氧化低密度脂蛋白对人血管内皮细胞ECV-304促增殖及诱导凋亡的作用 被引量：19

1

作者 秦英 杨君 +4 位作者 朱陵群 牛福玲 崔巍 王硕仁 姜良铎 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期334-339,T001,共7页

目的 :探讨氧化低密度脂蛋白 (ox -LDL)对血管内皮细胞损伤作用的多样性。方法 :通过细胞形态学、台盼蓝活细胞计数、细胞毒四唑盐 (MTT)比色试验、乳酸脱氢酶 (LDH)、流式细胞凋亡和细胞凋亡小分子量DNA片段凝胶电泳测定法 ,观察 (0 1... 目的 :探讨氧化低密度脂蛋白 (ox -LDL)对血管内皮细胞损伤作用的多样性。方法 :通过细胞形态学、台盼蓝活细胞计数、细胞毒四唑盐 (MTT)比色试验、乳酸脱氢酶 (LDH)、流式细胞凋亡和细胞凋亡小分子量DNA片段凝胶电泳测定法 ,观察 (0 1、1、10、10 0、15 0和 2 0 0 )mg/L的ox-LDL的条件培养液对人血管脐静脉内皮细胞ECV- 3 0 4的影响。结果 :(0 1- 10 )mg/L的ox -LDL对ECV - 3 0 4细胞具有促增殖作用 ,而增加浓度达 10 0mg/L及以上时 ,其表现则主要是对ECV - 3 0 4的细胞毒性 ;而且 ,这种细胞毒性以当ox -LDL的浓度达到 15 0和 2 0 0mg/L时 ,在12h开始诱导ECV - 3 0 4细胞出现凋亡 ,分别达 15 86%和 2 1 89%。而当ox-LDL作用ECV - 3 0 4细胞 18h后 ,则出现伴随凋亡的细胞坏死。结论 :ox -LDL具有很强的细胞毒性 ,其对内皮细胞的细胞毒性经历了促细胞增殖、凋亡前期。 展开更多

关键词 氧化低密度脂蛋白 人血管内皮细胞 ecv-304 细胞凋亡 动脉硬化

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高级蛋白氧化产物对人脐静脉内皮细胞ECV-304的作用 被引量：2

2

作者 范虹 丁峰 +2 位作者 顾勇 朱秋毓 林善锬 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期176-182,共7页

目的 观察体外制备的高级蛋白氧化产物修饰蛋白（AOPP-HSA）对人脐静脉内皮细胞（ECV-304细胞株）的作用.方法 在高压液相色谱仪（HPLC）中将人血清白蛋白（HSA）用次氯酸处理制备AOPP-HSA,观测AOPP-HSA对ECV-304细胞增殖和凋亡,细胞间... 目的 观察体外制备的高级蛋白氧化产物修饰蛋白（AOPP-HSA）对人脐静脉内皮细胞（ECV-304细胞株）的作用.方法 在高压液相色谱仪（HPLC）中将人血清白蛋白（HSA）用次氯酸处理制备AOPP-HSA,观测AOPP-HSA对ECV-304细胞增殖和凋亡,细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和E-选择素（E-selectin）及单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的表达,以及P50、P65和I-кB的mRNA表达含量的影响.结果 （1）AOPP-HSA与ECV-304细胞共同孵育后,可使其增殖指数下降,约为对照组的70%～80%.凋亡试验结果：AOPP-HSA组细胞早期凋亡较对照组升高17%.（2）ECV-304细胞有ICAM-1和MCP-1的基础表达,与AOPP-HSA共同孵育24 h后,两者的表达均有上调,以VitE预先孵育后,其表达量均较相应浓度AOPP-HSA组有明显下降;ECV-304细胞无E-selectin的基础表达,给予AOPP-HSA后也无改变.（3）ECV-304细胞与AOPP-HSA共同孵育后,其P50、P65的mRNA的相对表达含量均显著上调,在VitE干预组,P50、P65的相对表达含量较相应AOPP-HSA组下降.I-кB mRNA的相对表达含量在AOPP-HSA 100～400 μmol/L各组均明显下降,而在AOPP-HSA 600 μmol/L组中,其I-кB的相对表达含量出现显著的升高,给予VitE干预后,I-кB的相对含量也出现明显升高.结论 AOPP-HSA对ECV-304细胞具有多种生物学效应,可抑制增殖、促进凋亡、上调黏附分子和趋化因子的表达.这些作用可能是通过影响NF-кB而产生的.氧化应激参与了这些作用的发生. 展开更多

关键词 高级蛋白氧化产物 内皮细胞ecv-304 氧化应激

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丹参酮ⅡA对高血压病血瘀证患者血清致伤ECV-304细胞活性的影响 被引量：7

3

作者 胡小勤 陈利国 +2 位作者 贾会欣 彭志允 张竞之 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2008年第7期964-966,共3页

目的:观察丹参酮ⅡA对高血压病血瘀证患者血清致伤ECV-304活性的影响。方法:将培养的人脐静脉内皮细胞株ECV-304按空白对照组、血瘀证组、TanⅡA40、20、10、5μg/mL组分组,MTT法检测ECV-304活性。结果:24h和48h血瘀组与空白对照组比较... 目的:观察丹参酮ⅡA对高血压病血瘀证患者血清致伤ECV-304活性的影响。方法:将培养的人脐静脉内皮细胞株ECV-304按空白对照组、血瘀证组、TanⅡA40、20、10、5μg/mL组分组,MTT法检测ECV-304活性。结果:24h和48h血瘀组与空白对照组比较,细胞活性显著降低(P<0.01);24h和48h TanⅡA 10μg/mL组与血瘀组比较,细胞活性显著增强(P<0.05,或P<0.01)。结论:高血压病血瘀证患者血清可以损伤内皮细胞,丹参酮ⅡA对内皮细胞具有保护作用。 展开更多

关键词 丹参酮ⅡA 血瘀证 ecv-304 病证结合

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蒿甲醚对体外培养SGC-7901细胞及ECV-304细胞增殖及细胞周期的影响 被引量：1

4

作者 晁宏图 王熙才 +2 位作者 蒋永新 金丛国 伍治平 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第2期409-411,共3页

目的:观察中药蒿甲醚对体外培养SGC-7901细胞及ECV-304细胞增殖及细胞周期的影响。方法:取对数生长期的SGC-7901细胞配制成5×104mL-1的单细胞悬液,接种于96孔板,培养24h,加入不同浓度(1000.00、500.00、250.00、125.00、62.50、31.... 目的:观察中药蒿甲醚对体外培养SGC-7901细胞及ECV-304细胞增殖及细胞周期的影响。方法:取对数生长期的SGC-7901细胞配制成5×104mL-1的单细胞悬液,接种于96孔板,培养24h,加入不同浓度(1000.00、500.00、250.00、125.00、62.50、31.25mg/L)的蒿甲醚,以生理盐水为空白对照,继续培养48h,采用MTT法测定SGC-7901细胞的生长抑制率和IC50,并以人脐静脉内皮细胞ECV-304作对照。应用流式细胞仪分析500mg/L蒿甲醚作用24、48、60、72、84h后细胞凋亡率和细胞周期变化。结果:随着药物浓度的增加和作用时间的延长,蒿甲醚对SGC-7901和ECV-304细胞的生长抑制作用具有时间和剂量依赖性(P<0.05)。蒿甲醚作用于SGC-7901、ECV-304细胞24、48、72h的IC50分别为(504.74±3.87)、(130.46±3.12)、(83.46±2.92)和>1000、>1000、(384.42±13.74)mg/L,2种细胞间比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。流式细胞术结果显示SGC-7901细胞出现明显的凋亡峰,随着作用时间的延长,其凋亡率逐渐升高(P<0.05),细胞周期S及G2/M期细胞数大量减少,细胞周期阻滞于G0/G1期(P<0.05)。结论:蒿甲醚具有诱导胃腺癌SGC-7901细胞凋亡的作用。 展开更多

关键词 蒿甲醚 SGC-7901细胞 ecv-304细胞 细胞增殖 细胞周期 体外培养

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两种剂型的鱼肝油酸钠对ECV-304细胞系病理作用的对比研究 被引量：4

5

作者 屠军波 兰海龙 +3 位作者 杨壮群 张铁良 宋勇 邢喆 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期491-494,共4页

目的对比研究鱼肝油酸钠的普通剂型和脂质体剂型对ECV-304细胞系的病理作用。方法以ECV-304细胞系为实验对象,分别加入鱼肝油酸钠的普通剂型和脂质体剂型,通过对比形态学(倒置显微镜、Giemsa染色、透射电镜观察)、细胞活性(MTT法)及流... 目的对比研究鱼肝油酸钠的普通剂型和脂质体剂型对ECV-304细胞系的病理作用。方法以ECV-304细胞系为实验对象,分别加入鱼肝油酸钠的普通剂型和脂质体剂型,通过对比形态学(倒置显微镜、Giemsa染色、透射电镜观察)、细胞活性(MTT法)及流式细胞仪检测来探讨不同剂型对ECV-304细胞系作用及其机制。结果普通剂型组出现细胞水肿、线粒体和内质网肿胀、染色质絮状化等坏死性变化;脂质体剂型组中染色质出现了新月状边集,碎裂并向胞膜移动,形成凋亡小体。细胞活性测定显示普通剂型组活细胞数目下降速度快;脂质体剂型组活细胞数目下降速度较慢。脂质体剂型组PI染色后行流式细胞仪检测,结果出现典型亚二倍峰。结论鱼肝油酸钠普通剂型表现为剧烈的毒性作用,呈现坏死性变化;而鱼肝油酸钠脂质体剂型对ECV-304细胞系表现为渐进性的缓释作用,诱导细胞发生凋亡性变化。 展开更多

关键词 鱼肝油酸钠 脂质体 血管瘤 ecv-304细胞系

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CD40L诱导ECV-304细胞VCAM-1表达的分子机制 被引量：1

6

作者 张敏 陆国平 +2 位作者 陈桢月 吴春芳 戚文航 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2004年第10期810-813,共4页

目的 研究人类脐静脉内皮细胞(ECV-304)、CD40/CD40L系统诱导血管细胞黏附分-1(VCAM-1)表达的分子机制。方法 体外培养ECV-304,免疫印迹分析法及TransAMTM系统分别检测CD40L干预前后转染核因子-κB(NF-κB)P65的表达量及活性。阳离子脂... 目的 研究人类脐静脉内皮细胞(ECV-304)、CD40/CD40L系统诱导血管细胞黏附分-1(VCAM-1)表达的分子机制。方法 体外培养ECV-304,免疫印迹分析法及TransAMTM系统分别检测CD40L干预前后转染核因子-κB(NF-κB)P65的表达量及活性。阳离子脂质体介导法短暂转染NF-κB(P65)正反义寡核苷酸(ODN),流式细胞仪检测VCAM-1表达。结果CD40L干预后24 h,VCAM-1的表达显著升高(P<0.05);未干预内皮细胞核内几乎无P65蛋白的表达,CD40L刺激30 min后,P65蛋白表达显著升高(P<0.01);CD40L干预后内皮细胞核抽提物的NF-κB(P65)转录因子活性明显升高。阳离子脂质体转染P65反义ODN至内皮细胞,可以显著抑制 rhsCD40L介导的VCAM-1的表达(P<0.05),转染P65正义ODN则不能抑制rhsCD40L介导的VCAM-1的表达。结论 NF-κB的活化可能部分参与了CD40/CD40L介导VCAM-1表达的信号转导途径。 展开更多

关键词 VCAM-1 表达量 CD40L NF-κB 干预 转染 介导 ecv-304细胞 分子机制 转录因子

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缺氧对ECV-304细胞CASK表达及细胞内分布的影响 被引量：1

7

作者 陈建 梁光萍 +4 位作者 苏踊跃 陈小玲 陈卫 罗向东 杨宗城 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1142-1144,共3页

目的了解缺氧后ECV-304细胞钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶(calcium/calmodulin-dependent serine protein kinase,CASK)蛋白表达及细胞内分布的变化。方法将培养的ECV-304细胞置于缺氧(5%O2)条件培养1、3、6、12h,用Western blot方... 目的了解缺氧后ECV-304细胞钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶(calcium/calmodulin-dependent serine protein kinase,CASK)蛋白表达及细胞内分布的变化。方法将培养的ECV-304细胞置于缺氧(5%O2)条件培养1、3、6、12h,用Western blot方法检测CASK表达的变化,用免疫组化技术观察CASK在细胞内分布情况。结果ECV-304细胞的CASK表达随缺氧时间延长而逐渐增高,3h开始增加,6h达高峰,12h下降但仍高于正常。免疫组织化学染色的结果显示,随着缺氧时间的延长,细胞染色加深、并出现CASK向核膜聚集的现象。结论缺氧可以影响CASK的蛋白表达和细胞内分布,提示CASK可能是一个新的值得关注的缺氧相关蛋白。 展开更多

关键词 缺氧 钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶 ecv-304细胞

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人巨细胞病毒感染对单核细胞和内皮细胞株ECV-304间趋化和黏附的增强作用 被引量：1

8

作者 许从峰 牛玉宏 +6 位作者 陈瑞珍 徐薇 沈燕 陈灏珠 杨英珍 熊思东 葛均波 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第6期542-545,共4页

目的 研究人巨细胞病毒(HCMV)感染对单核细胞及内皮细胞株表达趋化因子的影响,以及对两者之间趋化和黏附的影响。方法 通过ELISA法和半定量RT-PCR的方法,检测CMV感染对单核细胞株(THP-1)及内皮细胞株(ECV-304)几种趋化因子及其受体表达... 目的 研究人巨细胞病毒(HCMV)感染对单核细胞及内皮细胞株表达趋化因子的影响,以及对两者之间趋化和黏附的影响。方法 通过ELISA法和半定量RT-PCR的方法,检测CMV感染对单核细胞株(THP-1)及内皮细胞株(ECV-304)几种趋化因子及其受体表达的改变,同时通过趋化实验和黏附实验研究内皮细胞对单核细胞的趋化和黏附的改变。结果 HCMV感染可刺激ECV-304分泌MCP-1、GROα,在mRNA水平可改变内皮细胞MCP-1、CRO-α和IL-8表达,先下调后上调(IL-8除外);而对单核细胞趋化因子受体CCR2、CXCR2的表达在mRNA水平却有明显的下调作用(P<0.05)。HCMV感染可显著增强内皮细胞对单核细胞的趋化和黏附。结论 HCMV感染可增强内皮细胞对单核细胞的趋化和黏附,参与炎症反应,这可能与CMV上调内皮细胞趋化因子表达有关。 展开更多

关键词 人巨细胞病毒感染 单核细胞 内皮细胞 ecv-304 趋化作用 黏附作用 趋化因子

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低浓度长春花碱对ECV-304细胞迁移及管样结构生成的影响

9

作者 高润霖 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1271-1273,共3页

目的研究在体外培养中低浓度长春花碱(VBL)对ECV-304细胞的迁移及管样结构生成的影响。方法分别用改良的Boyden室迁移测试法和M atrigel上血管新生的短期二维培养模型来评价低剂量VBL对ECV-304细胞迁移及管样结构生成的作用。结果ECV-30... 目的研究在体外培养中低浓度长春花碱(VBL)对ECV-304细胞的迁移及管样结构生成的影响。方法分别用改良的Boyden室迁移测试法和M atrigel上血管新生的短期二维培养模型来评价低剂量VBL对ECV-304细胞迁移及管样结构生成的作用。结果ECV-304细胞经0.1、2.5、5.0和10.0μg/L VBL预处理24 h后,其迁移抑制率分别为39.8%、56.9%、80.5%和97.2%,与对照组比较有显著差异(P<0.01);在M atrigel上形成管样结构数量逐渐减少,结构逐渐破坏,呈剂量依赖关系。结论低浓度VBL能有效抑制ECV-304细胞的迁移及管样结构生成。 展开更多

关键词 长春花碱 ecv-304细胞 血管新生 迁移作用 管样结构生成

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小檗碱通过调节凋亡相关基因的表达抑制金黄色葡萄球菌诱导的ECV-304细胞凋亡 被引量：2

10

作者 裴德翠 熊传银 +1 位作者 毕爱芬 胡汉斌 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2015年第1期35-37,共3页

目的:研究小檗碱在金黄色葡萄球菌(S.aureus)诱导ECV-304细胞内凋亡相关基因Bcl-2、Bax和Caspase-3表达的调节作用,探讨其抑制金黄色葡萄球菌诱导ECV-304细胞凋亡的机制。方法:小檗碱(Berberine,BBR)预处理ECV-304细胞2h后,用1∶100感... 目的:研究小檗碱在金黄色葡萄球菌(S.aureus)诱导ECV-304细胞内凋亡相关基因Bcl-2、Bax和Caspase-3表达的调节作用,探讨其抑制金黄色葡萄球菌诱导ECV-304细胞凋亡的机制。方法:小檗碱(Berberine,BBR)预处理ECV-304细胞2h后,用1∶100感染复数的S.aureus感染细胞,采用半定量RT-PCR及Western-blot法检测金黄色葡萄球菌感染后ECV-304细胞内Bcl-2、Bax和Caspase-3的mRNA及蛋白表达水平。结果:小檗碱预处理ECV-304后再感染S.aureus可显著性增加凋亡相关细胞因子Bcl-2 mRNA水平及蛋白表达量,而Bax和Caspase-3表达下调。结论:小檗碱可以通过调节凋亡相关基因Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达抑制S.aureus诱导的ECV-304细胞凋亡,本实验结果为临床治疗S.aureus感染提供理论依据。 展开更多

关键词 小檗碱 金黄色葡萄球菌 ecv-304 凋亡

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马氏体相变对304不锈钢点蚀发展过程的影响 被引量：13

11

作者 胡钢 许淳淳 张新生 《腐蚀与防护》 CAS 2004年第12期507-509,512,共4页

采用模拟闭塞电池法和交流阻抗法研究了奥氏体304不锈钢形变诱发马氏体相变对点蚀发展过程中化学和电化学行为的影响。结果表明,随着马氏体含量的增加,闭塞区溶液pH值下降得更快,Cl-迁入闭塞区的量更多。马氏体相的存在增强了材料的电... 采用模拟闭塞电池法和交流阻抗法研究了奥氏体304不锈钢形变诱发马氏体相变对点蚀发展过程中化学和电化学行为的影响。结果表明,随着马氏体含量的增加,闭塞区溶液pH值下降得更快,Cl-迁入闭塞区的量更多。马氏体相的存在增强了材料的电化学活性,既减小了点蚀发展过程中钝化膜孔隙内的欧姆电阻,又减小了孔隙内的反应极化电阻,从而促进了点蚀发展。 展开更多

关键词 304不锈钢 马氏体 点蚀 模拟闭塞电池 交流阻抗

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电沉积铅改性304不锈钢双极板在模拟PEMFC环境中的性能 被引量：3

12

作者 钱耀川 谭俊 +1 位作者 石恭臣 胡仲翔 《南京工业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2009年第5期47-51,共5页

为提高304不锈钢双极板的耐腐蚀性能,分别采用直流和脉冲电刷镀铅对其表面改性.采用电化学方法测定了改性前后304不锈钢在模拟PEMFC环境下的极化曲线,在扫描电镜(SEM)下观察了模拟腐蚀后的表面形貌,并用伏安法测量了改性前后304不锈钢... 为提高304不锈钢双极板的耐腐蚀性能,分别采用直流和脉冲电刷镀铅对其表面改性.采用电化学方法测定了改性前后304不锈钢在模拟PEMFC环境下的极化曲线,在扫描电镜(SEM)下观察了模拟腐蚀后的表面形貌,并用伏安法测量了改性前后304不锈钢的接触电阻.在模拟PEMFC环境中,改性后304不锈钢自腐蚀电流密度由10.83μA/cm2下降至6.18μA/cm2.经200 h模拟腐蚀后,304不锈钢表面发生点蚀,而改性不锈钢板表面完整,未观察到明显腐蚀.改性后的接触电阻也有所降低.结果表明,电沉积铅能有效提高304不锈钢在模拟PEMFC环境中的耐腐蚀性能,可望满足PEMFC环境下长期耐腐蚀的要求. 展开更多

关键词 质子交换膜燃料电池(PEMFC) 304不锈钢 金属双极板 电沉积 耐腐蚀性

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尿酸对ECV304细胞的NO-NOS通路及ADMA-DDAH系统的影响 被引量：4

13

作者 邹小秋 苏海 +3 位作者 饶芳 李菊香 王光富 邓志华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期190-191,204,共3页

目的:观察尿酸(uricacid,UA)对ECV304细胞的NO-NOS通路及ADMA-DDAH系统的影响。方法:①浓度依赖性分组:对照组、UA200μmol/L(UA2)组、UA400μmol/L(UA4)组、UA600μmol/L(UA6)组与ECV304细胞共同孵育24h。②时间依赖性:UA6组分别观察1... 目的:观察尿酸(uricacid,UA)对ECV304细胞的NO-NOS通路及ADMA-DDAH系统的影响。方法:①浓度依赖性分组:对照组、UA200μmol/L(UA2)组、UA400μmol/L(UA4)组、UA600μmol/L(UA6)组与ECV304细胞共同孵育24h。②时间依赖性:UA6组分别观察1、3、5、7d。检测培养液NO2-/NO3-浓度、NOS活性、非对称二甲基精氨酸(ADMA)浓度、二甲基精氨酸二甲胺水解酶(DDAH)活性以及SOD活性和AngⅡ浓度,细胞裂解液DDAH表达。结果:①3种浓度UA组NO2-/NO3-明显高于对照组,NOS、DDAH、SOD活性则在UA4、UA6两组明显高于对照组,而ADMA浓度在UA4、UA6两组降低,AngⅡ浓度和DDAH表达则无显著差异。②UA6组各时段NO2-/NO3-浓度和NOS、DDAH、SOD活性均高于相应对照组,而ADMA浓度低于对照组;AngⅡ浓度、DDAH表达则无明显差异。除NOS活性在第7d明显下降外,其余指标在不同时段组没有明显的差异。结论:①短期UA刺激使ECV304细胞分泌NO2-/NO3-增多,且呈浓度依赖,无时间依赖。②UA通过增加DDAH活性、加速ADMA的降解,使NOS活性增加而致NO2-/NO3-生成增多。③尿酸使SOD活性增加而不增加AngⅡ浓度。 展开更多

关键词 尿酸 ECV304细胞 一氧化氮合酶 细胞培养

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nanoLC-ESI/MS/MS在ECV304细胞蛋白质组学研究中的应用 被引量：2

14

作者 李菊玲 曾耀英 +1 位作者 季煜华 杜彬 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期205-208,共4页

目的:应用纳升液联用技术(nanoLC-ESI/MS/MS)对ECV304细胞蛋白质组学进行初步分析。方法:提取ECV304细胞总蛋白,经变性、还原、烷基化和酶解,nanoLC-ESI/MS/MS对酶解后的肽段进行分析,数据库(Swissprot)检索鉴定蛋白质,生物信息学工具... 目的:应用纳升液联用技术(nanoLC-ESI/MS/MS)对ECV304细胞蛋白质组学进行初步分析。方法:提取ECV304细胞总蛋白,经变性、还原、烷基化和酶解,nanoLC-ESI/MS/MS对酶解后的肽段进行分析,数据库(Swissprot)检索鉴定蛋白质,生物信息学工具对所鉴定的蛋白质进行细胞定位和功能分类。结果:从8μg细胞总蛋白中鉴定了120种蛋白质,所鉴定蛋白质的分子质量(MW)范围从6 648 D至280 739 D,MW<20 kD的蛋白质占24.2%,MW>100 kD的蛋白质占5.0%;主要位于细胞质、细胞骨架、细胞核和细胞膜,分别为27.8%、19.0%、15.2%和10.1%;大多为结构蛋白质和催化活性的蛋白质,分别为36.4%和34.1%,具有信号转导活性的占11.4%;其中角蛋白8、18和vimentin等为内皮细胞特异表达的蛋白质。结论:本研究建立了nanoLC-ESI/MS/MS分析ECV304细胞的蛋白质组学方法,为内皮细胞及内皮细胞损伤机制的蛋白质组学研究奠定了实验基础。 展开更多

关键词 nanoLC—ESI/MS/MS技术 ECV304细胞 蛋白质组

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氨法脱硫浆液中304不锈钢闭塞电池模拟锈层的优选 被引量：2

15

作者 余晨月 左杰 +2 位作者 付志浩 连洲洋 魏无际 《腐蚀与防护》 CAS 北大核心 2022年第8期28-31,102,共5页

构建了氨法脱硫浆液中304不锈钢局部腐蚀发展的闭塞电池模型。通过综合闭塞区离子迁移量、溶液pH和内电极腐蚀速率等对模型中模拟锈层的关键因素进行优选,最终确定最优模拟锈层。结果表明:最优模拟锈层是以滤纸为载体,以混氧化铁与硫酸... 构建了氨法脱硫浆液中304不锈钢局部腐蚀发展的闭塞电池模型。通过综合闭塞区离子迁移量、溶液pH和内电极腐蚀速率等对模型中模拟锈层的关键因素进行优选,最终确定最优模拟锈层。结果表明:最优模拟锈层是以滤纸为载体,以混氧化铁与硫酸钙质量比9∶1的混合物为负载物,以0.5%(质量分数)的琼脂溶液为固定成型剂,采用该锈层的闭塞电池模型可较好地模拟局部腐蚀发展过程。 展开更多

关键词 局部腐蚀 闭塞电池 304不锈钢 模拟锈层

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卡维地洛对过氧化氢致血管内皮细胞氧化应激损伤的保护作用 被引量：26

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作者 张健 魏欣冰 +1 位作者 丁华 娄海燕 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期620-624,共5页

目的观察卡维地洛(carved ilol)对过氧化氢(hydrogenperoxide,H2O2)致内皮细胞损伤及表面粘附分子表达的影响。方法采用H2O2作为外源性自由基生成系统,模拟内皮细胞的脂质过氧化损伤,建立离体培养的ECV-304细胞氧化应激损伤模型,观察卡... 目的观察卡维地洛(carved ilol)对过氧化氢(hydrogenperoxide,H2O2)致内皮细胞损伤及表面粘附分子表达的影响。方法采用H2O2作为外源性自由基生成系统,模拟内皮细胞的脂质过氧化损伤,建立离体培养的ECV-304细胞氧化应激损伤模型,观察卡维地洛对H2O2致内皮细胞损伤及表面粘附分子表达的影响。结果卡维地洛各浓度组均明显改善H2O2(1.0×10-6mol.L-1)所致ECV-304细胞形态学损伤,提高细胞生存率,降低LDH释放,并可使细胞内及细胞培养液中MDA含量降低,SOD活性升高,亦可下调ICAM-1蛋白及细胞内ICAM-1mRNA表达水平,上述作用随药物浓度增加呈增强趋势。结论卡维地洛可保护内皮细胞结构和功能的完整性,提高内皮细胞抗氧化能力,并从转录水平抑制脂质过氧化诱导的粘附分子表达增加,降低单核-内皮细胞粘附,有利于减少动脉粥样硬化的始动环节和早期事件的发生。 展开更多

关键词 ecv-304细胞 过氧化氢 氧化应激损伤 细胞间粘附分子-l 卡维地洛

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体外定量测定细胞迁移方法的建立及应用 被引量：22

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作者 梁光波 张国平 +1 位作者 金惠铭 汤大侃 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期175-179,共5页

目的 :在体外细胞划痕损伤模型中建立定量测定ECV - 30 4细胞迁移的方法。方法 :改良了体外细胞划痕损伤模型。用显微电视图像定量处理系统定量测定细胞迁移。在体外细胞划痕损伤模型中观察了肝素 (hep arin)和凝血酶敏感蛋白 - 1(throm... 目的 :在体外细胞划痕损伤模型中建立定量测定ECV - 30 4细胞迁移的方法。方法 :改良了体外细胞划痕损伤模型。用显微电视图像定量处理系统定量测定细胞迁移。在体外细胞划痕损伤模型中观察了肝素 (hep arin)和凝血酶敏感蛋白 - 1(thrombospondin - 1)对ECV - 30 4迁移的影响。结果 :12 0次划痕模型中划痕损伤的平均宽为 (0 95± 0 0 8)mm ,长 (5 1 2 0± 3 4 0 )mm ,迁移细胞可在 4 8h - 72h内完全覆盖划痕区。 2 4h左右细胞迁移达高峰。在体外损伤划痕损伤模型中与对照组比 ,肝素对ECV - 30 4迁移起明显促进作用 ,TSP - 1起明显抑制作用。结论 :建立了一种在体外细胞划痕损伤模型中进行细胞迁移的定量测定方法。用此方法证明 ,肝素能促进ECV - 30 4细胞迁移 ,TSP - 1抑制迁移。 展开更多

关键词 细胞运动 ecv-304细胞 肝素 凝血酶敏感蛋白1

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NDGA对内皮细胞增殖抑制的作用研究 被引量：11

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作者 孙慧勤 陈意生 +2 位作者 史景泉 卞修武 辛榕 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期245-248,共4页

目的 :探讨去甲二氢愈创木酸 (NDGA)对内皮细胞增殖活性的影响及特点。方法 :采用形态学观察、细胞计数、流式细胞仪分析、免疫组织化学等技术方法观测不同浓度NDGA作用下人脐静脉内皮细胞ECV 3 0 4细胞增殖活性的变化。结果 :①不同浓... 目的 :探讨去甲二氢愈创木酸 (NDGA)对内皮细胞增殖活性的影响及特点。方法 :采用形态学观察、细胞计数、流式细胞仪分析、免疫组织化学等技术方法观测不同浓度NDGA作用下人脐静脉内皮细胞ECV 3 0 4细胞增殖活性的变化。结果 :①不同浓度 ( 5 0～ 2 0 0 μmol/L)的NDGA处理ECV 3 0 4细胞 2 4～ 72h后或一定浓度 ( 10 0 μmol/L)的NDGA处理ECV 3 0 4细胞不同时间 ( 1～ 8d)后 ,均出现NDGA抑制细胞增殖的作用 ,且这种作用与NDGA的浓度和作用时间有关。②NDGA处理细胞后出现细胞增殖活性降低 ,主要表现为有丝分裂计数和细胞增殖指数降低 ,细胞的生长抑制率增加 ,细胞生长减慢 ,免疫组化显示PCNA、BrdU标记指数下降等。结论 :NDGA对内皮细胞增殖有明显抑制作用 ,此抑制作用可能是其影响血管生成的主要原因之一。 展开更多

关键词 去甲二氢愈创木酸 血管内皮细胞 细胞增殖

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养阴药物血清对内毒素诱导血管内皮细胞凋亡的影响 被引量：9

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作者 朱平 龚婕宁 +1 位作者 许冬青 杨进 《中医药学刊》 2005年第1期41-42,共2页

目的 :研究养阴药物血清对内毒素诱导的血管内皮细胞凋亡的影响。方法 :用低浓度LPS诱导ECV30 4 凋亡 ,用中药血清与之作用 ,采用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 :养阴药物血清可以明显抑制血管内皮的凋亡。同模型组比较有统计学意义。结... 目的 :研究养阴药物血清对内毒素诱导的血管内皮细胞凋亡的影响。方法 :用低浓度LPS诱导ECV30 4 凋亡 ,用中药血清与之作用 ,采用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 :养阴药物血清可以明显抑制血管内皮的凋亡。同模型组比较有统计学意义。结论 :养阴药物血清可明显拮抗内毒素诱导的血管内皮细胞的凋亡。 展开更多

关键词 血清药理学 内毒素 ECV304 细胞凋亡

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重组质粒pRNAT-U6.1/CFB siRNA的构建、鉴定及其对人脐静脉内皮细胞增生的影响

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作者 仝欢 尚庆丽 +2 位作者 马景学 高建 王鑫 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期686-690,共5页

背景 脉络膜新生血管（CNV）是多种眼部疾病致盲的原因之一,研究发现补体系统在CNV的发病机制中起重要作用.目的 构建针对补体因子B（CFB）的小干扰RNA（siRNA）重组质粒,体外观察其对人脐静脉内皮细胞ECV-304增生的影响.方法 根据人CF... 背景 脉络膜新生血管（CNV）是多种眼部疾病致盲的原因之一,研究发现补体系统在CNV的发病机制中起重要作用.目的 构建针对补体因子B（CFB）的小干扰RNA（siRNA）重组质粒,体外观察其对人脐静脉内皮细胞ECV-304增生的影响.方法 根据人CFB的基因序列设计引物,经PCR扩增后与质粒pRNAT-U6.1连接,得到重组质粒pRNAT-U6.1/CFB siRNA,并进行测序鉴定和PCR鉴定.ECV-304细胞株进行常规培养,用电转染技术将重组质粒或空质粒分别转染人ECV-304细胞株,分为CFB-siRNA转染组和空质粒转染组,未转染的细胞为空白对照组.细胞转染后继续培养48 h,于倒置荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白（GFP）的表达并计算转染效率;采用半定量逆转录PCR（RT-PCR）法测定各组细胞中CFB mRNA的相对表达量;用MTT法检测各组细胞转染24、48和72 h时细胞的增生值（A）并计算生长抑制率;利用流式细胞技术检测各组细胞的生长周期变化.结果 PCR扩增的目的片段序列与CFB基因序列完全相符,ECV-304细胞转染后,倒置荧光显微镜下可见CFB-siRNA转染组和空质粒转染组的细胞中GFP呈绿色荧光.半定量RT-PCR结果显示,CFB-siRNA转染组、空质粒转染组和空白对照组的CFB mRNA相对表达量分别为0.07±0.04、0.14±0.02和0.14 ±0.03,总体比较差异有统计学意义（F=233.05,P=0.00）;其中CFB-siRNA转染组CFB mRNA相对表达量明显低于空质粒转染组和空白对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.MTT法检测结果显示,各组不同时间细胞增生抑制率总体比较差异有统计学意义（F分组=212.99,P=0.00）;CFB-siRNA转染组细胞转染24、48、72 h后细胞增生的抑制率分别为（23.45±0.01）％、（33.48±0.02）％和（45.49±0.01）％,明显高于同时间点空质粒转染组和空白对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.流式细胞仪检测结果显示,CFB-siRNA转染组、空质粒转染组和空白对照组G1期的细胞数占总细胞数的（44.4±0.5）％、（25.8±0.4）％和（27.9±0.6）％,总体比较差异有统计学意义（F=58.98,P=0.00）;CFB-siRNA转染组G1期和G2期细胞所占百分比显著高于空白对照组和空质粒转染组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.结论 重组质粒pRNAT-U6.1/CFB siRNA可通过将细胞阻滞在G1期而有效抑制人脐静脉内皮细胞的增生. 展开更多

关键词 脉络膜新生血管 小干扰RNA 补体因子B 脐静脉内皮细胞 人 ecv-30细胞株

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