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套式PCR在检测SHIV动物模型中的应用
被引量：
1
1
作者
李晓燕
孙晓梅
+4 位作者
高家红
代成波
陈瑜
李琦涵
代解杰
《动物医学进展》
CSCD
2005年第12期67-70,共4页
用嵌合体猴/人免疫缺陷病毒接种恒河猴,进行体内连续传代,从第4次传代接种嵌合体猴/人免疫缺陷病毒的2只恒河猴外周血淋巴细胞中提取猴全基因组,针对编码嵌合体猴/人免疫缺陷病毒核心蛋白的gag基因进行引物设计,采用套式PCR对提取的全...
用嵌合体猴/人免疫缺陷病毒接种恒河猴,进行体内连续传代,从第4次传代接种嵌合体猴/人免疫缺陷病毒的2只恒河猴外周血淋巴细胞中提取猴全基因组,针对编码嵌合体猴/人免疫缺陷病毒核心蛋白的gag基因进行引物设计,采用套式PCR对提取的全基因组进行检测。套式PCR产物电泳后得到477 bp目的片段,测序结果与GenBank中的猴免疫缺陷病毒mac239的gag序列基本一致,说明嵌合体猴/人免疫缺陷病毒已整合到恒河猴基因组中。与传统病毒分离方法相比较,套式PCR检测的灵敏度明显高于病毒分离方法,尤其在感染初期和感染后期病毒处于潜伏期或病毒载量低的情况下,套式PCR方法的优越性更是传统病毒分离方法所不能替代的。
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关键词
动物模型
套式PCR嵌合体猴/人免疫缺陷病毒
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职称材料
一种快速定量检测猴组织中SIV/SHIV的方法
2
作者
高歌
孟凤珍
姚艳丰
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2020年第12期103-108,共6页
目的以猴-人免疫缺陷病毒(simian-human immunodeficiency virus,SHIV)gag基因为特异性扩增靶标,建立一种快速、灵敏、特异的TaqMan实时荧光定量PCR法检测猴血浆、外周血单核细胞和淋巴结中的猴免疫缺陷病毒(simian immunodeficiency vi...
目的以猴-人免疫缺陷病毒(simian-human immunodeficiency virus,SHIV)gag基因为特异性扩增靶标,建立一种快速、灵敏、特异的TaqMan实时荧光定量PCR法检测猴血浆、外周血单核细胞和淋巴结中的猴免疫缺陷病毒(simian immunodeficiency virus,SIV)和SHIV。方法以SHIVSF162p3n gag基因为模板,用普通PCR方法扩增出109 bp DNA片段用于克隆构建标准品质粒pGEM^®-T-SHIV gag。通过对SHIV标准品质粒定量分析,优化反应体系,检测TaqMan实时荧光定量PCR方法的灵敏度、特异度和重复性。结果TaqMan实时荧光定量PCR法能有效地检测出10^2~10^7 copies/μL SIV/SHIV gag基因mRNA,线性系数为R^2=0.998,slop=-3.304。方法重复性检测显示CV%在0.6%~1.1%之间。结论该TaqMan实时荧光定量PCR法具有快速、灵敏和特异性高的优点,适用于SIV/SHIV感染猴动物模型的研究工作。
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关键词
猴免疫缺陷病毒
猴-人免疫缺陷病毒
TaqMan实时荧光定量PCR
灵敏度
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职称材料
题名
套式PCR在检测SHIV动物模型中的应用
被引量：
1
1
作者
李晓燕
孙晓梅
高家红
代成波
陈瑜
李琦涵
代解杰
机构
中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所
出处
《动物医学进展》
CSCD
2005年第12期67-70,共4页
基金
中国综合性艾滋病研究项目基金资助(CIPRA)
文摘
用嵌合体猴/人免疫缺陷病毒接种恒河猴,进行体内连续传代,从第4次传代接种嵌合体猴/人免疫缺陷病毒的2只恒河猴外周血淋巴细胞中提取猴全基因组,针对编码嵌合体猴/人免疫缺陷病毒核心蛋白的gag基因进行引物设计,采用套式PCR对提取的全基因组进行检测。套式PCR产物电泳后得到477 bp目的片段,测序结果与GenBank中的猴免疫缺陷病毒mac239的gag序列基本一致,说明嵌合体猴/人免疫缺陷病毒已整合到恒河猴基因组中。与传统病毒分离方法相比较,套式PCR检测的灵敏度明显高于病毒分离方法,尤其在感染初期和感染后期病毒处于潜伏期或病毒载量低的情况下,套式PCR方法的优越性更是传统病毒分离方法所不能替代的。
关键词
动物模型
套式PCR嵌合体猴/人免疫缺陷病毒
Keywords
animal model
nested-PCR
chimeric simian/human immunodeficiency virus
分类号
R512.91 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
一种快速定量检测猴组织中SIV/SHIV的方法
2
作者
高歌
孟凤珍
姚艳丰
机构
中国科学院武汉病毒研究所
武汉大学基础医学院
出处
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2020年第12期103-108,共6页
文摘
目的以猴-人免疫缺陷病毒(simian-human immunodeficiency virus,SHIV)gag基因为特异性扩增靶标,建立一种快速、灵敏、特异的TaqMan实时荧光定量PCR法检测猴血浆、外周血单核细胞和淋巴结中的猴免疫缺陷病毒(simian immunodeficiency virus,SIV)和SHIV。方法以SHIVSF162p3n gag基因为模板,用普通PCR方法扩增出109 bp DNA片段用于克隆构建标准品质粒pGEM^®-T-SHIV gag。通过对SHIV标准品质粒定量分析,优化反应体系,检测TaqMan实时荧光定量PCR方法的灵敏度、特异度和重复性。结果TaqMan实时荧光定量PCR法能有效地检测出10^2~10^7 copies/μL SIV/SHIV gag基因mRNA,线性系数为R^2=0.998,slop=-3.304。方法重复性检测显示CV%在0.6%~1.1%之间。结论该TaqMan实时荧光定量PCR法具有快速、灵敏和特异性高的优点,适用于SIV/SHIV感染猴动物模型的研究工作。
关键词
猴免疫缺陷病毒
猴-人免疫缺陷病毒
TaqMan实时荧光定量PCR
灵敏度
Keywords
simian
immunodeficiency
virus
(SIV)
simian
-
human
immunodeficiency
virus
(SHIV)
TaqMan realtime FQ-PCR
sensitivity
分类号
R-33 [医药卫生]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
套式PCR在检测SHIV动物模型中的应用
李晓燕
孙晓梅
高家红
代成波
陈瑜
李琦涵
代解杰
《动物医学进展》
CSCD
2005
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
一种快速定量检测猴组织中SIV/SHIV的方法
高歌
孟凤珍
姚艳丰
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2020
0
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职称材料
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