬毛粗盖孔菌(Funalia trogii)漆酶在黑曲霉中的分泌表达量。通过对重组菌株进行蛋白水平、转录水平、菌体形态学检测,探究融合蛋白和密码子优化策略对漆酶表达的影响,旨在找出提高蛋白产量的有效策略,构建高效表达漆酶的黑曲霉重组菌株,为低表达蛋白在黑曲霉中的高效表达提供新思路。结果表明:通过融合蛋白策略,以黑曲霉内源高分泌蛋白XynB、FaeA作为载体蛋白,将硬毛粗盖孔菌漆酶的分泌表达量分别提高33.41倍、30.43倍,灵芝漆酶分泌表达量分别提高0.45倍、0.74倍。根据黑曲霉密码子使用偏好性对漆酶基因进行密码子优化,灵芝漆酶分泌表达量提高0.35倍,但硬毛粗盖孔菌漆酶分泌表达量显著降低。 展开更多
关键词 硬毛粗盖孔菌漆酶 灵芝漆酶 黑曲霉 优化表达策略 高效分泌表达
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硬毛粗盖孔菌预处理对玉米秸秆酶水解及组分变化的影响 被引量：4
2
作者 宋丽丽 魏涛 +2 位作者 张静涛 孙浩 张宁亮 《中国酿造》 CAS 北大核心 2017年第2期106-110,共5页
以硬毛粗盖孔菌(Funalia trogii)为研究对象,比较其在不同预处理时间的产酶特征、预处理前后玉米秸秆酶解产糖量及其组分变化。结果表明,硬毛粗盖孔菌对木质素的降解以漆酶和锰过氧化物酶的协同作用为主导,漆酶和锰过氧化物酶活最高分别... 以硬毛粗盖孔菌(Funalia trogii)为研究对象,比较其在不同预处理时间的产酶特征、预处理前后玉米秸秆酶解产糖量及其组分变化。结果表明,硬毛粗盖孔菌对木质素的降解以漆酶和锰过氧化物酶的协同作用为主导,漆酶和锰过氧化物酶活最高分别为341 IU/g和33 IU/g。经生物预处理14 d后的玉米秸秆酶解产糖量可达到350.74 mg/g秸秆,较原料提升184%。玉米秸秆组分的变化与其酶解增效密切相关,F.trogii预处理14 d后木质素和半纤维素含量分别降低了33.99%和36.61%,而纤维素仅降解8.77%,木质素和半纤维素的选择性降解,可显著降低玉米秸秆酶解抗性屏障,提升其酶解糖化效率。硬毛粗盖孔菌预处理玉米秸秆可实现木质纤维素的高效转化,缩短预处理时间,降低处理成本。 展开更多
关键词 硬毛粗盖孔菌 预处理 酶解糖化 木质素 玉米秸秆
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硬毛粗盖孔菌产漆酶条件优化及其对日落黄的降解作用 被引量：8
3
作者 宋丽丽 张志平 +2 位作者 王光路 杨旭 张靖楠 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第10期133-139,共7页
以硬毛粗盖孔菌(Funalia trogii)为研究对象,考察培养基组成及培养条件等对其发酵产漆酶的影响,并进一步研究漆酶对食用合成色素日落黄的降解脱色效果。结果表明,最适培养基组成及培养条件为:玉米淀粉25 g/L,蛋白胨2 g/L,Cu^(2+)1.5 mmo... 以硬毛粗盖孔菌(Funalia trogii)为研究对象,考察培养基组成及培养条件等对其发酵产漆酶的影响,并进一步研究漆酶对食用合成色素日落黄的降解脱色效果。结果表明,最适培养基组成及培养条件为:玉米淀粉25 g/L,蛋白胨2 g/L,Cu^(2+)1.5 mmol/L,香兰素1 mmol/L,培养温度30℃、初始p H6.0,摇床转速200 r/min,硬毛粗盖孔菌培养8 d后发酵液漆酶活力为(329±12) U/m L,是初始培养条件下的11.96倍。漆酶粗酶液对日落黄呈现出较高的降解脱色作用并可耐受高浓度底物(800 mg/L),50～200 mg/L日落黄脱色率均可达90%以上,漆酶介体ABTS可提升对日落黄脱色效率及速率,并降低高浓度底物对漆酶的抑制作用,曲酸的加入则抑制了漆酶活性,导致漆酶对日落黄的脱色率仅为7.14%。本研究为漆酶资源在食品行业的深入开发与应用提供理论依据。 展开更多
关键词 漆酶 硬毛粗盖孔菌 日落黄 脱色
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硬毛粗盖孔菌生物学发育特征及其GC-MS分析 被引量：1
4
作者 张亮 夏佳乐 +3 位作者 钱丹珠 刘佳 高雪阳 包海鹰 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2019年第1期130-138,共9页
【目的】研究硬毛粗盖孔菌(Funalia trogii)子实体不同生长阶段的生物学特性及脂溶性化学成分的变化,为深入了解其生长过程中内部化学物质的变化规律及开发利用提供基础。【方法】采用徒手切片法对不同生长时期的组织结构进行显微镜观... 【目的】研究硬毛粗盖孔菌(Funalia trogii)子实体不同生长阶段的生物学特性及脂溶性化学成分的变化,为深入了解其生长过程中内部化学物质的变化规律及开发利用提供基础。【方法】采用徒手切片法对不同生长时期的组织结构进行显微镜观察并记录;通过GC-MS检测硬毛粗盖孔菌不同生长时期的脂溶性成分,并将检测结果进行对比。【结果】在子实体个体发育过程中,表层菌丝首先分化出盖面组织,经过3次从白色蜂窝状结构至浅黄褐色菌毛的转变过程,菌肉逐渐增厚,内部空腔数量增多、总空间增大。灰褐色或浅黄褐色的齿状菌管起源于盖面组织边缘的菌丝组织。待子实层发育成熟后,部分栅栏状细胞层变为普通丝状菌丝,互相靠近交织,在齿状菌管之间相连,最终形成与自然状态下形态、结构相近的子实体个体。GC-MS分析显示,硬毛粗盖孔菌不同生长时期共检测出10种脂溶性化学成分,其中菌球期检测出8种,盖面组织发育完成期全被检测出(10种),子实体形成期检测出8种,3个时期共检测出56个脂溶性化合物。【结论】硬毛粗盖孔菌个体经过盖面组织分化、菌管与子实层分化以及子实层中菌丝变化3个阶段,可以发育形成类自然状态的子实体;且不同生长阶段的脂溶性成分种类和含量都不同。 展开更多
关键词 硬毛粗盖孔菌 生物学特征 GC-MS分析 显微结构 子实体
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硬毛粗盖孔菌子实体提取物对小鼠免疫功能及抗氧化能力的影响 被引量：3
5
作者 王洪发 刘颖 +1 位作者 王玉悦 包海鹰 《食用菌学报》 CSCD 北大核心 2020年第2期51-62,共12页
通过注射环磷酰胺(80 mg·kg^-1)建立小鼠免疫抑制模型,分别灌胃给药小鼠硬毛粗盖孔菌(Funalia trogii)子实体石油醚、乙酸乙酯提取物(高、中、低剂量分别为20、10、5 mg·kg^-1)以及水提取物(高、中、低剂量分别为150、75、37.... 通过注射环磷酰胺(80 mg·kg^-1)建立小鼠免疫抑制模型,分别灌胃给药小鼠硬毛粗盖孔菌(Funalia trogii)子实体石油醚、乙酸乙酯提取物(高、中、低剂量分别为20、10、5 mg·kg^-1)以及水提取物(高、中、低剂量分别为150、75、37.5 mg·kg^-1),通过测定脏器指数,观察HE染色切片和免疫组化切片,测定血清中免疫细胞因子、丙二醛、超氧化物歧化酶、溶菌酶、溶血素含量及总抗氧化能力,研究其对小鼠免疫功能及抗氧化能力的影响。结果表明:与模型组比较,水提取物高剂量组的胸腺、肝脏指数极显著增高,脾脏指数显著增高;乙酸乙酯提取物高剂量组的脾脏、肝脏指数极显著增高。水提取物高剂量组血清细胞因子IL-2、IL-4的分泌量极显著增加。水提取物高剂量组丙二醛的含量显著降低,且显著低于阳性组;水提取物高剂量组超氧化物歧化酶的含量显著增加;乙酸乙酯、水提取物高剂量组的总抗氧化能力极显著增强。水提取物各组的胸腺、脾脏细胞数量明显增加。研究表明硬毛粗盖孔菌子实体提取物能够增强小鼠的免疫功能及抗氧化能力,为其进一步开发利用提供参考。 展开更多
关键词 硬毛粗盖孔菌 免疫功能 抗氧化 免疫组化
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垂柳茎腐病病原鉴定及其生物学特性测定 被引量：3
6
作者 丁婧钰 李增平 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期547-552,共6页
通过对海南种植的垂柳上发生的茎腐病病原菌进行形态学特征鉴定、ITS序列分析和致病性测定,确认引起海南垂柳茎腐病的病原菌为硬毛粗毛盖孔菌[Funalia trogii(Berk.)Bondartsev&Singer]。生物学特性测定结果显示,光照可以抑制菌丝生... 通过对海南种植的垂柳上发生的茎腐病病原菌进行形态学特征鉴定、ITS序列分析和致病性测定,确认引起海南垂柳茎腐病的病原菌为硬毛粗毛盖孔菌[Funalia trogii(Berk.)Bondartsev&Singer]。生物学特性测定结果显示,光照可以抑制菌丝生长,菌丝生长的最适温度为34℃,最适p H值为6.0,可溶性淀粉和酵母浸膏为最佳碳源和氮源。 展开更多
关键词 海南 垂柳 茎腐病 硬毛粗毛盖孔菌 生物学特性
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硬毛粗盖孔菌饲料添加剂对牛体重及免疫功能的影响
7
作者 王洪发 包海鹰 张亮 《中国饲料》 北大核心 2020年第3期51-55,共5页
为研究硬毛粗盖孔菌饲料添加剂对牛体重、血液生化指标及免疫功能的影响,本文采用单因素试验,选择体重相近的12月龄西门塔尔公牛20头,随机分成4组,每组5头,A组饲喂基础日粮为空白对照,B、C、D组在基础日粮中分别添加1%、3%、5%的硬毛粗... 为研究硬毛粗盖孔菌饲料添加剂对牛体重、血液生化指标及免疫功能的影响,本文采用单因素试验,选择体重相近的12月龄西门塔尔公牛20头,随机分成4组,每组5头,A组饲喂基础日粮为空白对照,B、C、D组在基础日粮中分别添加1%、3%、5%的硬毛粗盖孔菌饲料添加剂。试验期为30 d。在试验结束时测定牛的体重、生化指标及免疫功能。结果表明:与空白组相比,(1)试验B、C、D组的平均日增重(ADF)分别提高了20.1%、52.97%和29.4%(P<0.01),饲料转化率分别提高了16.54%、34.59%和22.56%;(2)B组的尿素(UREA)降低了10.39%(P<0.05);C组的尿素(UREA)和胆固醇(TCHE)降低了11.35%和6.63%(P<0.05),血糖(GLUC)则提高了8.39%(P<0.05);D组的尿素(UREA)和胆固醇(TCHE)降低了10.96%和6.31%(P<0.05),血糖(GLUC)和总蛋白(TP)提高了7.04%和5.35%(P<0.05);(3)免疫指标中C组的IgA、IL-2、IL-4分别提高了27.99%、39.02%和37.63%(P<0.05),IgG提高了21.06%(P<0.01);D组中IFN-γ提高了15.58%(P<0.05),IgG提高了15.64%(P<0.01)。因此,硬毛粗盖孔菌饲料添加剂可以提高西门塔尔公牛的体重和免疫功能。 展开更多
关键词 硬毛粗盖孔菌 复方饲料添加剂 体重 免疫功能
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基质异质性对硬毛粗盖孔菌固态发酵产漆酶的影响
8
作者 钱珂羽 邓云天 +1 位作者 郭修圣 李冠华 《中国酿造》 CAS 北大核心 2022年第8期38-43,共6页
固态基质是固态发酵的核心,为了探究其异质性对固态发酵效率的影响,以不同部位玉米秸秆(鞘、茎、髓、叶)为固态基质,以硬毛粗盖孔菌(Funalia trogii)发酵生产漆酶,测定固态基质化学组成与物理性质,考察固态基质理化性质与漆酶产量关系,... 固态基质是固态发酵的核心,为了探究其异质性对固态发酵效率的影响,以不同部位玉米秸秆(鞘、茎、髓、叶)为固态基质,以硬毛粗盖孔菌(Funalia trogii)发酵生产漆酶,测定固态基质化学组成与物理性质,考察固态基质理化性质与漆酶产量关系,进一步从细胞壁角度探讨固态基质与微生物相互作用。结果表明,以髓为固态基质时,菌丝茂密且漆酶产量最高(110.70 U/g),鞘为固态基质时产量最低(26.40 U/g);髓具有最高的还原糖得率(239.44 mg/g)和较低的灰分含量,而鞘具有最低的还原糖得率(154.29 mg/g)和最高的半纤维素含量(36.65%);漆酶产量与木质素及还原糖得率呈显著正相关(P<0.05),与半纤维素及灰分呈显著负相关(P<0.05)。研究显示,固态基质异质性是影响固态发酵效率的重要因素。 展开更多
关键词 固态发酵 固态基质 不同部位玉米秸秆 硬毛粗盖孔菌 漆酶 异质性
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