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矮牵牛查尔酮黄烷酮异构酶(chiA)基因启动子的克隆和测序 被引量:2
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作者 范惠琴 姚泉洪 +1 位作者 黄晓敏 彭日荷 《上海农业学报》 CSCD 1998年第3期14-16,共3页
通过PCR扩增,从矮牵牛中克隆了能在花瓣、花药、花粉中特异表达的查尔酮黄烷酮异构酶(chiA)基因启动子,序列分析表明,该启动子含1305个核苷酸,与国外报道的序列完全一致。
关键词 特异表达 查尔酮 chia基因 启动子 矮牵牛
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荔枝果皮中4种酚类代谢酶活性的测定方法 被引量:7
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作者 李晓静 黄旭明 +1 位作者 胡桂兵 王惠聪 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期531-536,共6页
为了改进酚类物质生物合成途径中关键酶酶活性的测定方法,以南方重要常绿果树荔枝Litchi chinensis果皮为材料,采用两点法和酶动力法2种酶活性研究方法,结合分光光度法和高效液相色谱法检测产物浓度变化,优化了4种酚类代谢常见酶[包括... 为了改进酚类物质生物合成途径中关键酶酶活性的测定方法,以南方重要常绿果树荔枝Litchi chinensis果皮为材料,采用两点法和酶动力法2种酶活性研究方法,结合分光光度法和高效液相色谱法检测产物浓度变化,优化了4种酚类代谢常见酶[包括苯丙氨酸解氨酶(PAL)、查儿酮异构酶(CHI)、二氢黄酮醇还原酶(DFR)和类黄酮糖基转移酶(UFGT)]的测定方法,指出了酶液的纯化、酶活性的保护以及反应底物的溶解方法等对试验结果的稳定性和可靠性的影响,介绍了试验过程中常遇到的问题和具体的解决方法以及试验过程中的注意事项.应用改进后的方法测定荔枝发育过程中果皮PAL、CHI、DFR和UFGT的酶活性,结果发现活性变化趋势与前人的报道基本一致.改进的PAL、CHI、DFR和UFGT酶活性的测定方法可靠,可为相关的研究提供重要的参考. 展开更多
关键词 荔枝 酚类代谢酶 苯丙氨酸解氨酶(PAL) 查儿酮异构酶(CHI) 二氢黄酮醇还原酶(DFR) 类黄酮糖基转移酶(UFGT) 酶活性测定方法
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三色堇花色素合成途径中部分结构基因的克隆及生物信息学分析 被引量:1
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作者 龚胜 孙海燕 +4 位作者 张珂 曾媛 李婧 王健 李新国 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2015年第7期133-142,共10页
【目的】对三色堇花色素合成的3个结构基因VwCHS、VzvCHI和VwF3H进行克隆以及生物信息学分析。【方法】利用RAcE/PcR技术克隆得到VwCHS、‰cHf和VzvF3H基因的全长序列,并通过在线分析软件对其生物信息学进行分析。【结果】获得VwCHS、... 【目的】对三色堇花色素合成的3个结构基因VwCHS、VzvCHI和VwF3H进行克隆以及生物信息学分析。【方法】利用RAcE/PcR技术克隆得到VwCHS、‰cHf和VzvF3H基因的全长序列,并通过在线分析软件对其生物信息学进行分析。【结果】获得VwCHS、VwCHI和VwF3H的cDNA全长分别是1481,975和1361bp;经多重序列比对发现这3个基因编码的氨基酸与其他植物相关氨基酸一致性较高,主要集中在62%~90%,并且在CHS氨基酸序列中有4个催化活性位点(Cys171、Phe222、His310、Asn343),在CHI氨基酸序列中有4个催化活性位点(Thr50、Tyr108、Asn115、Ser192),在VwF3H氨基酸序列中有5个催化活性位点(Asp218、His253、Arg215、Arg284、Ser286);VwCHS、VwCHI、VwF3H的蛋白质分子量分别为9.91,5.37,4.1ku,等电点为5.02,5.16,5.44;二级结构预测发现,vwCHs和VwCHI二级结构主要是0t螺旋,分别占43.39%和41.89%,VwF3H的蛋白质二级结构主要是无规则卷曲,占42.30%;聚类分析发现VwCHS、VwCHI和VwF3H分别归属于各自的聚类簇。【结论1VwCHS、VwCHI和VwF3H是不存在信号肽的非跨膜蛋白。 展开更多
关键词 三色堇 查尔酮合成酶(CHS) 查尔酮异构酶(CHI) 黄烷酮-3-羟化酶(F3H) 生物信息学 基因克隆
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