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CONSTRUCTION, EXPRESSION AND BIOLOGICAL ASSESSMENT OF BPI_(23)-Fcγ1 RECOMBINANT PROTEIN PROKARYOTIC EXPRESSION VECTOR
被引量：
7
1
作者
安云庆
管远志
+1 位作者
柯岩
杨贵贞
《Chinese Medical Sciences Journal》
CAS
CSCD
2002年第3期140-147,共8页
关键词
pBV
bpi
600
Fcγ1700
recombinant
expression
vector
bpi
23
Fcγ1
recombinant
protein
Objective.
To
construct
pBV
bpi
600
Fcγ1700
recombinant
expression
vector
to
transform
it
into
Escherichia
coli
DH5α
and
to
induce
the
expression
of
bpi
2
在线阅读
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职称材料
猪BPI基因部分cSNPs检测及其对蛋白结构功能的影响
被引量：
5
2
作者
吴正常
王靖
+5 位作者
朱世平
赵乔辉
刘璐
訾臣
吴圣龙
包文斌
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第7期1000-1007,共8页
本试验以98头苏太猪为研究对象,检测BPI基因部分编码区的单核苷酸多态性(SNPs),并预测分析碱基突变对BPI蛋白结构和功能的影响。利用PCR-SSCP和PCR-RFLP结合测序的方法检测BPI基因外显子1、4和10的SNPs,运用生物信息学比较分析原蛋白和...
本试验以98头苏太猪为研究对象,检测BPI基因部分编码区的单核苷酸多态性(SNPs),并预测分析碱基突变对BPI蛋白结构和功能的影响。利用PCR-SSCP和PCR-RFLP结合测序的方法检测BPI基因外显子1、4和10的SNPs,运用生物信息学比较分析原蛋白和突变型蛋白的理化性质和结构。结果表明,以BPI基因cDNA序列作为参照,BPI外显子1、4和10存在6个SNPs,3个同义突变(c.24A>G、c.54T>C和c.522C>T)和3个错义突变(c.433C>T(Arg145Trp)、c.1060A>G(Thr354Ala)和c.1151T>G(Leu384Arg))。3种错义突变未改变BPI蛋白的理化性质、信号肽、跨膜区、糖基化位点以及二、三级结构,但是导致磷酸化位点的改变或存在其他潜在功能位点区域。Western blot试验发现,BPI蛋白的分子量为53ku,苏太猪F18大肠杆菌抗性型猪的BPI蛋白表达量显著高于敏感型猪。猪BPI外显子4和10的碱基突变不同程度影响到蛋白功能,并可能对机体疾病的抗性/易感性产生影响。
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关键词
猪
bpi
基因
SNPS
生物信息学
蛋白结构和功能
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职称材料
猪BPI蛋白重组载体的构建及真核表达
被引量：
1
3
作者
殷学梅
夏日炜
+3 位作者
孙丽
朱国强
包文斌
吴圣龙
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2015年第4期847-851,共5页
试验旨在构建猪BPI真核表达载体,获得猪源BPI重组蛋白。根据GenScript’s CloneEZ?PCR Cloning Kit试剂盒,将BPI编码序列克隆至pUC57载体上,酶切与测序鉴定无误后,将重组质粒pUC57-BPI转染293-6E细胞,并利用SDS-PAGE和Western blotting...
试验旨在构建猪BPI真核表达载体,获得猪源BPI重组蛋白。根据GenScript’s CloneEZ?PCR Cloning Kit试剂盒,将BPI编码序列克隆至pUC57载体上,酶切与测序鉴定无误后,将重组质粒pUC57-BPI转染293-6E细胞,并利用SDS-PAGE和Western blotting方法检测其表达水平。结果显示,本试验成功构建了猪源BPI蛋白真核表达载体pUC57-BPI,并在293-6E细胞培养上清中检测到猪源BPI重组蛋白的表达。该猪源BPI重组蛋白体外表达系统的建立为今后深入研究猪BPI的生物学功能以及猪抗菌蛋白的制备提供了试验基础。
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关键词
猪
bpi
蛋白
真核表达
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职称材料
题名
CONSTRUCTION, EXPRESSION AND BIOLOGICAL ASSESSMENT OF BPI_(23)-Fcγ1 RECOMBINANT PROTEIN PROKARYOTIC EXPRESSION VECTOR
被引量：
7
1
作者
安云庆
管远志
柯岩
杨贵贞
机构
Department of Microbiology and Immunology
Department of Microbiology
Department of Immunology
出处
《Chinese Medical Sciences Journal》
CAS
CSCD
2002年第3期140-147,共8页
关键词
pBV
bpi
600
Fcγ1700
recombinant
expression
vector
bpi
23
Fcγ1
recombinant
protein
Objective.
To
construct
pBV
bpi
600
Fcγ1700
recombinant
expression
vector
to
transform
it
into
Escherichia
coli
DH5α
and
to
induce
the
expression
of
bpi
2
Keywords
pBV-
bpi
600-Fcγ1700
重组表达
感染性休克
bpi
23-Fcγ1重组蛋白
革兰氏阴性菌
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
猪BPI基因部分cSNPs检测及其对蛋白结构功能的影响
被引量：
5
2
作者
吴正常
王靖
朱世平
赵乔辉
刘璐
訾臣
吴圣龙
包文斌
机构
扬州大学动物科学与技术学院
江苏省现代种猪分子选育工程技术研究中心
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第7期1000-1007,共8页
基金
江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD)
国家自然科学基金(31172183)
+4 种基金
江苏省产学研前瞻性联合研究项目(BY2012157)
江苏省科技支撑计划(农业)(BE2010371
BE2012330
苏州市科技支撑计划(SN201013
SN201133))
文摘
本试验以98头苏太猪为研究对象,检测BPI基因部分编码区的单核苷酸多态性(SNPs),并预测分析碱基突变对BPI蛋白结构和功能的影响。利用PCR-SSCP和PCR-RFLP结合测序的方法检测BPI基因外显子1、4和10的SNPs,运用生物信息学比较分析原蛋白和突变型蛋白的理化性质和结构。结果表明,以BPI基因cDNA序列作为参照,BPI外显子1、4和10存在6个SNPs,3个同义突变(c.24A>G、c.54T>C和c.522C>T)和3个错义突变(c.433C>T(Arg145Trp)、c.1060A>G(Thr354Ala)和c.1151T>G(Leu384Arg))。3种错义突变未改变BPI蛋白的理化性质、信号肽、跨膜区、糖基化位点以及二、三级结构,但是导致磷酸化位点的改变或存在其他潜在功能位点区域。Western blot试验发现,BPI蛋白的分子量为53ku,苏太猪F18大肠杆菌抗性型猪的BPI蛋白表达量显著高于敏感型猪。猪BPI外显子4和10的碱基突变不同程度影响到蛋白功能,并可能对机体疾病的抗性/易感性产生影响。
关键词
猪
bpi
基因
SNPS
生物信息学
蛋白结构和功能
Keywords
pig
bpi
gene
SNPs
bioinformatics
protein
structure and function
分类号
S828 [农业科学—畜牧学]
S813.3 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
猪BPI蛋白重组载体的构建及真核表达
被引量：
1
3
作者
殷学梅
夏日炜
孙丽
朱国强
包文斌
吴圣龙
机构
扬州大学动物科学与技术学院
扬州大学兽医学院
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2015年第4期847-851,共5页
基金
江苏省科技支撑计划(农业)(BE2013319
BE2013345
+1 种基金
BE2013062)
常州市科技支撑计划(CE2013011)
文摘
试验旨在构建猪BPI真核表达载体,获得猪源BPI重组蛋白。根据GenScript’s CloneEZ?PCR Cloning Kit试剂盒,将BPI编码序列克隆至pUC57载体上,酶切与测序鉴定无误后,将重组质粒pUC57-BPI转染293-6E细胞,并利用SDS-PAGE和Western blotting方法检测其表达水平。结果显示,本试验成功构建了猪源BPI蛋白真核表达载体pUC57-BPI,并在293-6E细胞培养上清中检测到猪源BPI重组蛋白的表达。该猪源BPI重组蛋白体外表达系统的建立为今后深入研究猪BPI的生物学功能以及猪抗菌蛋白的制备提供了试验基础。
关键词
猪
bpi
蛋白
真核表达
Keywords
porcine
bpi protein
eukaryotic expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
CONSTRUCTION, EXPRESSION AND BIOLOGICAL ASSESSMENT OF BPI_(23)-Fcγ1 RECOMBINANT PROTEIN PROKARYOTIC EXPRESSION VECTOR
安云庆
管远志
柯岩
杨贵贞
《Chinese Medical Sciences Journal》
CAS
CSCD
2002
7
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
猪BPI基因部分cSNPs检测及其对蛋白结构功能的影响
吴正常
王靖
朱世平
赵乔辉
刘璐
訾臣
吴圣龙
包文斌
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
猪BPI蛋白重组载体的构建及真核表达
殷学梅
夏日炜
孙丽
朱国强
包文斌
吴圣龙
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2015
1
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职称材料
已选择
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