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结球甘蓝类钙调蛋白CMLs与花粉萌发NPG1及NPGRs相互作用研究 被引量:2
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作者 许彬 曹绍玉 +5 位作者 苏甜 彭梦玲 吕霞 李振林 张国平 许俊强 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期2934-2944,共11页
类钙调蛋白作为钙调蛋白的家族之一,调控植物生长发育、激素调控及各种胁迫,对类钙调蛋白对参与花粉萌发及伸长的深入研究具有重要意义。为研究结球甘蓝花粉CMLs与NPG1及相关蛋白互作关系,探索CMLs在花粉发育及萌发过程的功能,本研究以... 类钙调蛋白作为钙调蛋白的家族之一,调控植物生长发育、激素调控及各种胁迫,对类钙调蛋白对参与花粉萌发及伸长的深入研究具有重要意义。为研究结球甘蓝花粉CMLs与NPG1及相关蛋白互作关系,探索CMLs在花粉发育及萌发过程的功能,本研究以结球甘蓝ZG为材料,克隆到12个花粉发育及萌发相关CMLs基因,及花粉萌发基因NPG1、NPGR1和NPGR2,通过酵母双杂交试验检测编码蛋白相互之间的互作关系,并检测NPG1、NPGR1和NPGR2在不同授粉时间后的表达水平。结果表明, 12个CMLs基因开放阅读框(open reading frame, ORF)在447~1095bp之间,其中CML20、CML48、CML49、CML50均含有4个内含子, CML21含有2个内含子,其余均不含内含子;编码蛋白均不含信号肽和跨膜域,均为胞外蛋白,且均为亲水性蛋白;分别含有2~4个EF-Hands结构域,氨基酸数目在148~364个氨基酸之间,亚细胞定位预测主要定位于细胞膜、液泡及细胞核中;结球甘蓝NPG1、NPGR1、NPGR2分别聚类到不同的进化枝上,与油菜、白菜的亲缘关系最近,与拟南芥亲缘关系较近;酵母双杂交试验表明, CML13、CML21、CML24、CML42不能与NPG1、NPGR1及NPGR2在体外发生相互作用, CML15、CML20、CML25、CML39、CML41、CML48、CML49均能与NPG1、NPGR1及NPGR2在体外发生相互作用, CML50可与NPGR1、NPGR2互作,而不能与NPG1发生互作。表达分析表明, NPG1表达量在授粉后的柱头中呈显著上升趋势, NPGR1、NPGR2表达量变化均不显著;CMLs在不同授粉时间均有不同的表达量变化,其中CML15、CML20、CML39、CML41、CML49均呈现出先升高后下降的趋势。本研究在结球甘蓝中筛选得到能与NPG1、NPGRs互作的CMLs蛋白,说明多个CMLs能参与花粉萌发及花粉管伸长过程,期望为Ca^(2+)信号系统参与花粉萌发及花粉管伸长的机制研究提供参考。 展开更多
关键词 结球甘蓝 花粉 cmls NPG1 NPGRs 蛋白互作
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CMLs参与调控植物花粉授粉竞争的作用 被引量:4
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作者 高述民 杨慕菡 +1 位作者 祝园园 周燕 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期143-150,共8页
【目的】在显花植物生殖过程中花粉萌发和花粉管生长起着至关重要的作用,这一过程受许多因素的影响,其中钙调素类似蛋白(calmodulin-like proteins,CMLs)通过直接或间接的作用机制调控花粉萌发及花粉管生长。然而,迄今人们对CMLs的功能... 【目的】在显花植物生殖过程中花粉萌发和花粉管生长起着至关重要的作用,这一过程受许多因素的影响,其中钙调素类似蛋白(calmodulin-like proteins,CMLs)通过直接或间接的作用机制调控花粉萌发及花粉管生长。然而,迄今人们对CMLs的功能研究尚少。本文旨在初步了解CMLs蛋白在花粉竞争优势中的作用,为深入探究CMLs蛋白在植物花粉竞争优势中的分子机制奠定理论基础。【方法】本文主要通过对参与调控花粉萌发以及花粉管生长过程的CMLs蛋白的结构、表达水平、细胞定位及其作用机理的归纳,结合不同植物中出现的花粉竞争现象,综合分析并总结国内外相关研究结果。【结果】CMLs蛋白约有4个保守的EF手性结构域,当CMLs蛋白结合Ca^(2+)时,其构象发生变化,增强与下游受体蛋白的结合能力,并启动Ca^(2+)依赖的级联信号放大效应,引起花粉管中Ca^(2+)的浓度变化,影响从萌发孔到花粉管顶端Ca^(2+)浓度梯度的形成,从而调控花粉管的正常生长。CMLs蛋白的表达还可以影响Mg^(2+)、NO等离子的浓度变化,影响Ca^(2+)与EF手性结构域的结合及花粉管生长的导向。不同CMLs蛋白具有不同生理功能,其中参与花粉萌发及花粉管生长的CMLs蛋白主要在植物花器官中表达;部分显花植物在受精过程中,不同倍性花粉之间可能由于基因组大小或者营养物质含量的差异,导致萌发率及生长速率的不同。【结论】CMLs蛋白可能通过在不同倍性花粉中的差异表达,影响花粉在体内萌发的进程,使其在某一时期表现出竞争优势。 展开更多
关键词 cmls 花粉萌发 花粉管生长 竞争强势 调控
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顺纹拉伸载荷下杨木多尺度结构的失效破坏特征
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作者 李芸琪 初石民 +1 位作者 林兰英 傅峰 《北京林业大学学报》 北大核心 2025年第9期143-152,共10页
【目的】木材作为具有天然多尺度结构的工程材料,常因受外部载荷作用而发生失效破坏。尽管多尺度结构对木材破坏具有决定性影响,但目前对不同尺度结构的破坏特征及其对失效破坏的影响机制仍缺乏系统性阐释。本研究旨在阐明杨木细胞结构... 【目的】木材作为具有天然多尺度结构的工程材料,常因受外部载荷作用而发生失效破坏。尽管多尺度结构对木材破坏具有决定性影响,但目前对不同尺度结构的破坏特征及其对失效破坏的影响机制仍缺乏系统性阐释。本研究旨在阐明杨木细胞结构与排列方向在顺纹拉伸载荷下诱发的多尺度失效破坏特征,为木材力学性能评价与工程应用提供理论依据。【方法】以人工林意大利杨为对象,截取轮内不同区域制备拉伸试样。结合SEM、AFM等显微表征手段,系统比较生长轮、细胞及细胞壁3个尺度结构单元的构造特征与力学性质差异,并解析其在顺纹拉伸过程中的破坏路径,揭示杨木多维结构与破坏行为间的内在联系。【结果】(1)生长轮尺度:在顺纹拉伸作用下,结构差异较大的生长轮边界处产生剪切应力,导致生长轮界面或轮界处靠近早材的一侧形成断裂面。(2)细胞尺度:在轴向载荷作用下,杨木轴向细胞主要发生垂直于纹理的细胞横断,形成水平断面或弧形断面;沿径向排列的射线细胞之间发生剥离,裂纹延展至射线末端后会再次转为沿轴向开裂,形成阶梯状断面。破坏断面的差异体现了木材中不同细胞排列方向对裂纹扩展路径的引导作用。(3)细胞壁尺度:杨木细胞壁厚度变化较大的区域易发生跨壁断裂,形成横断破坏;裂纹在细胞壁内扩展时,S1/S2界面或S2/S3界面层因微观结构差异成为剥离的薄弱环节,反映了细胞壁内部不同层之间结合力的差异,以及在应力作用下的响应特点;裂纹在细胞间沿顺纹方向扩展时,木纤维细胞之间沿CML/S1界面层发生剥离,形成沿胞间层CML剥离的破坏模式,表明胞间层在顺纹拉伸载荷下结合力相对较弱。【结论】顺纹拉伸载荷作用下,杨木内部构造、细胞形态结构和细胞排列方向的差异显著影响杨木不同尺度的破坏模式。不同尺度上同一单元之间的结构和力学性质差异是影响杨木受外部载荷作用时内部应力分配的主要因素。未来可通过原.位设备实时监测木材在力学载荷下生物大分子结构的微小变化,从分子层面揭示木材的力学响应机制。 展开更多
关键词 杨木 多尺度结构 结构差异 顺纹拉伸 破坏模式 细胞壁 胞间层(CML)
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大豆CML家族基因的生物信息学分析 被引量:13
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作者 陈超 端木慧子 +3 位作者 朱丹 刘艾林 肖佳雷 朱延明 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期957-963,共7页
CMLs蛋白是一类具有Ca2+结合的EF-hand保守结构域蛋白,广泛参与钙依赖的信号传导途径,在植物生长发育及生物胁迫与非生物胁迫响应中起着重要的作用。通过NCBI和植物基因组注释数据库等筛选并获得了68个大豆GmCML蛋白;分析了所有蛋白的... CMLs蛋白是一类具有Ca2+结合的EF-hand保守结构域蛋白,广泛参与钙依赖的信号传导途径,在植物生长发育及生物胁迫与非生物胁迫响应中起着重要的作用。通过NCBI和植物基因组注释数据库等筛选并获得了68个大豆GmCML蛋白;分析了所有蛋白的基本特性;通过与拟南芥CMLs基因的进化树分析表明,GmCML家族基因属于8个亚类;对GmCML家族基因进行了染色体定位与重复基因进化关系分析,发现其具有较高的进化速率;序列比对发现GmCML类蛋白含有2~4个保守的EF-hand结构域;利用芯片数据对野生大豆在碱胁迫下的叶和根中的CMLs基因表达模式进行了分析,得到26个GsCML基因在碱胁迫下有显著的差异表达,且在根和叶中的差异表达模式不同,表明这些基因参与植物碱胁迫应答,且具组织表达特异性。 展开更多
关键词 大豆 cmls EF-HAND 生物信息学 进化分析
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c-myb在CML斑马鱼模型中参与疾病进展并且可作为CML的治疗靶点
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《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第7期97-97,共1页
尽管酪氨酸激酶抑制剂已成功应用于慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia, CML)的治疗,但CML患者仍面临产生耐药性和发生疾病进展的困境。CML是一种由BCR基因和ABL1基因发生融合引起的克隆造血干细胞疾病,大部分患者在慢性期使用酪... 尽管酪氨酸激酶抑制剂已成功应用于慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia, CML)的治疗,但CML患者仍面临产生耐药性和发生疾病进展的困境。CML是一种由BCR基因和ABL1基因发生融合引起的克隆造血干细胞疾病,大部分患者在慢性期使用酪氨酸激酶抑制剂都能有较好的疗效,而在发生疾病进展后的加速期或是更严重的急变期对药物的响应变差导致治疗变得困难。 展开更多
关键词 疾病进展 酪氨酸激酶抑制剂 治疗靶点 CML C-MYB
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基于转录组的青海茄参CML基因家族鉴定及冷胁迫表达分析
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作者 张雪 赵艳艳 《甘肃农业大学学报》 北大核心 2025年第2期128-136,共9页
【目的】鉴定青海茄参(Mandragora chinghaiensis Kuang et A.M.Jl)CML基因家族成员,探究其对冷胁迫的响应。【方法】基于课题组的全长转录组数据,利用生物信息学技术对青海茄参CML基因家族的成员及其蛋白理化性质、系统发育过程、基因... 【目的】鉴定青海茄参(Mandragora chinghaiensis Kuang et A.M.Jl)CML基因家族成员,探究其对冷胁迫的响应。【方法】基于课题组的全长转录组数据,利用生物信息学技术对青海茄参CML基因家族的成员及其蛋白理化性质、系统发育过程、基因结构等进行分析。【结果】在青海茄参中共鉴定出19个CML基因家族成员,亚细胞定位主要在细胞核,含有1~4个EF-hand结构域,二三级结构主要由α-螺旋组成;基序分析发现,McCMLs蛋白含有4个典型的EF手部基序;系统进化树分析显示,McCMLs蛋白被分为3个亚族。冷胁迫表达模式分析表明,McCML基因家族在冷胁迫下差异表达,其中McCML3、McCML7表达量显著上调。【结论】通过对McCML基因家族进行鉴定和分析,筛选出McCML3、McCML7作为青海茄参抗寒候选基因,为后期研究其抗寒分子机制提供理论基础。 展开更多
关键词 青海茄参 CML基因家族 生物信息学分析 冷胁迫 表达分析
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LCA在产品生命周期环境影响评价中的应用 被引量:15
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作者 姜雪 李小平 +1 位作者 董珑丽 刘晓臣 《中国人口·资源与环境》 CSSCI 北大核心 2014年第S2期188-191,共4页
以碳钢喷涂产品为研究对象,基于生命周期评价方法,采用GaBi6软件中的CML2001模型,结合初级能源消耗情况对研究对象的资源消耗(ADP)、全球变暖(GWP)、酸化(AP)、富营养化(EP)、臭氧损耗(ODP)、光化学臭氧合成(POCP)等环境影响类别进行研... 以碳钢喷涂产品为研究对象,基于生命周期评价方法,采用GaBi6软件中的CML2001模型,结合初级能源消耗情况对研究对象的资源消耗(ADP)、全球变暖(GWP)、酸化(AP)、富营养化(EP)、臭氧损耗(ODP)、光化学臭氧合成(POCP)等环境影响类别进行研究和对比分析。结果表明,对于碳钢喷涂产品,EP最为显著,黑坯加工阶段的初级能源消耗量最大,该阶段对POCP、AP和GWP的影响贡献率均在80%以上。 展开更多
关键词 生命周期评价 环境影响 产品 GaBi 6 CML2001
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细胞因子诱导的杀伤细胞可诱导bcr-abl阳性的K562细胞凋亡 被引量:22
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作者 岑溪南 朱平 +3 位作者 石永进 任雅丽 马明信 虞积仁 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第3期201-204,共4页
表达bcr abl的K5 6 2细胞能抵抗不同化疗药物诱导的细胞凋亡 ,为了观察细胞因子诱导的杀伤 (CIK)细胞能否诱导表达bcr abl的K5 6 2细胞凋亡 ,应用流式细胞术DNA亚G1期分析法比较了CIK和化疗药物 (喜树碱和VP 16 )诱导K5 6 2及CEM细胞发... 表达bcr abl的K5 6 2细胞能抵抗不同化疗药物诱导的细胞凋亡 ,为了观察细胞因子诱导的杀伤 (CIK)细胞能否诱导表达bcr abl的K5 6 2细胞凋亡 ,应用流式细胞术DNA亚G1期分析法比较了CIK和化疗药物 (喜树碱和VP 16 )诱导K5 6 2及CEM细胞发生凋亡的情况。结果表明 ,RT PCR检测显示K5 6 2细胞表达bcr abl融合基因mRNA ,单独K5 6 2细胞对照组、K5 6 2 /喜树碱组及K5 6 2 /VP 16组均未见亚G1期峰 ,K5 6 2 /CIK组亚G1期峰值为38.1% ;单独CEM细胞对照组未见亚G1期峰 ,CEM /喜树碱组亚G1期峰值为 2 3.5 % ,CEM /VP 16组亚G1期峰值为 32 .3% ,CEM/CIK组亚G1期峰值为 4 5 .4 %。结论 :喜树碱和VP 16不能诱导表达bcr abl的K5 6 2细胞凋亡 ,而CIK细胞能诱导K5 6 2细胞凋亡 。 展开更多
关键词 细胞因子诱导的杀伤细胞 BCR-ABL K562细胞 细胞凋亡 慢性髓细胞性白血病 CML 流式细胞术
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自分泌VEGF对人慢性髓性白血病细胞系K562的作用 被引量:10
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作者 阮国瑞 刘艳荣 +5 位作者 陈珊珊 秦亚溱 于弘 常艳 李金兰 付家瑜 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第3期202-206,共5页
血管内皮细胞生长因子 (VEGF)是血管内皮细胞特异性的丝裂原 ,与实体肿瘤的血管生成、生长、转移及不良预后密切相关。最近的报道表明 ,慢性髓性白血病 (CML)病人骨髓过度表达VEGF。然而 ,VEGF在CML细胞异常增殖中的作用还不清楚。为了... 血管内皮细胞生长因子 (VEGF)是血管内皮细胞特异性的丝裂原 ,与实体肿瘤的血管生成、生长、转移及不良预后密切相关。最近的报道表明 ,慢性髓性白血病 (CML)病人骨髓过度表达VEGF。然而 ,VEGF在CML细胞异常增殖中的作用还不清楚。为了探讨自分泌VEGF对CML细胞系K5 62增殖与凋亡的影响 ,本研究首次采用正义和反义VEGF12 1cDNA转染K5 62细胞 ,通过RT PCR及ELISA方法鉴定各转染克隆VEGFmRNA及蛋白的表达。结果显示 ,转染反义VEGF12 1cDNA可以降低K5 62细胞VEGF的表达 ,而转染正义VEGF12 1cDNA可使VEGF的表达提高 3倍以上。MTT ,集落形成试验及细胞凋亡检测试验观察 :反义VEGF12 1cDNA转染可以抑制K5 62细胞的增殖及其集落形成 ,而促进其凋亡 ;正义VEGF12 1cDNA转染与其结果相反。本研究结果说明自分泌VEGF在CML细胞系K5 展开更多
关键词 血管内皮细胞生长因子 VEGF CML 慢性髓性白血病 K562细胞 细胞凋亡 基因转染
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扰动环境下作业车间网络多瓶颈识别方法研究 被引量:6
10
作者 李晓娟 孙文磊 +1 位作者 袁逸萍 李华华 《西安交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第12期64-72,78,共10页
针对扰动环境下作业车间多瓶颈识别困难、瓶颈漂移后的瓶颈识别缺乏全局性和实效性这一问题,构建了基于网络特性的多瓶颈动态识别方法。首先,根据设备工装、工艺路线、物流路径以及产品配置等多层次生产数据,构造作业车间网络模型;其次... 针对扰动环境下作业车间多瓶颈识别困难、瓶颈漂移后的瓶颈识别缺乏全局性和实效性这一问题,构建了基于网络特性的多瓶颈动态识别方法。首先,根据设备工装、工艺路线、物流路径以及产品配置等多层次生产数据,构造作业车间网络模型;其次,建立作业车间网络动力学方程,获取扰动因素流转的判定依据。对瓶颈内涵进行扩充,综合考虑节点自身动力学特性、节点间拓扑耦合影响机理及扰动在生产网络中的传播机制,建立基于耦合映射格子(CML)的瓶颈识别算法,实现作业车间瓶颈的量化描述和连续预测;最后,对某机电企业作业车间进行瓶颈的动态监控和预测。结果表明:在扰动环境下,CML模型能够较好地预测各工作站瓶颈度走势,其中工作站R1平均瓶颈度为1.12,瓶颈持续时间长达40h;工作站R3的平均瓶颈度为1.05,瓶颈持续时间为10h;工作站R1、R3首先成为系统的瓶颈,随着加工进度的推移,工作站R1和R24交替成为系统瓶颈。研究结果与该企业实际情况具有很好的一致性,验证了该方法的有效性和准确性。 展开更多
关键词 作业车间 扰动环境 复杂网络 CML模型 瓶颈识别
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CML28树突状细胞核酸疫苗的构建及其表达研究(英文) 被引量:6
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作者 张东华 周红升 +3 位作者 汪涯雅 刘文励 黄振倩 谭获 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第4期631-636,共6页
为了构建负载CML28的核酸疫苗,并在树突状细胞中进行表达,用分子克隆的方法,从K562细胞中克隆出CML28的cDNA全长,将其亚克隆至pGEM-T载体,经测序后酶切,克隆至真核表达载体pcDNA3.1HisA,将重组质粒pcDNA3.1HisA-CML28进行酶切分析和测... 为了构建负载CML28的核酸疫苗,并在树突状细胞中进行表达,用分子克隆的方法,从K562细胞中克隆出CML28的cDNA全长,将其亚克隆至pGEM-T载体,经测序后酶切,克隆至真核表达载体pcDNA3.1HisA,将重组质粒pcDNA3.1HisA-CML28进行酶切分析和测序鉴定;从正常人外周血中分离外周血单个核细胞(PBMC),在IL-4和GM-CSF条件下诱导分化为树突状细胞(DC),并进行鉴定;用电穿孔的方法将重组质粒pcDNA3.1HisA-CML28导入到DC中,WesternBlot检测His-CML28融合蛋白的表达。结果表明:经酶切分析和测序鉴定,重组质粒pcDNA3.1HisA-CML28含有正确的CML28全长序列;经电穿孔导入DC后,重组质粒能表达His-CML28蛋白。结论:成功构建了CML28树突状细胞核酸疫苗。 展开更多
关键词 CML28 树突状细胞 核酸疫苗
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基于FPGA的多类型混合信号采集存储系统设计 被引量:5
12
作者 任勇峰 马放 +1 位作者 单彦虎 彭巧君 《仪表技术与传感器》 CSCD 北大核心 2016年第4期54-56,59,共4页
动态测试领域当中,常常需要测控系统同时完成多类非电量信号以及多类数字信号的测量。为满足这一要求,提出了基于FPGA的多类型混合信号采集存储系统的设计。该系统以FPGA作为中央逻辑控制单元,实现多类型传感器信号的测量、滤波、A/D转... 动态测试领域当中,常常需要测控系统同时完成多类非电量信号以及多类数字信号的测量。为满足这一要求,提出了基于FPGA的多类型混合信号采集存储系统的设计。该系统以FPGA作为中央逻辑控制单元,实现多类型传感器信号的测量、滤波、A/D转换,以及多路电量信号、RS-422信号、CML标准的图像信号等的采集与存储。经试验验证,该系统性能稳定,数据存储可靠,满足实际测试要求。 展开更多
关键词 采集存储系统 FPGA CML 逻辑控制 滤波
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实时定量RT-PCR监测造血干细胞移植前后CML28mRNA表达 被引量:4
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作者 张东华 戴敏 +5 位作者 周红升 汪涯雅 张路 张丽 王斌 曹文静 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第5期843-847,共5页
本研究的目的在于建立检测CML28mRNA的SYBRGreenI实时定量PCR(RQPCR)的方法,并探讨CML28表达水平与异基因造血干细胞移植(AlloHSCT)后白血病复发之间的相关性,为此构建了pcDNA3.1HisACML28质粒作为定量模板,选择14例白血病患者进行研究... 本研究的目的在于建立检测CML28mRNA的SYBRGreenI实时定量PCR(RQPCR)的方法,并探讨CML28表达水平与异基因造血干细胞移植(AlloHSCT)后白血病复发之间的相关性,为此构建了pcDNA3.1HisACML28质粒作为定量模板,选择14例白血病患者进行研究。14例患者包括:10例慢性髓系白血病(CML),3例急性髓系白血病(AML),1例Ph阳性急性淋巴细胞白血病(Ph+ALL)。应用RocheLightCyclerPCR仪动态监测患者移植前后不同时间段的50份骨髓单个核细胞中CML28表达水平。研究结果表明:RQPCR的灵敏度为10-4(0.05ng)水平,标准品日间差及日内差均小于10%,重复性好。初治组中AML和CML加速期(CMLAP)与急变期(CMLBC)患者CML28呈高表达(6.58±2.34)×10-2,预处理前组CML28水平为(2.19±0.32)×10-2,移植后1月组CML28水平为(1.35±1.28)×10-2,移植后3月及以后组(以下简称移植后3月组)CML28水平为(4.57±6.39)×10-3。定期随访表明,3例CMLAP或BC患者与1例CML慢性期(CMLCP)患者,在AlloHSCT3个月后检测仍呈阳性,其中2例CML28mRNA的水平<2×10-2,获无病生存;2例CML28水平>2×10-2者,一年内均出现复发,其中1例死亡,另1例行第2次AlloHSCT后CML28水平虽然迅速下降,但仍>2×10-2,2个月后再次复发。结论:CML28水平与疾病的演变过程存在良好的相关性,对于造血干细胞移植受者,动态监测CML28水平比单一的结果价值更大,实时定量检测移植后CML28水平对预测白血病复发有一定的意义。 展开更多
关键词 白血病 ALLO-HSCT CML28 实时定量RT-PCR SYBR Green
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白血病基因产物靶向治疗的基础和临床研究 被引量:12
14
作者 陈赛娟 陈丽娟 周光飚 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第1期1-8,共8页
全反式维甲酸 (ATRA)和三氧化二砷 (As2 O3)治疗急性早幼粒细胞性白血病 (APL)获得了很大成功 ,已经成为白血病靶向治疗研究的代表性模式。ATRA与As2 O3的作用靶点均为异常转录因子PML RARα,前者通过针对RARα ,而后者通过PMLSUMO化后... 全反式维甲酸 (ATRA)和三氧化二砷 (As2 O3)治疗急性早幼粒细胞性白血病 (APL)获得了很大成功 ,已经成为白血病靶向治疗研究的代表性模式。ATRA与As2 O3的作用靶点均为异常转录因子PML RARα,前者通过针对RARα ,而后者通过PMLSUMO化后使PML RARα致病蛋白降解 ,导致APL细胞分化和凋亡。ATRA与As2 O3联合治疗初发APL ,证实了两药的相互协同作用 ,获得了迄今为止成人急性白血病治疗的最好疗效。酪氨酸激酶抑制剂格力维 (Gleevec)在慢性粒细胞白血病 (CML)治疗中获得了成功。联合应用格力维与砷剂治疗CML已在临床和实验中初步证实其有效性 ,这一治疗方案是基于针对ABL异常的酪氨酸激酶活性与降解BCR ABL融合蛋白的双重靶向作用。白血病多靶点联合治疗的思路将进一步拓展至ANLL M2b型白血病 ,为该类白血病提供新的治疗方案 ,有可能使该类白血病获得更为有效的治疗效果。 展开更多
关键词 白血病 靶向治疗 AS2O3 ATRA APL 治疗方案 CML 融合蛋白 转录因子 基因产物
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反义BCR-ABL寡核苷酸对化疗药物体外净化白血病细胞的增强效应 被引量:3
15
作者 罗绍凯 戴木水 +2 位作者 戴丽君 洪文德 彭爱华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期78-80,共3页
目的研究反义寡核苷酸对化疗药物阿霉素(ADM)、足叶乙甙(VP-16)及阿糖胞苷(Ara-C)体外抑制K562细胞克隆形成的影响,并探讨其可能的作用机制。方法体外甲基纤维素半固体培养观察各处理组K562细胞的克隆形成... 目的研究反义寡核苷酸对化疗药物阿霉素(ADM)、足叶乙甙(VP-16)及阿糖胞苷(Ara-C)体外抑制K562细胞克隆形成的影响,并探讨其可能的作用机制。方法体外甲基纤维素半固体培养观察各处理组K562细胞的克隆形成,流式细胞仪评价细胞的凋亡状况。结果实验浓度下单独应用ADM、VP-16或Ara-C,K562细胞集落存活率分别为41.41%、50.28%及52.08%,先用反义寡核苷酸AS-b3a2处理,再用上述3种化疗药物,集落存活率则分别为15.20%、19.77%及21.32%(P<0.01);单独应用AS-b3a2,K562集落存活率为39.31%,流式细胞仪检测到AS-b3a2处理后的K562凋亡细胞比例为27.2%,联用ADM后凋亡细胞比例为46.20%,而未处理组仅为7.4%。结论实验结果提示,反义BCR-ABL寡核苷酸AS-b3a2能增强化疗药物ADM、VP-16或Ara-C对K562细胞克隆形成的抑制作用,其作用可能在于增强化疗药物体外诱导K562细胞的凋亡。 展开更多
关键词 白血病 CML 药物疗法 基因治疗 寡核苷酸
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植物免疫应答过程中Ca^(2+)及CaM/CML的功能 被引量:5
16
作者 张超 赵芊 +1 位作者 张哲 宋水山 《生物学杂志》 CAS CSCD 2014年第2期69-72,共4页
钙离子是一个多功能的第二信使,在植物响应各种生理刺激时,Ca2+参与调节植物的多种生长发育和胁迫适应过程。在这些过程中,Ca2+信号带有特异性标签,通过Ca2+结合蛋白及其下游靶蛋白感知不同刺激并翻译成响应的细胞反应。钙调素(CaM)和... 钙离子是一个多功能的第二信使,在植物响应各种生理刺激时,Ca2+参与调节植物的多种生长发育和胁迫适应过程。在这些过程中,Ca2+信号带有特异性标签,通过Ca2+结合蛋白及其下游靶蛋白感知不同刺激并翻译成响应的细胞反应。钙调素(CaM)和钙调素类蛋白(CML)是Ca2+主要的感受器,通过调节不同靶蛋白的活性调控多种细胞功能。最近在植物对抗病原菌的防卫反应中有关Ca2+/CaM信号转导系统的研究取得了一定进展。重点关注植物免疫应答过程中受CaM/CML调控的信号组分的研究,包括参与Ca2+信号产生和Ca2+依赖的表达基因组分调控。 展开更多
关键词 CA2+ CAM CML 植物免疫 信号转导 钙调素结合蛋白
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抗bcr/abl mRNA特异性核酶作用于靶基因的细胞内外切割实验 被引量:3
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作者 陈波斌 林果为 +5 位作者 陆华中 范华骅 郭荣 肖娟 高跞 高峰 《复旦学报(医学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第3期259-262,共4页
目的 将已构建的具有抗慢性粒细胞性白血病(CML)融合基因bcr/abl mRNA的含核酶载体,进行细胞内外实验,了解抗bcr/abl mRNA核酶的切割效应。方法 含有抗靶基因的真核表达载体pAVGS4经酶切后,其中抗CML核酶M1-GS RNA的DNA序列被构建到pUC1... 目的 将已构建的具有抗慢性粒细胞性白血病(CML)融合基因bcr/abl mRNA的含核酶载体,进行细胞内外实验,了解抗bcr/abl mRNA核酶的切割效应。方法 含有抗靶基因的真核表达载体pAVGS4经酶切后,其中抗CML核酶M1-GS RNA的DNA序列被构建到pUC19上得到pGS210,并经酶切和测序鉴定;合成bcr/abl融合位点前后的一段靶序列,克隆到pGEM-7zf(+)上得到p bcr-abl经测序鉴定,将pGS210和p bcr-abl进行体外转录,获得 M1-GS RNA及其作用底物,将两者混合、孵育,通过放射自显影术检测切割的效果;将pAVGS4转染到CML细胞株K652细胞内,通过RT-PCR方法了解核酶对于目标 RNA的作用效应。结果 p bcr-abl经酶切电泳及测序证实载体中含有目标序列,Ml-GS RNA作用于底物后,放射自显影术检测显示底物 RNA被有效切割。pAVGS4转染到K562细胞48和72h后,RT-PCR显示bcr/abl mRNA被有效切割。结论 pAVGS4可以有效地切割K562细胞内的bcr/abl mRNA,预期可作为CML分子靶向治疗的工具。 展开更多
关键词 BCR/ABL 核酶 RNA 细胞内 CML BCR-ABL 抗B 酶切 测序 底物
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急性和慢性髓系白血病患者SALL4基因的表达 被引量:3
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作者 陈芹 钱军 +8 位作者 林江 杨静 李云 王翠竹 柴海彦 陈星星 钱震 马吉春 张铭 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期315-319,共5页
本研究旨在探讨急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)和慢性髓系白血病(chronic myeloidleukemia,CML)患者中SALL4基因的水平状态及其临床意义。应用RQ-PCR方法检测35例AML、12例CML患者和24例缺铁性贫血患者(作为对照)骨髓单个... 本研究旨在探讨急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)和慢性髓系白血病(chronic myeloidleukemia,CML)患者中SALL4基因的水平状态及其临床意义。应用RQ-PCR方法检测35例AML、12例CML患者和24例缺铁性贫血患者(作为对照)骨髓单个核细胞(BMMNC)SALL4 mRNA表达水平。结果表明,AML患者SALL4表达水平(0%-14%,中位1.43%)明显高于对照组(0%-1%,中位0%)(P<0.001),65.7%(23/35)AML患者中SALL4转录本呈阳性,SALL4表达频率依次为M2(86.7%,13/15)、M3(75.0%,6/8)、M1(60.0%,3/5)、M4(14.3%,1/7),4组间的差异有显著性(P=0.008);SALL4表达频率与AML患者年龄、性别、白细胞计数、血红蛋白浓度、血小板计数和染色体异常均无相关性(P>0.05)。13例CML患者中SALL4转录本均为阳性表达,相对含量为1%-128%(中位19.39%),明显高于对照组(P<0.001)。采用接收者操作特征曲线(receiver operatingcharacteristic curve,ROC曲线)分析显示,AML和CML曲线下面积(AUC)分别为0.983(95%可信区间0.95-1.017)和0.997(95%可信区间0.986-1.007)。结论:SALL4基因表达是AML和CML中常见的分子事件并且可考虑作为AML和CML辅助诊断的分子标记。 展开更多
关键词 AML CML SALL4表达 ROC曲线
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高三尖杉脂碱在慢性粒细胞白血病中的作用 被引量:5
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作者 曾晓颖 李秀松 +3 位作者 吴方 陈瑜 周励 沈志祥 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1999年第5期406-408,共3页
目的观察高三尖杉脂碱(HHT)治疗慢性粒细胞白血病(CML)的临床疗效。方法自1994年12月~1997年12月应用HHT及羟基脲(Hu)联合治疗CML21例作为治疗组,a-干扰素治疗CML19例作为对照组,分别观察、比较有效率。结果治疗组临床和血液... 目的观察高三尖杉脂碱(HHT)治疗慢性粒细胞白血病(CML)的临床疗效。方法自1994年12月~1997年12月应用HHT及羟基脲(Hu)联合治疗CML21例作为治疗组,a-干扰素治疗CML19例作为对照组,分别观察、比较有效率。结果治疗组临床和血液学完全缓解16例(76.2%);部分缓解3例(143%),总有效率90.5%;细胞遗传学转阴率14.3%,分子生物学转阴率14.3%。其中有1例从加速期转变为慢性期。对照组有效率、细胞遗传学转阴率和分子生物学转阴率与治疗组相仿。而且HHT治疗CML毒副作用小。结论HHT是经济、实惠、有效的治疗CML方法。 展开更多
关键词 白血病 高三尖杉脂碱 CML 药物疗法
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三尖杉酯碱诱导慢性髓系白血病K-562细胞凋亡的实验研究 被引量:6
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作者 李荣 刘晓力 +5 位作者 杜庆锋 田红 宋兰林 张燕 杨艺 周淑芸 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第9期788-790,共3页
目的阐明三尖杉酯碱(HT)作用于K562细胞的机制。方法应用细胞形态、DNA凝胶电泳和流式细胞仪等检测,观察HT对K562细胞株的作用方式,进一步用RT-PCR方法研究bcr/abl基因在转录水平的改变。结果0.01~100.00μg/ml浓度HT可诱导K562细胞... 目的阐明三尖杉酯碱(HT)作用于K562细胞的机制。方法应用细胞形态、DNA凝胶电泳和流式细胞仪等检测,观察HT对K562细胞株的作用方式,进一步用RT-PCR方法研究bcr/abl基因在转录水平的改变。结果0.01~100.00μg/ml浓度HT可诱导K562细胞凋亡,并呈时间和剂量依赖性。随着药物作用时间的延长,bcr/abl基因的转录下调。结论低浓度HT就可通过抑制bcr/abl基因的表达,诱导K562细胞凋亡。 展开更多
关键词 三尖杉酯碱 慢性髓系白血病 细胞系 K-562 CML RT-PCR方法 细胞凋亡
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