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花生AhEPSPS基因的克隆与表达分析
1
作者 刘坤 张召聪 +6 位作者 薛芳 刘慧暄 徐静怡 李唯佳 王鸿梅 仇燕 陈四龙 《中国油料作物学报》 北大核心 2025年第5期1154-1167,共14页
挖掘花生抗除草剂候选基因,研究草甘膦除草剂的靶标,即5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合成酶(EPSPS)基因AhEPSPS,采用RT-PCR技术从花生cDNA中克隆到AhEPSPS1和AhEPSPS2的CDS全长序列,分析其时空表达模式及亚细胞定位特征,旨在为深入解析AhEPSP... 挖掘花生抗除草剂候选基因,研究草甘膦除草剂的靶标,即5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合成酶(EPSPS)基因AhEPSPS,采用RT-PCR技术从花生cDNA中克隆到AhEPSPS1和AhEPSPS2的CDS全长序列,分析其时空表达模式及亚细胞定位特征,旨在为深入解析AhEPSPS基因的生物功能尤其在草甘膦抗性中的作用奠定基础。经生物信息学预测、亚细胞定位和实时荧光定量检测,结果表明AhEPSPS1和AhEPSPS2基因全长均为1581 bp,编码526个氨基酸,分子质量为55.9 kDa,等电点大小为6.80。系统进化树分析表明AhEPSPS1和AhEPSPS2与GmEPSPS蛋白的亲缘关系最近。烟草表皮细胞瞬时表达亚细胞定位结果证实,AhEPSPS1和AhEPSPS2基因的表达产物定位于叶绿体。荧光定量PCR分析结果表明,AhEPSPS1和AhEPSPS2在根、茎、叶中均有表达;1%草甘膦处理的花生叶片中,两基因的表达水平呈先下降而后升高的变化趋势,说明AhEPSPS1和AhEPSPS2对草甘膦药害能产生转录水平的动态响应。 展开更多
关键词 花生 epspS基因 基因克隆 草甘膦 表达分析 除草剂抗性
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杂草环境下转EPSPS基因大豆NZL06-698的生态适应性研究 被引量：4
2
作者 黄鹞 郭汝清 刘标 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期866-871,共6页
为研究转EPSPS基因大豆NZL06-698在杂草环境中的生态适应性,试验设置杂草处理模拟野外环境,研究转基因大豆NZL06-698(GT698)的生存竞争能力以及外源EPSPS蛋白表达情况。结果表明:在相同处理下转基因大豆GT698的株高(R8期)、百粒重显著... 为研究转EPSPS基因大豆NZL06-698在杂草环境中的生态适应性,试验设置杂草处理模拟野外环境,研究转基因大豆NZL06-698(GT698)的生存竞争能力以及外源EPSPS蛋白表达情况。结果表明:在相同处理下转基因大豆GT698的株高(R8期)、百粒重显著高于亲本大豆蒙豆12(MD12),但单株产量、单株籽粒数、结实率显著低于亲本大豆,说明外源基因的存在并未增强转基因大豆的生存竞争力,且转基因大豆在野外的生存竞争能力与亲本大豆相比较弱。试验注意到,杂草环境对转EPSPS基因大豆的生长有明显的限制作用,杂草处理下转基因大豆的单株产量、单株籽粒数、百粒重、结实率等指标均显著低于对照处理。ELISA检测结果表明,转基因大豆叶片及籽粒中外源EPSPS蛋白在杂草处理及对照中均正常表达,且两种处理下的EPSPS蛋白表达量无显著差异。以上结果表明杂草环境中转基因大豆的EPSPS蛋白正常表达,正常提供抗草甘膦性状,但是外源基因的存在并没有增加转基因大豆的生存竞争能力,且转基因大豆的生长受到杂草环境的显著抑制,由此得出结论:与亲本大豆相比,转EPSPS基因大豆NZL06-698在野外环境中生态适应能力较弱。 展开更多
关键词 转epspS基因大豆 生存竞争能力 epspS蛋白
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外源抗草甘膦EPSPs基因在大豆基因组中的整合与定位 被引量：13
3
作者 王晓波 蒋凌雪 +7 位作者 魏利 刘林 陆伟 李文欣 王俊 陶波 常汝镇 邱丽娟 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期365-375,共11页
通过基因特异引物扩增和免疫层析试纸法分别对转基因大豆中外源EPSPs基因和其编码的蛋白进行检测,结果表明,EPSPs基因不仅已整合到大豆基因组中,而且EPSPs蛋白可以正常表达。利用染色体步移法获得了转基因大豆插入位点的侧翼序列,序列... 通过基因特异引物扩增和免疫层析试纸法分别对转基因大豆中外源EPSPs基因和其编码的蛋白进行检测,结果表明,EPSPs基因不仅已整合到大豆基因组中,而且EPSPs蛋白可以正常表达。利用染色体步移法获得了转基因大豆插入位点的侧翼序列,序列比对表明35S上游的大豆DNA序列起始于Gm02:7912740,NOS下游的大豆DNA序列起始于Gm02:7777705。在本研究检测序列范围内发现插入位点两侧不同位置有3个不同的未知片段、2个大豆基因组序列倒位,同时发现2个大豆基因组片段丢失。外源基因不是以点插入方式整合,而是导致大豆基因组约135kb片段的移位;NOS下游大豆基因组序列发生重排,导致一个编码HEC1和HEATrepeat两个功能域的基因(Glyma02g09790)结构受到影响,首次发现该基因在ABA和PEG处理时下调表达,推测该基因通过ABA信号通路参与胁迫应答。本研究通过对抗除草剂EPSPs基因在大豆基因组中的插入位点分析,明确了外源EPSPs基因在大豆基因组中的整合、定位及其侧翼序列,为转基因大豆安全评价提供了依据。 展开更多
关键词 转基因大豆 插入位点 基因组 epspS 抗草甘膦 定位 侧翼序列
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银杏EPSPS基因克隆及表达分析 被引量：11
4
作者 程华 李琳玲 +2 位作者 王燕 姜德志 程水源 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期2365-2372,共8页
利用RACE技术,克隆到银杏EPSPS合酶基因(GbEPSPS)的cDNA序列并对其进行生物信息学分析。结果表明:银杏GbEPSPScDNA长1 403 bp(GenBank登录号GU084139),其包含一个1 035 bp的ORF框,编码344个氨基酸;预测该基因编码蛋白质分子量为36.87 kD... 利用RACE技术,克隆到银杏EPSPS合酶基因(GbEPSPS)的cDNA序列并对其进行生物信息学分析。结果表明:银杏GbEPSPScDNA长1 403 bp(GenBank登录号GU084139),其包含一个1 035 bp的ORF框,编码344个氨基酸;预测该基因编码蛋白质分子量为36.87 kD,其等电点为5.75。系统进化树分析表明,银杏EPSPS蛋白质序列与其他物种的EPSPS同源性较高。半定量RT-PCR分析结果显示,EPSPS基因在银杏的叶和果实中表达量最高,其次为茎,根中表达水平最低。草甘膦处理能显著诱导银杏EPSPS基因表达量升高;紫外光对银杏EPSPS基因的表达具有诱导作用;ABA诱导GbEPSPS表达量先升后降;GbEPSPS转录水平受到42℃高温显著诱导。 展开更多
关键词 银杏 epsp合酶 基因克隆 RACE技术
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农杆菌介导法向玉米茎尖导入抗草甘膦EPSPS基因的研究 被引量：14
5
作者 孙传波 李海华 +6 位作者 郭嘉 陶蕊 曲文利 孟凡梅 张举仁 刘文国 袁英 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期91-93,共3页
以玉米自交系郑58的茎尖为受体,通过农杆菌介导法将抗草甘膦EPSPS基因转入玉米中,研究以茎尖为受体的农杆菌转化体系的可行性。98株转化苗,经过300 ppm的除草剂(农达)筛选,共获得13株转基因植株,经PCR检测,其中7株表现阳性,转化率达7.14... 以玉米自交系郑58的茎尖为受体,通过农杆菌介导法将抗草甘膦EPSPS基因转入玉米中,研究以茎尖为受体的农杆菌转化体系的可行性。98株转化苗,经过300 ppm的除草剂(农达)筛选,共获得13株转基因植株,经PCR检测,其中7株表现阳性,转化率达7.14%。初步证明外源基因已经整合到玉米基因组中,以玉米茎尖作为受体的转化系统用于基因转化是可行、高效的。 展开更多
关键词 玉米 茎尖 农杆菌介导 epspS基因
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陆地棉EPSPS基因的克隆及其组织特异性表达分析 被引量：21
6
作者 童旭宏 吴玉香 祝水金 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2009年第4期259-264,共6页
5-烯醇式丙酮莽草酸-3-磷酸合成酶(EPSPS)是莽草酸途径中的一个重要酶,它是非选择性除草剂草甘膦的靶标酶,在高等植物中定位于叶绿体质膜上。根据EST拼接的序列设计引物,从陆地棉品种珂字棉312中获得了全长为1834 bp的cDNA序列,其最大... 5-烯醇式丙酮莽草酸-3-磷酸合成酶(EPSPS)是莽草酸途径中的一个重要酶,它是非选择性除草剂草甘膦的靶标酶,在高等植物中定位于叶绿体质膜上。根据EST拼接的序列设计引物,从陆地棉品种珂字棉312中获得了全长为1834 bp的cDNA序列,其最大可读框为1565bp,编码521个氨基酸。陆地棉EPSPS基因与其它植物中同类酶在氨基酸水平上有广泛的同源性。通过与已知的其它高等植物叶绿体转运肽剪切位点比对,推断棉花EPSPS基因含有74个氨基酸叶绿体运输肽和447个氨基酸组成的熟蛋白。该酶具有保守的PEP结合位点及催化位点的特征序列。半定量分析表明,该基因产物广泛存在于棉花根、茎和叶等各组织中,在叶片中表达量较高。进一步扩增棉花核基因组获得了3344 bp的DNA序列,它包含8个内含子和7个外显子。棉花EPSPS基因的克隆为抗草甘膦棉花种质资源的创制提供了理论基础。 展开更多
关键词 陆地棉 epspS 草甘膦 表达序列标签
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抗除草剂bar基因与EPSPS基因在转基因甘蔗中的应用研究 被引量：7
7
作者 王文治 杨本鹏 +6 位作者 蔡文伟 熊国如 冯翠莲 王俊刚 武媛丽 沈林波 张树珍 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期73-78,共6页
通过农杆菌介导法,分别将bar基因和EPSPS基因导入到甘蔗中,分别获得了抗草铵膦和草甘膦两种除草剂的转基因甘蔗。通过直接喷洒田间施用浓度的草铵膦和草甘膦除草剂,证明了转基因甘蔗T0、T1代、宿根1代和宿根2代外源基因遗传稳定,且均具... 通过农杆菌介导法,分别将bar基因和EPSPS基因导入到甘蔗中,分别获得了抗草铵膦和草甘膦两种除草剂的转基因甘蔗。通过直接喷洒田间施用浓度的草铵膦和草甘膦除草剂,证明了转基因甘蔗T0、T1代、宿根1代和宿根2代外源基因遗传稳定,且均具有稳定的耐除草剂的功能。因此转耐除草剂基因的甘蔗,可以与转耐除草剂基因的玉米、大豆、油菜和棉花一样,有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 转基因甘蔗 耐除草剂 BAR基因 epspS基因 草铵膦 草甘膦
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转EPSPS基因抗草甘膦棉花的遗传分析 被引量：7
8
作者 燕树锋 祝水金 +2 位作者 刘海芳 卢彩霞 铁双贵 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2015年第3期54-57,共4页
为分析转基因抗草甘膦棉花早代遗传情况,以花粉管通道法获得的26个转5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶基因(EPSPS)抗草甘膦棉花转化事件为材料,以其背景亲本中棉所49为对照,喷施草甘膦后对转基因棉T1、T2分离比例进行考察。T1田间抗性... 为分析转基因抗草甘膦棉花早代遗传情况,以花粉管通道法获得的26个转5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶基因(EPSPS)抗草甘膦棉花转化事件为材料,以其背景亲本中棉所49为对照,喷施草甘膦后对转基因棉T1、T2分离比例进行考察。T1田间抗性鉴定结果表明,经卡方检测20个转化事件T1分离符合3∶1的分离规律,即外源基因插入1个位点;6个转化事件不符合1对基因的分离规律,出现了偏分离。T2田间抗性鉴定结果表明,通过花粉通管法共获得152个纯合株系,分别来源于25个转化事件;对T2不纯合株系继续进行分离比例的考察,发现来源于15个转化事件的57个株系符合3∶1的分离规律;此外卡方检测结果表明,每个转化事件都有不符合3∶1分离规律的株系,且其中10个转化事件没有符合3∶1分离规律的株系。表明通过花粉管通道法获得的转基因植株中外源基因的整合和遗传均较复杂。 展开更多
关键词 棉花 草甘膦 epspS基因 遗传分析
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EPSP合成酶的特性及新抑制剂的研究进展 被引量：8
9
作者 向文胜 张文吉 +1 位作者 王相晶 覃兆海 《农药学学报》 CAS CSCD 2000年第2期1-8,共8页
概述了 EPSP合成酶的生理作用。高等植物前体 EPSP合成酶进入叶绿体后 ,经剪切而成成熟 EPSP合成酶并定位于叶绿体内质膜上 ;EPSP合成酶的三维结构上存在三个活性区域 ,改变活性区域的氨基酸残基可对草甘膦产生抗性 ,同时表明了酶与草... 概述了 EPSP合成酶的生理作用。高等植物前体 EPSP合成酶进入叶绿体后 ,经剪切而成成熟 EPSP合成酶并定位于叶绿体内质膜上 ;EPSP合成酶的三维结构上存在三个活性区域 ,改变活性区域的氨基酸残基可对草甘膦产生抗性 ,同时表明了酶与草甘膦的结合位点 ;不同生物的 EPSP合成酶有高的同源性。 EPSP合成酶催化底物反应机理为 :PEP首先与酶形成过渡态 ,而后和 S3P形成缩酮四面体 ,最后生成 EPSP。草甘膦与 EPSP合成酶、EPSP形成三元复合物而阻断了 EPSP合成酶的催化作用 ;以 EPSP和 S3P· glyphosate为分子模型 ,设计合成的化合物对 EPSP合成酶的活性有抑制作用。 展开更多
关键词 epsp合成酶 抑制剂 5-烯醇式丙酮酸莽草酸-3-磷酸合成酶 生理作用 草甘磷 催化机理 除草剂 特性
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薤白EPSP合成酶基因转化烟草提高其草甘膦抗性 被引量：5
10
作者 黄丽华 蒋向 +2 位作者 李博 李育强 张学文 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期855-860,共6页
葱属植物薤白具有较强的草甘膦抗性。将薤白中与草甘膦抗性相关的EPSP合成酶基因(EPSPsA)cDNA重组到植物表达载体pWM101中,构建薤白植物表达EPSPsA重组载体,采用根癌农杆菌介导法将其转入烟草品种WS38,获得转薤白EPSPsA基因烟草。PCR分... 葱属植物薤白具有较强的草甘膦抗性。将薤白中与草甘膦抗性相关的EPSP合成酶基因(EPSPsA)cDNA重组到植物表达载体pWM101中,构建薤白植物表达EPSPsA重组载体,采用根癌农杆菌介导法将其转入烟草品种WS38,获得转薤白EPSPsA基因烟草。PCR分析表明,目的基因已经整合进烟草基因组中。对转基因烟草愈伤组织及幼苗进行的草甘膦抗性检测表明,转基因烟草对草甘膦的耐受性明显提高。 展开更多
关键词 薤白 epsp合成酶基因 烟草转化 草甘膦抗性
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大豆ms1轮回群体应用于转EPSPS基因大豆育种改良研究 被引量：5
11
作者 赵青松 杨春燕 +7 位作者 赵双进 闫龙 史晓蕾 刘丽娟 赵聪聪 冯燕 赵鑫 张孟臣 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2016年第S1期112-116,共5页
针对抗草甘膦转EPSPS基因大豆遗传基础狭窄的问题,利用ms1轮回群体拓宽抗草甘膦转基因大豆的遗传基础。利用遗传基础丰富的ms1基础群体,与现有的抗草甘膦转EPSPS基因大豆新品系冀K32、冀K331、冀K69、冀K964建立抗草甘膦C0群体,C0群体... 针对抗草甘膦转EPSPS基因大豆遗传基础狭窄的问题,利用ms1轮回群体拓宽抗草甘膦转基因大豆的遗传基础。利用遗传基础丰富的ms1基础群体,与现有的抗草甘膦转EPSPS基因大豆新品系冀K32、冀K331、冀K69、冀K964建立抗草甘膦C0群体,C0群体改良后形成C1群体。分析基础、C0、C1 3个群体的品质、产量等农艺性状。结果表明,C1群体蛋白变化为35.66%~48.02%;脂肪变化为16.34%~22.92%;株高变化为46.00~158.00 cm;分枝数变化为0~8个;百粒质量变化为10.30~25.30 g;单株重变化为1.60~59.60 g。C1群体中不育株所占比例为19.20%,抗草甘膦性株所占比例为70.54%。利用大豆ms1基因构建了一个含EPSPS基因的转基因大豆轮回群体,该群体性状分离广泛,遗传多样性丰富,适合转基因大豆育种材料筛选。 展开更多
关键词 大豆 轮回群体选择 MS1 转基因 epspS 草甘膦
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利用玉米茎尖技术转化TR1-EPSPS 被引量：4
12
作者 王楠 杨毅 +7 位作者 王健美 谢树章 邱正高 张亚勤 袁亮 高梅 刘永胜 杨华 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第3期766-770,共5页
茎尖转化法是目前发展较快的农杆菌转化技术。本研究利用茎尖转化法将载体pCambia-35S-TR1-EPSPS转入玉米的自交系中,通过草甘膦除草剂筛选得到46株抗除草剂的玉米幼苗,通过PCR验证,这些幼苗中有9株含有外源载体片段。
关键词 玉米 茎尖(shoot tip) 草甘膦 epspS
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薤白EPSP基因对亚麻的转化及检测 被引量：5
13
作者 李博 黄丽华 +2 位作者 蒋向 李育强 张学文 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期12-16,共5页
薤白EPSP基因编码5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶,对除草剂草甘瞵具有一定的抗性.利用该基因构建植物表达重组体.薤白EPSPcDNA重组到植物表达载体pWM101中,构建成35S启动子控制的植物组成型表达载体,利用农杆菌介导法将其转入亚麻,经过潮... 薤白EPSP基因编码5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶,对除草剂草甘瞵具有一定的抗性.利用该基因构建植物表达重组体.薤白EPSPcDNA重组到植物表达载体pWM101中,构建成35S启动子控制的植物组成型表达载体,利用农杆菌介导法将其转入亚麻,经过潮霉素筛选获得了抗性的愈伤组织,诱导分化后获得了亚麻苗.经特异引物的PCR扩增,证明目的基因已经整合到亚麻基因组中,对转基因亚麻愈伤组织及幼苗进行的草甘膦抗性检测表明,转基因亚麻对草甘膦的耐受性明显提高. 展开更多
关键词 亚麻 薤白epsp合成酶基因 遗传转化
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转基因玉米EPSPS蛋白适体的筛选与结构分析 被引量：5
14
作者 江树勋 黄新 +6 位作者 邵碧英 陈敏 陈洪俊 Jun Sheng Lin 陈文炳 吴亚君 潘大仁 《热带作物学报》 CSCD 2010年第4期600-604,共5页
通过体外合成长度为70个碱基的随机ssDNA文库,采用指数富集配基的系统进化(SELEX)技术,以转基因玉米EPSPS蛋白为靶目标进行16轮筛选,将筛选到的适体群进行克隆、测序,初步获得与转基因玉米EPSPS蛋白特异性结合的适体。并用Macaw2.05和DN... 通过体外合成长度为70个碱基的随机ssDNA文库,采用指数富集配基的系统进化(SELEX)技术,以转基因玉米EPSPS蛋白为靶目标进行16轮筛选,将筛选到的适体群进行克隆、测序,初步获得与转基因玉米EPSPS蛋白特异性结合的适体。并用Macaw2.05和DNAMAN软件对每个适体的保守序列和二级结构进行分析。结果表明:一级结构分析序列同源性可分为四大群,其中A群有11条序列含有67个保守碱基;二级结构分析结果表明,茎环状和口袋状等结构可能是适体与转基因玉米EPSPS蛋白结合的结构基础。利用SELEX技术获得与转基因玉米EPSPS蛋白特异结合的适体群,其一级和二级结构与亲和力密切相关。 展开更多
关键词 转基因玉米 epspS蛋白 SELEX 适体 结构
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农杆菌介导抗草甘膦基因(EPSPS)的玉米转化及相关因子的影响研究 被引量：11
15
作者 王秀红 白建荣 +2 位作者 孙毅 史向远 任志强 《山西农业科学》 2010年第1期11-14,18,共5页
对影响农杆菌转化效率的一些因素进行了研究优化,结果表明,诱导培养基中添加200 mg/L的头孢霉素既能抑制农杆菌的生长又不影响幼胚的愈伤诱导;诱导和筛选培养基中添加5 mg/L硝酸银能有效抑制玉米愈伤组织褐变,显著改善愈伤组织及胚性愈... 对影响农杆菌转化效率的一些因素进行了研究优化,结果表明,诱导培养基中添加200 mg/L的头孢霉素既能抑制农杆菌的生长又不影响幼胚的愈伤诱导;诱导和筛选培养基中添加5 mg/L硝酸银能有效抑制玉米愈伤组织褐变,显著改善愈伤组织及胚性愈伤组织的诱导率;分化培养基中添加2μmol/L的嘧啶醇能延缓试管苗的生长速度,使苗更健壮。利用优化的根癌农杆菌介导转化体系将抗草甘膦基因(EPSPS)转入玉米杂交材料HiⅡ中,获得了PCR阳性植株。 展开更多
关键词 玉米 农杆菌介导 抗草甘膦基因(epspS) 相关因子
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转cry1Ab/vip3H+epsps基因粳稻对非靶标害虫稻叶蝉田间种群的影响 被引量：3
16
作者 卢增斌 韩乃顺 +5 位作者 徐刚 刘玉娥 胡萃 彭于发 郭予元 叶恭银 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1275-1285,共11页
转基因作物可能带来的风险之一是对非靶标生物尤其是非靶标植食者产生潜在的影响。本研究采用吸虫器取样法,通过在浙江长兴2地点3年的试验评价了新型抗虫/耐除草剂转cry1Ab/vip3H+epsps基因粳稻(G6H1)及其亲本对照(秀水110,XS110)对稻... 转基因作物可能带来的风险之一是对非靶标生物尤其是非靶标植食者产生潜在的影响。本研究采用吸虫器取样法,通过在浙江长兴2地点3年的试验评价了新型抗虫/耐除草剂转cry1Ab/vip3H+epsps基因粳稻(G6H1)及其亲本对照(秀水110,XS110)对稻叶蝉田间种群动态的影响。结果表明:叶蝉类主要有黑尾叶蝉Nephotettix cincticeps(Uhler)、二点叶蝉Cicadula fascifrons(Stl)和电光叶蝉Deltocephalus dorsalis Motschulsky组成,其中黑尾叶蝉是优势种。虽然3种叶蝉的种群密度随着地点和年份的不同有所不同,但是转基因水稻对3种叶蝉种群密度的年度变化均没有显著性影响。少数年份,黑尾叶蝉成虫、若虫及其两者总密度的时间动态在转基因水稻和对照田之间存在差异,大多数年份,趋势一致且无显著差异(P>0.05)。另外,二点叶蝉和电光叶蝉种群的时间动态在转基因水稻和对照田之间也相似。综合评价认为,本供试转基因水稻品系G6H1对稻田稻叶蝉种群无明显的负面影响。 展开更多
关键词 转基因水稻 CRYLAB vip3H基因 epsps基因 稻叶蝉 黑尾叶蝉 二点叶蝉 电光叶蝉 种群动态
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M细胞脊髓EPSP前电位的生理特性 被引量：6
17
作者 张淑华 张英才 +2 位作者 童学红 李效义 张茂先 《首都医科大学学报》 CAS 1997年第3期201-204,共4页
直接刺激脊髓可在鲫鱼Ｍ细胞体诱发脊髓ＥＰＳＰ前电位（简称前电位）。前电位以较短的潜伏期〔（１．３３±０．２１）ｍｓ〕、较低的幅度〔（２．２２±１．０８）ｍＶ〕、较短的持续期间〔（２．６５±０．８３）ｍｓ〕... 直接刺激脊髓可在鲫鱼Ｍ细胞体诱发脊髓ＥＰＳＰ前电位（简称前电位）。前电位以较短的潜伏期〔（１．３３±０．２１）ｍｓ〕、较低的幅度〔（２．２２±１．０８）ｍＶ〕、较短的持续期间〔（２．６５±０．８３）ｍｓ〕和较低的刺激阈值〔（３．４９±０．７４）Ｖ〕区别于脊髓ＥＰＳＰ。前电位对Ｍ细胞的兴奋性具有调制作用，它可能由脊髓内直径较粗、传导速度较快、只经过一次混合突触接替的传入途径中介。 展开更多
关键词 脊髓 epsp前电位 MAUTHNER细胞 鲫鱼
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转EPSPS基因大豆植株中蛋白的表达 被引量：4
18
作者 邢珍娟 李飞武 +5 位作者 刘娜 李葱葱 康岭生 宋新元 邵改革 张明 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期981-984,989,共5页
采用ELISA定量测定法研究了转EPSPS基因大豆不同生长时期不同器官中CP4EPSPS蛋白含量的变化。结果表明：转EPSPS基因大豆不同器官在不同生育期CP4EPSPS蛋白含量表现出较大的差异，R8期籽粒中的CP4EPSPS蛋白含量在所有时期和所有组织中... 采用ELISA定量测定法研究了转EPSPS基因大豆不同生长时期不同器官中CP4EPSPS蛋白含量的变化。结果表明：转EPSPS基因大豆不同器官在不同生育期CP4EPSPS蛋白含量表现出较大的差异，R8期籽粒中的CP4EPSPS蛋白含量在所有时期和所有组织中蛋白含量最高；上位叶和下位叶中CP4EPSPS蛋白除V3～V5期和R8期外的表达趋势一致，茎上部和茎下部中CP4EPSPS蛋白存不同时期表达动态趋势基本一致，根中CP4EPSPS蛋白含量在V3～V5期下降，然后逐渐升高，R1～R8期有一个大幅度的下降过程。从V1期至R8期，随着植株的不断生长，各组织中CP4EPSPS蛋白的含量有明显的变化。 展开更多
关键词 转基因大豆 CP4 epspE蛋白含量 酶联免疫吸附测定
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EPSP合酶的研究进展 被引量：5
19
作者 徐杰 蒋世云 +2 位作者 傅凤鸣 耿鹏飞 黄凯 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期40-50,共11页
5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶(5-Enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase,EPSP合酶)是莽草酸途径中的第六位酶,参与合成芳香族氨基酸以及部分次生代谢的产物,同时EPSP合酶不仅是除草剂草甘膦、抗菌素、抗寄生虫药物的作用靶酶,... 5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶(5-Enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase,EPSP合酶)是莽草酸途径中的第六位酶,参与合成芳香族氨基酸以及部分次生代谢的产物,同时EPSP合酶不仅是除草剂草甘膦、抗菌素、抗寄生虫药物的作用靶酶,而且也是促进生物体内莽草酸积累的重要调控位点。近年来,随着分子生物学技术的快速发展和对EPSP合酶的深入研究,EPSP合酶基因在耐草甘膦转基因作物、医药卫生等方面被广泛应用。对EPSP合酶的研究进展进行综述及展望。 展开更多
关键词 莽草酸途径 epsp合酶 莽草酸积累 耐草甘膦
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LAMP在检测转基因抗草甘膦大豆cp4-epsps基因上的应用 被引量：21
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作者 兰青阔 王永 +2 位作者 赵新 朱珠 程奕 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第24期10377-10378,10390,共3页
以转基因抗草甘膦大豆为主要研究对象,利用环介导等温扩增技术(Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP),针对cp4-epsps合成酶基因(5-enolpyruvlshimimate-3-phosphate synthase)的6个区域设计4条特异性引物,利用一种链置换DNA聚... 以转基因抗草甘膦大豆为主要研究对象,利用环介导等温扩增技术(Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP),针对cp4-epsps合成酶基因(5-enolpyruvlshimimate-3-phosphate synthase)的6个区域设计4条特异性引物,利用一种链置换DNA聚合酶(BstDNA polymerase),在65℃保温30 min,通过荧光显色即可完成对转基因的检测工作。结果显示,该LAMP方法能够特异性检测cp4-epsps基因,其检测灵敏度是常规定性PCR方法的10倍。建立了针对转基因大豆cp4-epsps基因的LAMP检测方法,其具有高度的特异性及稳定性,结果可靠,适合转基因抗草甘膦大豆的快速检测。 展开更多
关键词 转基因抗草甘膦大豆 cp4-epsps IAMP 检测
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