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健脾和胃法对食管癌细胞株EC9706移植瘤生长的抑制作用 被引量：20
1
作者 吴耀松 金华彬 +5 位作者 陈玉龙 尹素改 任闪闪 王朋辉 尚艺婉 李晨旭 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2019年第8期1836-1839,共4页
目的:通过观察健脾和胃法及其代表方六君子汤对裸鼠移植瘤的生长和组织中STAT3通路相关因子和蛋白表达的影响,探讨其治疗食管癌的分子机制。方法:用EC9706细胞皮下注射裸鼠制备移植瘤模型,实验分为:正常空白组(C组)、模型组(M组)、六君... 目的:通过观察健脾和胃法及其代表方六君子汤对裸鼠移植瘤的生长和组织中STAT3通路相关因子和蛋白表达的影响,探讨其治疗食管癌的分子机制。方法:用EC9706细胞皮下注射裸鼠制备移植瘤模型,实验分为:正常空白组(C组)、模型组(M组)、六君子汤组(L组)、抑制剂组(S组)、六君子汤加抑制剂组(L+S组),C、M组为空白对照组,灌服生理盐水和腹腔注射生理盐水;L组灌服六君子汤和腹腔注射生理盐水;S组灌服生理盐水和腹腔注射Stattic工作液;L+S组灌服六君子汤水煎液和腹腔注射Stattic工作液。4周后摘除眼球取血和移植瘤,ELISA检测血清中IL-6、VEGF含量;免疫组化检测移植瘤组织中CD34和VEGF表达;Western blot检测移植瘤组织细胞中JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达。结果:与模型组比较,六君子汤组肿瘤体积较小(P<0.05);各组移植瘤重量及组织中CD34表达均下降(P<0.05);血清中抑制剂组IL-6含量明显降低(P<0.05),其它各组没有明显差异;仅六君子汤组和抑制剂组中JAK2和STAT3表达下降(P<0.05),抑制剂组中p-STAT3明显降低(P<0.05),其它各组无明显差异。与抑制剂组比较,六君子汤组中CD34表达略高于抑制剂组(P<0.05),其它各组无明显差异;STAT3蛋白表达中六君子汤组表达降低(P<0.05),而联合抑制剂组则明显升高(P<0.05);p-STAT3表达中,六君子汤组和及其联合制剂组均明显升高(P<0.05)。与六君子汤组比较,除STAT3表达在联合抑制剂组表达有所增高(P<0.05)外,其它各组无明显差异。结论:健脾和胃法及其代表六君子汤可以抑制食管癌EC9706细胞裸鼠移植瘤的生长,可能与下调移植瘤中CD34、JAK2、STAT3的表达有关。 展开更多
关键词 健脾和胃法 六君子汤 食管癌 ec9706细胞株 移植瘤
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Notch1信号途径在食管鳞癌细胞株EC9706的作用研究 被引量：11
2
作者 鲁照明 刘红涛 +2 位作者 许培荣 侯桂琴 薛乐勋 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第13期740-743,共4页
目的:研究Notch1基因在食管癌细胞株中的表达及其对食管鳞癌细胞EC9706凋亡的影响。方法:通过免疫细胞化学检测Notch1基因在EC9706细胞中的表达。通过RT-PCR扩增Notch1基因,构建真核表达载体pcDNA3.1-Notch1,转染EC9706细胞,利用Western... 目的:研究Notch1基因在食管癌细胞株中的表达及其对食管鳞癌细胞EC9706凋亡的影响。方法:通过免疫细胞化学检测Notch1基因在EC9706细胞中的表达。通过RT-PCR扩增Notch1基因,构建真核表达载体pcDNA3.1-Notch1,转染EC9706细胞,利用Western blotting检测转染pcDNA3.1-Notch1载体12h,24h,48h,72h的食管癌细胞株与转染空载体食管癌细胞株中Notch1的表达,并观察每一时期食管癌细胞株的凋亡情况。结果:在食管癌细胞株中Notch1基因低表达,此外,转染Notch1后的细胞株Notch1表达量与转染空载体相比有明显差异(F=80.442,P<0.05)。经组间两两比较,实验组食管癌细胞株的Notch1的表达量在12h时比对照组食管癌细胞株的表达量显著增高(P<0.01),前者约为后者的4.6倍。但48h至72h时Notch1表达量实验组与对照组食管癌细胞株无显著性差异(P>0.05)。进一步通过倒置显微镜发现48h至72h细胞出现大量凋亡的现象。上述结果说明12hNotch1表达量的增加,使食管癌细胞EC9706中的Notch1信号途径得以激活,该途径激活后导致48h到72h时的细胞大量凋亡。结论:Notch1在食管癌细胞中的激活引起细胞大量凋亡,提示Notch1基因有可能成为治疗食管癌的新靶点。 展开更多
关键词 NOTCH1 ec9706 免疫细胞化学 WESTERN BLOTTING
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通幽汤及拆方对食管癌EC9706细胞PI3K/AKT信号通路影响的研究 被引量：14
3
作者 贾永森 吕翠田 +2 位作者 吴范武 杨雨旸 赵舒 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2011年第7期1306-1308,共3页
目的:揭示通幽汤对食管癌抑制作用的细胞内分子机制,确定从功效分类的有效药物及瘀血内结证的分子本质。方法:体外培养食管鳞癌EC9706细胞,通幽汤及活血行气、滋阴养血拆方分别作用于细胞,倒置显微镜观察细胞形态变化;以MTT法检测细胞... 目的:揭示通幽汤对食管癌抑制作用的细胞内分子机制,确定从功效分类的有效药物及瘀血内结证的分子本质。方法:体外培养食管鳞癌EC9706细胞,通幽汤及活血行气、滋阴养血拆方分别作用于细胞,倒置显微镜观察细胞形态变化;以MTT法检测细胞抑制率,确定最佳药物浓度和作用时间;western blot法观察PI3K/AKT信号通路各蛋白表达变化情况。结果:通幽汤及活血行气拆方可显著抑制EC9706细胞增殖,48h作用最强,通幽汤全方IC50=1523μg.mL-1,活血行气拆方IC50=1001μg.mL-1;可抑制PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达,作用强弱依次为:活血行气拆方>通幽汤全方>滋阴养血拆方。结论:通幽汤抑制食管癌细胞增殖主要为活血行气类药物,根据"以方测证"理论,瘀血内结证与PI3K/AKT信号通路表达增强有关。 展开更多
关键词 通幽汤 拆方 食管癌 ec9706细胞 PI3K/AKT 方证
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穿心莲内酯诱导人食管癌Ec9706细胞凋亡机制研究 被引量：14
4
作者 戴桂馥 赵进 +3 位作者 王庆端 毛世杰 夏薇 刘宏民 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期173-176,共4页
目的在前期工作基础上进一步研究穿心莲内酯(an-drographolide,AD)抑制人食营癌Ec9706细胞增殖和诱导凋亡的机制。方法分光光度法分别检测AD处理Ec9706细胞6、12、18h对caspase-3活性的影响以及AD处理Ec9706细胞6h对caspase-8和caspase-... 目的在前期工作基础上进一步研究穿心莲内酯(an-drographolide,AD)抑制人食营癌Ec9706细胞增殖和诱导凋亡的机制。方法分光光度法分别检测AD处理Ec9706细胞6、12、18h对caspase-3活性的影响以及AD处理Ec9706细胞6h对caspase-8和caspase-9活性的影响,并用MTT法比较研究在有或无caspase广谱抑制剂Z-VAD-FMK时AD对Ec9706细胞增殖的影响;免疫组化法分析AD处理Ec9706细胞6h对bcl-2基因表达的影响。结果AD(30、60mg.L-1)下调bcl-2基因的表达(P<0.01),提高Ec9706细胞caspase-3和caspase-9活性,对caspase-8活性无明显影响,caspase广谱抑制剂Z-VAD-FMK减弱AD对Ec9706的细胞毒作用。结论AD通过下调bcl-2,激活caspase-9、caspase-3诱导Ec9706细胞凋亡。 展开更多
关键词 穿心莲内酯 caspase激活 ec9706 BCL-2 凋亡
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PTEN基因表达对EC9706细胞增殖、侵袭、凋亡能力的影响 被引量：13
5
作者 黄丽艳 王娜 +4 位作者 汤黎明 许燕 黄幼田 杨红艳 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第1期16-20,共5页
目的:观察PTEN基因表达水平的变化对食管癌EC9706细胞增殖、侵袭、凋亡能力的影响。方法:构建2个靶向PTEN的siRNA载体及1个PTEN表达载体,分别转染EC9706细胞。实验分沉默1组、沉默2组、siRNA载体对照组、PTEN表达组、表达载体对照组和... 目的:观察PTEN基因表达水平的变化对食管癌EC9706细胞增殖、侵袭、凋亡能力的影响。方法:构建2个靶向PTEN的siRNA载体及1个PTEN表达载体,分别转染EC9706细胞。实验分沉默1组、沉默2组、siRNA载体对照组、PTEN表达组、表达载体对照组和未转染组。RT-PCR、Westernblot法检测转染后各组细胞PTEN基因mRNA和蛋白表达水平。采用CCK-8试验、软琼脂克隆形成实验、流式细胞术和Transwell试验分别检测各组细胞增殖、克隆形成能力、细胞凋亡率及侵袭能力。结果:与未转染组比较,沉默1组、沉默2组PTENmRNA和蛋白表达量均降低,PTEN表达组PTENmRNA相对表达量升高(F=25.762,P<0.001);与未转染组比较,PTEN表达组细胞软琼脂克隆形成数和穿透细胞数均降低,细胞凋亡率增加(F=50.752、29.981、32.193,P均<0.001)。结论:上调PTEN的表达水平可以有效抑制EC9706细胞的增殖、克隆形成和侵袭转移能力,同时促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 PTEN ec9706 细胞增殖 细胞侵袭 凋亡 食管癌
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EC9706和Eca109细胞中雷帕霉素靶蛋白信号通路激活状态观察 被引量：11
6
作者 侯桂琴 范天黎 +4 位作者 鲁照明 刘兰琦 许培荣 薛乐勋 王建人 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第2期223-225,共3页
目的:观察低分化的食管鳞癌细胞EC9706和高分化的食管鳞癌细胞Eca109中雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号转导通路的激活状态。方法:采用细胞免疫组织化学方法检测EC9706和Eca109细胞中mTOR及其下游靶分子p70S6K的表达和定位,并采用RT-PCR和West... 目的:观察低分化的食管鳞癌细胞EC9706和高分化的食管鳞癌细胞Eca109中雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号转导通路的激活状态。方法:采用细胞免疫组织化学方法检测EC9706和Eca109细胞中mTOR及其下游靶分子p70S6K的表达和定位,并采用RT-PCR和Westernblot方法分别从mRNA及蛋白水平检测此通路的活性。结果:在2种细胞中mTOR均有表达,且在EC9706细胞中的表达水平高于Eca109(P<0.05);EC9706细胞中mTOR下游靶点的磷酸化水平高于Eca109细胞(P<0.05)。结论:在2种食管鳞癌细胞中,mTOR信号通路均特异性激活;但激活状态与细胞的分化程度有关,细胞分化程度低者通路的激活水平较高。 展开更多
关键词 食管癌 雷帕霉素靶蛋白 p70S6激酶 ec9706细胞 ECA109细胞
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六君子汤对食管癌细胞株EC9706致血管生成的影响 被引量：9
7
作者 周凌 尹素改 +2 位作者 吴耀松 王慧慧 陈玉龙 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1165-1169,共5页
目的研究六君子汤对食管癌血管生成的影响。方法 MTT法检测六君子汤醇提物对食管癌细胞株EC9706生长抑制作用,收集其500μg/m L质量浓度的EC9706细胞条件培养基用于鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成、人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和小管形成的... 目的研究六君子汤对食管癌血管生成的影响。方法 MTT法检测六君子汤醇提物对食管癌细胞株EC9706生长抑制作用,收集其500μg/m L质量浓度的EC9706细胞条件培养基用于鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成、人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和小管形成的观察。ELISA法检测EC9706细胞和人脐静脉内皮细胞培养基上清中VEGF和IL-6含有量。结果六君子汤醇提物可明显抑制EC9706细胞增殖,具一定剂量依赖性,其IC50值为505.28μg/m L。六君子汤醇提物可减少EC9706细胞条件培养基所致鸡胚绒毛尿囊膜血管生成、人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和小管形成。六君子汤醇提物可减少EC9706细胞和内皮细胞IL-6及内皮细胞VEGF分泌。结论六君子汤醇提物可能通过干预EC9706细胞信号通路从而抑制血管生成的效应。 展开更多
关键词 六君子汤 食管癌细胞株ec9706 人脐静脉内皮细胞 鸡胚绒毛尿囊膜 血管生成 VEGF IL-6
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藤梨根提取物与奥沙利铂在诱导人食管癌细胞Ec9706细胞凋亡中的协同作用 被引量：9
8
作者 党辉 关徐涛 +3 位作者 宋锐 王冰 王涛 高萍 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2017年第2期286-289,共4页
目的:观察藤梨根提取物与第三代铂类奥沙利铂(L-OHP)对人食管癌Ec9706细胞株增殖的影响。方法:分别应用藤梨根正丁醇提取物与L-OHP单独应用以及联合应用于人食管癌Ec9706细胞株,并应用MTT法检测食管癌Ec9706细胞的抑制率,并且应用显微... 目的:观察藤梨根提取物与第三代铂类奥沙利铂(L-OHP)对人食管癌Ec9706细胞株增殖的影响。方法:分别应用藤梨根正丁醇提取物与L-OHP单独应用以及联合应用于人食管癌Ec9706细胞株,并应用MTT法检测食管癌Ec9706细胞的抑制率,并且应用显微镜在镜下观察食管癌细胞株的形态变化;并且对细胞的凋亡率和细胞周期使用流式技术进行检测,且对食管癌细胞Ec9706株应用免疫细胞化学技术检测中细胞株内Bcl-2和Survivin蛋白的表达水平。结果:藤梨根提取物单用、奥沙利铂单用、以及联合应用均可对食管癌细胞Ec9706的增殖起到抑制作用。通过显微镜下观察食管癌细胞株发现Ec9706细胞的形态发生了改变,并且凋亡比率也显著增加;且藤梨根提取物与L-OHP连用后能起到协同增效的作用。而应用藤梨根提取物后食管癌细胞Ec9706中Bcl-2和Survivin蛋白的表达水平均受到了抑制。连用L-OHP后两种蛋白的阳性率表达均进一步降低。结论:藤梨根正丁醇提取物能显著抑制人食管癌细胞Ec9706细胞的增殖并且与L-OHP联用可有协同增效的作用,抑制作用明显增强,可能机制与Bcl-2和Survivin蛋白的下调有关。 展开更多
关键词 藤梨根提取物 奥沙利铂 食管癌细胞ec9706细胞 BCL-2
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冬凌草甲素对EC9706细胞增殖、凋亡的影响 被引量：21
9
作者 刘俊保 岳静宇 唐引引 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2014年第1期8-11,共4页
目的:观察冬凌草甲素对食管鳞状细胞癌EC9706细胞增殖、凋亡的影响。方法:用MTT法检测冬凌草甲素对EC9706细胞生长的抑制作用;采用流式细胞仪技术检测冬凌草甲素对EC9706细胞周期和细胞凋亡的影响,并计算凋亡率;激光共聚焦显微镜观察不... 目的:观察冬凌草甲素对食管鳞状细胞癌EC9706细胞增殖、凋亡的影响。方法:用MTT法检测冬凌草甲素对EC9706细胞生长的抑制作用;采用流式细胞仪技术检测冬凌草甲素对EC9706细胞周期和细胞凋亡的影响,并计算凋亡率;激光共聚焦显微镜观察不同浓度冬凌草甲素作用后EC9706细胞中游离Ca2+荧光强度的变化。结果:MTT法显示冬凌草甲素作用EC9706细胞株后,抑制率随浓度增高而增高(F=370.600,P<0.001);流式细胞仪检测结果显示,冬凌草甲素作用EC9706细胞48 h后,G1/G0期细胞均显著增多(F=24.200,P<0.001);细胞凋亡结果显示,冬凌草甲素均能明显诱导EC9706细胞凋亡(P<0.05),冬凌草甲素40μmol/L组的作用效果最佳(F=10.214、37.820,P<0.001)。不同浓度冬凌草甲素均升高了EC9706细胞内游离Ca2+荧光强度(F=24.400,P<0.001)。结论:冬凌草甲素可抑制EC9706细胞增殖、促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 食管鳞状细胞癌 ec9706 增殖 凋亡 ec9706
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组织蛋白酶B特异性siRNA对食管癌EC9706细胞组织蛋白酶B基因表达的影响 被引量：7
10
作者 娄欣 张红 +6 位作者 曹学全 孙淼淼 高冬玲 张岚 宋一民 李冰 陈奎生 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第1期14-17,共4页
目的:探讨小分子干扰RNA(siRNA)对食管癌EC9706细胞组织蛋白酶B(CB)基因表达的影响。方法:设计并用体外转录方法合成针对CB基因的siRNA,转染EC9706细胞(设10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L3个转染浓度),分别培养24h、48h、72h(实验组),... 目的:探讨小分子干扰RNA(siRNA)对食管癌EC9706细胞组织蛋白酶B(CB)基因表达的影响。方法:设计并用体外转录方法合成针对CB基因的siRNA,转染EC9706细胞(设10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L3个转染浓度),分别培养24h、48h、72h(实验组),采用免疫细胞化学及原位杂交方法检测转染细胞中CB蛋白和mRNA表达的变化,并设正常对照、空白对照、无关对照。结果:不同浓度siRNA转染24h、48h、72hEC9706细胞CB蛋白表达量均较正常、空白及无关对照降低(P<0.05),以转染72h的抑制效应最为明显,但3者相比差异无统计学意义(P>0.05)。3个时间段内随浓度增加siRNA抑制效应增强,3者相比差异有统计学意义(P<0.05),正常对照、空白对照、无关对照均未表现出对CB蛋白表达的抑制效应。转染siRNA后部分细胞形态发生改变。结论:特异性siRNA能有效抑制EC9706细胞中CB蛋白和mRNA表达。 展开更多
关键词 食管肿瘤 癌 组织蛋白酶B ec9706细胞 小分子干扰RNA
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RNA干扰对EC9706细胞mTOR表达及细胞生长与凋亡的影响 被引量：7
11
作者 张威 陈玉 +1 位作者 亚国伟 陈奎生 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第1期11-15,共5页
目的:探讨RNA干扰技术对人食管癌EC9706细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达及细胞生长与凋亡的影响。方法:设计合成mTORsiRNA,采用低、中、高浓度(50、100与150nmol/L)的mTORsiRNA分别转染EC9706细胞24、48与72h,同时设无义对照组... 目的:探讨RNA干扰技术对人食管癌EC9706细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达及细胞生长与凋亡的影响。方法:设计合成mTORsiRNA,采用低、中、高浓度(50、100与150nmol/L)的mTORsiRNA分别转染EC9706细胞24、48与72h,同时设无义对照组(转染无义对照siRNA)、空白对照组(转染空脂质体)及正常对照组(不转染)。采用免疫细胞化学与原位杂交法分别检测各组EC9706细胞中mTOR蛋白与mRNA的表达;应用MTT法检测细胞增殖,计算细胞生长抑制率;应用TUNEL法检测转染24h时细胞凋亡,计算凋亡指数(AI)。结果:转染24、48与72h,6组细胞mTOR蛋白和mRNA的表达差异均有统计学意义(mTOR蛋白:F=24.14,45.78,59.19,P均<0.001;mTORmRNA:F=41.42,69.74,43.71,P均<0.001),细胞生长抑制率差异亦有统计学意义(F=143.85,172.98,155.01,P均<0.001);低、中、高浓度组转染不同时间点间比较,mTOR蛋白(F=42.23,29.46,50.22,P均<0.001)、mTORmRNA(F=6.48,8.50,4.80,P均<0.05)及细胞生长抑制率(F=78.77,76.14,52.28,P均<0.001)差异均有统计学意义。mTORsiRNA转染组EC9706细胞mTOR蛋白与mRNA的表达均低于各对照组,且mTOR蛋白及mRNA的表达随mTORsiRNA浓度的增加及转染时间的延长而减弱(P<0.05)。不同浓度mTORsiRNA转染组EC9706细胞生长抑制率均高于各对照组,且细胞生长抑制率随mTORsiRNA浓度的增加和转染时间的延长而升高(P<0.05)。转染24h,6组细胞AI相比,差异有统计学意义(F=442.96,P<0.001),mTORsiRNA转染组AI均高于各对照组,且高浓度转染组AI高(P<0.05)。结论:mTORsiRNA可有效抑制EC9706细胞mTOR蛋白与mRNA的表达,且能抑制EC9706细胞的增殖并促进其凋亡。 展开更多
关键词 食管肿瘤 癌 ec9706细胞 MTOR RNA干扰 增殖 凋亡
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启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤对人食管癌EC9706细胞Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导的影响 被引量：13
12
作者 吕翠田 司富春 陈玉龙 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2016年第7期1455-1458,I0001,共5页
目的:研究启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤对人食管癌EC9706细胞增殖影响,并从Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导通路探讨三方作用机制。方法:体外培养食管鳞癌细胞株EC9706细胞,分别加入启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤提取液培养处理细胞,通过... 目的:研究启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤对人食管癌EC9706细胞增殖影响,并从Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导通路探讨三方作用机制。方法:体外培养食管鳞癌细胞株EC9706细胞,分别加入启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤提取液培养处理细胞,通过MTT染色观察细胞增殖变化,通过Western blot法检测Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导通路蛋白表达。结果:启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤的IC50值分别是1462、1232、2875μg/m L,均可促进Caspase-3蛋白表达而诱导细胞凋亡,而Cyt.C蛋白表达较弱;启膈散和沙参麦冬汤对FADD、Fas、TNFR1和DR5蛋白表达有不同程度地影响。结论:三方可通过激活Caspase-3诱导细胞凋亡,其中启膈散主要通过非依赖FADD死亡受体途径,沙参麦冬汤主要通过依赖FADD死亡受体途径,通幽汤可能通过其他凋亡蛋白参与的上游信号途径而激活Caspase-3致细胞凋亡。 展开更多
关键词 食管癌 ec9706细胞 细胞凋亡信号转导 启膈散 沙参麦冬汤 通幽汤
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肝素酶特异性RNAi对人食管癌EC9706细胞肝素酶基因表达的影响 被引量：5
13
作者 李文才 孙淼淼 +6 位作者 张红 曹学全 娄欣 高冬玲 张岚 宋一民 陈奎生 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第1期9-11,共3页
目的:探讨RNAi技术对人食管癌EC9706细胞肝素酶(heparanase,Hpa)基因表达的影响。方法:针对Hpa不同基因位点设计合成寡核苷酸,然后转录为小分子干扰RNA(siRNA),分别用浓度为10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L的siRNA经LipofectamineTM200... 目的:探讨RNAi技术对人食管癌EC9706细胞肝素酶(heparanase,Hpa)基因表达的影响。方法:针对Hpa不同基因位点设计合成寡核苷酸,然后转录为小分子干扰RNA(siRNA),分别用浓度为10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L的siRNA经LipofectamineTM2000脂质体介导转染EC9706细胞72h,同时设无关序列组及不转染组。采用完整细胞原位杂交技术观察各组EC9706细胞中Hpa基因的表达。结果:siRNA可有效抑制人食管癌EC9706细胞Hpa基因的表达,以15μmol/L的siRNA作用效应最强,但不同浓度siRNA两两相比,差异均无统计学意义(P>0.05),不同浓度siRNA对Hpa基因表达的抑制效应均显著强于无关序列组及不转染组(P<0.05)。结论:RNAi技术可有效抑制人食管癌EC9706细胞Hpa基因的表达。 展开更多
关键词 肝素酶 食管肿瘤 癌细胞 RNAI ec9706细胞系
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维生素D_3对EC9706细胞增殖、裸鼠移植瘤生长及NDRG1蛋白表达的影响 被引量：5
14
作者 贺付成 张岚 +3 位作者 高冬玲 李惠翔 陈奎生 张云汉 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第1期42-45,共4页
目的:观察1,25-(OH)2维生素D3对食管癌EC9706细胞细胞增殖、细胞周期、食管癌细胞裸鼠移植瘤生长及对NDRG1蛋白表达的影响。方法:采用0.3μmol/L的1,25-(OH)2维生素D3作用于EC9706细胞后,MTT法检测肿瘤细胞的增殖情况,流式细胞仪检测细... 目的:观察1,25-(OH)2维生素D3对食管癌EC9706细胞细胞增殖、细胞周期、食管癌细胞裸鼠移植瘤生长及对NDRG1蛋白表达的影响。方法:采用0.3μmol/L的1,25-(OH)2维生素D3作用于EC9706细胞后,MTT法检测肿瘤细胞的增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期的变化。BALB/c小鼠荷瘤后,用5μg/kg1,25-(OH)2维生素D3溶液皮下注射于移植瘤周围,观察移植瘤生长情况,并采用免疫组织化学方法检测裸鼠移植瘤组织中NDRG1蛋白表达水平。实验中均以未经1,25-(OH)2维生素D3处理作为对照组。结果:①MTT实验结果显示,1,25-(OH)2维生素D3作用1～5d时各组吸光度均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);随着1,25-(OH)2维生素D3作用时间的延长,细胞增殖抑制率逐渐升高(1d:7.4%,3d:21.1%,5d:23.8%)。②细胞周期检测结果显示,不同培养时间组G1期细胞分别与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。③与对照组相比,1,25-(OH)2维生素D3可上调NDRG1蛋白表达水平。结论:1,25-(OH)2维生素D3可抑制食管癌细胞增殖,并通过上调NDRG1的表达而抑制食管癌裸鼠移植瘤的生长。 展开更多
关键词 1 25-(OH)2维生素D3 NDRG1 ec9706细胞 裸鼠
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雷帕霉素抑制mTOR信号通路对EC9706细胞生长及凋亡的影响 被引量：7
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作者 王琼叶 侯桂琴 +1 位作者 王莉莉 薛乐勋 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第3期356-359,共4页
目的:检测食管鳞状细胞癌组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的活性及雷帕霉素(rapa)对食管鳞状细胞癌细胞系EC9706细胞生长及凋亡的影响。方法:采用免疫组织化学SP法检测50例食管鳞状细胞癌组织及15例正常食管组织中mTOR蛋白的表达。... 目的:检测食管鳞状细胞癌组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的活性及雷帕霉素(rapa)对食管鳞状细胞癌细胞系EC9706细胞生长及凋亡的影响。方法:采用免疫组织化学SP法检测50例食管鳞状细胞癌组织及15例正常食管组织中mTOR蛋白的表达。分别用不同浓度(20、50和100nmol/L)的rapa处理食管鳞状细胞癌EC9706细胞系,以未处理组作为阴性对照,采用流式细胞术测定细胞周期和凋亡率。结果:食管鳞状细胞癌组织中mTOR蛋白的阳性表达率为64.0%(32/50),高于正常组织的13.3%(2/15)(χ2=11.873,P=0.001)。与对照组比较,rapa可使细胞停滞于G0/G1期(F=102.609,P=0.001),且明显促进细胞凋亡(F=916.882,P=0.001)。结论:mTOR信号通路在食管鳞状细胞癌中被显著激活,rapa能抑制食管鳞状细胞癌细胞生长并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 雷帕霉素 ec9706
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去甲斑蝥素诱导人食管癌Ec9706细胞凋亡及其可能的机制 被引量：6
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作者 刘亮 李慧 左连富 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期419-422,共4页
目的:研究去甲斑蝥素对人食管鳞癌Ec9706细胞的致凋亡作用及其可能的作用机制,为去甲斑蝥素应用于临床抗癌治疗提供实验依据。方法:不同质量浓度去甲斑蝥素(0、5、10、20、40μg/ml)分别作用Ec9706细胞不同时间(12、24和48 h)后,MTT方... 目的:研究去甲斑蝥素对人食管鳞癌Ec9706细胞的致凋亡作用及其可能的作用机制,为去甲斑蝥素应用于临床抗癌治疗提供实验依据。方法:不同质量浓度去甲斑蝥素(0、5、10、20、40μg/ml)分别作用Ec9706细胞不同时间(12、24和48 h)后,MTT方法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡及Caspase-3和Survivin蛋白表达的变化。结果:去甲斑蝥素作用后Ec9706细胞呈现不同程度的增殖抑制,而且细胞增殖抑制程度随作用剂量及时间增加不断增强,40μg/ml去甲斑蝥素作用48 h时,Ec9706细胞增殖抑制率达(80.00±2.15)%。去甲斑蝥素显著诱导Ec9706细胞凋亡,其20μg/ml作用48 h时,Ec9706细胞的凋亡率达(38.57±1.76)%。去甲斑蝥素作用后,Ec9706细胞中Caspase-3蛋白水平显著增高,而Survivin蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论:去甲斑蝥素明显诱导食管癌Ec9706细胞凋亡,其作用机制可能与下调细胞Survivin蛋白及上调Caspase-3蛋白表达有关。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 ec9706细胞 去甲斑蝥素 细胞凋亡
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不同基因位点的人端粒酶RNA反义寡核苷酸对食管癌EC9706细胞增殖及端粒酶活性的影响 被引量：3
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作者 张蕾 耿丽 +2 位作者 张云汉 温洪涛 张岚 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第3期406-409,共4页
目的:探讨封闭人端粒酶RNA不同基因位点的硫代修饰性反义寡核苷酸(ASODN)对食管癌细胞增殖及端粒酶活性的影响。方法:采用阳离子脂质体介导的方法,将不同浓度(0μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L和30μmol/L)的5条ASODN(ASODN1、... 目的:探讨封闭人端粒酶RNA不同基因位点的硫代修饰性反义寡核苷酸(ASODN)对食管癌细胞增殖及端粒酶活性的影响。方法:采用阳离子脂质体介导的方法,将不同浓度(0μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L和30μmol/L)的5条ASODN(ASODN1、ASODN2、ASODN3、ASODN4和ASODN5)和无关序列寡核苷酸(N -ODN)分别导入食管癌EC9706细胞中,应用MTT法及端粒酶活性的定性及定量检测法,测定ASODN对食管癌EC9706细胞增殖及端粒酶活性的抑制作用。结果:5条ASODN和1条N ODN按照N ODN、ASODN4、ASODN5、ASODN2、ASODN1和ASODN3的顺序,对细胞增殖及端粒酶活性的抑制作用逐渐增高(P<0.05)。结论:封闭hTR功能区的反义寡核苷酸可有效抑制食管癌细胞增殖及端粒酶活性。 展开更多
关键词 食管肿瘤 癌 ec9706细胞 反义寡核苷酸 端粒酶
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组织蛋白酶B特异性siRNA对人食管癌EC9706细胞体外侵袭力的抑制作用 被引量：3
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作者 张红 娄欣 +6 位作者 曹学全 孙淼淼 高冬玲 张岚 宋一民 李冰 陈奎生 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第1期17-19,共3页
目的:探讨组织蛋白酶B(CB)特异性siRNA对人食管癌EC9706细胞体外侵袭力的抑制作用。方法:将体外转录合成的针对CB的特异性siRNA设10μmol/L、15μmol/L和20μmol/L3个不同剂量转染人食管癌EC9706细胞,用Boydenchamber体外侵袭实验检测... 目的:探讨组织蛋白酶B(CB)特异性siRNA对人食管癌EC9706细胞体外侵袭力的抑制作用。方法:将体外转录合成的针对CB的特异性siRNA设10μmol/L、15μmol/L和20μmol/L3个不同剂量转染人食管癌EC9706细胞,用Boydenchamber体外侵袭实验检测转染前后细胞体外侵袭力的变化。对照组设无关siRNA转染组、空白对照组(转染空脂质体)及正常对照组(不进行任何操作)。结果:和正常对照组相比,特异性siRNA15μmol/L组和20μmol/L组穿越Matrigel胶的细胞数明显减少(P<0.05),而10μmol/L特异性siRNA组、空白对照组和无关siRNA转染组与正常对照组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:特异性CBsiRNA能有效抑制人食管癌EC9706细胞的体外侵袭力。 展开更多
关键词 siRNA 组织蛋白酶B ec9706细胞 转染 侵袭力
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肝素酶反义寡核苷酸转染的人食管癌EC9706细胞中肝素酶mRNA的表达 被引量：3
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作者 陈奎生 张岚 +4 位作者 唐琳 张云汉 高冬玲 阎亮 张蕾 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2004年第2期181-183,共3页
目的:探讨肝素酶反义寡核苷营酸对肝毒酶mRNA表达的影响。方法:食管癌EC9706细胞分6组培养,5组分别用设计合成的4条封闭肝素酶不同基因位点的反义寡核苷酸(ASODN1、ASODN2、ASODN3、ASODN4)及1条无关寡核苷酸(N-ODN)转染,另1组不转染。... 目的:探讨肝素酶反义寡核苷营酸对肝毒酶mRNA表达的影响。方法:食管癌EC9706细胞分6组培养,5组分别用设计合成的4条封闭肝素酶不同基因位点的反义寡核苷酸(ASODN1、ASODN2、ASODN3、ASODN4)及1条无关寡核苷酸(N-ODN)转染,另1组不转染。采用完整细胞原位杂交技术观察各组EC9706细胞中肝素酶mR-NA表达情况。结果:4条肝素酶反义寡核苷酸转染的EC9706细胞中肝素酶mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05),但均显著低于无关寡核苷酸组(P<0.05)。结论:肝素酶反义寡核苷酸序列可抑制食管癌EC9706细胞中肝素酶mRNA表达。 展开更多
关键词 肝素酶 食管肿瘤 癌 ec9706细胞系 反义寡核苷酸
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全反式维甲酸对EC9706细胞体外增殖抑制及诱导凋亡作用 被引量：3
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作者 路太英 杨成梁 +5 位作者 王留兴 王瑞林 陆士新 高冬玲 张岚 樊青霞 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2008年第6期1090-1094,共5页
目的:观察全反式维甲酸(ATRA)对食管癌细胞体外增殖抑制及诱导凋亡的作用。方法:应用不同浓度(1×10-6、1×10-5、5×10-5mol/L)ATRA体外处理人食管癌细胞EC9706(ATRA1、ATRA2、ATRA3组),并设不加ATRA的对照组,倒置显微镜... 目的:观察全反式维甲酸(ATRA)对食管癌细胞体外增殖抑制及诱导凋亡的作用。方法:应用不同浓度(1×10-6、1×10-5、5×10-5mol/L)ATRA体外处理人食管癌细胞EC9706(ATRA1、ATRA2、ATRA3组),并设不加ATRA的对照组,倒置显微镜下观察细胞的生长状态,HE染色后光镜下观察细胞结构的改变,应用MTT法测定细胞生长抑制率,免疫组织化学技术检测凋亡相关蛋白Bax及Bcl-2的表达情况。结果:经ATRA处理后,ATRA3组与对照组比较,细胞生长速度减慢,群体倍增时间延长(P均<0.05);光镜下可见细胞形态趋向良性分化,细胞质内成熟细胞器增多,生长抑制率增加(P<0.05)。与对照组比较,3个ATRA组细胞Bax蛋白表达增加、Bcl-2蛋白表达下降(P<0.01),且以ATRA2、ATRA3组为明显(P<0.05)。结论:ATRA能有效抑制EC9706细胞增殖,其机制与Bax及Bcl-2蛋白表达调控有关。 展开更多
关键词 食管肿瘤 全反式维甲酸 细胞凋亡 细胞生长抑制率 ec9706细胞 体外
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