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甘蔗黄叶病毒与花叶病毒CP基因RNAi载体构建与转化甘蔗研究
被引量:
9
1
作者
陈利平
陈平华
+6 位作者
陈忠伟
王恒波
许莉萍
刘迪
高三基
郭晋隆
陈如凯
《热带作物学报》
CSCD
北大核心
2016年第1期99-106,共8页
甘蔗黄叶病和甘蔗花叶病是我国甘蔗最主要的病毒病,感病品种产量下降和品质变劣,传统方法难以防治。RNA干扰技术使培育抗病毒甘蔗品种成为可能。本研究根据甘蔗黄叶病毒和侵染甘蔗的高粱花叶病毒结构与功能特性,广泛收集不同来源病毒分...
甘蔗黄叶病和甘蔗花叶病是我国甘蔗最主要的病毒病,感病品种产量下降和品质变劣,传统方法难以防治。RNA干扰技术使培育抗病毒甘蔗品种成为可能。本研究根据甘蔗黄叶病毒和侵染甘蔗的高粱花叶病毒结构与功能特性,广泛收集不同来源病毒分离物CP基因序列,经过比对选取保守序列作为干扰序列。通过在序列两端添加酶切位点,合成并连接成双价甘蔗黄叶病和花叶病毒干扰序列,然后构建到中间载体p HANNIBAL上,形成双价RNAi干扰结构,最后插入到p ART27上形成干扰表达载体。利用基因枪轰击甘蔗品种福农15号愈伤组织进行转化,经G418筛选获得抗性再生植株。通过提取DNA和RNA分析,证实双价RNAi干扰结构不仅以不同拷贝整合到甘蔗基因组中,而且得到了转录表达。
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关键词
甘蔗黄叶病毒
甘蔗花叶病毒
CP基因
双价RNAi表达载体构建
遗传转化
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职称材料
水稻植酸酶基因OsPHY2启动子的克隆及生物信息学分析
2
作者
杜小明
李瑞娟
+4 位作者
路文静
李小娟
郭程谨
谷俊涛
肖凯
《河北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期10-15,29,共7页
水稻种子萌发后,新生器官分化和生长所需磷素主要来自于植酸酶对种子中贮存植酸及其盐类的降解。针对水稻植酸酶基因OsPHY2在萌发种子中优势表达、但其转录调控机制尚不明确的现状,本研究克隆了该基因的启动子。利用生物信息学工具对该...
水稻种子萌发后,新生器官分化和生长所需磷素主要来自于植酸酶对种子中贮存植酸及其盐类的降解。针对水稻植酸酶基因OsPHY2在萌发种子中优势表达、但其转录调控机制尚不明确的现状,本研究克隆了该基因的启动子。利用生物信息学工具对该启动子中含有的顺式调控元件分析表明,该启动子中除含有RNA聚合酶结合的重要保守元件TATA盒和调控转录效率的保守元件CAAT盒外,还含有调控OsPHY2呈组织特异表达、参与碳代谢和应答光照等环境信号的调控元件。利用DNA重组技术,构建了OsPHY2启动子不同长度片段驱动报告基因GUS表达的系列双元表达载体。本试验为鉴定OsPHY2启动子中含有的重要调控元件及其在启动子中的精细定位,进而阐明水稻植酸酶基因OsPHY2的转录调控机制奠定了基础。
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关键词
水稻(Oryza
SATIVA
L.)
OsPHY2启动子
克隆
调控元件
表达载体构建
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职称材料
题名
甘蔗黄叶病毒与花叶病毒CP基因RNAi载体构建与转化甘蔗研究
被引量:
9
1
作者
陈利平
陈平华
陈忠伟
王恒波
许莉萍
刘迪
高三基
郭晋隆
陈如凯
机构
福建农林大学农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室国家甘蔗工程技术中心农业部甘蔗及制品质检中心转基因检测室
出处
《热带作物学报》
CSCD
北大核心
2016年第1期99-106,共8页
基金
国家自然科学基金项目(No.31070330)
福建省自然科学基金(No.2014J01092)
文摘
甘蔗黄叶病和甘蔗花叶病是我国甘蔗最主要的病毒病,感病品种产量下降和品质变劣,传统方法难以防治。RNA干扰技术使培育抗病毒甘蔗品种成为可能。本研究根据甘蔗黄叶病毒和侵染甘蔗的高粱花叶病毒结构与功能特性,广泛收集不同来源病毒分离物CP基因序列,经过比对选取保守序列作为干扰序列。通过在序列两端添加酶切位点,合成并连接成双价甘蔗黄叶病和花叶病毒干扰序列,然后构建到中间载体p HANNIBAL上,形成双价RNAi干扰结构,最后插入到p ART27上形成干扰表达载体。利用基因枪轰击甘蔗品种福农15号愈伤组织进行转化,经G418筛选获得抗性再生植株。通过提取DNA和RNA分析,证实双价RNAi干扰结构不仅以不同拷贝整合到甘蔗基因组中,而且得到了转录表达。
关键词
甘蔗黄叶病毒
甘蔗花叶病毒
CP基因
双价RNAi表达载体构建
遗传转化
Keywords
SCYLV
SCMV
CP gene
construction of binary ihprna expression vector
Genetic transformation
分类号
S566.1 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
水稻植酸酶基因OsPHY2启动子的克隆及生物信息学分析
2
作者
杜小明
李瑞娟
路文静
李小娟
郭程谨
谷俊涛
肖凯
机构
河北农业大学生命科学学院
河北农业大学农学院
出处
《河北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期10-15,29,共7页
基金
国家自然科学基金(No.30871466)
河北省作物生长发育调控重点实验室资助
文摘
水稻种子萌发后,新生器官分化和生长所需磷素主要来自于植酸酶对种子中贮存植酸及其盐类的降解。针对水稻植酸酶基因OsPHY2在萌发种子中优势表达、但其转录调控机制尚不明确的现状,本研究克隆了该基因的启动子。利用生物信息学工具对该启动子中含有的顺式调控元件分析表明,该启动子中除含有RNA聚合酶结合的重要保守元件TATA盒和调控转录效率的保守元件CAAT盒外,还含有调控OsPHY2呈组织特异表达、参与碳代谢和应答光照等环境信号的调控元件。利用DNA重组技术,构建了OsPHY2启动子不同长度片段驱动报告基因GUS表达的系列双元表达载体。本试验为鉴定OsPHY2启动子中含有的重要调控元件及其在启动子中的精细定位,进而阐明水稻植酸酶基因OsPHY2的转录调控机制奠定了基础。
关键词
水稻(Oryza
SATIVA
L.)
OsPHY2启动子
克隆
调控元件
表达载体构建
Keywords
rice(Oryza sativa L.)
OsPHY2 promoter
cloning
cis-regulatory elements
construction
of
binary
expression
vector
分类号
S511 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
甘蔗黄叶病毒与花叶病毒CP基因RNAi载体构建与转化甘蔗研究
陈利平
陈平华
陈忠伟
王恒波
许莉萍
刘迪
高三基
郭晋隆
陈如凯
《热带作物学报》
CSCD
北大核心
2016
9
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
水稻植酸酶基因OsPHY2启动子的克隆及生物信息学分析
杜小明
李瑞娟
路文静
李小娟
郭程谨
谷俊涛
肖凯
《河北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
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参考文献
引证文献
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