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结核分枝杆菌ESAT-6蛋白免疫优势肽段的重组表达、纯化与鉴定被引量：1: 1; 作者王海波朱中元刘贤杰《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期170-173,共4页; 目的构建结核分枝杆菌(MTB)ESAT-6免疫优势肽段(ESAT-6P)的基因表达工程菌,以获得大量重组肽段。方法根据编码ESAT-6P的MTB基因序列,设计1对特异引物,通过PCR技术从H37Rv基因组DNA扩增出ESAT-6P编码基因,目的片段克隆到原核表达载体pET-... 展开更多; 关键词结核分枝杆菌 esat-6蛋白抗原表位表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

牛分枝杆菌ESAT-6蛋白抗体间接ELISA方法的建立被引量：1: 2; 作者许礼义徐志光 +5 位作者宋振忠徐敏古努尔李爱巧黄炯呼西旦《草食家畜》 2010年第2期69-72,共4页; 利用分子克隆技术,提取结核分支杆菌早期分泌性抗原靶ESAT-6基因,然后对其进行克隆表达,获得高效表达的ESAT-6蛋白,Western blot证实ESAT-6蛋白可与结核牛阳性血清发生特异性反应。以纯化复性的ESAT-6重组蛋白作为诊断抗原建立的间接EL... 展开更多; 关键词牛结核 esat-6蛋白间接ELISA; 在线阅读下载PDF 职称材料

牛结核杆菌MPB70-ESAT-6融合蛋白的原核表达及抗原反应性分析被引量：1: 3; 作者姜秀云董阳 +5 位作者包艳红张建宁方诗文金海玲王宁马红霞《中国兽药杂志》 2019年第3期7-12,共6页; 为增强单个蛋白的抗原性,利用(Gly4Ser)3柔性连接肽将牛结核杆菌MPB70和ESAT-6融合。采用重叠延伸PCR技术将牛结核杆菌mpb70与esat-6基因连接,获得融合基因mpb70-esat-6,连接至T-Vector pMD19中,获得克隆质粒pMD-70-esat-6。经Bam HⅠ、... 展开更多; 关键词牛结核杆菌 mpb70基因 esat-6基因融合蛋白原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

结核分枝杆菌重组双歧杆菌-ESAT-6-MPT64疫苗的构建及鉴定被引量：1: 4; 作者曾莉蓉李文桂《湖北民族学院学报（医学版）》 2010年第4期14-16,共3页; 目的构建并鉴定结核分枝杆菌重组双歧杆菌((Bifidobacteria bifidum,Bb)-ESAT-6-MPT64疫苗。方法以结核分枝杆菌H37Rv标准株基因组DNA为模板,通过PCR扩增ESAT-6和MPT64单基因序列,然后采用基因拼接(gene SOEing)法构建融合基因ESAT-6-MP... 展开更多; 关键词结核分枝杆菌融合基因esat-6-MPT64 rBb-esat-6-MPT64疫苗; 在线阅读下载PDF 职称材料

牛结核分枝杆菌ESAT-6蛋白的原核表达和纯化: 5; 作者徐志光许礼义 +2 位作者呼西旦宋振忠徐敏《草食家畜》 2010年第1期67-70,共4页; 构建牛结核分枝杆菌ESAT-6基因的原核表达载体,诱导表达、纯化并初步鉴定该蛋白。方法:以牛型分枝杆菌基因组DNA为模板,PCR方法扩增ESAT-6基因,产物通过双酶切克隆入pET-22b(+)质粒,经PCR、酶切、测序等方法鉴定后,转入大肠杆菌BL21(DE3... 展开更多; 关键词牛分枝杆菌 esat-6 表达纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

ESAT-6在结核病防治中的研究进展: 6; 作者边红芝汤兵祥《河南医学研究》 CAS 2011年第4期494-496,共3页; 结核病是由结核分枝杆菌（MTB）引起的慢性传染病,中国结核病人数居世界第2位,结核病病死数每年达13万,超过其他传染病数的总和[1],故结核病的早期、快速诊断对其早期化疗和控制传播都有重要的意义。; 关键词结核病人 esat-6 慢性传染病防治结核分枝杆菌早期化疗控制传播快速诊断; 在线阅读下载PDF 职称材料

ESAT-6和干扰素-γ表达水平在结核性脑膜炎诊断中的应用价值被引量：5: 7; 作者王娟娟马利《山西医科大学学报》 CAS 2017年第2期153-156,共4页; 目的探讨脑脊液早期分泌性靶抗原-6(ESAT-6)和干扰素-γ(IFN-γ)表达水平变化在结核性脑膜炎的临床诊断中的应用价值。方法将2012-05~2016-05延安大学附属医院收治的90例结核性脑膜炎患者为观察组,选择同期住院的90例非结核性脑膜炎患... 展开更多; 关键词脑脊液脑脊液早期分泌性靶抗原-6 干扰素-Γ 结核性脑膜炎诊断; 在线阅读下载PDF 职称材料

血浆中干扰素-γ及相关抗原检测对结核分枝杆菌潜伏感染的灵敏度和特异性影响被引量：1: 8; 作者陈苏芳马丽玲徐俊驰《抗感染药学》 2020年第12期1804-1807,共4页; 目的:考察血浆中相关抗原(MPt 83、ESAT-6)及结核分枝杆菌干扰素-γ释放试验(TB-IGRSA)检测对结核分枝杆菌潜伏感染(LTBI)的灵敏度和特异性影响。方法:选取2019年9月—2020年1月间被确诊为TB 102例患者,分别用MPt 83抗原和结核分枝杆菌... 展开更多; 关键词结核分枝杆菌干扰素-γ释放试验结核分枝杆菌潜伏感染结核抗原MPt 83 esat-6; 在线阅读下载PDF 职称材料

牛分支杆菌CFP-10的原核表达及其在牛结核病诊断中的应用被引量：3: 9; 作者李超然别克.吐尔逊 +1 位作者蔡宏朱玉贤《动物医学进展》 CSCD 2007年第8期21-26,共6页; 低分子质量的蛋白抗原CFP-10是一种重要的牛分支杆菌早期分泌蛋白。为了检测该蛋白和其他几种抗原在牛结核病诊断中的临床应用,对CFP-10的基因进行克隆,鉴定,并在原核系统中表达。PCR法扩增cfp-10基因片段,连接到pET-22b(+)原核表达载体... 展开更多; 关键词牛结核病间接酶联免疫吸附试验 CFP-10 esat-6; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名结核分枝杆菌ESAT-6蛋白免疫优势肽段的重组表达、纯化与鉴定被引量：1: 1; 作者王海波朱中元刘贤杰; 机构海南医学院附属新华医院检验科海南大学植物保护学院; 出处《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期170-173,共4页; 基金海南省卫生厅科研基金(编号:琼卫2006-61号); 文摘目的构建结核分枝杆菌(MTB)ESAT-6免疫优势肽段(ESAT-6P)的基因表达工程菌,以获得大量重组肽段。方法根据编码ESAT-6P的MTB基因序列,设计1对特异引物,通过PCR技术从H37Rv基因组DNA扩增出ESAT-6P编码基因,目的片段克隆到原核表达载体pET-30 a中,构建N端带有6H is-tag的表达载体。将重组表达载体转化E.coliBL21(DE3)后,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析表达产物,斑点免疫结合法(D IBA)鉴定重组肽段的免疫反应性。结果成功诱导表达ESAT-6蛋白的免疫优势肽段,与表达载体氨基酸序列融合后,表达产物相对分子质量约为16 500,该重组肽段以包涵体形式存在。D IBA结果表明,该重组肽段可被结核患者血清特异识别。结论获得MTB ESAT-6免疫优势肽段的基因表达工程菌,为将此重组肽段应用于结核诊断试剂和新型疫苗的研制奠定了基础。; 关键词结核分枝杆菌 esat-6蛋白抗原表位表达; Keywords Mycobacterium tuberculosis esat-6 protein epitope expression; 分类号 R446.5 [医药卫生—诊断学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名牛分枝杆菌ESAT-6蛋白抗体间接ELISA方法的建立被引量：1: 2; 作者许礼义徐志光宋振忠徐敏古努尔李爱巧黄炯呼西旦; 机构新疆畜牧科学院兽医研究所新疆农业大学新疆乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心; 出处《草食家畜》 2010年第2期69-72,共4页; 基金新疆少数民族科技人才特殊培养计划科研项目"基于基因重组蛋白的牛结核病ELISA诊断方法的研究"; 文摘利用分子克隆技术,提取结核分支杆菌早期分泌性抗原靶ESAT-6基因,然后对其进行克隆表达,获得高效表达的ESAT-6蛋白,Western blot证实ESAT-6蛋白可与结核牛阳性血清发生特异性反应。以纯化复性的ESAT-6重组蛋白作为诊断抗原建立的间接ELISA特异性为94%、敏感性为63.35%。交叉反应试验表明,该抗原只与牛副结核病阳性血清有交叉反应,而不与其他5种常见的牛病阳性血清发生交叉反应。用间接ELISA方法对285份PPD阳性牛血清、对74份PPD阴性牛血清、79份牛γ-干扰素(IFN-γ)检测阳性血清进行检测,其负荷率分别为62.1%、98.64%、83.54%。实验结果表明建立的间接ELISA方法可以用于牛结核病感染和免疫抗体检测,且具有很好的开发和应用前景。; 关键词牛结核 esat-6蛋白间接ELISA; Keywords bovine tuberculosis esat-6 protein indirect ELISA; 分类号 S855.2 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名牛结核杆菌MPB70-ESAT-6融合蛋白的原核表达及抗原反应性分析被引量：1: 3; 作者姜秀云董阳包艳红张建宁方诗文金海玲王宁马红霞; 机构吉林农业大学生命科学学院长春科技学院生物食品学院吉林农业大学动物科技学院; 出处《中国兽药杂志》 2019年第3期7-12,共6页; 基金国家自然科学基金项目(No.31572555) 吉林省科技发展计划项目(No.20170101025JC) +1 种基金 No.JJKH20170315KJ); 文摘为增强单个蛋白的抗原性,利用(Gly4Ser)3柔性连接肽将牛结核杆菌MPB70和ESAT-6融合。采用重叠延伸PCR技术将牛结核杆菌mpb70与esat-6基因连接,获得融合基因mpb70-esat-6,连接至T-Vector pMD19中,获得克隆质粒pMD-70-esat-6。经Bam HⅠ、EcoRⅠ酶切、纯化,并与p ET28a(+)载体连接,构建了pET-70-esat-6重组表达质粒。SDS-PAGE发现,在27.2 ku处表达了融合蛋白MPB70-ESAT-6,Western blotting证实,MPB70-ESAT-6与牛结核阳性血清反应性良好。MPB70-ESAT-6融合蛋白的研究为牛结核病诊断抗原及相关疫苗研究奠定了基础。; 关键词牛结核杆菌 mpb70基因 esat-6基因融合蛋白原核表达; Keywords Mycobacterium bovis mpb70 gene esat-6 gene fusion protein prokaryotic expression; 分类号 S852.61 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名结核分枝杆菌重组双歧杆菌-ESAT-6-MPT64疫苗的构建及鉴定被引量：1: 4; 作者曾莉蓉李文桂; 机构恩施州中心医院消化内科重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所重庆市传染病寄生虫病学重点实验室; 出处《湖北民族学院学报（医学版）》 2010年第4期14-16,共3页; 基金重庆市卫生局科研基金资助项目(05-2-203); 文摘目的构建并鉴定结核分枝杆菌重组双歧杆菌((Bifidobacteria bifidum,Bb)-ESAT-6-MPT64疫苗。方法以结核分枝杆菌H37Rv标准株基因组DNA为模板,通过PCR扩增ESAT-6和MPT64单基因序列,然后采用基因拼接(gene SOEing)法构建融合基因ESAT-6-MPT64,定向克隆至穿梭表达载体pGEX-1λT中,构建重组质粒pGEX-ESAT-6-MPT64;再电转化入Bb,构建结核分枝杆菌重组双歧杆菌-ESAT-6-MPT64疫苗。结果 PCR成功扩增出1020bp的ESAT-6-MPT64融合基因;双酶切证实ESAT-6-MPT64融合基因成功插入pGEX-1λT中;PCR证实rBb-ESAT-6-MPT64疫苗构建成功。结论成功构建了结核分枝杆菌rBb-ESAT-6-MPT64疫苗,为进一步研究其免疫保护效果奠定了基础。; 关键词结核分枝杆菌融合基因esat-6-MPT64 rBb-esat-6-MPT64疫苗; Keywords Mycobacterium tuberculosis fusion gene esat-6-MPT64 recombinant Bb-esat-6-MPT64 vaccine; 分类号 R186.3 [医药卫生—流行病学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名牛结核分枝杆菌ESAT-6蛋白的原核表达和纯化: 5; 作者徐志光许礼义呼西旦宋振忠徐敏; 机构新疆畜牧科学院兽医研究所新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心; 出处《草食家畜》 2010年第1期67-70,共4页; 基金新疆少数民族科技人才特殊培养计划科研项目资助; 文摘构建牛结核分枝杆菌ESAT-6基因的原核表达载体,诱导表达、纯化并初步鉴定该蛋白。方法:以牛型分枝杆菌基因组DNA为模板,PCR方法扩增ESAT-6基因,产物通过双酶切克隆入pET-22b(+)质粒,经PCR、酶切、测序等方法鉴定后,转入大肠杆菌BL21(DE3)polys菌体,经IPTG诱导表达蛋白;利用Western-blot鉴定重组蛋白后,纯化目的蛋白。结果:所获得ESAT-6基因序列与GenBank公布的完全一致。经SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定均发现在6kDa处有特异性蛋白条带。纯化的蛋白的大小与蛋白质分子量标准比较一致。结论:成功表达纯化并鉴定构建了ESAT-6融合蛋白。; 关键词牛分枝杆菌 esat-6 表达纯化; Keywords Mycobacterium bovis esat-6 Construction of vector expression purification; 分类号 S852.618 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名ESAT-6在结核病防治中的研究进展: 6; 作者边红芝汤兵祥; 机构郑州大学第一附属医院呼吸内科河南省胸科医院呼吸内科; 出处《河南医学研究》 CAS 2011年第4期494-496,共3页; 文摘结核病是由结核分枝杆菌（MTB）引起的慢性传染病,中国结核病人数居世界第2位,结核病病死数每年达13万,超过其他传染病数的总和[1],故结核病的早期、快速诊断对其早期化疗和控制传播都有重要的意义。; 关键词结核病人 esat-6 慢性传染病防治结核分枝杆菌早期化疗控制传播快速诊断; 分类号 R52 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名ESAT-6和干扰素-γ表达水平在结核性脑膜炎诊断中的应用价值被引量：5: 7; 作者王娟娟马利; 机构延安大学附属医院神经内科三病区; 出处《山西医科大学学报》 CAS 2017年第2期153-156,共4页; 文摘目的探讨脑脊液早期分泌性靶抗原-6(ESAT-6)和干扰素-γ(IFN-γ)表达水平变化在结核性脑膜炎的临床诊断中的应用价值。方法将2012-05~2016-05延安大学附属医院收治的90例结核性脑膜炎患者为观察组,选择同期住院的90例非结核性脑膜炎患者为对照组。采用ELISA法检测两组患者的脑脊液中的ESAT-6和IFN-γ水平,对观察组按照不同时相(急性期与恢复期)、不同病情程度(重症和轻症)分组进行ESAT-6、IFN-γ水平比较,并比较ESAT-6和IFN-γ单独与联合检测的灵敏性、特异性和阳性结果准确性。结果 1观察组结核性脑膜炎患者急性期的ESAT-6和IFN-γ水平均较对照组明显升高(P<0.05);而观察组结核性脑膜炎患者恢复期的ESAT-6和IFN-γ水平和对照组相比,无显著性差异(P>0.05)。2观察组重症结核性脑膜炎患者的ESAT-6和IFN-γ水平均较轻症组和对照组明显升高(P<0.05);观察组轻症结核性脑膜炎患者的ESAT-6和IFN-γ水平均较对照组明显升高(P<0.05)。3ESAT-6和IFN-γ联合检测的灵敏性、特异性和阳性结果准确性均较单独ESAT-6、单独IFN-γ检测明显提高(P<0.05)。结论脑脊液ESAT-6和IFN-γ表达水平变化将有助于结核性脑膜炎的早期临床诊断。; 关键词脑脊液脑脊液早期分泌性靶抗原-6 干扰素-Γ 结核性脑膜炎诊断; Keywords cerebrospinal fluid esat-6 IFN-γ tuberculous meningitis diagnosis; 分类号 R529.3 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名血浆中干扰素-γ及相关抗原检测对结核分枝杆菌潜伏感染的灵敏度和特异性影响被引量：1: 8; 作者陈苏芳马丽玲徐俊驰; 机构苏州市第五人民医院检验中心; 出处《抗感染药学》 2020年第12期1804-1807,共4页; 文摘目的:考察血浆中相关抗原(MPt 83、ESAT-6)及结核分枝杆菌干扰素-γ释放试验(TB-IGRSA)检测对结核分枝杆菌潜伏感染(LTBI)的灵敏度和特异性影响。方法:选取2019年9月—2020年1月间被确诊为TB 102例患者,分别用MPt 83抗原和结核分枝杆菌干扰素-γ(TB-IGRA)试验检测患者血浆中的IFN-γ水平,分析其检测结果对TB-IGRA阳性和阴性的活动性肺结核(ATB)和社区获得性肺炎(CAP)分布以及结核分枝杆菌潜伏感染(LTBI)的诊断、结核抗原MPt 83和早期分泌靶向抗原(ESAT-6)分布特征等情况;并采用受试者特征试验曲线(ROC)分析其检测的灵敏度和特异性。结果:对MPt 83、ESAT-6和IFN-γ的测定,可有效区分ATB和LTBI患者的诊断,提高了临床对ATB、LTBI检测的灵敏度、特异性以及检测效率。结论:采用MPt 83、ESAT-6检测IFN-γ水平,有利于对ATB、LTBI患者的诊断,其检测的灵敏度MPt 83高于ESAT-6。; 关键词结核分枝杆菌干扰素-γ释放试验结核分枝杆菌潜伏感染结核抗原MPt 83 esat-6; 分类号 R446 [医药卫生—诊断学] R52 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名牛分支杆菌CFP-10的原核表达及其在牛结核病诊断中的应用被引量：3: 9; 作者李超然别克.吐尔逊蔡宏朱玉贤; 机构北京大学蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室; 出处《动物医学进展》 CSCD 2007年第8期21-26,共6页; 基金国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2002AA206411); 文摘低分子质量的蛋白抗原CFP-10是一种重要的牛分支杆菌早期分泌蛋白。为了检测该蛋白和其他几种抗原在牛结核病诊断中的临床应用,对CFP-10的基因进行克隆,鉴定,并在原核系统中表达。PCR法扩增cfp-10基因片段,连接到pET-22b(+)原核表达载体中,再转入表达宿主E.coliBL21(DE3)PlysS菌株内,用IPTG诱导,进行蛋白表达、纯化。分别以CFP-10、ESAT-6、MPT83、MPT70、牛PPD、CFP-10与ESAT-6混合蛋白,MPT83与MPT70混合蛋白为抗原,用间接ELISA法诊断牛结核病。结果表明,以CFP-10与ESAT-6混合蛋白作为抗原检测牛结核病的特异性和敏感性分别达到了100%和63.6%,均超过了其他单抗原或抗原组合,为以筛选合适抗原为基础的血清学诊断技术提供了有力的支持并创造了良好的应用前景。; 关键词牛结核病间接酶联免疫吸附试验 CFP-10 esat-6; Keywords Bovine tuberculosis iELISA CFP-10 esat-6; 分类号 S852.618 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	结核分枝杆菌ESAT-6蛋白免疫优势肽段的重组表达、纯化与鉴定	王海波朱中元刘贤杰	《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	牛分枝杆菌ESAT-6蛋白抗体间接ELISA方法的建立	许礼义徐志光宋振忠徐敏古努尔李爱巧黄炯呼西旦	《草食家畜》	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	牛结核杆菌MPB70-ESAT-6融合蛋白的原核表达及抗原反应性分析	姜秀云董阳包艳红张建宁方诗文金海玲王宁马红霞	《中国兽药杂志》	2019	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	结核分枝杆菌重组双歧杆菌-ESAT-6-MPT64疫苗的构建及鉴定	曾莉蓉李文桂	《湖北民族学院学报（医学版）》	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	牛结核分枝杆菌ESAT-6蛋白的原核表达和纯化	徐志光许礼义呼西旦宋振忠徐敏	《草食家畜》	2010	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	ESAT-6在结核病防治中的研究进展	边红芝汤兵祥	《河南医学研究》 CAS	2011	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	ESAT-6和干扰素-γ表达水平在结核性脑膜炎诊断中的应用价值	王娟娟马利	《山西医科大学学报》 CAS	2017	5	在线阅读下载PDF 职称材料
8	血浆中干扰素-γ及相关抗原检测对结核分枝杆菌潜伏感染的灵敏度和特异性影响	陈苏芳马丽玲徐俊驰	《抗感染药学》	2020	1	在线阅读下载PDF 职称材料
9	牛分支杆菌CFP-10的原核表达及其在牛结核病诊断中的应用	李超然别克.吐尔逊蔡宏朱玉贤	《动物医学进展》 CSCD	2007	3	在线阅读下载PDF 职称材料